專利名稱：布氏白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制品的貯存、運(yùn)輸及注意事項貯存應(yīng)選擇干燥、通風(fēng)、避光場所。常溫貯存不超過半年，超過半年使用的必須要放于4℃處冷藏。
運(yùn)輸中應(yīng)防潮、防曬、防高溫(低于35℃)。禁止與殺菌劑混用。
本發(fā)明從蠐螬危害嚴(yán)重地區(qū)采集罹病蟲尸，分離純化并進(jìn)行篩選，得到布氏白僵菌D5(CGMCC NO.0737)菌株，對大黑鰓金龜幼蟲毒力最高，達(dá)93.1％，產(chǎn)孢量比出發(fā)菌株提高了2.8倍。發(fā)酵周期只有48～72h，克服了現(xiàn)已用于生產(chǎn)白僵菌殺蟲劑生產(chǎn)周期長的缺點，而且本發(fā)明所述的生產(chǎn)方法具有工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)的特點。再有就是本發(fā)明所涉及的殺蟲劑產(chǎn)品具有對蠐螬殺滅的專用性。


圖1 布氏白僵菌D5(CGMCC NO.0737)菌株生產(chǎn)工藝流程
②用凹凸棒營養(yǎng)土(25％黃豆粉，25％玉米粉；50％凹凸棒土作為載體，與菌液混勻后造微粒。包衣粉劑30％面粉，20％玉米粉，50％凹凸棒土，與菌液混勻后干燥，查看包衣效果，恢復(fù)產(chǎn)孢效果和孢子分散效果。7產(chǎn)品貯存產(chǎn)品干燥至含水量4％～6％。隔氧膜包裝封口后常溫貯存。實驗1對花生蠐螬的防治效果施菌方法分為播種期施菌將布氏白僵菌D5(CGMCC NO.0737)菌株用本發(fā)明制成的菌粉和定量的土混勻，花生播種時同種子一起施入土穴中。中耕期施菌在中耕期將布氏白僵菌D5(CGMCC NO.0737)菌株用本發(fā)明制成的菌粉和定量的土混勻(菌土法)，均勻撒到花生根際附近，再將菌粉摟入土中或?qū)⒕刍煊谒校瑵姷交ㄉ?水潑法)。池栽試驗 在1的無底水泥池中播種花生，出苗后將多余的苗拔掉，使每池中苗數(shù)相等。按規(guī)定劑量和時期施菌。待蠐螬至2齡初，按5頭/m2的蟲量接入池內(nèi)，秋后調(diào)查活蟲數(shù)和花生被害果數(shù)。不同施菌期結(jié)果表明，中耕期防治效果優(yōu)于播種期，當(dāng)施菌計量為每公頃75萬億孢子時，在中耕期施菌大黑金龜子(蠐螬成蟲)幼蟲死亡率為93.3％，而播種期施菌大黑金龜子幼蟲死亡率為66.6％，差異顯著。不同施菌劑量結(jié)果表明，在播種期施菌，施菌劑量需150萬億孢子/hm2以上時才有理想的防治效果，而在中耕期施菌75萬億孢子/hm2菌藥(+1.2kg甲基異柳磷)混用或單用菌均可達(dá)到理想的防治效果(蟲果減退率可達(dá)90％)。田間試驗 選擇蠐螬蟲口基數(shù)較一致，危害中等的地塊，采用不同施菌時期、劑量、施菌方式進(jìn)行防治試驗。結(jié)果表明中耕期防治效果優(yōu)于播種期，與池栽試驗結(jié)果一致。在中耕期施菌劑量為150萬億孢子/hm2或75萬億孢子+1.2kg甲基異柳磷/hm2時可獲得80％的防治效果。菌藥混用可降低菌的用量，提高防治效果。在中耕期，使用菌土法和水潑法兩種施菌方式防治效果均較理想，無明顯差異。
權(quán)利要求
1.一種蠐螬專用白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)方法，其特征主要包括以下幾個步驟(1)將D5原始生產(chǎn)菌株，一種布氏白僵菌-Beauveria bringniartii，已于2002年4月17日保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其簡稱為CGMCC，保藏編號為CGMCCNO.0737，均勻接入斜面培養(yǎng)基上，置在26℃±1℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)培養(yǎng)7～10d，分生孢子產(chǎn)生良好時取出，可作生產(chǎn)用斜面菌種。(2)將斜面菌種中加入液體培養(yǎng)基或滅菌水洗下培養(yǎng)物成菌懸液。(3)在搖瓶及種子罐中用液體培養(yǎng)法將種子放大培養(yǎng)至發(fā)酵罐培養(yǎng)所需種子液的量，罐裝系數(shù)70％。發(fā)酵控制條件罐壓0.2kg/cm2，通氣量按v/v/min計為1∶1，罐溫27℃±1℃，培養(yǎng)時間為36h，菌絲量大，菌液變稠，有少量芽生孢子形成，無污染，可作為種子液。(4)實罐消毒和管道消毒在發(fā)酵罐進(jìn)行實罐消毒的同時，進(jìn)行種子罐與發(fā)酵罐接種管道的消毒，消毒時微開管道上各有關(guān)排氣閥門，務(wù)必使整條管道暢通，不成死角，調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥至管內(nèi)壓力1.2kg/cm2，保壓30min，然后自前至后依次關(guān)閉各進(jìn)氣閥，冷卻待用。通過兩罐壓差，將合格的二級液種按1∶10的比例壓到發(fā)酵罐，壓種畢迅速關(guān)閉兩罐出料閥，然后調(diào)節(jié)好罐壓力和進(jìn)、排氣閥，開動攪拌、進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)攪拌速度200r/min，罐溫27℃±1℃，罐內(nèi)壓力0.5kg/cm2，通氣量按v/v/min計為1∶0.7。培養(yǎng)48～72h。發(fā)酵到24～36h大量形成芽生孢子時，補(bǔ)充葡萄糖1％、乳糖0.3％、硼酸0.02％、磷酸二氫鉀0.3％、甘油4％，在培養(yǎng)中每隔4h抽樣檢查一次。(5)發(fā)酵液大量產(chǎn)孢時即菌絲80％以上均轉(zhuǎn)化為芽生孢子時放罐。發(fā)酵結(jié)束時添加經(jīng)滅菌處理的固體填料硫酸銅及助劑麥麩。添加助劑及填料后含水量20％～30％。(6)生產(chǎn)菌種斜面培養(yǎng)基配方蔗糖2％，酵母粉0.5％，魚蛋白胨0.5％，硫酸銅0.005％，硫酸鋅0.005％，硫酸亞鐵0.005％，棉仁粉0.5％，米粉0.5％，硼酸0.01％，硫酸錳0.002％，乳糖0.3％，瓊脂2％。(7)液體培養(yǎng)基配方蔗糖2％，酵母粉0.5％，魚蛋白胨0.5％，硫酸銅0.005％，棉仁粉0.5％，米粉1％，硫酸鎂0.1％，硫酸亞鐵0.005％，磷酸二氫鉀0.2％。
2.權(quán)利要求1所述蠐螬專用白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)方法，其特征為其生產(chǎn)菌株是一種布氏白僵菌-Beauveria bringniartii D5菌株已于2002年4月17日保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其簡稱為CGMCC，保藏編號為CGMCC NO.0737。
3.權(quán)利要求1所述蠐螬專用白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)方法，其特征為所述的生產(chǎn)方法還包括將發(fā)酵后發(fā)酵液加工成顆粒劑、粉粒劑、微粒劑和包衣粉劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及了一種蠐螬專用白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)方法及其用途。該方法是利用本發(fā)明人從蠐螬危害嚴(yán)重地區(qū)采集罹病蟲尸，分離純化并進(jìn)行篩選，得到布氏白僵菌D5菌株采用液體培養(yǎng)法進(jìn)行白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)，其特點是本法適應(yīng)工業(yè)化大生產(chǎn)的目的，生產(chǎn)周期短，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，該產(chǎn)品對蠐螬殺蟲效果顯著。
文檔編號A01N63/04GK1395839SQ0211678
公開日2003年2月12日 申請日期2002年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月13日
發(fā)明者鄧春生, 張燕榮, 蔣海霖 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物防治研究所