密度
[0122] 試驗(yàn)步驟：
[0123] 1)配制供試品溶液:取供試品約50mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加稀釋劑使溶解 并稀釋至刻度，搖勻，即得；（平行配制6份）；
[0124] 2)配制自身對(duì)照溶液:精密移取供試品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋 至刻度，搖勻，再精密移取1.0ml，置10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得； (0.1%)；
[0125] 3)取上述供試品溶液和自身對(duì)照溶液依次進(jìn)樣，記錄色譜圖，按帶校正因子的主 成分自身對(duì)照法計(jì)算每份供試品中各有關(guān)物質(zhì)含量及RSD %，試驗(yàn)結(jié)果見表4。
[0126] 表4精密度試驗(yàn)數(shù)據(jù)
[0129] 由表3可知，本色譜系統(tǒng)對(duì)泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)測(cè)定，精密度良好。
[0130] 實(shí)施例7本發(fā)明色譜系統(tǒng)對(duì)泊沙康唑中間體Z1有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的準(zhǔn)確度
[0131] 試驗(yàn)步驟：
[0132] 1)配制供試品貯備液:精密稱取泊沙康唑中間體Z12.0045g，置100ml量瓶中，加稀 釋劑使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0133] 2)對(duì)照溶液:精密移取供試品貯備液10ml，置100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0134] 3)準(zhǔn)確度貯備液:精密移取雜質(zhì)1貯備液2.0ml、雜質(zhì)2貯備液2.0ml、雜質(zhì)3貯備液 3.0ml、雜質(zhì)4貯備液20ml，置同一 100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0135] 4)標(biāo)準(zhǔn)溶液:精密移取準(zhǔn)確度貯備液5.0ml，置25ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0136] 5)加標(biāo)溶液1:精密移取供試品貯備液2.5ml、準(zhǔn)確度貯備液5.0ml，置同一25ml量 瓶，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。（平行配制三份）
[0137] 6)加標(biāo)溶液2:精密移取供試品貯備液5.0ml、準(zhǔn)確度貯備液7.5ml，置同一 50ml量 瓶，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。（平行配制三份）
[0138] 7)加標(biāo)溶液3:精密移取供試品貯備液10ml、準(zhǔn)確度貯備液10ml，置同一 100ml量 瓶，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。（平行配制三份）
[0139] 8)取上述供試品溶液、對(duì)照溶液、加標(biāo)溶液1~3及標(biāo)準(zhǔn)溶液依次進(jìn)樣，記錄色譜 圖，按外標(biāo)法計(jì)算每份供試品中各雜質(zhì)含量、回收率及RSD %。試驗(yàn)結(jié)果見表5。
[0140]表5準(zhǔn)確度試驗(yàn)測(cè)定數(shù)據(jù)
[0141]
[0142] 從上表數(shù)據(jù)可知，本色譜系統(tǒng)對(duì)泊沙康唑中間體Z1中有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)準(zhǔn)確度良好。
[0143] 實(shí)施例8本發(fā)明色譜系統(tǒng)測(cè)定方法的耐用性
[0144] 取混合溶液，在流動(dòng)相組成、柱溫和流速有微小的波動(dòng)條件下進(jìn)行測(cè)試，記錄主峰 與雜質(zhì)峰間的分離度;試驗(yàn)結(jié)果見圖6~11，試驗(yàn)數(shù)據(jù)見表6。
[0145] 表6色譜條件變化耐用性數(shù)據(jù)
[0147] 從上表數(shù)據(jù)可知，流動(dòng)相起始比例、柱溫、柱流速進(jìn)行微小調(diào)整，各雜質(zhì)之間、雜質(zhì) 與主峰之間的分離度均大于1.5,對(duì)檢測(cè)結(jié)果無(wú)影響，方法耐用性好。
[0148] 實(shí)施例9本發(fā)明色譜系統(tǒng)對(duì)泊沙康唑中間體Z1樣品檢測(cè)
[0149] 試驗(yàn)步驟：
[0150] 1)配制空白溶液:取水40ml，置100ml量瓶中，加乙腈稀釋至刻度，搖勻，即得；
[0151 ] 2)配制供試品溶液:取泊沙康唑中間體Z1 (共5批泊沙康唑中間體Z1，批號(hào)分別為： 1510101、150102、150103、150601、150602)約50mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加稀釋劑溶解 并稀釋至刻度，搖勻，得為供試品溶液；
[0152] 3)配制自身對(duì)照溶液:精密移取供試品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋 至刻度，搖勻，再精密移取1.0ml，置10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。（0.1%)
[0153] 4)取供試品溶液，按上述條件進(jìn)行液相色譜分析，記錄色譜圖，結(jié)果見圖12~圖 16;詳細(xì)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)見表7。
[0154] 表7多批次中間體Z中基因毒性雜質(zhì)檢出數(shù)據(jù)
[0156] 由圖1~圖16、表1~7說(shuō)明，本方法的發(fā)明，可以有效地將泊沙康唑中間體Z1及其 有關(guān)物質(zhì)分離，并可以準(zhǔn)確進(jìn)行測(cè)定，以控制泊沙康唑中間體Z中所述基因毒性雜質(zhì)的含 量，從而保證最終泊沙康唑原料和制劑的質(zhì)量安全可控。
[0157] 最后說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較 佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技 術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本 發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 分離測(cè)定泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于，以十八烷基硅烷鍵 合硅膠為固定相，以無(wú)機(jī)鹽緩沖液和有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相梯度洗脫進(jìn)行固液分離，所述Z1 結(jié)構(gòu)式如下所示：Z1 所述梯度洗脫設(shè)置如下：所述流動(dòng)相A為無(wú)機(jī)鹽緩沖液，所述流動(dòng)相B為有機(jī)溶劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述無(wú)機(jī)鹽緩沖液中無(wú)機(jī)鹽為磷酸二氫 鉀、磷酸二氫鈉、磷酸二氫銨、高氯酸鈉中的一種或多種;所述有機(jī)溶劑為甲醇、乙腈、異丙 醇中的一種或幾種。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述無(wú)機(jī)鹽緩沖液的濃度為0.005mol/L~ 0.2mol/L〇4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述有關(guān)物質(zhì)包括：雜質(zhì)1，雜質(zhì)2，雜質(zhì)3， 雜質(zhì)4的一種或多種，具體結(jié)構(gòu)式如下： 求職J求職5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，具體包括以下步驟： 1)配制流動(dòng)相:分別配制流動(dòng)相A和流動(dòng)相B; 2) 配制供試品溶液:取供試品溶于稀釋劑中，再加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，得供試品 溶液； 3) 將步驟2)所述供試品溶液注入分離檢測(cè)系統(tǒng)中，用步驟1)所述流動(dòng)相對(duì)步驟2)所述 供試品溶液進(jìn)行梯度洗脫分離得洗脫液； 4) 步驟3)所述洗脫液進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟2)所述稀釋劑為乙腈水溶液，乙腈與 水的體積比為75-25:25-75。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟2)所述供試品溶液的濃度為0.5mg/ml ~3·Omg/ml〇8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟3)所述流動(dòng)相流速為0.5 m 1 / m i η~ 2. Oml/min;步驟4)所述檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為205~280nm。9. 利用高效液相色譜法分離測(cè)定泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在 于，所述有關(guān)物質(zhì)包括:雜質(zhì)1，雜質(zhì)2,雜質(zhì)3,雜質(zhì)4,具體包括以下步驟： 1) 配制空白溶液:配置乙腈水溶液作為空白溶液； 2) 配制有關(guān)物質(zhì)定位溶液:取泊沙康唑中間體Z1有關(guān)物質(zhì)對(duì)照品，用稀釋劑溶解并稀 釋，得有關(guān)物質(zhì)定位溶液； 3) 配制供試品溶液:取泊沙康唑中間體Z1樣品，加稀釋劑溶解并稀釋，得供試品溶液； 4) 配制自身對(duì)照溶液:取步驟3)所述供試品溶液再加稀釋劑稀釋，得自身對(duì)照溶液； 5) 分別取步驟1)所述空白溶液、步驟2)所述有關(guān)物質(zhì)定位溶液、步驟3)所述供試品溶 液和步驟4)所述自身對(duì)照溶液進(jìn)樣，進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，確定泊沙康唑中 間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)的保留時(shí)間，按自身對(duì)照法計(jì)算供試品溶液中有關(guān)物質(zhì)的含量。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜方法采用十八烷基鍵 合硅膠為填充劑的色譜柱，所述色譜柱柱箱溫度為25~40°C，以無(wú)機(jī)鹽緩沖液和和有機(jī)溶 劑作為流動(dòng)相;所述稀釋劑為乙腈水溶液，乙腈與水的體積比為75-25:25-75。
【專利摘要】本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種分離測(cè)定泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)的方法。該方法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以無(wú)機(jī)鹽緩沖液和有機(jī)溶劑為流動(dòng)相進(jìn)行固液分離；該方法能同時(shí)將泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)完全分離，檢測(cè)中溶劑峰不干擾泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定，分離度大于1.5；本方法專屬性強(qiáng)，穩(wěn)定性好，靈敏度和準(zhǔn)確度高，可有效分離泊沙康唑中間體Z1及其有關(guān)物質(zhì)，保障泊沙康唑原料及其制劑的質(zhì)量安全；該操作方法簡(jiǎn)單，具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)泊沙康唑中間體Z1的質(zhì)量控制、安全性保證具有極其重要的意義。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號(hào)】CN105606736
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610060459
【發(fā)明人】李江玲, 沈紅梅
【申請(qǐng)人】重慶華邦制藥有限公司
【公開日】2016年5月25日
【申請(qǐng)日】2016年1月27日