專利名稱:一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑及制片方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑及制片方法屬病理診斷的組織切片領(lǐng)域，尤適于對(duì)各種生物體液的組織切片。
背景技術(shù)：
對(duì)病理組織檢查，通常用到組織切片，對(duì)病人來說，意味著要?jiǎng)邮中g(shù)從其身體上取下病灶組織，這是一個(gè)痛苦過程，且增加病人經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和診斷時(shí)間。腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷對(duì)于惡性腫瘤的診斷，特別是早期診斷具有重要意義。細(xì)胞學(xué)診斷在實(shí)際應(yīng)用中有很多優(yōu)點(diǎn)，方法簡(jiǎn)便快速，經(jīng)濟(jì)，病人痛苦較少，但細(xì)胞學(xué)診斷有局限性。以前診斷體液的辦法是把體液涂在玻璃片上，此法雖然免除了手術(shù)取活體組織，但是有如下缺點(diǎn)涂片厚，細(xì)胞重疊；結(jié)構(gòu)不清、細(xì)胞量少、免疫染色背景深、非特異性著色、陽(yáng)性不可靠。脫落的細(xì)胞無(wú)組織結(jié)構(gòu)，診斷準(zhǔn)確率不及活檢診斷，難以病理分型。并且涂片面積大容易造成試劑浪費(fèi)、保存時(shí)間短， 各種體液只能收集到其中部分細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞量少的體液根本無(wú)法收集到細(xì)胞所以無(wú)法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行分析，因此疾病也無(wú)法得到診斷。很多診斷仍需進(jìn)行手術(shù)活檢，制作組織切片。細(xì)胞塊石蠟包埋切片法收集到的有核細(xì)胞量多、細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，大大提高了細(xì)胞學(xué)的陽(yáng)性診斷率，對(duì)細(xì)胞量較少的標(biāo)本意義更大。用細(xì)胞塊做免疫組化，可連續(xù)切片，有利于多種抗體聯(lián)合應(yīng)用，比較觀察，提高了臨床疑難病例診斷的準(zhǔn)確性，還可回顧性研究。目前，采用細(xì)胞塊石蠟包埋切片技術(shù)的，如“公開號(hào)為CN10727779A，名為一種新生物組織和包埋方法”，又如 “公開號(hào)為CN1M9M5A，名為生物組織切片包埋劑”，他們所采用的包埋劑原料是塑料，且組分多，塑料在包埋過程中的聚合反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生熱量，會(huì)遮蔽、破壞細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和核酸的成分，無(wú)法完整保存細(xì)胞，生物切片無(wú)法直接進(jìn)行免疫酶標(biāo)等組化檢測(cè)，此外，多組分令制作的要求較高，成本較大。因此，要尋求新的做包埋劑的原料。天然淀粉的顆粒具有微晶結(jié)構(gòu)、對(duì)在冷水中的溶解、溶脹以及淀粉酶的作用等具有抗性。將淀粉在一定量的水存在情況下進(jìn)行加熱處理，淀粉顆粒溶脹成為糊狀，規(guī)則排列的膠束被破壞，微晶消失，并且容易接受酶的作用，這種狀態(tài)的淀粉稱為預(yù)糊化淀粉。預(yù)糊化淀粉能夠在冷水中膨脹溶解，形成具有高粘度的糊液，或成固體狀，目前預(yù)糊化淀粉只是作食品，化妝品，金屬鑄造中的粘合劑； 在紡織工業(yè)中廣泛地用作上漿劑；在建筑業(yè)中用作水質(zhì)涂料。目前沒有發(fā)現(xiàn)預(yù)糊化淀粉作包埋劑的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提出的一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑及制片方法，其目的是能收集體液中的細(xì)胞進(jìn)行切片檢查，并克服塑料包埋劑存在的缺點(diǎn)，且原料來源廣泛，價(jià)錢便宜。
一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑，其特征在于所說的包埋劑是預(yù)糊化淀粉。
上述的一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑，其特征在于所說的預(yù)糊化淀粉是木薯粉、馬鈴薯粉、面粉、綠豆粉、玉米粉、高粱粉等或其混合粉制作的預(yù)糊化淀粉。
上述的一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑的制片方法是1、標(biāo)本收集
適量體液標(biāo)本，不少于5ml ；
2、標(biāo)本離心濃縮
將標(biāo)本置離心機(jī)上以1500-2000轉(zhuǎn)/分，離心5-10分鐘；
3、將上述離心后的標(biāo)本上清液棄去，加入適量10%濃度的福爾馬林液后； 置于離心機(jī)上以1500-2000轉(zhuǎn)/分，離心5-10分鐘；
4、包埋
將步驟3中的標(biāo)本去除上清液體，按1 :1體積比加入預(yù)糊化淀粉，與標(biāo)本混合，攪拌后放進(jìn)包埋盒；
5、將包埋盒常規(guī)固定，脫水，包埋制成石蠟塊；
6、組織切片
將石蠟塊切片后可進(jìn)行常規(guī)HE染色，特殊染色，免疫組化，分子原位雜交染色等。
淀粉是葡萄糖分子縮合而成的多糖聚合物。通式是(C6H10(^)n，水解到二糖階段為麥芽糖，化學(xué)式是C12H22011，完全水解后得到葡萄糖，化學(xué)式是C6H1206。
本實(shí)用新型使用預(yù)糊化淀粉包埋劑，原料來源廣泛、價(jià)錢便宜、操作簡(jiǎn)單，能收集含細(xì)胞量少的體液進(jìn)行切片檢查，因?yàn)轭A(yù)糊化淀粉水溶，固化后對(duì)體液中的細(xì)胞起支撐穩(wěn)定作用，并克服塑料包埋劑存在的缺點(diǎn)。
具體實(shí)施方式
病例一 Fl 1(^602腹腔穿刺液(腹水)病理診斷為腺癌病例二 Fl 1(^844腹腔穿刺液(腹水)病理診斷為腺癌
該兩例病例均用離心濃縮后的管壁回流的腹水與等體積的木薯粉或馬鈴薯粉、面粉、 綠豆粉、玉米粉、高粱粉或其混合粉做成的預(yù)糊化淀粉攪拌成團(tuán)，放進(jìn)包埋盒，常規(guī)固定，脫水，包埋制成石蠟塊。將此石蠟塊切片后進(jìn)行了常規(guī)HE染色，特殊染色，免疫組化染色。最后均確診為腺癌。
該兩病例均是體液中的細(xì)胞量太少，用以前的方法無(wú)法收集足夠細(xì)胞制成切片， 即不能進(jìn)行病理診斷。用此方法制成的切片細(xì)胞量數(shù)量多，切片薄，細(xì)胞單層排列.結(jié)構(gòu)清晰，有組織的結(jié)構(gòu)可連續(xù)切片，并進(jìn)行了免疫細(xì)胞化學(xué)染色。最后病例得到確診，此標(biāo)本還永久保存，利于對(duì)病人進(jìn)行病情追蹤。
權(quán)利要求
1.一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑，其特征在于所說的包埋劑是預(yù)糊化淀粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑，其特征在于所說的預(yù)糊化淀粉是木薯粉、馬鈴薯粉、面粉、綠豆粉、玉米粉、高粱粉或其混合粉制作的預(yù)糊化淀粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1或2所述的一種組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑的制片方法是(1)、標(biāo)本收集適量體液標(biāo)本，不少于5ml ；(2)、標(biāo)本離心濃縮將標(biāo)本置離心機(jī)上以1500-2000轉(zhuǎn)/分，離心5-10分鐘；(3)、將上述離心后的標(biāo)本上清液棄去，加入適量10%濃度的福爾馬林液后，置于離心機(jī)上以1500-2000轉(zhuǎn)/分，離心5-10分鐘；(4)、包埋將步驟(3)中的標(biāo)本去除上清液體，按1 :1體積比加入預(yù)糊化淀粉與標(biāo)本混合，攪拌后放進(jìn)包埋盒；(5)、將包埋盒常規(guī)固定，脫水，包埋制成石蠟塊；(6)、組織切片將石蠟塊切片后可進(jìn)行常規(guī)HE染色，特殊染色，免疫組化，分子原位雜交染色。
專利摘要
一種用于組織切片的預(yù)糊化淀粉包埋劑及制片法屬病理診斷的組織切片領(lǐng)域，尤適于對(duì)各種生物體液的組織切片。其特征在于所說的包埋劑是淀粉面粉、綠豆粉、玉米粉、高粱粉等制作的預(yù)糊化淀粉。本發(fā)明使用淀粉包埋劑，原料來源廣泛、價(jià)錢便宜、操作簡(jiǎn)單，其目的是能收集體液中的細(xì)胞進(jìn)行切片檢查，并克服塑料包埋劑存在的缺點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N1/28GKCN102393321SQ201110385466
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年11月29日
發(fā)明者熊宇杰 申請(qǐng)人:熊宇杰導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan