專利名稱：：氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種磁性納米顆粒，特別涉及一種氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，還涉及該超順磁性納米顆粒的制備方法。
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤嚴重危害著人類健康。全世界每年有iooo萬人患上癌癥，大多數(shù)患者在被確診時腫瘤細胞已發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移，錯過了手術(shù)機會，只能依賴于藥物治療。因此，惡性腫瘤的早期診斷以及高效、安全、經(jīng)濟的靶向抗腫瘤藥物的研究成為目前臨床急待解決的問題。近年來，納米4支術(shù)的發(fā)展為惡性腫瘤的早期診斷及把向性治療提供了新的機遇，超順磁性納米顆粒已被廣泛應(yīng)用于磁共振成像診斷、腫瘤細胞磁分離、腫瘤過熱治療和磁靼向給藥等諸多方面，顯示出巨大的應(yīng)用潛力。用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的超順磁性納米顆粒要求滿足下述基本要求(1)無毒性；(2)在生物環(huán)境中足夠的化學(xué)穩(wěn)定性；(3)在血液中合適的循環(huán)時間；(4)生物降解產(chǎn)物無害。但由于超順磁性納米顆粒具有表面疏水性和高比表面積，以及各向異性的磁偶極相互作用，在生物體內(nèi)易于團聚和吸附血漿蛋白，容易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)清除，從而影響其到達診斷和治療扭區(qū)，因此，需要對超順磁性納米顆粒進行表面改性，在其表面覆蓋親水涂層，以防止團聚、增加穩(wěn)定性和生物相容性，減少RES吞噬量，延長血中循環(huán)時間。此外，為提高主動單巴向性，還可以將磁性耙向和生物耙向相結(jié)合，使超順磁性納米顆粒同時攜帶一種可以識別和結(jié)合到特定革巴位的分子如單克隆抗體等，以增強治療效果、減少毒副作用。目前，可用于超順》茲性納米顆粒的表面改性劑主要有兩類一類為有機小分子表面活性劑，如脂肪酸、氨基酸、多肽^f汙生物和葉酸等；另一類為高分子表面活性劑，如聚乙二醇、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚乳酸、葡聚糖、殼聚糖、白蛋白和明膠等。與有機小分子表面活性劑相比，高分子表面活性劑分子鏈較長，可在納米顆粒表面形成一定厚度的吸附層，從而使納米顆粒更加穩(wěn)定。在眾多表面改性劑中，葡聚糖(Dextran)由于具有優(yōu)良的生物相容性和生物可溶解性，且含有的活性基團經(jīng)過修飾后可以同時負栽多種功能分子(如酶、抗體、多肽、DNA或RNA等)，在超順磁性納米顆粒的表面改性領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。但葡聚糖修飾的超順磁性納米顆粒與單克隆抗體的進一步結(jié)合，目前主要采用戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鈉氧化法，操作較復(fù)雜，且使用的戊二醛和過硪酸鈉等化學(xué)試劑可能對機體造成毒副作用。
發(fā)明內(nèi)容有鑒于此，為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的之一在于提供一種氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，具有高親水性，在水相中穩(wěn)定分敎，可以減少RES吞噬量，延長血中循環(huán)時間，并且表面富含氨基，可以方便地與單克隆抗體結(jié)合以提高主動靶向性，同時對機體不造成毒副作用，生物相容性好。為達到此目的，在本發(fā)明的第一方面，提供了一種氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，該超順磁性納米顆粒具有核殼型結(jié)構(gòu)，其內(nèi)核為磁性四氧化三鐵，內(nèi)核表面為葡聚糖包覆層，葡聚糖包覆層外表面連接氨基硅烷偶聯(lián)劑。進一步，所述氨基硅烷偶聯(lián)劑為N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三曱氧基硅烷(AEAPS)或3-氨基丙基三乙氧絲烷(APTES);進一步，所述氨基硅烷偶聯(lián)劑為AEAPS。本發(fā)明的目的之二在于提供一種所述氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，操作簡便易行，所得納米顆粒粒徑小、分散均勻、具有超順磁性。為達到此目的，在本發(fā)明的第二方面，提供了一種所述氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，包括以下步驟a、制備葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒按照二價鐵鹽、三價鐵鹽和葡聚糖的摩爾比為13:1.5~4:0.04~0.10，稱取二價鐵鹽、三價鐵鹽和葡聚糖，加水使溶解，再在惰性氣體保護、溫度為55~65。C和攪拌速度為8001500r/min的條件下滴加堿溶液調(diào)節(jié)pH至7.09.0,滴加完畢后繼續(xù)恒溫攪拌反應(yīng)12小時，冷卻，離心棄沉淀，上清液用酸調(diào)節(jié)pH至7.09.0,微孔濾膜過濾，濾液即為葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒懸浮液；b、用氨基硅烷偶聯(lián)劑對葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒進行表面修飾在步驟a制得的葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒懸浮液中，按照葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒與氨基硅烷化偶聯(lián)劑的摩爾比為1~3:3~15，加入M硅烷化偶聯(lián)劑，在惰性氣體保護、溫度為5565。C和攪拌速度為800~1500r/min的條件下恒溫攪拌反應(yīng)35小時，；微孔濾膜過濾，濾液即為氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒懸浮液。進一步，所述二價鐵鹽為氯化亞鐵或硫酸亞鐵，三價鐵鹽為氯化鐵或硫酸鐵，葡聚糖的相對分子質(zhì)量為10000;所述二價鐵鹽、三價鐵鹽和葡聚糖的摩爾比為l:1.7:0.08;進一步，所述堿溶液為質(zhì)量百分濃度為25%的氨水溶液，酸為冰乙酸；進一步，所述步驟a是在氮氣保護、溫度為60。C和攪拌速度為1000r/min的條件下以1mL/min的速度滴加堿溶液，滴加完畢后繼續(xù)恒溫撹拌反應(yīng)l小時；進一步，所述^KJ^烷偶聯(lián)劑為AEAPS或APTES;進一步，所述氨基硅烷偶聯(lián)劑為AEAPS;所述葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒與氨基硅烷化偶聯(lián)劑的摩爾比為l:7;進一步，所述步驟b是在氮氣保護、溫度為6(TC和攪拌速度為1000r/min的條件下恒溫攪拌反應(yīng)4小時。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明提供了一種氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，具有高親水性，在水相中穩(wěn)定分散，可以減少RES吞噬量，延長血中循環(huán)時間，并且表面富含氨基，可以方便地與單克隆抗體結(jié)合以提高主動耙向性，同時對機體不造成毒副作用，生物相容性好；本發(fā)明還提供了該超順磁性納米顆粒的制備方法，操作簡便易行，所得納米顆粒粒徑小、分散均勻、具有超順》茲性；本發(fā)明的超順磁性納米顆粒在惡性腫瘤的早期診斷和靶向性治療領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步的詳細描述，其中圖1為氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的透射電鏡圖；圖2為氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的顆粒數(shù)與顆粒直徑關(guān)系圖3為M硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的磁化曲線圖。具體實施例方式本發(fā)明采用化學(xué)共沉淀法制備超順磁性Fe304納米顆粒，其化學(xué)反應(yīng)式為Fe2++2Fe3++80IT=Fe304+4H20考慮到Fe"在反應(yīng)中很容易被空氣氧化成Fe3+,導(dǎo)致Fe304晶體中Fe"含量減少，晶體結(jié)構(gòu)和純度發(fā)生變化，適當提高Fe"比例可以保證Fe"反應(yīng)完全，因此，本發(fā)明中Fe2+和Fe3+的投料摩爾比為13:1.5~4，優(yōu)選1:1.7。用葡聚糖對超順磁性Fe304納米顆粒進行表面改性時，適當提高葡聚糖的比例可以使超順磁性Fe304納米顆粒與葡聚糖充分接觸并反應(yīng)，因此，本發(fā)明中Fe2+、Fe3+和葡聚糖的投料摩爾比為1~3:1.5~4:0.04~0.10,優(yōu)選1:1.7:0.08。同樣，用氨基硅烷偶聯(lián)劑對葡聚糖包覆的超順磁性Fe304納米顆粒進行表面修飾時，適當提高氨基硅烷偶聯(lián)劑的比例可以使葡聚糖包覆的超順磁性Fe304納米顆粒與氨基硅烷偶聯(lián)劑充分接觸并反應(yīng)，因此，本發(fā)明中葡聚糖包覆的超順磁性Fe304納米顆粒與^iJ^硅烷化偶聯(lián)劑的投料摩爾比為1~3:315，優(yōu)選1:下面將參照附圖，對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細的描述。實施例1、氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備本實施例采用氨基硅烷偶聯(lián)劑AEAPS，制備AEAPS與葡聚糖共修飾的超順磁性Fe304納米顆粒(AEAPS/Dextran-SPION)，包括以下步驟a、制備葡聚糖包覆的超順磁性Fe304納米顆粒(Dextran-SPION)稱取氯化亞4失0.86g(4.33mmol)、氯化鐵1.99g(7.36mmol)和DextranT-10(相對分子質(zhì)量10000,BBI公司)3.5g(0.35mmol)(Fe2+、Fe"和葡聚糖的摩爾比為l:1.7:0.08)，加入三蒸水30mL,攪拌使溶解，再在氮氣保護、溫度為60。C和攪拌速度為1000r/min的條件下以lmL/min的速度滴加質(zhì)量百分濃度為25。/。的氨水調(diào)節(jié)pH至8.0,滴加完畢后繼續(xù)恒溫攪拌反應(yīng)l小時，得黑色膠狀物，自然冷卻至室溫，8000r/min離心10分鐘，棄沉淀，上清液用水乙酸調(diào)節(jié)pH至8.0，用孔徑為0.22拜的微孔濾膜過濾，濾液即為Dextran-SPION懸浮液，用原子吸收分光光度計測得濃度為5mmol/L,置溫度4"保存，備用；b、用AEAPS對Dextran-SPION進行表面修飾，制備AEAPS/Dextran-SPION取步驟a制得的濃度為5mmol/L的Dextran-SPION懸浮液50mL,加入濃度為0.35mol/L的AEAPS溶液[將AEAPS(AlfaAesar公司)用摩爾比為l:l的甲苯-甲醇混合液稀釋制得]5mL(Dextran-SPION與AEAPS的摩爾比為l:7),在氮氣保護、溫度為60'C和攪拌速度為1000r/min的條件下恒溫攪拌反應(yīng)4小時，用孔徑為0.22nm的微孔濾膜過濾，濾液即為AEAPS/Dextran-SPION懸浮液，置溫度4'C保存。實施例2、tt硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備本實施例采用tt硅烷偶聯(lián)劑APTES,制備APTES與葡聚糖共修飾的超順磁性Fe304納米顆粒(APTES/Dextran-SPION),包括以下步驟a、制備Dextran-SPION稱取硫酸亞鐵1.20g(4.33mmol)、硫酸鐵2.94g(7.36mmol)和DextranT-10(相對分子質(zhì)量10000，BBP〉司)3.5g(0.35mmol)(Fe2+、Fe3+和Dextran的摩爾比為l:1.7:0.08),加入三蒸水30mL，攪拌使溶解，再在氮氣保護、溫度為60。C和攪拌速度為1000r/min的條件下以lmL/min的速度滴加質(zhì)量百分濃度為25。/。的氨7jc調(diào)節(jié)pH至8.0,滴加完畢后繼續(xù)攪拌反應(yīng)l小時，得黑色膠狀物，自然冷卻至室溫，8000r/min離心10分鐘，棄沉淀，上清液用》h乙酸調(diào)節(jié)pH至8.0，用孔徑為0.22|0111的微孔濾膜過濾，濾液即為Dextran-SPION懸浮液，用原子吸收分光光度計測得濃度為5mmoI/L，置溫度4"C保存，備用；b、用APTES對Dextran-SPION進行表面修飾，制備APTES/Dextran-SPION取步驟a制得的濃度為5mmol/L的Dextran-SPION懸浮液50mL，加入濃度為0.35mol/L的APTES溶液[將APTES(AlfaAesar公司)用摩爾比為l:l的曱苯-甲醇混合液稀釋制得]5mL(Dextran-SPION與APTES的摩爾比為l:7)，在氮氣保護、溫度為60X:和攪拌速度為1000r/min的條件下恒溫攪拌反應(yīng)4小時，用孔徑為0.22Mm的微孔濾膜過濾，濾液即為APTES/Dextran-SPION懸浮液，置溫度4"C保存。參照實施例1和實施例2，采用不同的Fe"、Fe"和Dextran投料摩爾比(Fe2+、Fe3+和Dextran的投料摩爾比為13:1.5~4:0.04~0.10)和/或不同的Dextran-SPION與氨M烷化偶聯(lián)劑投料摩爾比(Dextran-SPION與氨基硅烷化偶聯(lián)劑的投料摩爾比為13:3~15)，同樣可以制得本發(fā)明的氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒。此外，所述氨基硅烷化偶聯(lián)劑采用除AEAPS、APTES以外的其它氨基硅烷化偶聯(lián)劑；所述堿溶液采用質(zhì)量百分濃度為20%~50%的氨水溶液、氫氧化鈉溶液或氫氧化鉀溶液；所述惰性氣體采用氮氣或氬氣，反應(yīng)溫度在5565'C之間，攪拌速度在8001500r/min之間；都可以達到本發(fā)明目的。氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的性能檢測1、形態(tài)和賴:徑用透射電鏡(Hitachi-600型，日本日立公司)觀察AEAPS/Dextran-SPION的形態(tài)和粒徑在銅網(wǎng)上制膜并滴加AEAPS/Dextran-SPION懸浮液，自然沉淀5分鐘，用濾紙吸去邊緣多余液體，置透射電鏡下觀察。結(jié)杲見圖1和圖2，由圖1可知，AEAPS/Dextran-SPION呈球形，具有核殼型結(jié)構(gòu)，其內(nèi)核為高密處6304晶體，內(nèi)核表面為Dextran與AEAPS共修飾涂層，內(nèi)核粒徑不超過20nm，整體粒徑不超過25nm;由圖2可知，AEAPS/Dextran-SPION的平均粒徑約為15nm。2、鐵離子和葡聚糖的含量分別采用二價鐵-鄰二氮菲法(參見文獻魚腥草等七種中草藥中鐵元素的測定分析.穆衛(wèi)東等.廣東孩史量元素科學(xué)，第12期，4749頁，2006年)和蒽酮-硫酸法(參見文獻葡聚糖T2(Ht為白芷多糖含量測定標準品可行性研究.匡扶等.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，第5期，570~575頁，2008年)測定Dextran-SPION懸浮液和AEAPS/Dextran-SPION懸浮液中鐵離子和葡聚糖的含量。結(jié)果以標準鐵溶液濃度C為橫坐標、吸光y^4為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方^4=0.0012C+0.0405(r-0.9992)，由標準曲線算得Dextran-SPION懸浮液中鐵離子濃度為0.71mg/mL,AEAPS/Dextran-SPION懸浮液中鐵離子濃度為1.2mg/mL;以標準Dextran溶液濃度C為橫坐標、吸光^(為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程4-0.0126C+0.0533(r-0.9994)，由標準曲線算得Dextran-SPION懸浮液中Dextran濃度為20,59mg/mL，AEAPS/Dextran-SPION懸浮液中Dextran濃度為19.37mg/mL。3、磁學(xué)性質(zhì)用振動樣品磁強計(HH-15型，南京大學(xué)儀器廠)檢測AEAPS/Dextran-SPION的磁學(xué)性質(zhì)將AEAPS/Dextran-SPION懸浮液真空干燥后，逐漸增大外加磁場強度至AEAPS/Dextran-SPION的磁化強度不再增大時停止，記錄i茲化曲線并進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果見圖3,由圖3可知，AEAPS/Dextran-SPION的磁化強度隨外加磁場強度的增大而增大，當外加磁場強度增大至3000Gs后，繼續(xù)增大外加磁場強度，AEAPS/Dextran-SPION的磁化強度基本保持不變，即達到磁飽和；所得磁化曲線為一條過原點的單一曲線，表明當外加磁場撤消后，AEAPS/Dextran-SPION幾乎沒有剩磁，具有超順磁性；通過外推法求得AEAPS/Dextran-SPION的飽和磁化強度為67.36488emu/gFe,比飽和磁化強度為69.82151emu/g,比剩余磁化強度為32.5472emu/g,剩磁為22.61721Gs。4、AEAPS/Dextran-SPION與單克隆抗體的結(jié)合用戊二醛(GA)替代AEAPS，按照前述AEAPS/Dextran-SPION的制備方法制得GA/Dextran-SPION。用水乙酸調(diào)節(jié)AEAPS/Dextran-SPION懸浮液或GA/Dextran-SPION懸浮液pH至6.0,加入終濃度為2.59(ig/mL的抗甲胎蛋白單克隆抗體(mAb-APF),溫度4。0:靜置24小時使旭好8/063^311-310>1或0^6乂紅311-SPION與mAb-APF相結(jié)合，制得^1)-好？-^^3/06乂13"311-3101^或11^1>奵？-GA/Dextran隱SPION。在酶標板中，設(shè)3個復(fù)孔，每孔加入濃度為40ng/mL的甲胎蛋白(APF)100iaL,溫度4X:包被過夜，PBS洗滌3次后，加入質(zhì)量百分濃度為1%的牛血清白蛋白200pL，溫度37。C封閉1.5小時，PBS洗滌3次后，加入終濃度為38mg/mL的mAb-APF-AEAPS/Dextran-SPION，溫度37'C孵育1小時，PBS洗滌3次后，加入鐵染液(將鹽酸和質(zhì)量百分濃度為20。/o的亞鐵氰化鐘溶液按體積比為l:5混合，即得)進行普魯士藍顯色反應(yīng)(鐵離子遇到亞鐵氰根離子生成藍色的亞鐵氰化鐵即普魯士藍沉淀)，溫度37。C反應(yīng)0.5小時，用酶標儀(MultiskanSepectrun型，美國The皿o公司)在波長490nm處測定吸光值(OD柳)；同時，還設(shè)置AEAPS/Dextran-SPION組、mAb-APF國GA/Dextran誦SPION組、GA/Dextran-SP腿組、陽性對照組(Dextran-SPION懸浮液直接與鐵染液進行普魯士藍顯色反應(yīng))和空白對照組，每組設(shè)3個復(fù)孔；各組OD49o值以3個復(fù)孔的均值(f)和標準差(5*)表示，大于或等于空白對照組2.1倍者判為陽性。結(jié)果見表l，由表1可知，AEAPS/Dextran-SPION組、mAb-APF-GA/Dextran-SPION組和GA/Dextran-SPION組的OD將o值均小于空白對照組的2.1倍，判為陰性；而mAb-APF-AEAPS/Dextran-SPION組的OD柳值為空白對照組的2.4倍，判為陽性>說明AEAPS/Dextran-SPION可以與mAb-APF有效結(jié)合，并與AFP發(fā)生特異性反應(yīng)，同時證實Dextran-SPION的表面成功修飾有AEAPS。表l、AEAPS/Dextran-SPION與單克隆抗體的結(jié)合檢測結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過參照本發(fā)明的優(yōu)選實施例已經(jīng)對本發(fā)明進行了描述，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以在形式上和細節(jié)上對其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍。權(quán)利要求1、氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，其特征在于該超順磁性納米顆粒具有核殼型結(jié)構(gòu)，其內(nèi)核為磁性四氧化三鐵，內(nèi)核表面為葡聚糖包覆層，葡聚糖包覆層外表面連接氨基硅烷偶聯(lián)劑。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的M硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，其特征在于所述tt硅烷偶聯(lián)劑為N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷或3-氨基丙基三乙氧基硅烷。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的M硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒，其特征在于所述氨基硅烷偶聯(lián)劑為N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三曱氧絲烷。4、權(quán)利要求1所述的氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于包括以下步驟a、制備葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒按照二價鐵鹽、三價鐵鹽和葡聚糖的摩爾比為l-3:1.5~4:0.040.10，稱取二價鐵鹽、三價鐵鹽和葡聚糖，加水使溶解，再在惰性氣體保護、溫度為55~65。C和攪拌速度為8001500r/min的條件下滴加堿溶液調(diào)節(jié)pH至7.09.0，滴加完畢后繼續(xù)恒溫攪拌反應(yīng)12小時，冷卻，離心棄沉淀，上清液用酸調(diào)節(jié)pH至7.09.0，微孔濾膜過濾，濾液即為葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒懸浮液；b、用氨基硅烷偶聯(lián)劑對葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒進行表面修飾在步驟a制得的葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒懸浮液中，按照葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒與氨基硅烷化偶聯(lián)劑的摩爾比為1~3:3~15，加入氨基硅烷化偶聯(lián)劑，在惰性氣體保護、溫度為5565。C和攪拌速度為800~1500r/min的條件下恒溫攪拌反應(yīng)35小時，孩t孔濾膜過濾，濾液即為氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒懸浮液。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的M硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于所述二價鐵鹽為氯化亞鐵或硫酸亞鐵，三價鐵鹽為氯化鐵或硫酸鐵，葡聚糖的相對分子質(zhì)量為10000;所述二價鐵鹽、三價鐵鹽和葡聚糖的摩爾比為l:1.7:0.08。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于所述堿溶液為質(zhì)量百分濃度為25%的氨水溶液，酸為水乙酸。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟a是在氮氣保護、溫度為60'C和攪拌速度為1000r/min的條件下以1mL/min的速度滴加堿溶液，滴加完畢后繼續(xù)恒溫攪拌反應(yīng)1小時。8、根據(jù)權(quán)利要求4所迷的氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于所述M硅烷偶聯(lián)劑為N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷或3-氣基丙基三乙氧;i^f圭烷。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于所述M硅烷偶聯(lián)劑為N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷；所述葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒與氨基硅烷化偶聯(lián)劑的摩爾比為l:7。10、根據(jù)權(quán)利要求9所迷的M硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟b是在氮氣保護、溫度為60。C和攪拌速度為1000r/min的條件下恒溫攪拌反應(yīng)4小時。全文摘要本發(fā)明公開了一種氨基硅烷偶聯(lián)劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒及其制備方法，該超順磁性納米顆粒具有核殼型結(jié)構(gòu)，其內(nèi)核為磁性四氧化三鐵，內(nèi)核表面為葡聚糖包覆層，葡聚糖包覆層外表面連接氨基硅烷偶聯(lián)劑；其制備方法是先制備葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒，再用氨基硅烷偶聯(lián)劑對葡聚糖包覆的超順磁性四氧化三鐵納米顆粒進行表面修飾；本發(fā)明的超順磁性納米顆粒具有高親水性，在水相中穩(wěn)定分散，可以減少網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬量，延長血中循環(huán)時間，并且表面富含氨基，可以方便地與單克隆抗體結(jié)合以提高主動靶向性，同時對機體不造成毒副作用，生物相容性好，制備方法簡單，在惡性腫瘤早期診斷和靶向性治療領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。文檔編號H01F1/032GK101554574SQ20091010365公開日2009年10月14日申請日期2009年4月21日優(yōu)先權(quán)日2009年4月21日發(fā)明者娟賀,均鄧,鄭峻松申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)