專利名稱：磁性微粒及其制造方法
磁性微粒及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種磁性微粒，特別涉及一種具有專 一性分離生物材料的 磁性微粒及其制造方法。
背景技術(shù)：
通常要將生物材料例如核酸從復(fù)雜的生物體中分離是很困難的，因?yàn)?其濃度非常低，并且許多其它的固體或不可溶的物質(zhì)也同時(shí)存在。
因此，提出了許多用來分離生物材料的方法和材料，例如使用磁性微 粒去吸附生物材料，并通過施加磁場及進(jìn)行清洗步驟使得生物材料從原始 的樣品中分離出來。
目前有許多用來分離生物材料的磁性微粒，例如美國專利第6133047 號中描述了 一種超順磁性單一分散型微粒，其包括第 一 高分子制成的核心， 第二高分子制成的內(nèi)層涂布在核心上，其中具有磁性物質(zhì)分布，以及第三
高分子制成的外層涂布在內(nèi)層上，其可以與生物分子作用。美國專利第 6274387號中描述一種磁性載體，包括內(nèi)含磁性物質(zhì)的二氧化硅微粒，其表 面上有聚丙烯酰胺(polyacrylamide)，該內(nèi)含》茲性物質(zhì)的二氧化硅孩i粒的表面 以耦合試劑處理，且處理過的二氧化硅微粒與丙烯酰胺(acrylamide)和/或聚 丙烯酰胺反應(yīng)。然而，這些磁性微粒的特性例如尺寸、磁性或分離效果等 并無法充分地控制。
因此，亟需一種磁性微粒，其需具有可調(diào)控的尺寸、粒徑分布小、均 勻度佳、高磁化量、良好儲存穩(wěn)定性以及具有專一性分離功能的表面修飾。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所提供的磁性微粒，其可以有效地分離生物材料、純化生物材 料、傳送藥品以及應(yīng)用在環(huán)境分析上，該磁性微粒具有可調(diào)控的尺寸、粒 徑分布小、均勻度佳、高磁化量、良好儲存穩(wěn)定性以及專一性的表面修飾 以分離生物分子。
本發(fā)明提供一種磁性微粒，包括高分子核心，包覆高分子核心的磁性
物質(zhì)層，以及包覆磁性物質(zhì)層的硅化物層。磁性微粒的直徑約為0.1至5 此外，磁性微粒還包括在硅化物層上的耦合試劑，以及連接至耦合試劑的 活性分子。
本發(fā)明提供一種磁性微粒的制造方法，包括以乳液聚合法將至少一種 單體聚合形成高分子核心，以氧化還原反應(yīng)形成磁性物質(zhì)層包覆高分子核 心，以及以聚合反應(yīng)形成硅化物層包覆磁性物質(zhì)層。該方法還包括以耦合 試劑修飾硅化物層的表面，以及將活性分子連接至耦合試劑。
此外，本發(fā)明也提供一種在復(fù)雜的生物分子樣品中分離特定生物分子 的方法，包括將本發(fā)明的磁性微粒與復(fù)雜的生物分子樣品混合形成混合物， 施加磁場至混合物，由此將帶有特定生物分子的磁性微粒與復(fù)雜的生物分 子樣品分離。其中，硅化物層的表面以具有官能團(tuán)連接至活性分子的耦合 試劑修飾，因此可提高生物分子的分離效率。
為了使本發(fā)明的上述目的、特征、及優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂，以下結(jié)合多 個(gè)實(shí)施例與比較例，作詳細(xì)說明如下


圖1為依據(jù)本發(fā)明一實(shí)施例的磁性微粒的剖面示意圖。
圖2為本發(fā)明實(shí)施例1的高分子核心的SEM照片，其直徑為220.4±6.5nm。
圖3為本發(fā)明實(shí)施例1的另 一 高分子核心的SEM照片，其直徑為921.6± 75.3 nm。
圖4為依據(jù)本發(fā)明實(shí)施例2,將圖2的高分子核心包覆磁性物質(zhì)層的 SEM照片，其總直徑為250.4 ± 7.2 nm。
圖5為依據(jù)本發(fā)明實(shí)施例2,將圖3的高分子核心包覆磁性物質(zhì)層的 SEM照片，其總直徑為950.0± 77.2 nm。
圖6至7為依據(jù)本發(fā)明實(shí)施例3,表面包覆硅化物層的磁性微粒的TEM 照片。
圖8為本發(fā)明實(shí)施例3的磁性微粒的EDX分析光譜圖。 圖9為使用本發(fā)明的磁性微粒所分離的CRP量對原始溶液中CRP濃度 的結(jié)果。
主要附圖標(biāo)記說明
10 ~高分子核心；
12-》茲性物質(zhì)層；
14 硅化物層；
16 耦合試劑；
18-活性分子。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明提供的磁性微粒適用于特定生物材料的分離以及環(huán)境分析，磁 性微粒的表面修飾成與特定的物質(zhì)或生物分子連接。例如，磁性微?？蓱?yīng) 用于從血液中分離生物材料，其修飾的表面可以與血液中特定的生物分子 結(jié)合，并通過磁力簡化復(fù)雜的分離步驟。此外，磁性微粒還可以應(yīng)用在環(huán) 境分析上，例如從水中分離出污染物。
圖1為磁性微粒的剖面示意圖，其包括高分子核心10,包覆高分子核 心的磁性物質(zhì)層12,以及包覆磁性物質(zhì)層的硅化物層14。磁性微粒的直徑 約為0.1至5 (im,高分子核心可為均聚合物(homopolymer)或共聚合物 (copolymer),其可由單體聚合而成，單體例如為苯乙烯(styrene)、苯乙烯衍 生物(styrene derivative)、烷基丙烯酸酯(alkylacrylate)、烷基曱基丙烯酸酯 (alkylmethacrylate)、 N-烷基丙烯酰胺(N-alkylacrylamide)或N,N-二烷基丙烯 酰胺(N，N-dialkyl-acrylamide)，其中烷基為(:3-2()烷基，且其中優(yōu)選的單體為 苯乙烯或苯乙烯衍生物。苯乙烯衍生物例如為曱基苯乙烯(methyl styrene)、 乙基苯乙烯(ethyl styrene)、叔丁基苯乙烯(tert-butyl styrene)、氯曱基苯乙烯 (chloromethylstyrene)或二乙烯基苯(di-vinyl benzene)。不茲'l"生4勿質(zhì)層可以是力頃 ,茲4生(paramagnetic)、 超力頃》茲'I"生(superparamagnetic)、纟失/f茲'I"生(ferromagnetic)或 鐵氧磁性(ferritemagnetic)材料，適合的磁性物質(zhì)包括鐵、鈦、鈷、鋅、銅、 錳或鎳及其金屬氧化物、石茲鐵礦(magnetite)、赤鐵礦(hematite)、鐵氧體(ferrite) 例如錳、鎳或錳-鋅鐵氧體，或是鈷或鎳的合金。包覆磁性物質(zhì)層的硅化物 層可以使磁性物質(zhì)固定在核心表面上，提高磁性微粒儲存的穩(wěn)定性，同時(shí) 易于進(jìn)行表面修飾。硅化物層可以是硅氧烷(siloxane)、硅石玻璃(silica glass)、氧化珪(silicon oxide)、硅酸鹽(silicate salt)或其它類似的材料。
如圖l所示，,茲性微粒還可包括在硅化物層上的耦合試劑16,以及連接至耦合試劑的官能團(tuán)的活性分子18。耦合試劑可以是功能性硅烷 (functional silane),耦合試劑16的官能團(tuán)包括氨基(amino)、硫醇基(thiol)、 羥基(hydroxyl)、醛基(aldehyde)、羧基(carboxylic)、酯基(ester)或其它類似的 官能團(tuán)，其可以與活性分子18連接?；钚苑肿?8具有親和力以吸附特定 物質(zhì)、生物分子或細(xì)胞，活性分子可包含但不限定于抗體(antibody)、核酸 (nucleic acid)、 寡聚核芬酸(oligonucleotide)、 蛋白質(zhì)(protein)、 醣類(sugar) 或抗原(antigen)。
在本發(fā)明的磁性微粒的制造方法的 一 實(shí)施例中，高分子核心可由上述 至少一種單體以乳液聚合法(emulsionpolymerization)合成，例如可在7jc與乙 醇的混合物中，使用苯乙烯單體與曱基丙烯酸(methylacrylic acid，簡稱MAA) 以乳液聚合法反應(yīng)，合成出表面帶有羧酸基(carboxylic acid group)的聚苯乙 烯核心，并且通過調(diào)整水與乙醇的比例及苯乙烯的含量，得到各種尺寸的 高分子核心。高分子核心的直徑可約為200至5000 nm，并且其粒徑的分布 是均勻的。接著，通過高分子核心上的官能團(tuán)將磁性物質(zhì)前體均勻地吸附 在高分子核心表面上，高分子核心上的官能團(tuán)可為氨基、羥基、羧基或其 它類似的官能團(tuán)，然后，磁性物質(zhì)前體通過氧化還原反應(yīng)轉(zhuǎn)換成磁性物質(zhì) 層覆蓋在高分子核心上。例如，F(xiàn)e"離子通過高分子核心上的羧酸基均勻地 吸附在每一個(gè)聚苯乙烯核心的表面上，然后將Fe^離子轉(zhuǎn)換成Fe304作為磁 性物質(zhì)層覆蓋在核心上，磁性物質(zhì)層的厚度約在15至30 nm。接下來，形 成硅化物層覆蓋磁性物質(zhì)層，硅化物層的厚度約為20至30 nm,硅化物層 可以是硅氧烷、硅石玻璃、氧化硅或硅酸鹽，其可由含硅的前體形成，含 珪的前體可以是珪烷氧化物(silicon alkoxide)、石圭酸鈉(sodium silicate)、 3-氨 基丙炔基石圭》克(3-aminopropinyl silane)、乙歸基三氯石圭》克(vinyltrichlorosilane)、 三曱氧乙烯基硅烷(trimethoxyvinylsilane)、 乙烯基三乙氧基硅烷 (triethoxyvinylsilane)、 乙烯基三O曱氧基乙氧基)硅烷 (tris(2-methoxyethoxy)vinylsilane) 、 3-縮水甘油氧基丙基三曱氧基硅烷 (3-glycidoxypropyltrimethoxysilane)、 3-曱基丙烯酰氧基丙基三曱氧基硅烷 (3-methacryloxypropyltrimethoxysilane) 、 二乙氧基-3-縮水甘油氧基丙基曱基 硅烷(diethoxy-3-glycidoxypropylmethyllsilane)或前述的組合，其中硅烷氧化 物例如為Si(OCH3)4、 Si(OC2H5)4、 Si(0-n-C3H7)4、 Si(0-i-C3H7)4、 Si(0-n-C4H9)4 或Si(0-i-C4H9)4。例如，可加入原硅酸四乙酯(tetraethyl orthosilicate，簡稱TEOS)Si(OC2H5)4作為硅化物層的前體，以覆蓋磁性物質(zhì)層形成》茲性微粒。 硅化物層的表面可用耦合試劑修飾，耦合試劑帶有官能團(tuán)包括氨基、 硫醇基、羥基、醛基、羧基、酯基或其它類似的官能團(tuán)?；钚苑肿涌梢赃B 接至磁性微粒上的耦合試劑，以分離復(fù)雜的生物分子樣品中特定的生物分 子，被分離的特定生物分子可以是抗體、核酸、寡聚核苷酸、蛋白質(zhì)、醣 類或抗原。例如，可使用耦合試劑(3-氨基丙基)三乙氧基硅烷((3-amin叩ropyl) triethoxysilane，簡稱APTES)修飾磁性微粒的硅化物層，然后將末端氨基轉(zhuǎn) 換成羧酸基，并與活性分子例如抗體連接，以分離血液中的抗原。
本發(fā)明的磁性微粒可以從復(fù)雜的生物分子樣品中分離出特定的生物分 子，首先，將其上含有活性分子的磁性微粒與復(fù)雜的生物分子樣品混合， 活性分子可以分離復(fù)雜的生物分子樣品中特定的生物分子，然后通過施加 磁場及進(jìn)行清洗步驟，使得特定的生物分子從復(fù)雜的生物分子樣品中分離 出來。
本發(fā)明的磁性微粒的制造方法的實(shí)施例如下所述，然而其并非限定本 發(fā)明的磁性微粒的制造方法。
實(shí)施例1
高分子核心的制備
將18毫升的苯乙烯、1毫升的曱基丙烯酸(methylacrylicacid)、 0.1克的 過硫酸鉀(potassiumperoxydisulfate， K2S208)、 10毫升的乙醇以及60毫升的 去離子水置入反應(yīng)器中，在氮?dú)庀?，將上述混合物?0。C攪拌反應(yīng)24小 時(shí)，然后冷卻至室溫，得到聚苯乙烯核心。接著，可使用掃描式電子顯微 鏡(SEM)觀察并測量這些高分子核心的直徑，依據(jù)上述反應(yīng)條件所得到的高 分子核心的SEM照片如圖3所示，其直徑約為921.6± 75.3 nm,且粒徑分 布小，均勻度高。
上述反應(yīng)條件中水對乙醇的比例可調(diào)整為7:0,并且可將混合物在80°C 攪拌反應(yīng)24小時(shí)，其它反應(yīng)條件保持不變，如此所得到的高分子均勻性高， 核心的直徑約為220.4 ±6.5 nm,其SEM照片如圖2所示，并且其粒徑亦是 均勻的。
實(shí)施例2
在高分子核心上包覆磁性物質(zhì)層
將200毫克實(shí)施例1的聚苯乙烯核心以及30毫升的乙二醇(ethylene glycol)以超聲波震蕩10分鐘，然后加入120毫升的去離子水。接著，將2 克的六亞曱基四胺(hexamethylenetetramine) 、 0.1克的賄酸鐘(potassium nitrate, KN03)以及1克的氯化亞鐵(Iron(II) chloride, FeCl2)加入上述混合物 中，在80。C反應(yīng)4小時(shí)。反應(yīng)完成后，用去離子水清洗產(chǎn)物，得到以聚苯 乙烯為核心且表面包覆氧化鐵磁性物質(zhì)層的微粒。圖4為直徑220.4 ± 6.5nm 的高分子核心被磁性物質(zhì)層包覆的SEM照片，圖4中的微粒的總直徑約為 250.4 土 7.2 nm,其々包和,茲化量為61.3 emu/g。圖5為直徑921.6± 75.3 nm的 高分子核心被磁性物質(zhì)層包覆的SEM照片，其總直徑約為950 ± 77.2 nm, 其飽和f茲化量為52.3emu/g。上述的f茲性物質(zhì)層的厚度約為30 nm。
實(shí)施例3
在磁性物質(zhì)層上包覆硅化物層
將50毫克實(shí)施例2的微粒、50毫升去離子水以及1.25克聚乙烯吡咯 烷酮(polyvinylpyrrolidone,簡稱PVP-10)置入反應(yīng)器中，以轉(zhuǎn)速600 rpm攪 拌反應(yīng)24小時(shí)。將得到的固體產(chǎn)物以離心力分離，并加入50毫升乙醇與 固體產(chǎn)物混合。接下來，將2.42毫升濃度為4.2。/。的氨水溶液(ammonia solution)溶于乙醇的溶液以及濃度為10 %的原硅酸四乙酯(tetraethyl orthosilicate, TEOS)溶于乙醇的溶液加入上述混合物中，攪拌反應(yīng)15小時(shí)， 得到表面包覆硅化物層的磁性微粒。圖6和7為表面包覆硅化物層的磁性 微粒的SEM照片，圖8為實(shí)施例3的磁性微粒以能量分散X射線光譜儀 (energy dispersive x-ray, EDX)作元素分析所得到的最終分析光謙圖，如圖8 所示，其顯示磁性微粒具有Si、 O及Fe的波峰，這表示在磁性微粒上形成 有硅化物層。
C實(shí)施例4
與耦合試劑連接
將實(shí)施例3的磁性微粒與濃度為20%的(3-氨基丙基)三乙氧基硅烷 (Oaminopropyl) triethoxysilane,簡稱APTES)溶于乙醇的溶液攪拌反應(yīng)15 小時(shí)，待反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物以乙醇及去離子水各清洗3次，得到其上具 有耦合試劑APTES的磁性微粒，然后將末端氨基轉(zhuǎn)換成羧酸基。
實(shí)施例5
與活性分子連接
將1克實(shí)施例4其上具有羧酸基的磁性微粒以25mM、 pH 5的2-(N-嗎啉代)乙磺酸(2-(N-morpholino) ethanesulfonic acid)緩沖液(MES buffer)清 洗，攪拌5分鐘，然后以磁性分離器將磁性微粒從溶液中分離。將上述步 驟重復(fù)2次，接著，將清洗過的磁性微粒、的50mg/ml 7V-乙基-7VI-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺C/V-Ethyl-7V!-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide,簡 稱EDC)以及50jLtl的50mg/ml羥基-2,5- 二氧代吡咯烷-3-磺酸鈉 (Hydroxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonicacid sodium salt , 簡稱sulfo-NHS) 攪拌反應(yīng)30分鐘，然后以25mM、 pH 5的MES緩沖液清洗2次。
將100 pl的卯0 pg/ml C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,簡稱CRP)抗體 溶液以及依上述方式處理過的；茲性」微粒攪拌反應(yīng)2小時(shí)，并將未反應(yīng)的抗 體溶液除去。接著，加入100pl的1M、 pH7.4的三羥曱基氨基甲烷(Tris (hydroxymethyl) aminomethane) Tris溶液反應(yīng)0.5小時(shí)，然后以0.01M、pH 7.4 的磷酸緩沖液(phosphate buffer solution,簡稱PBS)清洗，得到10 mg/ml表 面具有CRP抗體修飾的磁性微粒溶液，每1毫克的磁性微粒表面可以鍵結(jié) 約30pg的活性CRP抗體。
實(shí)施例6
生物分子分離測試
將100 pl實(shí)施例5的表面具有CRP抗體修飾的磁性微粒溶液放置于磁 性分離器中，除去其中的緩沖液。接著，以0.01M、 pH7.4的PBS緩沖液 調(diào)配各種濃度的CRP溶液，并與上述處理過的磁性微?；旌稀Ｔ诖判晕⒘? 上的CRP抗體可以分離溶液中的CRP,在反應(yīng)l小時(shí)之后，將混合物放置 于磁性分離器中分離，收集未反應(yīng)的CRP溶液，測定其中的CRP量，如此 可估算被磁性微粒分離的CRP量。圖9為被磁性微粒分離的CRP量對原始 溶液中CRP濃度的結(jié)果，由CRP分離測試的結(jié)果可得知，表面具有CRP 抗體修飾的磁性微粒，其分離CRP的效率高于95.4% 。
雖然本發(fā)明已以優(yōu)選實(shí)施例披露如上，然其并非用以限定本發(fā)明。任 何本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域中的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)， 應(yīng)可作任意更動與潤飾，因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求書所 限定的范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種磁性微粒，包括高分子核心；磁性物質(zhì)層，覆蓋該高分子核心；以及硅化物層，覆蓋該磁性物質(zhì)層。
2. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其中該高分子核心還包括官能團(tuán)以吸 附/磁性物質(zhì)前體。
3. 如權(quán)利要求2所述的磁性微粒，其中該官能團(tuán)包括氨基、鞋基或羧基。
4. 如權(quán)利要求2所述的磁性微粒，其中該磁性物質(zhì)前體包括Fe"離子。
5. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其直徑為0.1至5 pm。
6. 如權(quán)利要求1所述的^f茲性微粒，其中該高分子核心的直徑為200至 5000 nm。
7. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其中該磁性物質(zhì)層的厚度至少為15nm。
8. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其中該硅化物層的厚度至少為20 nm。
9. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其中該高分子核心包括均聚合物或共 聚合物。
10. 如權(quán)利要求9所述的磁性微粒，其中該均聚合物或共聚合物的單體 包括苯乙烯、苯乙烯衍生物、烷基丙烯酸酯、烷基曱基丙烯酸酯、N-烷基 丙烯酰胺或N,N-二烷基丙烯酰胺(N,N-dialkyl-acrylamide)。
11. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其中該磁性物質(zhì)層包括順磁性、超 順-茲性、鐵磁性或鐵氧,茲性材料。
12. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，其中該硅化物層包括硅氧烷、硅石 玻璃、氧化硅或硅酸鹽。
13. 如權(quán)利要求1所述的磁性微粒，還包括在該硅化物層上的耦合試劑。
14. 如權(quán)利要求13所述的磁性微粒，還包括連接至該耦合試劑的活性分子。
15. 如權(quán)利要求13所述的磁性微粒，其中該耦合試劑包括功能性硅烷。
16. 如權(quán)利要求13所述的磁性微粒，其中該耦合試劑含有官能團(tuán)，包括 氨基、硫醇基、羥基、醛基、羧基或酯基。
17. 如權(quán)利要求14所述的磁性微粒，其中該活性分子包括抗體、核酸、寡聚核苷酸、蛋白質(zhì)、醣類或抗原。
18. —種磁性微粒的制造方法，包括以乳液聚合法將至少一種單體聚合形成具有官能團(tuán)的高分子核心； 以該具有官能團(tuán)的高分子核心吸附磁性物質(zhì)前體，形成磁性物質(zhì)層覆 蓋該高分子核心；以及形成硅化物層覆蓋該磁性物質(zhì)層。
19. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該官能團(tuán)包括氨 基、羥基或羧基。
20. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該磁性物質(zhì)前體包 括Fe2+離子。
21. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該磁性微粒的直徑 為0.1至5μm.
22. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該高分子核心的直 徑以水對乙醇的溶劑比控制在200至5000 nm。
23. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該磁性物質(zhì)層的厚 度至少為15 nm。
24. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該硅化物層的厚度 至少為20 nm。
25. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該高分子核心包括 均聚合物或共聚合物。
26. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該單體包括苯乙 烯、苯乙烯衍生物、烷基丙烯酸酯、烷基曱基丙烯酸酯、N-烷基丙烯酰胺 或N，N-二烷基丙烯酰胺。
27. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該磁性物質(zhì)層包括 順磁性、超順磁性、鐵磁性或鐵氧磁性材料。
28. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，其中該硅化物層包括硅 氧烷、石圭石玻璃、氧化石圭或硅酸鹽。
29. 如權(quán)利要求28所述的磁性微粒的制造方法，其中該硅化物層由含硅 前體形成。
30. 如權(quán)利要求29所述的磁性微粒的制造方法，其中該含硅前體包括硅烷氧化物、硅酸鈉、3-氨基丙炔基硅烷、乙烯基三氯硅烷、三曱氧乙烯基硅烷、乙烯基三乙氧基硅烷、乙烯基三(2-曱氧基乙氧基)硅烷、3-縮水甘油氧 基丙基三曱氧基硅烷、3-甲基丙烯酰氧基丙基三曱氧基硅烷、二乙氧基-3-縮水甘油氧基丙基曱基硅烷或前述的組合。
31. 如權(quán)利要求30所述的磁性微粒的制造方法，其中該硅烷氧化物包括 Si(OCH3)4、 Si(OC2H5)4、 Si(0-n-C3H7)4 、 Si(0-i-C3H7)4 、 Si(0-n-C4H9)4或 Si(0-i-C4H9)4。
32. 如權(quán)利要求18所述的磁性微粒的制造方法，還包括以耦合試劑修飾 該硅化物層的表面，以及將活性分子連接至該耦合試劑。
33. 如權(quán)利要求32所述的磁性微粒的制造方法，其中該耦合試劑包括功 能性硅烷。
34. 如權(quán)利要求32所述的磁性微粒的制造方法，其中該耦合試劑含有官 能團(tuán)，包括氨基、硫醇基、羥基、醛基、羧基或酯基。
35. 如權(quán)利要求32所述的磁性微粒的制造方法，其中該活性分子包括抗 體、核酸、寡聚核苷酸、蛋白質(zhì)、醣類或抗原。
36. —種在含生物分子的樣品中分離生物分子的方法，包括 將如權(quán)利要求14所述的磁性微粒與該含生物分子的樣品混合，形成混合物；施加磁場至該混合物；以及 將該磁性微粒與該含生物分子的樣品分離。
37. 如權(quán)利要求36所述的方法，其中該生物分子包括蛋白質(zhì)、抗體、核 酸、寡聚核芬酸、醣類或抗原。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種磁性微粒及其制造方法，磁性微粒包括高分子核心，包覆高分子核心的磁性物質(zhì)層，以及包覆磁性物質(zhì)層的硅化物層。此外，磁性微粒還包括在硅化物層上的耦合試劑，以及連接至耦合試劑的活性分子。本發(fā)明磁性微粒的粒子尺寸具有可調(diào)性、粒徑分布小、均勻度佳，且其具有高磁化量、良好儲存穩(wěn)定性以及專一性表面修飾，可應(yīng)用在生物材料的分離和環(huán)境分析。
文檔編號H01F1/42GK101345113SQ20081008065
公開日2009年1月14日 申請日期2008年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月11日
發(fā)明者卓慧如, 巫昆展, 李昆峰, 江佩馨, 蘇志賢, 趙啟民, 郭文旬, 黃湘瑗 申請人:財(cái)團(tuán)法人工業(yè)技術(shù)研究院