一種化妝品中多種紫外線吸收劑快速檢測(cè)與確證技術(shù)的制作方法
【專利摘要】一種化妝品中多種紫外線吸收劑快速檢測(cè)與確證技術(shù)，本發(fā)明公開了一種化妝品中17種紫外線吸收劑快速檢測(cè)技術(shù)方法及其應(yīng)用，所述的檢測(cè)技術(shù)包括：樣品經(jīng)過(guò)提取后，采用高效液相色譜-質(zhì)譜方法(HPLC-MS/MS)進(jìn)行檢測(cè)與確證。本發(fā)明提供的檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性好，靈敏度高，使用方便，能夠?qū)崿F(xiàn)快速檢測(cè)化妝品中17種紫外線吸收劑。
【專利說(shuō)明】
一種化妝品中多種紫外線吸收劑快速檢測(cè)與確證技術(shù)
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于分析和檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種化妝品中多種防曬劑快速檢測(cè)技術(shù)方 法及其應(yīng)用，更具體的說(shuō)是涉及一種化妝品中17種紫外線吸收劑快速檢測(cè)技術(shù)方法及其 應(yīng)用，包括采用四氫呋喃_甲醇-水體系，配置提取溶劑進(jìn)行提取，采用高效液相色譜-質(zhì) 譜方法（HPLC-MS/MS)進(jìn)行檢測(cè)與確證。本發(fā)明提供的檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性好，靈敏度高， 使用方便。
【背景技術(shù)】
[0002] 化學(xué)防曬劑局部用于皮膚，濃度較高可能引發(fā)接觸致敏和光接觸致敏等不良反 應(yīng)。目前我國(guó)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007)等同采用了歐盟允許使用的防曬劑的品種及其限 量的相關(guān)規(guī)定。限用的防曬劑包括甲氧基肉桂酸乙基己酯、二苯-3、二苯酮_4和二苯酮-5 等26種化學(xué)防曬劑以及二氧化鈦和氧化鋅2種物理防曬劑。防曬化妝品中的防曬劑是作為 限用原料添加的，對(duì)防曬劑的含量檢測(cè)是保證防曬化妝品的安全性的重要手段。《化妝品衛(wèi) 生規(guī)范》（2007)給出化學(xué)防曬劑的檢測(cè)方法，涉及了 15種化學(xué)防曬劑的定量檢測(cè)，成為目 前防曬化妝品質(zhì)量控制的重要技術(shù)手段。但是鑒于該方法存在的一些不足，影響了該方法 的適用性。同時(shí)，新型防曬劑的使用，也對(duì)防曬劑檢測(cè)方法提出了新的要求。為此，通過(guò)優(yōu) 化色譜條件，開發(fā)新的色譜分離方法，以避免使用四氫呋喃和高氯酸這樣高腐蝕性的溶劑， 在普通液相色譜上實(shí)現(xiàn)多種限用防曬劑目標(biāo)化合物的定量分析方法顯得非常必要。
[0003] 化妝品衛(wèi)生規(guī)范中規(guī)定的限用防曬劑的檢測(cè)方法，采用一種液相條件分離了 15 種限用防曬劑。涉及防曬劑的種類與QB/T 2333-1997相比，雖然總數(shù)少了 4種，但是涉及 了 4種QB/T2333-1997未涉及的限用防曬劑。將等度洗脫改進(jìn)為梯度洗脫，使得色譜的分 離度有了很大的改進(jìn)，在方法提供的液相色譜條件下大多數(shù)的化合物可以獲得基線分離， 有利于化合物的準(zhǔn)確定量。但是仍然采用高含量的四氫呋喃為流動(dòng)相，而且流動(dòng)相中仍然 使用高氯酸作為酸性改性劑，是該方法的不足之處。而這些不足，也影響了方法的適用性。 開展多組分同時(shí)測(cè)定的定性定量檢測(cè)方法研究十分必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種化妝品中17種紫外線吸收劑快速檢測(cè)技術(shù)方法及其應(yīng)用，包 括采用四氫呋喃-甲醇-水體系，配置溶劑為提取溶劑，采用高效液相色譜-質(zhì)譜方法 (HPLC-MS/MS)進(jìn)行檢測(cè)與確證。本發(fā)明提供的檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性好，靈敏度高，使用方 便。本技術(shù)對(duì)于17種紫外線吸收劑的檢測(cè)具有較低的檢出限和較寬的線性范圍。
[0005] 本發(fā)明應(yīng)用的儀器和設(shè)備：
[0006] (1)高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀配置ESI離子源。
[0007] (2)超聲波清洗器
[0008] (3)蝸旋混合器。
[0009] (4)離心機(jī)。
[0010] (5)分析天平：感量分別為0? lmg和0? Olmg。
[0011] 本發(fā)明所述的試劑與溶液：除另有規(guī)定外，所用試劑至少為分析純。
[0012] (1)甲醇：色譜純。
[0013] (2)正己烷：色譜純。
[0014] (3)無(wú)水硫酸鈉：優(yōu)級(jí)純，于650°C灼燒4h，冷卻后儲(chǔ)于密閉干燥容器中備用。
[0015] (4)標(biāo)準(zhǔn)品：詳細(xì)信息見表1。
[0016] 表1 17種紫外線吸收劑化合物信息

[0019] 本發(fā)明建立的17種紫外線吸收劑液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)的主要質(zhì)譜參數(shù)
[0020] 表2 16種紫外線吸收劑成分的主要參考質(zhì)譜參數(shù)

[0023] 16種紫外線吸收劑在質(zhì)譜儀器上的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM)色譜圖見圖1(正離子模 式）、圖2 (負(fù)尚子模式）。
[0024]
[0025] 圖1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)總離子流質(zhì)譜圖（正模式）和提取離子質(zhì)譜圖
[0026] 對(duì)應(yīng)峰號(hào)：1、對(duì)氨基苯甲酸（PABA) ;2、二苯酮；3、二苯酮-3(Bp3) ;4、p-甲氧基肉 桂酸異戊酯（IAMC) ;5、4_甲基芐亞基樟腦（4MBC) ;6、奧克利林（0C) ;7、二乙氨基羥苯甲酰 基苯甲酸己酯（DHHB) ;8、甲氧基肉桂酸乙基己酯（EHMC) ;9、PABA乙基己酯（0D-PABA) ;10、 丁基甲氧基二苯酰基甲烷（BMDBM) ;11、乙基己基三嗪酮（EHT) ;12、亞甲基雙-苯并三唑基 四甲基丁基酚（MBBT) ;13、雙-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（BEMT)胡莫柳酯（HMS);
[0027]
[0028] 圖2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)總離子流質(zhì)譜圖（負(fù)模式）和提取離子質(zhì)譜圖
[0029] 對(duì)應(yīng)峰號(hào)：1、苯基苯并咪唑磺酸（PBSA) ;2、二苯酮-4和二苯酮-5(Bp4/Bp5) ;3、 水楊酸乙基己酯（EHS) ;4、胡莫柳酯（HMS);
[0030] 本發(fā)明有如下的有益效果：本項(xiàng)研究建立了同時(shí)檢測(cè)化妝品中多種17種紫外線 吸收劑的分析方法，保證了結(jié)果的重復(fù)性與穩(wěn)定性，極大地提高了分析速度。
【附圖說(shuō)明】
[0031] 圖1 16種紫外線吸收劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)總離子流質(zhì)譜圖和提取離子質(zhì)譜圖（正離子模 式）
[0032] 對(duì)應(yīng)峰號(hào)：1、對(duì)氨基苯甲酸（PABA) ;2、二苯酮；3、二苯酮-3(Bp3) ;4、p-甲氧基肉 桂酸異戊酯（IAMC) ;5、4_甲基芐亞基樟腦（4MBC) ;6、奧克利林（0C) ;7、二乙氨基羥苯甲酰 基苯甲酸己酯（DHHB) ;8、甲氧基肉桂酸乙基己酯（EHMC) ;9、PABA乙基己酯（0D-PABA) ;10、 丁基甲氧基二苯?；淄椋˙MDBM) ;11、乙基己基三嗪酮（EHT) ;12、亞甲基雙-苯并三唑基 四甲基丁基酚（MBBT) ;13、雙-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（BEMT)胡莫柳酯（HMS);
[0033] 圖2 16種紫外線吸收劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)總離子流質(zhì)譜圖和提取離子質(zhì)譜圖（負(fù)離子模 式）
[0034] 對(duì)應(yīng)峰號(hào)：1、苯基苯并咪唑磺酸（PBSA) ;2、二苯酮-4和二苯酮-5(Bp4/Bp5) ;3、 水楊酸乙基己酯（EHS) ;4、胡莫柳酯（HMS);
【具體實(shí)施方式】
[0035] 下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例做詳細(xì)說(shuō)明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行 實(shí)施給出了詳細(xì)的實(shí)施方案和具體的操作過(guò)程。但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的具體實(shí) 施例。
[0036] 1分析步驟
[0037] 1. 1 提取
[0038] 稱取約0. lg化妝品樣品（精確至lmg)于15mL具塞刻度試管中，首先向試管中加 入6mL四氫咲喃（含0.1 %氨水），禍旋或超聲使樣品完全分散。若不能分散一般適當(dāng)超聲 可解決問(wèn)題，對(duì)超聲15min仍無(wú)法分散的樣品（例如唇膏樣品），需用60°C水浴，振蕩加熱 約1~2分鐘即可溶解分散。繼續(xù)向試管中加入甲醇/水（3 : 1)(含0.1%氨水）定容至 10mL，禍旋混合。于5000轉(zhuǎn)/分離心5~lOmin，取清液，聚丙稀微孔濾膜過(guò)濾，待用。
[0039] 涉及對(duì)氨基苯甲酸、苯基苯并咪唑磺酸的檢測(cè)，需取上述待用清液100 y L用甲醇 稀釋至lmL，用聚丙烯微孔濾膜過(guò)濾后，方可上機(jī)測(cè)試。其他目標(biāo)化合物的檢測(cè)視情況可適 當(dāng)稀釋后上機(jī)測(cè)試，也可無(wú)需稀釋，將上述待用清液直接上機(jī)測(cè)試。
[0040] 1. 2儀器參數(shù)與測(cè)定條件
[0041] 1.2.1液相色譜條件
[0042] 色譜柱：PFP(五氟苯基）色譜柱，4.6mmX150mm(I.D.)，3ym。
[0043] 流速：0? 5mL/min 進(jìn)樣量：2 y L。柱溫：25°C。
[0044] 流動(dòng)相：A水溶液（正模式含0? 1%甲酸，負(fù)模式含0.05%氨水），
[0045] B甲醇溶液（正模式含0? 1 %甲酸，負(fù)模式含0? 05%氨水）。
[0046] 梯度洗脫條件：
[0047] 表3梯度洗脫條件
[0049] 1. 2. 2質(zhì)譜參考條件
[0050] 離子源；電噴霧電離源（ESI源）檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM)。
[0051] 霧化氣：氮?dú)猓?5Psi。干燥氣：氮?dú)?，流?0L/min，溫度：350°C。
[0052] 碰撞氣：氮?dú)?。毛?xì)管電壓：4000V。
[0053] 2校準(zhǔn)曲線的制備
[0054] 分別準(zhǔn)確移取各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液200 y L于10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配置 成200 y g/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，取適量混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用甲醇逐級(jí)稀釋成100 y g/mL， 50 y g/mL，10 y g/mL，5 y g/mL，1 y g/mL的系列，構(gòu)成6個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)系列，標(biāo)準(zhǔn)系列應(yīng) 于使用前配制。二苯酮-9采用上述方法以水為溶劑進(jìn)行系列濃度配制移取10 yL系列 標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，建立校準(zhǔn)曲 線。
[0055] 3樣品測(cè)定
[0056] 在設(shè)定色譜條件下，移取10 y L待測(cè)溶液進(jìn)行高效液相色譜質(zhì)譜分析。若待測(cè)溶 液中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度超過(guò)校準(zhǔn)曲線線性范圍的上限，須對(duì)待測(cè)液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測(cè) 定。
[0057] 4平行實(shí)驗(yàn)
[0058] 按以上步驟，完成兩份樣品的平行測(cè)定。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié) 果的絕對(duì)差值不大于這兩次測(cè)定值的算術(shù)平均值的10%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種化妝品中化學(xué)防曬劑快速檢測(cè)技術(shù)方法及其應(yīng)用，一種化妝品中17種紫外線 吸收劑快速檢測(cè)技術(shù)方法及其應(yīng)用，所述的檢測(cè)技術(shù)包括：樣品經(jīng)過(guò)提取后，采用高效液相 色譜-質(zhì)譜方法（HPLC-MS/MS)進(jìn)行檢測(cè)與確證。2. -種將權(quán)利要求1所述的應(yīng)用于實(shí)際樣品中所含17種紫外線吸收劑檢測(cè)技術(shù)方法， 其特征在于，以電噴霧離子源（ESI源）為離子源，采用正負(fù)離子切換模式，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè) (MRM)掃描方式對(duì)17種紫外線吸收劑進(jìn)行檢測(cè)。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的實(shí)際樣品中所含17種紫外線吸收劑檢測(cè)技術(shù)方法，其特征在 于，可用于膏霜類、乳液類、水劑類、唇膏等蠟基類、指甲油類、粉類等化妝品中甲氧基肉桂 酸乙基己酯等17種紫外線吸收劑含量測(cè)定。
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK105891344SQ201410771067
【公開日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2014年12月15日
【發(fā)明人】王傳現(xiàn), 宋青, 張縉, 賴國(guó)銀, 任碩, 劉夏, 陳樹兵, 倪昕路, 方曉明, 李曉虹, 何宇平
【申請(qǐng)人】上海出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物與食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心