液相色譜法測定7種苯多酸及其衍生物特定遷移量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于化學(xué)物檢測領(lǐng)域，涉及食品接觸材料中的化學(xué)物的檢測，尤其涉及一 種使用高效液相色譜紫外（HPLC-UV)法測定塑料類食品包裝材料及容器中7種苯多酸及其 衍生物特定（總）迀移量的檢測方法。 技術(shù)背景
[0002] 苯多酸中的對苯二甲酸屬于低毒類化合物、與鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、和偏苯三 甲酸等苯多酸類似，對眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有刺激作用。苯多酸可作為單體或功能 助劑，廣泛應(yīng)用于聚酯樹脂、不飽和聚酯樹脂等塑料的生產(chǎn)。一些食品接觸材料相關(guān)制品中 殘留或降解出來的苯多酸，在使用的過程中會迀移到食物中，直接危害人體健康。歐盟在 2011年發(fā)布的（EU)N0 10/2011法規(guī)將七種苯多酸及其衍生物的特定總迀移量SML(T)限定 在 5-7. 5mg/kg〇
[0003] 目前，國內(nèi)外有關(guān)苯多酸的檢測主要集中在塑料、化學(xué)試劑、空氣、雪、尿液以及食 品模擬物類樣品中。主要使用的檢測方法有氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS)，氣相色譜法（GC)， 高效液相色譜法（HPLC)。已有的檢測標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)僅能檢測食品模擬物中對苯二甲酸的迀移 量，無法對歐盟（EU)NO10/2011法規(guī)中苯多酸的特定總迀移量進(jìn)行檢測。
[0004] 考慮偏苯三甲酸、偏苯三甲酸酐、間苯二甲酰氯、間苯二甲酸、對苯二甲酰氯、鄰苯 二甲酸、對苯二甲酸這7種苯多酸及其衍生物中的偏苯三甲酸酐、間苯二甲酰氯、對苯二甲 酰氯化學(xué)性質(zhì)活潑，極易與水反應(yīng)生成對應(yīng)的苯多酸，參考國內(nèi)外類似標(biāo)準(zhǔn)的做法，這三種 物質(zhì)相關(guān)的特定（總）迀移量，只需檢測其對應(yīng)的水解產(chǎn)物--苯多酸。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決塑料類食品包裝材料及容器中有害七種苯多酸及其衍生物特定迀移量 檢測的難題，本發(fā)明的目的是提供一種高效液相色譜紫外（HPLC-UV)法檢測塑料類食品接 觸材料中七種苯多酸及其衍生物的特定迀移量的檢測方法，該方法具有靈敏、準(zhǔn)確、快速、 簡便的特點。所述的7種苯多酸及其衍生物是：偏苯三甲酸、偏苯三甲酸酐、間苯二甲酰 氯、間苯二甲酸、對苯二甲酰氯、鄰苯二甲酸、對苯二甲酸。其中的偏苯三甲酸酐、間苯二甲 酰氯、對苯二甲酰氯化學(xué)性質(zhì)活潑，極易與水反應(yīng)生成對應(yīng)的苯多酸，參考國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)的做 法，對這三種物質(zhì)相關(guān)的特定迀移量，只需檢測其對應(yīng)的水解產(chǎn)物--苯多酸。
[0006] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的檢測方法通過以下步驟實現(xiàn)：
[0007] 一、迀移試驗
[0008] 根據(jù)食品接觸塑料制品的實際用途，按照表面積體積比將選用的食品模擬物注入 到待測樣品塑料制品或玻璃器皿中，在器皿口或容器口以表面皿或鋁箱紙進(jìn)行密封后，在 烘箱或培養(yǎng)箱中按歐盟（EU)NO10/2011法規(guī)規(guī)定迀移條件設(shè)定迀移溫度和時間進(jìn)行迀移 試驗，完畢后冷卻至室溫，將其中的食品模擬物轉(zhuǎn)移到干凈玻璃器皿中待后續(xù)處理，其中食 品模擬物分別為食品模擬物A、B、C、Dl、D2。
[0009] 所述的食品模擬物根據(jù)歐盟（EU)NO10/2011法規(guī)規(guī)定有五種，分別為食品模擬 物A、B、C、Dl、D2五種。食品模擬物A:10%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬pH> 4. 5的水 性食品；食品模擬物B:3%乙酸水溶液（w/v)，用于模擬pH< 4. 5的酸性食品；食品模擬 物C:20 %乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含量不超過20%的食品；食品模擬物 D1:50%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含量大于20%的食品以及油水乳化液； 食品模擬物D2 :橄欖油，用于模擬表面含有游離脂肪的食品。
[0010] 其中的迀移條件按照歐盟（EU)NO10/2011法規(guī)規(guī)定，見表1。按表1所示根據(jù)產(chǎn) 品實際用途選擇合適的迀移試驗條件。
[0011] 表 1
[0012]
[0013]
[0014] 表面積體積比按照歐盟（EU)NO10/2011法規(guī)規(guī)定：對于< 500mL，> 10L容器類 塑料制品或不可盛裝的扁平制品，將塑料制品剪切好放入干凈的玻璃器皿中，以6dm2食品 接觸面的表面積對應(yīng)1L食品模擬物的比例；對于> 500mL，< 10L的容器類塑料制品，則將 食品模擬物注入至距容器邊緣4/5處。
[0015] 二、食品模擬物的處理
[0016] ①食品模擬物A、B、C、D1的處理：將各試液充分混勻后，用注射器吸取上述稀釋后 的各食品模擬物1~2mL，經(jīng)親水性聚四氟乙烯針頭過濾器過濾至進(jìn)樣瓶中，待測；
[0017] ②食品模擬物D2的處理：稱取橄欖油模擬物10g(精確至0.lg)于50mL具塞玻 璃離心試管中，分別加入提取溶劑10.OmL正庚烷和1.OOmL異丙醇，混勻后，再加入4.OOmL 0. 1 %乙酸銨水溶液，旋緊塞子，置于分液漏斗振蕩器上300rpm震蕩20min，再靜置15min， 用2mL注射器吸取下層水溶液約2mL，過0. 45ymPTFE針頭過濾器至預(yù)先裝有5yL磷酸的 樣瓶中，蓋緊蓋子，混勻后，上樣。
[0018] 三、空白試驗
[0019] 按照步驟二中①、②方法處理沒有與待測樣品接觸的食品模擬試液。
[0020] 四、高效液相色譜紫外（HPLC-UV)法測定。
[0021] 高效液相色譜紫外（HPLC-UV)法的測定條件見表2。
[0022] 表 2
[0023]
[0024]
[0025] 檢測結(jié)果根據(jù)歐盟NO10/2011法規(guī)規(guī)定判斷特定迀移量是否合格。
[0026] 作為進(jìn)一步的改進(jìn)，上述的步驟二、①中用親水性聚四氟乙酸針頭過濾器過濾。
[0027] 作為進(jìn)一步的改進(jìn)，上述的步驟二、②樣品前處理程序中食品模擬物D2試液植物 油稱取的量為l〇g;提取溶劑正庚烷、異丙醇和〇. 1 %乙酸銨水溶液加入的量分別為10mL、 lmL和4mL;震蕩提取的速度為300rpm;震蕩提取時間為20min;靜置分層時間為15min;下 層水溶液過針頭過濾器的類型為聚四氟乙酸針頭過濾器。
[0028] 本發(fā)明采用了上述的技術(shù)方案，食品模擬物A、B、C、D1采用親水性聚四氟乙酸針 頭過濾器過濾，食品模擬物D2采用0. 1 %乙酸銨和正庚烷液液分配去除甘油酯，可以高效、 簡便、快速的測定塑料類食品包裝材料及容器中七種苯多酸及其衍生物特定迀移量。
[0029] 本發(fā)明提供了一種同時測定五種食品模擬物（10 %乙醇、20 %乙醇、50 %乙醇、3 % 乙酸和橄欖油）中偏苯三甲酸、偏苯三甲酸酐、間苯二甲酰氯、間苯二甲酸、對苯二甲酰氯、 鄰苯二甲酸、對苯二甲酸等7種苯多酸及其衍生物的特定迀移量。通過將食品模擬物浸泡 待測樣品，冷卻至室溫并混勻，水基食品模擬物經(jīng)親水性聚四氟乙酸針頭過濾器過濾后進(jìn) 樣；橄欖油用〇. 1 %乙酸銨水溶液提取后，下清液用親水性聚四氟乙酸針頭過濾器過濾后 進(jìn)樣。用SynergiPolar-RP柱梯度洗脫分離；檢測波長為232nm。本發(fā)明方法在五種食品 模擬物中的定量限為〇. 1~〇. 2mg/kg;在0. 5~12mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r>0. 99991); 1. 25、2. 5、6. 25mg/kg水平的加標(biāo)回收率為94. 3 %~105 %，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0. 1 %~ 2. 3%。結(jié)果表明，該方法色譜分離和線性關(guān)系較好，回收率和準(zhǔn)確度高，完全滿足歐盟（EU) N0 10/2011法規(guī)附表2中七種苯多酸及其衍生物的SML(T)的限量要求，并已應(yīng)用于實際樣 品的檢測。
【具體實施方式】
[0030] 本發(fā)明結(jié)合具體實施例做進(jìn)一步的說明。
[0031] 實施例1本發(fā)明的高效液相色譜紫外（HPLC-UV)法測定塑料類食品包裝材料及容 器中7種苯多酸及其衍生物特定迀移量的檢測方法。所述的7種苯多酸及其衍生：物是偏 苯三甲酸、偏苯三甲酸酐、間苯二甲酰氯、間苯二甲酸、對苯二甲酰氯、鄰苯二甲酸、對苯二 甲酸。其中的偏苯三甲酸酐、間苯二甲酰氯、對苯二甲酰氯化學(xué)性質(zhì)活潑，極易與水反應(yīng)生 成對應(yīng)的苯多酸，根據(jù)國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)的做法，對這三種物質(zhì)相關(guān)的特定迀移量，只需檢測其對 應(yīng)的水解產(chǎn)物一一苯多酸。檢測方法具體通過以下步驟實現(xiàn)：
[0032] 一、樣品前處理方法
[0033] 1、迀移試驗
[0034] 1. 1食品模擬物：根據(jù)歐盟（EU)N0 10/2011法規(guī)規(guī)定，食品模擬物A:10 %乙醇水 溶液（v/v)，用于模擬pH> 4. 5的水性食品；食品模擬物B:3%乙酸水溶液（w/v)，用于模 擬pH< 4. 5的酸性食品；食品模擬物C:20%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含 量不超過20%的食品；食品模擬物Dl:50%乙醇水溶液（v/v)，用于模擬含酒精且酒精含量 大于20%的食品以及油水乳化液；食品模擬物D2 :植物油，用于模擬表面含有游離脂肪的 食品。
[0035] 1. 2迀移條件：根據(jù)歐盟（EU)N0 1