一種利用超高效合相色譜同時(shí)快速檢測白酒中4種維生素e的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是一種利用超高效合相色譜串接二極管陣列 檢測器同時(shí)快速檢測白酒中4種維生素 E的方法，屬于酒類分析技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 針對(duì)全球飲食不足的現(xiàn)狀，食品生產(chǎn)商正依法增強(qiáng)許多食品和飲料產(chǎn)品的安全意 識(shí)，以增加消費(fèi)者的營養(yǎng)水平。鑒于此，食品生產(chǎn)商需要快速的、可信賴的和利潤高的方法 來分析他們的產(chǎn)品中的營養(yǎng)組分，以確保他們宣傳的真實(shí)性。維生素經(jīng)常是存在的，但其即 使是被強(qiáng)化之后，在挑戰(zhàn)性的基質(zhì)中的濃度水平仍然很低，這就使得準(zhǔn)確分析很費(fèi)力。
[0003] 現(xiàn)在，水溶性維生素化合物都是單獨(dú)分析的，或在小組里，使用廣大范圍的不同的 分析方法，如微生物測試法、比色法、滴定法、熒光法和HPLC法。這就意味著分析實(shí)驗(yàn)室需 要一筆可觀的費(fèi)用用于各種各樣不同儀器的財(cái)政支出，以便于多種維生素分析，同時(shí)如果 有一系列的分析需要進(jìn)行的話，還需要投入大量的員工時(shí)間和努力。所以，一個(gè)快速的、選 擇性好的解決方案的同時(shí)分析水溶性維生素化合物的能力，可以給商業(yè)帶來以下潛力：提 高生產(chǎn)率；由于提高了效率而引起的財(cái)政收入的增加、加速樣品周轉(zhuǎn)，以及減少勞動(dòng)力和培 訓(xùn)成本。
[0004] 本發(fā)明描述了一個(gè)用來同時(shí)分析4種水溶性維生素 E的快速的、選擇性好的解決 方案，這個(gè)方案尤其適用于希望得到與UV檢測器相比更高靈敏度、更高選擇性和更快的樣 品周轉(zhuǎn)時(shí)間的水溶性維生素分析方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種利用超高效合相色譜儀串接二極管陣列檢測器同時(shí) 快速檢測白酒中4種維生素 Ε(α-維生素 Ε，β-維生素 Ε，γ-維生素 Ε，δ-維生素 E)的 方法。本發(fā)明可以為白酒中維生素檢測的準(zhǔn)確判定、快速檢測提供科學(xué)依據(jù)。
[0006] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
[0007] 本發(fā)明利用超高效合相色譜同時(shí)快速檢測白酒中4種維生素 E的方法，其特點(diǎn)在 于：
[0008] 所用儀器為：超高效合相色譜儀（配有二極管陣列檢測器）；c18色譜柱 (3. OX 100mm，L 7 μ m);禍旋儀；移液槍。
[0009] 方法包括如下步驟：
[0010] ⑴對(duì)待測白酒酒樣進(jìn)行前處理：
[0011] 移取5mL待測白酒酒樣于IOmL比色管中，加入2mL正己烷，渦旋lmin，移取I. 5mL 上層溶液作為待測溶液注入2mL樣品瓶，待進(jìn)樣；
[0012] (2)設(shè)定超高效合相色譜儀的條件為：
[0013] 色譜柱：C18色譜柱（3. OX 100mm，1. 7 μπι);柱溫：30 ~50°C ;
[0014] 樣品室溫度：10~20°C
[0015] 流動(dòng)相：二氧化碳（A相）+甲醇〇相）；流速：2~3mL/min ;洗脫方式：梯度洗脫； 進(jìn)樣量：1 UL ;時(shí)間：5min ;ABPR 壓力：1885psi ;
[0016] 二極管陣列檢測器PDA的條件設(shè)定為：
[0017] 3D 通道：200nm-410nm
[0018] 分離度：1. 2 ~2. Onm
[0019] 采樣速率：20~50點(diǎn)/秒
[0020] (3) 4種維生素 E的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
[0021] 取α -維生素 Ε、β -維生素 Ε、γ -維生素 E和δ -維生素 E配制質(zhì)量濃度范圍在 12. 5~250ug/mL的混合系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，然后按照（2)所設(shè)定的儀器的條件取I. 5mL各 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣，作UPC2檢測，以待測物的峰面積對(duì)其所相應(yīng)的質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸， 獲得4種維生素 E的線性回歸方程，各線性回歸方程所對(duì)應(yīng)的曲線，即為相應(yīng)維生素的標(biāo)準(zhǔn) 曲線；
[0022] 所述的4種維生素 E對(duì)應(yīng)的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)r2見表1，
[0023] 表1 :4種維生素 E的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限
[0024]
[0025] (4)待測樣品的測試
[0026] 將待測白酒酒樣按步驟（1)的方式進(jìn)行前處理后，取I. 5mL按步驟（2)的條件作 UPC2檢測，通過使用3D波長掃描，獲得待測樣品的色譜圖，對(duì)待測白酒酒樣根據(jù)保留時(shí)間進(jìn) 行定性分析，然后根據(jù)4種維生素 E的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)待測白酒酒樣進(jìn)行定量分析。
[0027] 對(duì)本發(fā)明方法作如下靈敏度測試：靈敏度測試包括儀器的靈敏度與方法的靈敏 度，儀器的靈敏度用儀器的檢出限表示，取信噪比多3的維生素 E的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的最小濃 度為儀器檢出限；方法的靈敏度用方法的定量限表示，取信噪比多9的維生素 E混合標(biāo)準(zhǔn)溶 液的最小濃度為方法定量限。所得的相關(guān)數(shù)據(jù)見表1。
[0028] 對(duì)本發(fā)明方法作如下準(zhǔn)確性及重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)：選用同一個(gè)白酒樣品經(jīng)前處理后作為 空白樣品，分為3份，分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，計(jì)算回收率；選取1個(gè) 白酒樣品按照同一前處理方法處理6個(gè)，分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)的 范圍來判斷分析方法的重現(xiàn)性。所述的準(zhǔn)確性用回收率來表示，見表2,方法的重現(xiàn)性用相 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)來表示，見表3?？梢钥闯龌厥章试?0~120%，RSD〈10%。
[0029] 表2 :4種維生素 E的加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)
[0030]
[0031] 表3 :4種維生素 E的重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)
[0032]
[0033] 本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：
[0034] 1、本發(fā)明建立了一種利用超高效合相色譜串接二極管陣列檢測器同時(shí)快速檢測 白酒中4種維生素 E的方法，能夠準(zhǔn)確地對(duì)白酒中的維生素 E進(jìn)行定性、定量，為白酒中維 生素 E的準(zhǔn)確判定、快速檢測提供科學(xué)依據(jù)。
[0035] 2、本發(fā)明超高效合相色譜串接二極管陣列檢測器操作簡單快捷、準(zhǔn)確可靠、重復(fù) 性好。
[0036] 3、本發(fā)明C18色譜柱（3. OX 100mm，1. 7 μπι)與0)2和甲醇流動(dòng)相的選擇對(duì)白酒中4 種維生素 E達(dá)到了優(yōu)異的分離效果。
[0037] 4、本發(fā)明的前處理操作步驟少，從而降低了實(shí)驗(yàn)誤差并提高了數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
[0038] 5、本發(fā)明的檢測方法是一項(xiàng)環(huán)保的"綠色"技術(shù)。分析中采用的主要流動(dòng)相二氧 化碳來自于其它工業(yè)釋放的回收二氧化碳，實(shí)驗(yàn)中的使用二氧化碳不會(huì)再產(chǎn)生新的溫室氣 體。使用此方法時(shí)，每次進(jìn)樣所消耗的改性劑（甲醇）僅為〇.9mL，與同類檢測方法相比，降 低了 90 %的有機(jī)溶劑使用量。
[0039] 6、本發(fā)明通過減少實(shí)驗(yàn)室消耗品的使用