一種同時(shí)分析保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥非法添加品的測(cè)定，具體地說，是涉及一種同時(shí)分析保健食 品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法，屬于醫(yī)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前我國(guó)已批準(zhǔn)的保健食品的保健功能有減肥、緩解體力疲勞、輔助降血脂、輔助 降血壓、輔助降血糖、輔助改善記憶力等27種，近年來，隨著社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)壓力的不斷增大和老 年化社會(huì)的擴(kuò)大，輔助改善記憶力類保健品正步入人們的學(xué)習(xí)、工作和生活中，常見功能有 改善記憶力、補(bǔ)充大腦營(yíng)養(yǎng)等。"輔助改善記憶"的保健功能主要通過補(bǔ)充大腦正常運(yùn)行所 必須的物質(zhì)、增加大腦細(xì)胞對(duì)氧氣的利用、提供能夠促進(jìn)腦部新陳代謝排出的物質(zhì)等功效。 然而不法商家為了使保健品起效快，以達(dá)到增加銷售量目的，會(huì)在保健品中非法添加化學(xué) 藥物，但化學(xué)藥物的副作用往往會(huì)嚴(yán)重影響人們的身體健康。
[0003] 目前用于輔助改善記憶力類保健食品非法添加的篩查方法較少，同時(shí)檢測(cè)多種非 法添加藥物的方法更是少之又少。因此，針對(duì)此類保健食品中潛在的、可能添加化學(xué)藥物建 立一種有效的、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，預(yù)防輔助改善記憶類保健食品進(jìn)入市場(chǎng)后導(dǎo)致的不良事 件發(fā)生，確保其安全性。本研宄依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)通過對(duì)17種促智類化學(xué)藥品（多奈哌齊、石 杉?jí)A甲、依達(dá)拉奉、倍他司汀、煙酸占替諾、吡拉西坦、加蘭他敏、咖啡因、茴拉西坦、氟馬西 尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、雙氯芬酸鈉）建立高效液相 色譜分析方法，應(yīng)用于改善記憶力類保健食品中非法添加化學(xué)藥物的篩查。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種同時(shí)分析保健食品中非法添加的多種化 學(xué)藥物的方法，該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速，能實(shí)現(xiàn)3種劑型中17種非法添加化學(xué)物的同 時(shí)分析，可用于輔助改善記憶類保健食品中非法添加化學(xué)藥品的定性篩查和定量檢測(cè)。
[0005] 本發(fā)明提供的的技術(shù)方案是這樣的：
[0006] 該同時(shí)分析保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法，依次包括下述步驟：
[0007] 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0008] 分別精密稱取17種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，加60%四氫呋喃溶液使成濃度為0. 5mg/mL，檢 測(cè)17種化學(xué)藥物單標(biāo)色譜和混標(biāo)色譜圖；
[0009] 3)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
[0010] 取標(biāo)準(zhǔn)溶液適量加60 %四氫呋喃溶液，分別配制成50 μ g/mL、100 μ g/mL、 120 μ g/mL、200 μ g/mL、300 μ g/mL，作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶；
[0011] 3)樣品前處理；
[0012] 4)凈化
[0013] 精密量取上述濾液2mL以約lmL/min流速通過C18-SPE柱，用3mL 50%四氫呋 喃-水洗脫，合并流出液與洗脫液，用〇. 20 μ m有機(jī)濾膜過濾即得待測(cè)樣品；
[0014] 其中，
[0015] 所述色譜條件為：色譜柱：C18-SPE ;流動(dòng)相：A :水；B :100mmol/L枸櫞酸-磷酸 氫二鈉 ，pH 5. 8 ;C:甲醇；梯度洗脫程序：3~8min，15%~25% A、10% B、5%~45% C ; 10 ~12min，45% A、10% B、45% C ;10 ~15min，45%~31% A、10%~14% B、45% C ;15 ~ 15. lmin，31% ~0% A、14% ~50% B、50% C ;15· 1 ~18min，0% A、50% B、50% C ;18 ~ 18. lmin，0%~85% A、50%~10% B、50%~5% C ;17· 1 ~20min，85% A、10% B、5% C ; 在85% A、10% B、5% C下平衡3min。流速：0. 8mL/min ;柱溫：40°C ;進(jìn)樣量：3 μ I ;檢測(cè)波 長(zhǎng)：220nm為主要檢測(cè)波長(zhǎng)；254nm、280nm輔助定性。
[0016] 進(jìn)一步，上述的同時(shí)分析保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法，所述樣品 為液體或者固體或者膠囊；液體樣品處理的方法為取相當(dāng)于一次口服劑量，置于50mL容量 瓶中，加20mL 60%四氫呋喃溶液，超聲處理30分鐘，用50%四氫呋喃-水溶液定容至刻 度，搖勻，過濾，濾液待用；固體樣品處理的方法為稱取相當(dāng)于一次口服劑量，置于IOOmL錐 形瓶中，精密加入50mL 60 %四氫呋喃溶液，稱其重量，超聲提取30分鐘，冷卻，用50 %四氫 呋喃-水溶液補(bǔ)足重量，過濾，濾液待用；軟膠囊樣品處理的方法為稱取相當(dāng)于一次口服劑 量，置于IOOmL錐形瓶中，精密加入50mL 60%四氫呋喃溶液，稱其重量，超聲提取30分鐘， 冷卻，用50%四氫呋喃-水溶液補(bǔ)足重量，于2~4°C冰箱放至1~2小時(shí)，待略有沉淀產(chǎn) 生，將溶液轉(zhuǎn)移離心管，于4000r/min離心5min,上清液過濾，濾液待用。
[0017] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案建立了使用同一種色譜條件同時(shí)分析輔 助改善記憶類保健食品中可能添加的17種化學(xué)藥物含量的高效液相方法，在20min內(nèi)完成 了對(duì)各化合物的分析測(cè)定，在保證分離度的情況下，實(shí)現(xiàn)了快速有效的高通量分析，可為監(jiān) 測(cè)輔助改善記憶類保健食品非法添加藥物提供強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面通過實(shí)施例的方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任 何人在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改仍在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)。
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 1材料與方法
[0021] 1.1 材料
[0022] I. I. 1樣品來源
[0023] 輔助改善記憶力類保健食品包括4批液體制劑（口服液），6批軟膠囊制劑，2批硬 膠囊制劑共3種基質(zhì)，12批樣品，來源于市場(chǎng)銷售樣品。
[0024] I. L 2主要儀器與試劑
[0025] Agilent 1260高效液相色譜儀（二極管陣列檢測(cè)器，美國(guó)Agilent)，XA20OTU電 子分析天平（瑞士梅特勒公司），Classic UVF超純水器（英國(guó)ELGA公司），P300H超聲 波清洗器（德國(guó)Elma公司），Sigma 3K15高速離心機(jī)（德國(guó)賽多利斯公司），C18-SPE柱 (60mg/3mL,天津博納艾杰爾科技有限公司）。
[0026] 多奈哌齊、石杉?jí)A甲、依達(dá)拉奉、倍他司汀、煙酸占替諾、吡拉西坦、加蘭他敏、咖啡 因、茴拉西坦、氟馬西尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、雙氯芬 酸鈉對(duì)照品均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研宄院，純度均多98. 5% ;四氫呋喃和甲醇（液質(zhì)級(jí)， B&J)，其它試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)ELGA PURELAB Classic UVF凈化系過濾的去離 子水。
[0027] L 2 方法
[0028] 1. 2. 1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0029] I. 2. I. 1標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別精密稱取17種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，加60%四氫呋喃溶液使成 濃度為〇. 5mg/mL。其中：1吡拉西坦；2萘普生；3咖啡因；4依達(dá)拉奉；5雙氯酚酸鈉；6茴 拉西坦；7佛馬西尼；8煙酸占替諾；9雌三醇；10石杉?jí)A甲；11尼莫地平；12加蘭他敏；13 倍他司?。?4己烯雌酚；15阿米三嗪；16 ;多奈哌齊；17,佛桂利嗪。
[0030] 1. 2. 1. 2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線：取標(biāo)準(zhǔn)溶液適量加60%四氫呋喃溶液，分別配制成 50 μ g/mL、100 μ g/mL、120 μ g/mL、200 μ g/mL、300 μ g/mL，作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶液。
[0031] L 2. 2樣品前處理
[0032] 1.2.2. 1液體制劑：取相當(dāng)于一次口服劑量（如說明書無一次口服劑量，則取日服 劑量），置于50mL容量瓶中，加20mL 60%四氫呋喃溶液，超聲處理30分鐘，用50%四氫呋 喃-水溶液定容至刻度，搖勻，過濾，濾液待用。
[0033] 1. 2. 2. 2固體制劑：稱取相當(dāng)于一次口服劑量（如說明書無一次口服劑量，則取日 服劑量），置于IOOmL錐形瓶中，精密加入50mL 60%四氫呋喃溶液，稱其重量，超聲提取30 分鐘，冷卻，用50 %四氫呋喃-水溶液補(bǔ)足重量，過濾，濾液待用。
[0034] 1. 2. 2. 3軟膠囊制劑：稱取相當(dāng)于一次口服劑量（如說明書無一次口服劑量，則取 日服劑量），置于IOOmL錐形瓶中，精密加入50mL 60%四氫呋喃溶液，稱其重量，超聲提取 30分鐘，冷卻，用50%四氫呋喃-水溶液補(bǔ)足重量，于2~4°C冰箱放至1~2小時(shí)，待略有 沉淀產(chǎn)生，將溶液轉(zhuǎn)移離心管，于4000r/min離心5min，上清液過濾，濾液待用。
[0035] 1. 2. 2. 4凈化：精密量取上述濾液2mL以約lmL/min流速通過C18-SPE柱（使用 前分別以3mL四氫呋喃，水活化），用3mL 50%四氫呋喃-水洗脫，合并流出液與洗脫液，用 0. 20 μ m有機(jī)濾膜過濾即得待測(cè)樣品。