一種測定l900洗滌液殘留量的檢測方法
【專利說明】
[0001]
技術領域
[0002] 本發(fā)明涉及化學成分檢測技術領域，特別是用于制藥、醫(yī)學研宄、學校、生物技術 和其他機構的塑料實驗器具和玻璃器具清洗中測定L900洗滌液殘留量的檢測方法。
[0003]
【背景技術】
[0004] L900液體洗滌劑是Nalgene生產(chǎn)的，專門用于制藥、醫(yī)學研宄、學校、生物技術以 及其它機構的塑料器具清潔的液體洗滌液。該洗滌液適用于所有塑料制品，尤其是聚碳酸 酯制品，不會導致出現(xiàn)裂紋、應力裂紋或污點。Nalgene公司是目前全美國最大的實驗室及 醫(yī)藥容器生產(chǎn)供應商之一，該公司生產(chǎn)的醫(yī)用產(chǎn)品因牢固，衛(wèi)生，易用性好而深受美國、中 國等廣大醫(yī)藥企業(yè)的歡迎。鑒于塑料器具在醫(yī)藥企業(yè)中的廣泛應用，其清洗的質量控制也 成為了醫(yī)藥企業(yè)所關注的對象。L900液體洗滌液對塑料器具有極好的洗滌效果，但是由于 該洗滌液在洗滌過程中可能作為外源物質殘留在塑料器具中，對藥品質量及安全性可能產(chǎn) 生一定的影響。因此，有必要對L900洗滌液在塑料器具中的殘留量進行檢測，從而降低藥 品生產(chǎn)中外源性物質污染的風險，提高藥品質量。
[0005]L900液體洗滌液主要由辛烷基硫酸鈉、辛烷基磺酸鈉、檸檬酸鈉、氯化鈉，其中辛 烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉有一定的毒副作用。因此，L900液體洗滌液殘留量的檢測主要 針對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉殘留量的檢測。辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉作為陰離 子表面活性劑，常用亞甲藍分光光度法（GB7494-87)進行測定，但是現(xiàn)有方法測定靈敏度 較低，且容易受到其他化學物質的干擾，使其無法滿足藥品質量控制的要求。因此需建立一 種檢測方法，有利于快速簡便地開展器具清洗驗證，以及日常清洗效果的監(jiān)控。
[0006]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是在亞甲藍分光光度法的基礎上結合陰離子交換柱和反相高效液 相色譜法，提供一種操作簡單、靈敏度高、準確度和特異性好的L900洗滌液殘留量的檢測 方法，并很好地滿足實際檢測中的需要。
[0008] 本發(fā)明建立在亞甲藍分光光度法的基礎上結合陰離子交換柱和反相高效液相色 譜來定量分析塑料、玻璃器具中L900洗滌液殘留量，通過簡單高效的步驟，實現(xiàn)塑料、玻璃 器具清洗液中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的富集濃縮，提高檢測的靈敏度，并采用反相 高效液相色譜有效分離出與亞甲藍結合的辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉，以去除其他物質 對檢測的干擾，有效地確保方法的特異性。本方法對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的檢出 限為2ng/mL，有效地確保檢測數(shù)據(jù)的準確度，有利于在極低濃度下L900洗滌液的樣品檢 測。
[0009] 本發(fā)明一種測定L900洗滌液殘留量的檢測方法，通過下列技術方案完成， 具體步驟如下： 1、安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱富集樣品 樣品預處理：采集樣品1000毫升，加入15-20毫升氨水混勻；用蠕動泵將預處理的樣 品通過活化的安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱；用2-4毫升水清洗交換柱，再用2-4毫升乙 醇清洗交換柱；用〇. 5毫升含有5%甲酸的乙醇溶液洗脫交換柱，得到富集的陰離子樣品，用 氫氧化鈉調節(jié)酸堿度到7. 5-8. 0。
[0010] 2、亞甲藍染色樣品并萃取 取5毫升亞甲藍溶液，加入富集的陰離子樣品中，充分混勻后，先用1毫升氯仿萃取，用 離心機離心分層，吸走氯仿層，再次加入1毫升氯仿萃取，用離心機離心分層，將兩次萃取 所得氯仿層液體合并即為待測樣品。
[0011] 3、反相高效液相色譜法檢測 色譜柱為ZoRBAXSB-C18, 5微米，4. 6X150毫米；流動相為含0. 1%三氟乙酸的45%甲 醇水溶液；洗脫程序為從〇到10分鐘；流速〇. 8毫升/分鐘；柱溫35°C，檢測波長為294納 米；進樣量為20微升。
[0012] 4、按外標法以峰面積法計算L900洗滌液殘留量的濃度。
[0013] 本發(fā)明的檢測方法，通過辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉來確定塑料、玻璃器具中 L900洗滌液的殘留量。
[0014] 本發(fā)明的檢測方法，用亞甲藍溶液配方為一水磷酸二氫鈉50克、濃硫酸6. 8毫升、 亞甲藍100-200毫克，加水定容至1000毫升。
[0015] 本發(fā)明的檢測方法，通過離心機離心分層條件為4000-5000轉/分鐘來實現(xiàn)氯仿 萃取分層。
[0016] 步驟1中，所述安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱為市售。
[0017] 步驟2中，所述離心機離心分層條件為4000-5000轉/分鐘。
[0018] 本發(fā)明檢測方法操作簡單、靈敏度高、準確度和特異性好，并能很好地滿足實際檢 測中的需要。本發(fā)明建立在亞甲藍分光光度法的基礎上結合陰離子交換柱和反相高效液相 色譜來定量分析塑料制藥器具中L900洗滌液殘留量，通過簡單高效的步驟，實現(xiàn)塑料制品 清洗液中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的富集濃縮，提高了檢測的靈敏度，并采用反相高 效液相色譜有效分離出與亞甲藍結合的辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉，以去除其他物質對 檢測的干擾，有效地確保方法的特異性。最終對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的檢出限為 2ng/mL，有效地確保檢測數(shù)據(jù)的準確度，有利于L900洗滌液在極低濃度下的樣品檢測。
[0019]
【附圖說明】
[0020] 圖1為系列濃度標準溶液回歸曲線。
[0021] 圖2為辛烷基硫酸鈉標準品液相色譜圖。
[0022] 圖3為辛烷基磺酸鈉標準品液相色譜圖。
[0023] 圖4為L900洗滌液液相色譜圖。
[0024]
【具體實施方式】
[0025] 以下實施例用來解釋說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明進行限制，在本發(fā)明的 精神和權利要求的保護范圍內(nèi)，對本發(fā)明作出的任何修改和改變，都落入本發(fā)明的保 護范圍。
[0026] 實施例1塑料制藥器具中的L900洗滌劑殘留量檢測 1安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱富集樣品 (1) 用超純水配制L900洗滌劑的系列濃度標準溶液，以辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉 含量為單位，配制濃度如下〇、2ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml，每個稀釋濃 度配制1000毫升； (2) 將分別在每個稀釋濃度標準品和待測樣品中加入15毫升氨水混勻進行預處理； (3) 取安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱先用2毫升乙醇洗脫，再用2毫升超純水洗脫； 然后用蠕動泵將預處理的樣品通過活化的安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱，每個樣品單獨 用一個PlexaPAX陰離子交換柱； (4) 用3毫升水清洗交換柱，再用3毫升乙醇清洗交換柱； (5) 用0.5毫升含有5%甲酸的乙醇溶液洗脫交換柱，得到富集的陰離子樣品，用氫氧化 鈉調節(jié)酸堿度到7. 8。
[0027] 2亞甲藍染色樣品并萃取 取5毫升亞甲藍溶液，加入富集的陰離子樣品中，充分混勻后，先用1毫升氯仿萃取，用 離心機4500轉/分鐘離心分層，吸走氯仿層，再次加入1毫升氯仿萃，用離心機4500轉/ 分鐘離心分層，將兩次萃取所得氯仿層液體合并即為待測樣品。
[0028] 3反相高效液相色譜法檢測 (1)打開高效液相色譜儀，設置色譜條件：色譜柱為ZoRBAXSB-C18, 5um，4. 6X150mm;流動相為含〇. 1%三氟乙酸的45%甲醇水溶液；洗脫程序為從0到10min;流速0. 8ml/min; 柱溫35°C，檢測波長為294nm;進樣量為20ul。
[0029] (2)用流動相平衡色譜柱，待基線平穩(wěn)后，進樣20ul開始檢測。
[0030] (3)待檢測結束后，對峰面積進行積分。見表1。
[0031] 4按外標法以峰面積法計算L900洗滌液殘留量的濃度 (1)以L900洗滌劑標準品中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉濃度為縱坐標，峰面積為橫 坐標繪制標準曲線，所得線性回歸方程為：y= 〇. 3773x- 0. 1255。見圖1。
[0032] (2)將待測樣品的峰面積代入線性回歸方程，計算得到待測樣品中辛烷基硫酸鈉 和辛烷基磺酸鈉的濃度。見表2。
[0033] 表1各標準溶液峰信息
【主權項】
1. 一種測定L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于具有如下步驟： (1)安捷倫Plexa PAX陰離子交換柱富集樣品 樣品預處理：采集樣品1000毫升，加入15-20毫升氨水混勻；用蠕動泵將預處理的樣 品通過活化的安捷倫Plexa PAX陰離子交換柱；用2-4毫升水清洗交換柱，再用2-4毫升乙 醇清洗交換柱；用〇. 5毫升含有5%甲酸的乙醇溶液洗脫交換柱，得到富集的陰離子樣品，用 氫氧化鈉調節(jié)酸堿度到7. 5-8. 0 ; (2) 亞甲藍染色樣品并萃取 取5毫升亞甲藍溶液，加入富集的陰離子樣品中，充分混勻后，先用1毫升氯仿萃取，用 離心機離心分層，吸走氯仿層，再次加入1毫升氯仿萃取，用離心機離心分層，將兩次萃取 所得氯仿層液體合并即為待測樣品； (3) 反相高效液相色譜法檢測 色譜柱為ZoRBAX SB-C18, 5微米，4. 6 X 150毫米；流動相為含0. 1%三氟乙酸的45%甲 醇水溶液；洗脫程序為從〇到10分鐘；流速〇. 8毫升/分鐘；柱溫35°C，檢測波長為294納 米；進樣量為20微升； (4) 按外標法以峰面積法計算L900洗滌液殘留量的濃度。
2. 根據(jù)權利要求1所述的L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于亞甲藍溶液配方 為一水磷酸二氫鈉50克、濃硫酸6. 8毫升、亞甲藍100-200毫克，加水定容至1000毫升。
3. 根據(jù)權利要求1所述的L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于通過離心機離心 分層條件為4000-5000轉/分鐘來實現(xiàn)氯仿萃取分層。
4. 根據(jù)權利要求1所述的L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于通過辛烷基硫酸 鈉和辛烷基磺酸鈉來確定塑料、玻璃器具中L900洗滌液的殘留量。
【專利摘要】本發(fā)明涉及化學成分檢測技術領域，特別是用于制藥、醫(yī)學研究、學術、生物技術和其他機構的塑料實驗器具和玻璃器具清洗中測定L900洗滌液殘留量的檢測方法。本發(fā)明建立在亞甲藍分光光度法的基礎上結合陰離子交換柱和反相高效液相色譜來定量分析塑料、玻璃器具中L900洗滌液殘留量，通過簡單高效的步驟，實現(xiàn)塑料、玻璃器具清洗液中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的富集濃縮，提高了檢測的靈敏度，并采用反相高效液相色譜有效分離出與亞甲藍結合的辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉，以去除其他物質對檢測的干擾，有效地確保方法的特異性。本方法對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的檢出限為2ng/mL，有效地確保檢測數(shù)據(jù)的準確度，有利于在極低濃度下L900洗滌液的樣品檢測。
【IPC分類】G01N30-89
【公開號】CN104849396
【申請?zhí)枴緾N201510280551
【發(fā)明人】朱赟, 高孟, 毛岱敏, 方任華, 田寅, 忻亞娟, 莊昉成, 錢汶, 毛子安, 毛江森
【申請人】浙江普康生物技術股份有限公司
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2015年5月28日