一種測定鹽酸樂卡地平片溶出度的hplc方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種化學(xué)藥物片劑溶出度的測定方法，具體涉及一種鹽酸樂卡地平片 溶出度的HPLC測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 鹽酸樂卡地平（Lercanidipine hydrochloride)是意大利Recordati公司開發(fā)的 第三代二氫吡啶類鈣拮抗劑，1997年首次在荷蘭上市。鹽酸樂卡地平結(jié)構(gòu)中加入了二苯丙 氨烷基因此具有很強(qiáng)的親脂性，主要作用是阻滯血管平滑肌細(xì)胞膜上的L型鈣離子通道， 使流入細(xì)胞的鈣離子減少，從而舒張血管平滑肌、擴(kuò)張血管，降低血壓，且具有藥效持久、血 管選擇性高、不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，臨床主要用于治療中、輕度高血壓。鹽酸樂卡地平在水中 幾乎不溶，溶出度檢查是鹽酸樂卡地平片質(zhì)量控制的必要組成部分。國家食品藥品監(jiān)督管 理局標(biāo)準(zhǔn)YBH03972010采用小杯法，紫外分光光度法測定本品溶出度，紫外法以測定整個(gè) 溶出液的紫外吸收值為鹽酸樂卡地平的吸收值來計(jì)算鹽酸樂卡地平的含量，整個(gè)溶液的吸 收情況不能排除輔料干擾，同時(shí)溶出介質(zhì)亦對(duì)吸收測定有影響，因此紫外分光光度法缺乏 專屬性?，F(xiàn)有有關(guān)鹽酸樂卡地平片中鹽酸樂卡地平含量測定的文獻(xiàn)報(bào)道很少，均采用HPLC 法，測定方法中其流動(dòng)相都加入了一定濃度的三乙胺溶液作為掃尾劑，且鹽酸樂卡地平的 出峰時(shí)間在8-14分鐘之間?？赡苡捎趪覙?biāo)準(zhǔn)中采用紫外分光光度法測定鹽酸樂卡地平 片溶出度存在輔料干擾且專屬性不強(qiáng)，目前還未見對(duì)鹽酸樂卡地平片溶出度測定的文獻(xiàn)報(bào) 道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了克服以上問題，本發(fā)明的目的是建立一種高效快速、專屬性強(qiáng)的測定鹽酸樂 卡地平片溶出度的方法。該方法克服了現(xiàn)有的紫外法測定存在片劑輔料和溶出介質(zhì)干擾的 缺陷，能更真實(shí)、準(zhǔn)確、科學(xué)的測定鹽酸樂卡地平的溶出度。該方法相對(duì)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道的其 他HPLC方法更為快速和簡便，流動(dòng)相中不使用其他方法中加入的三乙胺作為掃尾劑，從而 可以保護(hù)色譜儀和色譜柱；流動(dòng)相采用恒度洗脫，不使用梯度洗脫，操作簡便；該方法中鹽 酸樂卡地平的出峰時(shí)間為6分鐘，鹽酸樂卡地平峰形好，柱效高，分析時(shí)間都較其他分析方 法短，且在室溫范圍內(nèi)即可分析。同時(shí)該方法相比國家標(biāo)準(zhǔn)紫外分光光度法測定可排除輔 料和溶出介質(zhì)的干擾，能更準(zhǔn)確、客觀的測定鹽酸樂卡地平片的溶出度，各種試驗(yàn)表明該方 法專屬性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好、操作簡便，更適于該制劑溶出度的測定，能更科學(xué)的控制 鹽酸樂卡地平片的質(zhì)量。
[0004] 本發(fā)明所述的一種測定鹽酸樂卡地平片溶出度的HPLC方法，按下列步驟進(jìn)行：
[0005] (1)鹽酸樂卡地平片溶出試驗(yàn)及樣品溶液制備：取鹽酸樂卡地平片6片，照中國藥 典2010年版二部附錄XC第二法，以含0. 3 %吐溫80的0.1mol · L-1鹽酸溶液500mL為溶 出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50r · mirT1，依法操作，經(jīng)45min，取溶液用0. 45 μ m微孔濾膜濾過作為樣品 溶液；
[0006] (2)鹽酸樂卡地平對(duì)照品溶液制備：取鹽酸樂卡地平對(duì)照品適量，精密稱定，加甲 醇5mL溶解，加溶出介質(zhì)定量稀釋制成每ImL中約含20 μ g的溶液作為對(duì)照品溶液；
[0007] (3)高效液相色譜測定：取對(duì)照品溶液和樣品溶液在以下色譜條件下進(jìn)行測定分 析，色譜柱為Waters SunFire C18;流動(dòng)相為0. 15mol ·廠1高氯酸鈉溶液（用70%高氯酸調(diào) 節(jié) pH為 3. 0 ~4. 0):乙腈（40 : 60);柱溫 25 ~30°C;檢測波長 240nm;流速 l.Oml.min-1; 對(duì)照品溶液和樣品溶液各進(jìn)樣40 μ L，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，色譜圖記錄與處理由工作站完 成。
[0008] 在該方法條件下，鹽酸樂卡地平出峰時(shí)間為6分鐘左右，鹽酸樂卡地平線性試驗(yàn)， 精密度試驗(yàn)，穩(wěn)定性試驗(yàn)等均符合分析要求，理論塔板數(shù)按鹽酸樂卡地平峰計(jì)算不低于 6000。該方法專屬性好，穩(wěn)定，相比國家標(biāo)準(zhǔn)中的紫外分光光度法測定鹽酸樂卡地平片溶出 度可排除片劑輔料和溶出介質(zhì)的干擾，相對(duì)文獻(xiàn)報(bào)道的其他測定鹽酸樂卡地平的方法更為 簡便和快速，該方法能真實(shí)、準(zhǔn)確、科學(xué)的測定鹽酸樂卡地平片的溶出度，更有效的對(duì)藥品 質(zhì)量進(jìn)行控制。
【附圖說明】
[0009] 圖1鹽酸樂卡地平片空白對(duì)照色譜圖
[0010] 圖2鹽酸樂卡地平對(duì)照品溶液色譜圖（1.鹽酸樂卡地平）
[0011] 圖3鹽酸樂卡地平片溶出度樣品溶液（1.鹽酸樂卡地平）
[0012] 圖4鹽酸樂卡地平片的溶出曲線圖
【具體實(shí)施方式】
[0013] 通過以下實(shí)施例，進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
[0014] 實(shí)施例1
[0015] 1儀器與試藥
[0016] Waters 2695型高效液相色譜儀；瑞士 S0TAXAT7smart溶出儀（瑞士 SOTAX公 司），F(xiàn)0DT-601型光纖藥物溶出度實(shí)時(shí)測定儀（新疆富科思分析儀器有限公司）。鹽酸樂 卡地平片（規(guī)格IOmg/片，批號(hào)110901，111001，111002)及鹽酸樂卡地平工作對(duì)照品（含 量99. 7% )均由重慶圣華曦藥業(yè)股份有限公司提供。乙腈為色譜純（山東禹王實(shí)業(yè)總公司 化工廠），其他試劑均為分析純。
[0017] 2方法與結(jié)果
[0018] 2.1色譜條件
[0019] 色譜柱為 Waters SunFire C18 (4. 6mmX 150mm，5 μ m);流動(dòng)相為 0· 15mol .I71 高氯 酸鈉溶液（用70%高氯酸調(diào)節(jié)？!1值至3.0)-乙腈（40:60);柱溫25°〇;檢測波長24011111; 流速1.0 ml · mirT1;進(jìn)樣量40 μ L。理論塔板數(shù)按鹽酸樂卡地平峰計(jì)算不低于6000。
[0020] 2. 2干擾性試驗(yàn)
[0021] 取鹽酸樂卡地平片樣品和不含鹽酸樂卡地平的空白片各1片，分別置溶出杯內(nèi)， 按照本文的溶出度測定法操作，另取鹽酸樂卡地平對(duì)照品加流動(dòng)相溶解并制成40 μ g · ml/1 的對(duì)照品溶液。按"2. 1"項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)樣40 μ L，結(jié)果表明鹽酸樂卡地平出峰處無任 何色譜峰出現(xiàn)，表明空白輔料與溶出介質(zhì)對(duì)測定無干擾，結(jié)果見圖1。
[0022] 2· 3線性試驗(yàn)
[0023] 精密稱取鹽酸樂卡地平對(duì)照品0. 01018g，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并用溶出介 質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液，精密量取0. 5,1，2,4,6,8,10mL，置50mL量瓶中， 加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，既得濃度為2. 036~40. 72 μ g 的系列對(duì)照品溶液。按 "2. 1"項(xiàng)下色譜條件測定，以峰面積A對(duì)C( μ g · ml/1)進(jìn)行線性回歸。以信噪比S/N彡10 計(jì)，定量限為〇. 13μ μ 回歸方程為：Y = 39449. 6C-592. 8(r = 0. 9999)，結(jié)果表明， 鹽酸樂卡地平濃度在2. 036~40. 72 μ g · ml/1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。
[0024] 2. 4精密度試驗(yàn)
[0025] 取濃度為20. 36 μ g · mL-1的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，RSD為0. 03%，符合精密 度試驗(yàn)要求。
[0026] 2. 5穩(wěn)定性試驗(yàn)
[0027] 取"2.2項(xiàng)"下的供試品溶液，室溫下放置0，1，2,4,6,81!，分別進(jìn)樣測定峰面積， RSD = 0. 39%，表明供試品溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。
[0028] 2. 6回收率試驗(yàn)
[0029] 取鹽酸樂卡地平對(duì)照品約8,10,12mg，精密稱定，置50mL量瓶中，按處方量加入空 白輔料，用溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL置IOOmL量瓶中， 加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，按"2. 1"項(xiàng)下色譜條件測定，按外標(biāo)法計(jì)算回收率。結(jié)果平 均回收率為 100. 18%，RSD = 0· 98% (η = 9)。
[0030] 3溶出曲線測定
[0031] 為提高工作效率，采用F0DT-601型光纖藥物溶出度實(shí)時(shí)測定儀測定了鹽酸樂卡 地平片的溶出曲線。
[0032] 3. 1標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立精密稱取鹽酸樂卡地平對(duì)照品0. 02009g，置25mL量瓶中，加 溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1，2. 5,4, 5mL，置200mL量瓶中，加溶出介質(zhì)稀 釋至刻度，搖勻，得到濃度（以溶出百分率表示）為20%，50%，80%，100%的系列對(duì)照品 溶液。以溶出介質(zhì)為空白溶劑，采用5_規(guī)格的光纖探頭。檢測波長選擇357nm，參比波長 550nm，分別測定吸光度，以溶出率百分比（C)與吸光度值（A)進(jìn)行線性回歸（見表1)。
[0033] 表1 6個(gè)通道的線性方程及相關(guān)系數(shù)
[0034]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測定鹽酸樂卡地平片溶出度的HPLC方法，其特征在于包括下列步驟： (1) 鹽酸樂卡地平片溶出度試驗(yàn)及樣品溶液制備：取鹽酸樂卡地平片6片，照中國藥典 2010年版二部附錄XC溶出度測定法，以含0. 3%吐溫80的0.1mol噸4鹽酸溶液500mL為 溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50r ? mirT1，依法操作，經(jīng)45min，取溶液用0. 45 y m微孔濾膜濾過作為樣 品溶液； (2) 鹽酸樂卡地平對(duì)照品溶液制備：取鹽酸樂卡地平對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇 5mL溶解，加溶出介質(zhì)定量稀釋制成每ImL中約含20 y g的溶液作為對(duì)照品溶液； (3) 高效液相色譜測定：取對(duì)照品溶液和樣品溶液在以下色譜條件下進(jìn)行測定分析， 色譜柱為Waters SunFire C18;流動(dòng)相由70 %高氯酸調(diào)節(jié)pH值為3. 0~4. 0的0. 15mol ?廠1 高氯酸鈉溶液和乙腈的比例為40 : 60組成；柱溫25~30°C ;檢測波長為240mm ;流速為 LOml ^irT1;對(duì)照品溶液和樣品溶液各進(jìn)樣40 yL，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，色譜圖記錄與處 理由工作站完成，理論塔板數(shù)按鹽酸樂卡地平峰計(jì)算不低于6000。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種測定鹽酸樂卡地平片溶出度的HPLC方法，該方法包括以下步驟：(1)鹽酸樂卡地平片溶出度試驗(yàn)及樣品溶液制備(2)鹽酸樂卡地平對(duì)照品溶液制備(3)高效液相色譜測定：取對(duì)照品溶液和樣品溶液在以下色譜條件下進(jìn)行測定分析，色譜柱為Waters SunFire C18(4.6mm×150mm，5μm)；流動(dòng)相為0.15mol·L-1高氯酸鈉溶液(用70％高氯酸調(diào)節(jié)pH為3.0～4.0)-乙腈(40∶60)；柱溫25～30℃；檢測波長240nm；流速1.0ml·min-1；進(jìn)樣量40μL。方法學(xué)試驗(yàn)表明該方法專屬性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好、操作簡便，更適于鹽酸樂卡地平片溶出度的測定，能更科學(xué)、有效的控制鹽酸樂卡地平片的質(zhì)量。
【IPC分類】G01N30-02, G01N30-06
【公開號(hào)】CN104807898
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510155155
【發(fā)明人】何丹, 楊林, 邱紅梅, 張景勍
【申請(qǐng)人】重慶醫(yī)科大學(xué)
【公開日】2015年7月29日
【申請(qǐng)日】2015年4月3日