本發(fā)明屬于藥物分析，為提高頭孢洛林酯合成的效率和產(chǎn)品質(zhì)量，建立一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法。

背景技術(shù)：

1、頭孢洛林酯為第五代頭孢菌素類藥物，對革蘭氏陽性菌包括耐甲氧西林葡萄球菌感染、多重耐藥肺炎鏈球菌感染及常見的革蘭氏陰性菌的感染等具有良好的抗菌活性。目前，注射用頭孢洛林酯于2010年10月29號經(jīng)美國fda批準(zhǔn)通過，由阿斯利康進(jìn)行生產(chǎn)，在國內(nèi)均無申報及已上市產(chǎn)品。在細(xì)菌耐藥問題是世界難題的今天，頭孢洛林酯作為抗多藥耐藥菌的新型藥物，具有廣泛的應(yīng)用前景。

2、頭孢洛林酯制備過程的簡單敘述(僅涉及本發(fā)明中要檢測的六種中間體)：

3、第一步反應(yīng)，從3-羥基頭孢用制備cfms

4、

5、第二步反應(yīng)，制備ct-3

6、

7、第三步反應(yīng)，制備ct-3m

8、

9、第四步反應(yīng)，制備7-aptm

10、

11、第五步反應(yīng)，制備7-atm

12、

13、從上面上述發(fā)現(xiàn)：頭孢洛林酯合成步驟多，工藝比較復(fù)雜。我們要求對每一步反應(yīng)產(chǎn)生的中間體進(jìn)行監(jiān)控。通過觀察其已反應(yīng)(或剩余)及新產(chǎn)生物質(zhì)的相對含量，以確定該步反應(yīng)是不是充分，能否進(jìn)行下一步投料。每部反應(yīng)都會殘留少量中間體或出現(xiàn)一些副產(chǎn)物，全應(yīng)作為雜質(zhì)，在該工藝下給予控制，從而保證最終產(chǎn)品的質(zhì)量。

14、反應(yīng)中涉及到的3-羥基頭孢、cfms、ct-3、ct-3m、7-aptm和7-atm均定為中間體和產(chǎn)物中的雜質(zhì)予以控制。

15、在現(xiàn)有的制備過程中，往往考慮只是比較“粗糙”的中間體控制，為貪圖方便，一度試圖采用等度法洗脫，結(jié)果造成監(jiān)控效果很不理想，精確度非常差。而采用不同的分析方法則會大大降低生產(chǎn)效率。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在克服上述缺陷，提供一種無需更換不同的分析方法以應(yīng)對不同的樣品，能在同一張圖譜上顯示六種物質(zhì)在反應(yīng)過程中的變化情況，具有簡便、準(zhǔn)確、快速、一目了然的優(yōu)點(diǎn)的，對于保證頭孢洛林酯產(chǎn)品質(zhì)量，提高合成工作效率都也有很大幫助的同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法。

2、本發(fā)明提供的一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法，采用高效液相色譜法，其特征在于：

3、上述高效液相色譜法的流動相a和流動相b為不同組成的醋酸鹽緩沖液-乙腈；

4、上述流動相a為0.04-0.12mol/l醋酸鹽緩沖液-乙腈，

5、其中，醋酸鹽緩沖液與乙腈的體積比為99-85：1-15；

6、上述流動相b為0.04-0.12mol/l醋酸鹽緩沖液-乙腈，

7、其中，醋酸鹽緩沖液與乙腈的體積比為10-25：90-75；

8、洗脫方式：梯度洗脫。

9、進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法，其特征還在于：

10、上述流動相a為0.08mol/l醋酸鹽緩沖液-乙腈,

11、醋酸鹽緩沖液與乙腈的體積比為95:5；

12、上述流動相b為0.08mol/l醋酸鹽緩沖液-乙腈,

13、醋酸鹽緩沖液與乙腈的體積比為18:82。

14、進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法，其特征還在于：

15、上述梯度洗脫程序如下：

16、 時間(min) a(％) b(％) 0 90-100 10-0 5 90-100 10-0 10 38～46 62～54 20 38～46 62～54 25 24～30 76～70 40 24～30 76～70 41 90-100 10-0 50 90-100 10-0

17、進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法，其特征還在于：

18、上述梯度洗脫程序如下：

19、 時間(min) a(％) b(％) 0 100 0 5 100 0 10 42 58 20 42 58 25 27 73 40 27 73 41 100 0 50 100 0

20、進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法，其特征還在于：

21、上述高效液相色譜法的色譜柱選用waters?symmetry?shield?rp185μm4.6*250mm。

22、進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的一種同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法，其特征還在于：

23、上述高效液相色譜法的流速為1.0ml/min，檢測波長230nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μl。

24、此外，本發(fā)明提供的同時檢測頭孢洛林酯制備過程中多種中間體的方法在同時觀察3-羥基頭孢、cfms、ct-3、ct-3m、7-aptm和7-atm在反應(yīng)過程中的含量變化中的應(yīng)用。

25、本發(fā)明的作用和效果：

26、于同一張圖譜上顯示六種物質(zhì)在整個反應(yīng)過程中的變化情況，且具有簡便、準(zhǔn)確、快速特點(diǎn)的分析方法，能提供較為可靠的數(shù)據(jù)，以達(dá)到有效優(yōu)化合成工藝，保證頭孢洛林酯產(chǎn)品質(zhì)量的目的。