技術(shù)特征：

1.一種活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一：使用原子力顯微鏡獲取細胞表面彈性值基本穩(wěn)定的作用力范圍，及其對應(yīng)楊氏模量值；

步驟二：使用原子力顯微鏡獲得活體細胞在設(shè)定成像力下的來回掃描高度圖像；

步驟三：對探針與細胞間相互作用進行受力分析，將兩者間相互作用分解為豎直成像力與水平側(cè)向力；

步驟四：根據(jù)成像力大小、在此力下細胞表面形貌、細胞表面彈性系數(shù)計算獲得細胞在未受作用力時細胞表面形貌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述步驟一為使用原子力顯微鏡獲取細胞頂部處的力曲線,獲得不同作用力下細胞彈性模量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述細胞表面彈性值基本穩(wěn)定的作用力范圍為10-1000pN。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述步驟二為使用原子力顯微鏡接觸模式，調(diào)節(jié)成像力至步驟一所獲作用力范圍，測得活體細胞的高度及摩擦力的來回掃描圖像。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述步驟二為使用原子力顯微鏡接觸模式，調(diào)節(jié)成像力至930pN，對活體細胞進行高度成像，成像速率為2Hz，記錄來回掃描圖像。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述步驟三中細胞實際表面上一點(x₀,y₀)在探針作用下，在第一次掃描時移動至(x₁,y₁)，在第二次掃描時移動至(x₂,y₂)，當δ₁、δ₂分別為細胞表面法向形變時，則上述變量關(guān)系如公式1：

同時δ₁、δ₂又必須滿足赫茲模型，即公式2：

$\left\{\begin{array}{c}{\mathrm{\δ}}_1=\sqrt{\frac{2\left(F\right|\cos \mathrm{\θ}|+f_1|sin\mathrm{\θ}\left|\right)(1-v^2)}{\left|\mathrm{\π}E\tan \left(\mathrm{\α}\right)\right|}}\\ {\mathrm{\δ}}_2=\sqrt{\frac{2\left(F\right|\cos \mathrm{\θ}|-f_2|sin\mathrm{\θ}\left|\right)(1-v^2)}{\left|\mathrm{\π}E\tan \left(\mathrm{\α}\right)\right|}}\end{array}\right.;$

細胞表面所受水平側(cè)向力與該點豎直高度成線性比例，即公式3：

$\left\{\begin{array}{c}{f}_1={\mathrm{py}}_1\\ f_2={\mathrm{py}}_2\end{array}\right.;$

使用迭代法聯(lián)解公式1-3，可得到校正后各接近實際情況的細胞形狀，其中所述θ為細胞剖面的切向角，F(xiàn)為成像力，v為細胞泊松比，E為細胞楊氏模量，α為原子力顯微鏡探針尖的開放角，p為比例常數(shù)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述活體細胞為貼壁培養(yǎng)活體細胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的活體細胞原子力顯微鏡快速精確表征方法，其特征在于，所述活體細胞按照如下方法培養(yǎng)：

將細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液除盡，向細胞培養(yǎng)瓶中加入4ml 0.025％胰酶溶液，晃動培養(yǎng)瓶以確保培養(yǎng)瓶底部所有區(qū)域均被胰酶溶液所覆蓋；

立即從培養(yǎng)瓶中吸出3ml胰酶溶液，將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)箱中1-5分鐘；

在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，當觀察到細胞形態(tài)變圓后，輕敲培養(yǎng)瓶使細胞從瓶壁脫落；

向培養(yǎng)瓶中加入3ml培養(yǎng)液中止胰酶，并將培養(yǎng)瓶中全部溶液轉(zhuǎn)移到15ml無菌離心管中，再向培養(yǎng)瓶中加入3ml培養(yǎng)液，并用吸管吹打底面數(shù)次，然后將溶液移入上述離心管中；

180x g離心7分鐘，棄去上清，并向離心管中加入4ml培養(yǎng)液，吹散沉淀形成新的細胞懸浮液；

根據(jù)實驗時樣品細胞生長密度要求，移出一定量懸浮液至無菌培養(yǎng)皿或放有無菌玻片的培養(yǎng)皿中；

向培養(yǎng)皿中再加入4ml培養(yǎng)液，將培養(yǎng)皿置于37℃，5％CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

培養(yǎng)12至48小時后取出，對活體細胞進行原子力顯微鏡成像。