本發(fā)明公開了一種中藥組合物的指紋圖譜檢測方法，具體公開了一種由丁香、肉桂為原料藥制成的中藥組合物的指紋圖譜檢測方法，屬于藥物分析領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：本發(fā)明涉及由丁香、肉桂兩味藥按照一定比例組合后，提取其揮發(fā)油制備而成的中藥制劑，其主要成分為丁香酚和桂皮醛。該制劑具有溫散寒邪、行氣止痛的作用，適用于腸易激綜合癥出現(xiàn)腹痛，遇寒加重，腹瀉，便秘，脘腹脹痛，噯氣，畏寒，排便急迫或脹墜感，便后痛減，舌質(zhì)淡，舌苔白，脈弦或緊等癥狀由于中藥及其制劑均為多組分復(fù)雜體系，因此評(píng)價(jià)其質(zhì)量應(yīng)采用與之相適應(yīng)的，能提供豐富鑒別信息的檢測方法，但現(xiàn)行的顯微鑒別、理化鑒別和含量測定等方法都不足以解決這一問題。中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示其化學(xué)特征的色譜圖或光譜圖。中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，能較為全面地反映中藥及其制劑中所含化學(xué)成分的種類與數(shù)量，進(jìn)而對(duì)藥品質(zhì)量進(jìn)行整體描述和評(píng)價(jià)。所以，中藥指紋圖譜已經(jīng)成為目前國際上較為先進(jìn)的中藥質(zhì)量控制手段。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種中藥組合物的氣相色譜指紋圖譜檢測方法。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種中藥組合物的氣相色譜指紋圖譜檢測方法，包括以下步驟：氣相色譜條件：選用毛細(xì)柱為色譜柱，氫焰離子化檢測器，載氣為氮?dú)?，分流比?～20：1；柱流量為0.5～1ml/min，檢測器溫度(FID1)250℃-270℃，進(jìn)樣口溫度(SPL1)230℃-250℃，起始柱溫100-140℃，經(jīng)升溫后溫度為200～240℃；制備供試品溶液：取中藥組合物，以有機(jī)溶劑溶解，得供試品溶液；制備對(duì)照品溶液：取桂皮醛對(duì)照品適量，加有機(jī)溶劑制成桂皮醛對(duì)照溶液；進(jìn)樣檢測：分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定。優(yōu)選的，分流比為10:1，柱流量為0.85ml/min，檢測器溫度270℃，進(jìn)樣口溫度250℃，升溫程序?yàn)椋浩鹗贾鶞貫?00-120℃，保持0-15min，以2.5-10℃/min速度升溫至220℃。進(jìn)一步優(yōu)選的，升溫程序?yàn)椋浩鹗贾鶞貫?00℃，升溫程序?yàn)椋合纫?.5℃/min速度升至135℃，再以4℃/min速度升至150℃，最后以10℃/min速度升至220℃；或，起始柱溫為105℃，升溫程序?yàn)椋合纫云鹗贾鶞乇３?5min，再以5℃/min速度升至150℃，最后以10℃/min速度升至220℃；或，起始柱溫為120℃，升溫程序?yàn)椋合纫云鹗贾鶞乇３?5min，再以10℃/min速度升至220℃。最優(yōu)選的，起始柱溫為120℃，升溫程序：先以起始柱溫保持15min，再以10℃/min速度升至220℃。優(yōu)選的，制備供試品溶液步驟中所述有機(jī)溶劑包括正己烷、石油醚、乙醚、乙酸乙酯、無水乙醇、甲醇、丙酮中的任意一種或幾種；進(jìn)一步優(yōu)選為乙酸乙酯；更進(jìn)一步，所述供試品溶液制備方法為取中藥組合物，加入乙酸乙酯制備成16mg/ml的供試品溶液。優(yōu)選的，制備對(duì)照品溶液步驟中所述有機(jī)溶劑包括正己烷、石油醚、乙醚、乙酸乙酯、無水乙醇、甲醇、丙酮中的任意一種或幾種；進(jìn)一步優(yōu)選為乙酸乙酯；更進(jìn)一步，所述對(duì)照品溶液制備方法為取桂皮醛，加入乙酸乙酯制備成3.0mg/ml的桂皮醛對(duì)照品溶液。利用本發(fā)明提供的氣相色譜指紋圖譜檢測方法對(duì)中藥組合物進(jìn)行檢測，其檢測結(jié)果為指紋圖譜有10個(gè)共有特征峰，以桂皮醛的色譜峰為參照(S)，各共有特征峰的相對(duì)保留時(shí)間為：0.5261±0.0263、0.5463±0.0273、0.5840±0.0292、0.6023±0.0301、0.6759±0.0338、0.7023±0.0351、0.7586±0.0379、1.0000(S)、1.0321±0.0516、1.0815±0.0541；在本發(fā)明的一些具體實(shí)施例中，指紋圖譜有10個(gè)共有特征峰，以桂皮醛的色譜峰為參照(S)，各共有特征峰的相對(duì)保留時(shí)間為：0.5256～0.5267、0.5457～0.5471、0.5833～0.5845、0.6018～0.6030、0.675～0.6766、0.7016～0.7034、0.7580～0.7592、1.0000(S)、1.0317～1.0323、1.0810～1.0819；在本發(fā)明的一些具體實(shí)施例中，指紋圖譜10個(gè)共有特征峰的相對(duì)保留時(shí)間為0.5261、0.5463、0.5840、0.6023、0.6759、0.7023、0.7586、1.0000(S)、1.0321、1.0815。優(yōu)選的，所述中藥組合物的原料藥包括：丁香1～10重量份、肉桂按1～10重量份；進(jìn)一步優(yōu)選的，所述中藥組合物為原料藥丁香1～10重量份、肉桂按1～10重量份按常規(guī)提取方法制備的提取物或進(jìn)一步按常規(guī)制劑工藝制備的常規(guī)劑型；所述常規(guī)提取方法包括浸泡提取、超聲提取、滲漉提取、回流提取或水蒸汽蒸餾提?。凰龀Ｒ?guī)劑型包括片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、散劑、口服液、丸劑、貼劑、膏劑、噴霧劑、注射劑等。更進(jìn)一步優(yōu)選的，所述中藥組合物制備方法為：取丁香、肉桂，隔水蒸餾8～12小時(shí)，收集揮發(fā)油，冷藏24小時(shí)，除去水分，即得。經(jīng)方法學(xué)考察，本發(fā)明氣相色譜指紋圖譜檢測方法系統(tǒng)適應(yīng)性良好、專屬性強(qiáng)、精密度高、穩(wěn)定性好、可重復(fù)性強(qiáng)，符合構(gòu)建指紋圖譜的要求，應(yīng)用于中藥組合物或其制劑的質(zhì)量控制，可靠性高，簡捷易行。附圖說明圖11#色譜條件下檢測供試品溶液的色譜圖。圖22#色譜條件下檢測供試品溶液的色譜圖。圖33#色譜條件下檢測供試品溶液的色譜圖。圖44#色譜條件下檢測供試品溶液的色譜圖。圖55#色譜條件下檢測供試品溶液的色譜圖。圖66#色譜條件下檢測供試品溶液的色譜圖。圖76#色譜條件下檢測桂皮醛對(duì)照品溶液的色譜圖。圖86#色譜條件下檢測丁香酚對(duì)照品溶液的色譜圖。圖9實(shí)施例3系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)中檢測對(duì)照品溶液的色譜圖。圖10實(shí)施例3系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)中檢測供試品溶液的色譜圖。圖11實(shí)施例3專屬性試驗(yàn)中檢測對(duì)照品溶液的色譜圖。圖12實(shí)施例3專屬性試驗(yàn)中檢測供試品溶液的色譜圖。圖13實(shí)施例3專屬性試驗(yàn)中檢測空白溶劑對(duì)照溶液的色譜圖。圖1410批中藥組合物軟膠囊劑的氣相色譜圖。圖15實(shí)施例4的對(duì)照色譜圖。圖16實(shí)施例5待測品的色譜圖。具體實(shí)施方式以下通過具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1中藥組合物軟膠囊的制備取丁香375g、肉桂375g，加8倍量水，隔水蒸餾8小時(shí)，收集揮發(fā)油，冷藏24小時(shí)，除去水分，共制36ml揮發(fā)油。將36ml揮發(fā)油與364ml大豆油混勻，備用。取明膠150g、甘油60g、單糖漿10g，加去離子水150g混勻，加熱到60-70℃，保溫0.5小時(shí)，加入對(duì)羥基苯甲酸甲酯0.15g、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.075g，攪拌，抽真空，70℃保溫20分鐘，制成囊材。取揮發(fā)油與大豆油的混合物，用囊材采用壓制法制成軟膠囊，檢驗(yàn)，分裝，即得軟膠囊1000粒。實(shí)施例2色譜條件考察1儀器與試藥島津ShimadzuGC-2010Plus氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測器；電子天平；Mili-Q純水儀；KQ-500DE型超聲波清洗儀。乙醇、甲醇、乙酸乙酯、正己烷、乙醚為分析純；桂皮醛(98％，批號(hào)：PS151228-05)、丁香酚(98％，批號(hào)：PS0262-0500)均購自成都普思生物科技股份有限公司，中藥組合物為按實(shí)施例1制備的軟膠囊劑。2樣品溶液的制備供試品溶液的制備方法：精密稱取軟膠囊內(nèi)容物0.8g，置50mL容量瓶，分別以正己烷、乙醚、乙酸乙酯、無水乙醇、甲醇稀釋至刻度，搖勻。結(jié)果表明，乙酸乙酯組澄清透明，溶解良好，其他組出現(xiàn)不同程度的分層。據(jù)此，選擇乙酸乙酯組，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，密封備用。對(duì)照品溶液的制備：分別精密稱取丁香酚、桂皮醛對(duì)照品適量，各加乙酸乙酯制成濃度分別約為1.8、3.0mg/mL的對(duì)照品溶液，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，密封，于4℃保存，備用?？瞻兹軇?duì)照溶液：為乙酸乙酯試劑，微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。3色譜條件考察色譜條件：色譜柱：6％氰丙基苯基/94％二甲基聚硅氧烷為固定相的-624毛細(xì)柱(30m×0.25mm，1.4um)；載氣為氮?dú)?99.99％)；分流比為10：1；柱流量為0.85ml·min-1。對(duì)SPL1與FID1溫度、升溫程序進(jìn)行考察。1#SPL1為230℃；FID1為250℃，起始柱溫為120℃，以2℃·min-1升至150℃，再以4℃·min-1升至165℃，最后以10℃·min-1升至220℃。色譜圖見圖1。結(jié)果顯示，8.995-10.787min的色譜峰分離度較差。2#SPL1為230℃；FID1為250℃，起始柱溫為140℃，以1℃·min-1升至160℃，再以5℃·min-1升至200℃，最后以10℃·min-1升至220℃。色譜圖見圖2。結(jié)果顯示，5.505-7.2115min的色譜峰分離度較差。3#SPL1為250℃；FID1為270℃，起始柱溫為140℃，以1℃·min-1升至160℃，再以5℃·min-1升至200℃，最后以10℃·min-1升至220℃。色譜圖見圖3。結(jié)果顯示，8.662-9.916min的色譜峰分離度較差。4#SPL1為250℃；FID1為270℃，起始柱溫為100℃，以2.5℃·min-1升至135℃，再以4℃·min-1升至150℃，最后以10℃·min-1升至220℃。色譜圖見圖4。結(jié)果顯示，各主要峰分離度得到改善。5#SPL1為250℃；FID1為270℃，起始柱溫為105℃，保留15min，以5℃·min-1升至150℃，再以10℃·min-1升至220℃。色譜圖見圖5。結(jié)果顯示，各主要峰分離度較4#無顯著差異，但分析時(shí)間延長。6#SPL1為250℃；FID1為270℃，起始柱溫為120℃，保留15min，以10℃·min-1升至220℃。色譜圖見圖6。結(jié)果顯示，各主要峰分離度進(jìn)一步改善，分離度良好，分析時(shí)間較短。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，檢測器溫度270℃，進(jìn)樣口溫度250℃；起始柱溫為100-120℃，經(jīng)升溫后溫度為220℃的色譜條件適宜分離、分析供試品溶液，并進(jìn)一步構(gòu)建相關(guān)指紋圖譜，其中，4#、5#、6#為優(yōu)選的色譜條件，6#為最優(yōu)選的色譜條件。即最優(yōu)色譜條件：色譜柱：6％氰丙基苯基/94％二甲基聚硅氧烷為固定相的-624毛細(xì)柱(30m×0.25mm，1.4um)；載氣為氮?dú)?99.99％)；SPL1為250℃；FID1為270℃，起始柱溫為120℃，保留15min，以10℃·min-1升至220℃；分流比為10：1；柱流量為0.85ml·min-1，進(jìn)樣量為1uL。在最優(yōu)選的6#色譜條件下，依次注入桂皮醛對(duì)照品溶液、丁香酚對(duì)照品溶液。色譜圖見圖7至圖8。結(jié)果表明，桂皮醛色譜峰峰面積較大，保留時(shí)間適中，因此，選擇桂皮醛色譜峰作為參照峰。實(shí)施例3方法學(xué)考察1樣品溶液的制備供試品溶液的制備：精密稱取軟膠囊內(nèi)容物0.8g，置50mL量瓶，加乙酸乙酯溶解、稀釋至刻度，微孔濾膜(0.45μm)濾過，密封備用。對(duì)照品溶液的制備：精密稱取桂皮醛對(duì)照品適量，加乙酸乙酯稀釋、定容至100mL容量瓶，制成濃度約為3.0mg/mL的對(duì)照品溶液，微孔濾膜(0.45μm)濾過，密封，于4℃保存，備用。2色譜條件色譜條件：色譜柱：6％氰丙基苯基/94％二甲基聚硅氧烷為固定相的-624毛細(xì)柱(30m×0.25mm，1.4um)；載氣為氮?dú)?99.99％)；SPL1為250℃；FID1為270℃，起始柱溫為120℃，保留15min，以10℃·min-1升至220℃；分流比為10：1；柱流量為0.85ml·min-1，進(jìn)樣量為1uL。系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：在上述色譜條件下，取對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄保留時(shí)間與峰面積，并計(jì)算RSD(％)，結(jié)果見表1，色譜圖見圖9；取供試品溶液重復(fù)進(jìn)樣2次，記錄色譜圖，色譜圖見圖10。表1系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果表明：對(duì)照品溶液的重復(fù)性RSD小于5％，供試品溶液的分離度均大于1.5，系統(tǒng)適應(yīng)性良好。專屬性試驗(yàn)：在上述色譜圖條件下，取上述對(duì)照品溶液、供試品溶液、空白溶劑對(duì)照溶液各進(jìn)一針，記錄色譜圖，色譜圖分別見圖11至圖13。結(jié)果表明：空白溶劑對(duì)照無干擾，方法專屬性良好。精密度試驗(yàn)：在上述色譜條件下，取供試品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，以桂皮醛色譜峰為參照(S)，計(jì)算各主要峰(A1-A9)的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)峰面積，并計(jì)算RSD(％)。結(jié)果見表2和表3。表2精密度試驗(yàn)結(jié)果(相對(duì)峰面積)表3精密度試驗(yàn)結(jié)果(相對(duì)保留時(shí)間)試驗(yàn)結(jié)果表明，色譜圖各共有峰(S、A1-A9)的相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的RSD均小于5.0％，符合指紋圖譜制訂的相關(guān)要求。穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一批樣品，按上述供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，室溫下放置分別于0、2、4、8、12、24h進(jìn)樣，以桂皮醛色譜峰(S)為參照，計(jì)算各主要峰(A1-A9)的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)峰面積，并計(jì)算RSD(％)。結(jié)果見表4和表5。表4穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果(相對(duì)峰面積)表5穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果(相對(duì)保留時(shí)間)試驗(yàn)結(jié)果表明，色譜圖各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的RSD均小于5.0％，符合指紋圖譜制訂的相關(guān)要求。重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品，按上述供試品溶液制備方法制備6份樣品溶液，依次進(jìn)樣，以桂皮醛色譜峰(S)為參照，計(jì)算各主要峰(A1-A9)的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)峰面積，計(jì)算RSD(％)。結(jié)果見表6和表7。表6重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果(相對(duì)峰面積)表7重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果(相對(duì)保留時(shí)間)試驗(yàn)結(jié)果表明，色譜圖各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積的RSD均小于5.0％，符合指紋圖譜制訂的相關(guān)要求。實(shí)施例4指紋圖譜的建立及相似度評(píng)價(jià)將10批(S1-S10)按實(shí)施例1方法制備的中藥組合物軟膠囊按實(shí)施例2的方法制備供試品溶液，并根據(jù)最優(yōu)選的6#色譜條件測試。將獲得的10批樣品色譜圖，見圖14，各色譜峰的相對(duì)峰面積和相對(duì)保留時(shí)間見表8-9。導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，生成對(duì)照色譜圖，見圖15。根據(jù)10個(gè)批次樣品中各成分相對(duì)保留時(shí)間的一致性，從中選擇了10個(gè)共有峰作為指紋圖譜的特征峰，以桂皮醛色譜峰為參照(S)，(t＝19.955min)，對(duì)照色譜圖中各共有峰相對(duì)保留時(shí)間為：0.5261、0.5463、0.5840、0.6023、0.6759、0.7023、0.7586、1.0000(S)、1.0321、1.0815，RSD(％)均小于0.1％。相似度計(jì)算見表10，結(jié)果顯示，各批次樣品的相似度為0.933-0.981，均大于0.9，其指紋圖譜具有較高的相似度。上述10批次中藥組合物的指紋圖譜共有特征峰，以各批次的桂皮醛色譜峰為參照(S)，各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間為0.5261±0.0263、0.5463±0.0273、0.5840±0.0292、0.6023±0.0301、0.6759±0.0338、0.7023±0.0351、0.7586±0.0379、1.0000(S)、1.0321±0.0516、1.0815±0.0541。其中10個(gè)批次中藥組合物的指紋圖譜共有特征峰，以各批次的桂皮醛色譜峰為參照(S)，各共有特征峰的相對(duì)保留時(shí)間為：0.5256～0.5267、0.5457～0.5471、0.5833～0.5845、0.6018～0.6030、0.675～0.6766、0.7016～0.7034、0.7580～0.7592、1.0000(S)、1.0317～1.0323、1.0810～1.0819。表810批樣品相對(duì)峰面積計(jì)算結(jié)果序號(hào)SA1A2A3A4A5A6A7A8A9110.03050.16070.01280.09560.06330.03870.67070.97143.7558210.06160.31520.02190.18300.12800.06971.30790.69383.6566310.07440.37650.03610.22120.14610.08251.54420.52113.4829410.03930.20350.01720.10960.07020.04440.80490.74264.6011510.08340.42970.04120.25550.16050.08821.75460.44723.7860610.09480.48690.04680.28920.18700.10071.97050.31433.6420710.10600.55140.05140.32340.20850.11362.22620.18233.4152810.08470.41780.03850.24640.16400.08991.72430.46213.9375910.09390.48160.04080.28340.19040.10552.00290.30623.60751010.11350.57670.05030.34080.22300.12332.39440.05843.1979表910批樣品相對(duì)保留時(shí)間計(jì)算結(jié)果序號(hào)SA1A2A3A4A5A6A7A8A9110.52670.54710.58360.60300.67630.70280.75921.03201.0817210.52650.54680.58400.60290.67660.70340.75921.03231.0815310.52630.54640.58430.60240.67620.70270.75881.03211.0814410.52580.54570.58420.60180.67500.70160.75831.03191.0819510.52560.54600.58410.60210.67530.70200.75811.03221.0815610.52560.54580.58330.60180.67550.70190.75801.03231.0817710.52580.54590.58370.60200.67570.70190.75841.03201.0813810.52660.54680.58450.60300.67610.70280.75921.03221.0815910.52610.54650.58420.60250.67640.70240.75921.03231.08161010.52660.54680.58440.60270.67660.70260.75901.03171.0810表10指紋圖譜相似度計(jì)算結(jié)果序號(hào)相似度序號(hào)相似度S10.976S60.959S20.981S70.980S30.952S80.933S40.943S90.942S50.972S100.961注：表中S1-S10為10批次的編號(hào)。實(shí)施例5指紋圖譜在中藥組合物質(zhì)量控制中的應(yīng)用制備供試品溶液：取10批次的中藥組合物軟膠囊供試品，分別精密稱取內(nèi)容物0.8g，置50mL量瓶，加乙酸乙酯溶解、稀釋至刻度，經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過，得供試品溶液。確定氣相色譜條件：色譜柱的固定相為6％氰丙基苯基/94％二甲基聚硅氧烷，尺寸為30m×0.25mm，1.4um，優(yōu)選-624毛細(xì)柱；氫焰離子化檢測器，檢測器溫度為270℃；載氣為氮?dú)?，分流比?0：1；柱流量為0.85ml·min-1，進(jìn)樣口溫度為250℃；起始柱溫為100-120℃，升溫程序?yàn)椋合纫云鹗贾鶞乇３?-15min，然后以2.5-10℃·min-1升至220℃，優(yōu)選起始柱溫為120℃，保持15min，再以10℃·min-1升至220℃；進(jìn)樣量為1uL；制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜：將上述制得的10批供試品溶液注入氣相色譜儀，以上述的色譜條件檢測，測得供試品溶液氣相色譜圖，比較各色譜圖，得到由共有特征峰構(gòu)成的中藥組合物制劑的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；測試中藥組合物軟膠囊待測品：取待測品，按制備供試品溶液方法制得待測品溶液，注入氣相色譜儀，以上述的色譜條件檢測，測得待測品溶液氣相色譜圖，見圖16；檢測待測品質(zhì)量：將待測品色譜圖與上述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行比較，計(jì)算相似度，相似度大于0.9。實(shí)施例6中藥組合物片劑的制備取實(shí)施例1制備的揮發(fā)油3ml，加微粉硅膠2.5mg，乳糖5.5mg，微晶纖維素5.3mg，糖粉3.0mg，用10％PVP‐k30水溶液制粒，外加低取代羥丙基纖維素0.5mg和硬酯酸鎂0.2mg，壓片，即得。實(shí)施例7中藥組合物顆粒劑的制備取實(shí)施例1制備的揮發(fā)油5ml，并溶于少量乙醇中，備用。取40gβ‐環(huán)糊精，加入300ml蒸餾水，水浴加熱溶解，溫度降至35℃時(shí)加入揮發(fā)油乙醇溶液，混合均勻，超聲包合30min，冷藏過夜，抽濾，沉淀于38℃低溫干燥，得揮發(fā)油β‐環(huán)糊精包合物。將β‐環(huán)糊精包合物與適量糊精混合，采用90％乙醇為潤濕劑制軟材，過20目篩進(jìn)行濕法制粒，65℃干燥，整粒，即得。實(shí)施例8中藥組合物指紋圖譜檢測色譜條件：選用毛細(xì)柱為色譜柱，氫焰離子化檢測器，載氣為氮?dú)?，分流比?0：1；柱流量為1ml/min，檢測器溫度270℃，進(jìn)樣口溫度250℃，升溫程序?yàn)椋浩鹗贾鶞貫?00℃，升溫程序?yàn)椋合纫?.5℃/min速度升至135℃，再以4℃/min速度升至150℃，最后以10℃/min速度升至220℃；制備供試品溶液：取實(shí)施例6或7的中藥組合物制劑0.8g，置于50ml容量瓶，以乙酸乙酯溶解，并稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，得供試品溶液；制備對(duì)照品溶液：取桂皮醛對(duì)照品適量，加乙酸乙酯制成3.0mg/ml的桂皮醛對(duì)照溶液，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，備用；進(jìn)樣檢測：分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定。實(shí)施例9中藥組合物指紋圖譜檢測色譜條件：選用毛細(xì)柱為色譜柱，氫焰離子化檢測器，載氣為氮?dú)?，分流比?0：1；柱流量為1ml/min，檢測器溫度270℃，進(jìn)樣口溫度250℃，起始柱溫為105℃，升溫程序?yàn)椋合纫云鹗贾鶞乇３?5min，再以5℃/min速度升至150℃，最后以10℃/min速度升至220℃；制備供試品溶液：取實(shí)施例6或7的中藥組合物制劑0.8g，置于50ml容量瓶，以乙酸乙酯溶解，并稀釋至刻度，搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，得供試品溶液；制備對(duì)照品溶液：取桂皮醛對(duì)照品適量，加乙酸乙酯制成3.0mg/ml的桂皮醛對(duì)照溶液，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)濾過，備用；進(jìn)樣檢測：分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定。當(dāng)前第1頁1 2 3