本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及結(jié)核分枝桿菌rv1078蛋白在診斷潛伏性/活動性肺結(jié)核中的用途。

背景技術(shù)：

多個世紀以來，結(jié)核病持續(xù)在全球成為一個不容忽視的公共衛(wèi)生問題。目前全球已有三分之一的人口攜帶結(jié)核分枝桿菌，僅2010年一年就新增結(jié)核病病例880萬，死亡145萬，平均不到22秒即有一人死于肺結(jié)核病，結(jié)核病高居傳染病死亡人數(shù)之首。而我國是全球22個結(jié)核病高負擔國家之一，結(jié)核病患者人數(shù)高居全球第二位，受感染人數(shù)超過5億，僅2010年一年就有新發(fā)病例90～120萬，占據(jù)了全球總新增病例的約12％，如不及時采取有效措施，在未來十年內(nèi)可能有3000萬人發(fā)病，將會導(dǎo)致嚴重的公共衛(wèi)生問題和社會問題，所以從國家戰(zhàn)略層面必需盡快實現(xiàn)對肺結(jié)核的有效控制。

科學證據(jù)表明，結(jié)核感染人體后，在大多數(shù)情況下，會受到人體內(nèi)免疫系統(tǒng)的控制，從而處于一個潛伏感染狀態(tài)，在任何時候都有可能轉(zhuǎn)化為潛伏性結(jié)核病?？紤]到全球結(jié)核感染人口，甚至在我國都是一個十分龐大的數(shù)字，結(jié)合結(jié)核病的易傳播性和社會危害性，在健康人群中篩查結(jié)核潛伏患者就顯得尤為重要。已有研究證實潛伏性肺結(jié)核感染(1atenttuberculosisinfection，ltbi)的預(yù)防性治療可降低hiv/tb雙重感染人群進展為潛伏性tb的風險(bucherhc，griffithle，guyattgh，etal：isoniazidprophylaxisfortuberculosisinhivinfection：ameta-analysisofrandomizedcontrolledtrails[j].aids，1999，13：501-508)。但是，目前國內(nèi)診斷潛伏感染主要依據(jù)結(jié)核菌素皮試(ppd皮試)的結(jié)果，一般認為ppd強陽性或在短期內(nèi)從陰性轉(zhuǎn)為陽性者是結(jié)核病潛伏感染者。然而因為ppd皮試無法區(qū)分在中國廣泛推廣的bcg接種產(chǎn)生的免疫應(yīng)答反應(yīng)與潛伏感染產(chǎn)生的應(yīng)答反應(yīng)。而基于抗原抗體反應(yīng)的血清學診斷，由于其簡便性、快速性，是重要的潛伏性肺結(jié)核感染臨床輔助性診斷手段。因此，從長遠角度看，應(yīng)致力于發(fā)現(xiàn)敏感性和特異性均較好的結(jié)核標志物。

理想的結(jié)核診斷標志物應(yīng)符合以下條件：(1)敏感性高；(2)特異性高；(3)存在于體液，特別是血液中，易于檢測。但是目前肺結(jié)核分支桿菌血清學診斷所針對的抗原如抗原5、38kd抗原、30/31kd抗原以及抗原60等，均存在陽性檢出率低，與其它分支桿菌的交叉免疫性等問題，雖然在療效監(jiān)測、提示復(fù)發(fā)、判斷預(yù)后和高危人群的普查中具有一定的價值，但目前仍不能用于潛伏性肺結(jié)核感染的確診。為了實現(xiàn)對潛伏性肺結(jié)核感染的高靈敏性，高特異性的診斷，急需在分子水平上尋找到更敏感、更特異的潛伏性肺結(jié)核感染生物標志物。

rv1078蛋白基因名pra，屬于編碼富含脯氨酸蛋白基因家族。目前功能未知。。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及rv1078蛋白在制備鑒別、診斷/輔助診斷、篩查/輔助篩查目標檢測樣本是否來自于潛伏性/活動性肺結(jié)核患者的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

所述rv1078蛋白是如下a)或b)的蛋白：

a)序列表中的seqidno.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

seqidno.1：

>m.tuberculosish37rv|rv1078|pra

mteqpppggsypppppppgpsgghepppaappggsgyapppppssgsgypppppppggga

ypppppsaggyappppgpairtmptesytpwitrvlaafidwapyvvlvgigwvimlvtq

tsscvtsiseydvgqfcvsqpsmigqlvqwllsvgglaylvwnygyrqgtigssigksvl

kfkvvsettgqpigfgmsvvrqlahfidaiicfvgflfplwdakrqtladkimttvcvpi

b)將序列表中的seqidno.1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與seqidno.1所示蛋白具有相同功能的蛋白質(zhì)。

所述的檢測樣品為全血樣品、血清樣品、組織樣品、病理組織，優(yōu)選為血清樣品。

本發(fā)明還提供一種用于鑒別、診斷/輔助診斷、篩查/輔助篩查目標檢測樣本是否來自于潛伏性/活動性肺結(jié)核患者的標記物，所述的標記物為抗rv1078的抗體，

優(yōu)選的，所述抗體為igg抗體，

更優(yōu)選的，為人離體血清中的igg抗體，

所述rv1078是如下a)或b)的蛋白：

a)序列表中的seqidno.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

b)將序列表中的seqidno.1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與seqidno.1所示蛋白具有相同功能的蛋白質(zhì)。

所述的檢測樣品為全血樣品、血清樣品、組織樣品、病理組織，優(yōu)選為血清樣品。

本發(fā)明的再一個目的是提供血清中抗rv1078抗體作為標志物在開發(fā)、設(shè)計和/或制備具有鑒別、診斷/輔助診斷、篩查/輔助篩查目標檢測樣本是否來自于潛伏性/活動性肺結(jié)核患者的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

優(yōu)選的，所述抗體為igg抗體，

更優(yōu)選的，為人離體血清中的igg抗體，

所述rv1078是如下a)或b)的蛋白：

a)序列表中的seqidno.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

b)將序列表中的seqidno.1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與seqidno.1所示蛋白具有相同功能的蛋白質(zhì)。

所述的檢測樣品為全血樣品、血清樣品、組織樣品、病理組織，優(yōu)選為血清樣品。

所述鑒別、診斷/輔助診斷、篩查/輔助篩查目標檢測樣本是否來自于潛伏性/活動性肺結(jié)核患者具體指，

(1)鑒別、診斷和/或輔助診斷待測樣本的來源個體是否患有潛伏性/活動性肺結(jié)核；

或(2)篩查和/或輔助篩查待測樣本來源人群中患有潛伏性/活動性肺結(jié)核的情況。

所述的檢測樣品為全血樣品、血清樣品、組織樣品、病理組織，優(yōu)選為血清樣品。

本發(fā)明的又一個目的是提供一種以所述rv1078蛋白為活性分子的用于鑒別、診斷、輔助診斷、篩查和/或輔助篩查潛伏性/活動性肺結(jié)核的試劑盒，所述的試劑盒包括，

(1)檢測芯片，所述檢測芯片上設(shè)置有連接rv1078蛋白的檢測點，每個檢測點獨立于相鄰的檢測點，所述rv1078是如下a)或b)的蛋白：

a)序列表中的seqidno.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

b)將序列表中的seqidno.1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與seqidno.1所示蛋白具有相同功能的蛋白質(zhì)；

(2)配合檢測芯片一起使用的試劑，所述試劑包括樣品稀釋液、洗滌液、封閉液；

(3)用于顯示檢測結(jié)果的標記物，所述標記物優(yōu)選為熒光標記的抗人第二抗體。

所述的樣品稀釋液為ph7.4pbs溶液,其組成為：

所述的洗滌液為ph7.4的pbst溶液,其組成為：

所述的封閉液為含bsa的ph7.4pbs溶液：

所述的熒光標記的抗人第二抗體優(yōu)選為抗人的igg第二抗體。

所述試劑盒還包括說明書，所述說明書記載如下內(nèi)容：

(1)與正常人相比，潛伏性/活動性肺結(jié)核感染患者的檢測樣品中，抗rv1078抗體水平顯著升高；

(2)所述的檢測樣品為全血樣品、血清樣品、組織樣品、病理組織，優(yōu)選為全血樣品；

(3)所述抗體為igg類型的抗體。

本發(fā)明還涉及所述試劑盒中的檢測芯片的制備方法，所述的方法包括，

(1)將含有rv1078蛋白的溶液點樣于載體玻片上，所述含有rv1078蛋白的溶液的配方為：

(2)采用生物芯片點樣儀點樣，每次點樣使用的點樣溶液體積為0.3-1nl；優(yōu)選0.5-1nl；最優(yōu)選1nl；

(3)點樣后，將載體玻片保持在30％rh-40％rh濕度，4℃環(huán)境中過夜，優(yōu)選的，濕度為35％rh；

(4)將載體玻片放置于塑料盒中封口-80℃低溫保存。

所述含有rv1078蛋白的溶液中，還進一步包括：體積百分比為25％的甘油、體積百分比為0.02％的tween20、0.05mg/ml的bsa和0.1g/l的nan3。

根據(jù)需要，在點樣步驟(2)和步驟(3)之間，可在每個載體玻片上貼上用于隔離每個檢測點的塑料圍欄，在玻片上形成點樣孔。

所述載體玻片是三維h載體玻片。

本發(fā)明還涉及一種檢測待測樣品是否來自于潛伏型/活動型肺結(jié)核患者的方法，所述的方法為：

使用所述rv1078蛋白或以rv1078蛋白為活性分子的檢測芯片/檢測試劑盒檢測待測樣品，判斷抗rv1078抗體水平是否顯著升高，所述的判斷方法為：待測樣品的檢測結(jié)果中，抗rv1078抗體呈陽性，則判定該待測樣品是潛伏性/活動性肺結(jié)核陽性，否則為潛伏性/活動性肺結(jié)核陰性；

所述陽性具體判斷標準為若各個抗體的信噪比值處于如下值之間，則認為是該抗體呈陽性：

rv1078的抗體的信噪比值處于7.15和8.70之間，包括7.15和8.70；

所述信噪比值的計算公式為：

式中，s和b分別代表所述檢測芯片中掃描儀直接顯示的信號值和非樣品點制區(qū)域的背景值，而σ則是代表該點原始信號的標準差；

所述σ對應(yīng)的實驗次數(shù)為3次；所述s和b值是用掃描儀在532nm通道掃描得到的；所述掃描儀優(yōu)選為為genepix。

所述抗rv1078抗體優(yōu)選為igg抗體。

本發(fā)明的最后一個目的是提供上述任一所述試劑盒在制備具有鑒別、診斷、輔助診斷、篩查和/或輔助篩查潛伏性/活動性肺結(jié)核用途的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

附圖說明

圖1為所制備的抗原蛋白rv1078的銀染定量結(jié)果圖。

圖2為所制備的抗原蛋白rv1078的western-blotting鑒定結(jié)果圖。

具體實施方式

下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。

下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

實施例1、蛋白質(zhì)芯片的制備

(一)結(jié)核分支桿菌抗原蛋白rv1078的制備

1、表達

基因工程改造過的釀酒酵母利用半乳糖誘導(dǎo)過量表達，具體過程為：

首先從分支桿菌屬結(jié)核分枝桿菌(mycobacteriumm.tuberculosis)(北京株)中，通過pcr從頭克隆獲得蛋白rv1078的基因編碼片段，通過invitrogen公司的bp酶將片段連接到pdonr221載體(購自invitrogen)上，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌dh5-alpha中擴增，提取載體再通過lr酶(invitrogen)換至經(jīng)過改造的能夠表達gst標簽的pegh-a載體(該載體在“jianzhu，hengzhu，etal：j.virol.may2009vol.83no.105219-5231”中公開過)上，再次轉(zhuǎn)化到大腸桿菌dh5-alpha中擴增，提取質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到pep4釀酒酵母菌株(該菌株在文獻“hengzhu，michaelsnyder，etal：naturegenetics26,283–289(2000)doi:10.1038/81576”中公開過)中。誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待其od600為0.6-0.8時，加入終濃度為2g/l的半乳糖，誘導(dǎo)6h，4000rpm離心收集菌，-80℃保存。

pcr從頭克隆中所使用的pcr引物序列如下所示：

擴增rv1078蛋白的基因編碼片段的引物對：

上游引物：ggggacaagtttgtacaaaaaagcaggcttaatgaccgaacagccgc

下游引物：ggggaccactttgtacaagaaagctgggtatcagatcggcacgcacac

每1l誘導(dǎo)培養(yǎng)基(溶劑為水)中含有的組分如表1所示：

表1

2、純化

1)、準備裂解液：

50ml裂解液中加50μl巰基乙醇，125μlpmsf及兩片roche蛋白抑制劑；

2)、于-80℃冰箱里取出上述步驟1收集的菌(從120ml誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)收集到的菌體)，加400μl氧化鋯珠和400μl裂解液，4℃環(huán)境中震蕩30s，后置冰上2min，重復(fù)四次；

3)、取出后11,000rpm離心2min，取上清于一新的15ml離心管中；

4)、重復(fù)2和3步四次，將上清收集于同一離心管中；

5)、添加裂解液至12ml即原始誘導(dǎo)培養(yǎng)基體積的1/10，同時用沒加抑制劑的裂解液將谷胱甘肽beads清洗3次。12ml裂解液中加入300μl的beads；

6)、加入beads后的裂解液于4℃孵育2h；

7)、11,000rpm離心2min后取上清保存于4℃。beads用清洗液ι和清洗液ii各洗3次；

8)、加300μl洗脫液孵育15min后，離心取上清收集于一新的離心管中，重復(fù)一次。

得到的洗脫液即溶有該蛋白。

上述純化過程中所用到的緩沖液(溶劑均為水)的組成見表2-表5.

表2裂解液(1l)

表3清洗液i(1l)

表4清洗液ii(1l)

表5洗脫液(1l)

3、鑒定

下述實驗過程中，所述的溶劑或液體的百分數(shù)為體積百分數(shù)。

1)、材料制備

配置兩塊12％的sds-page膠，1.0mm，15孔。一塊銀染，一塊westernblotting。取上述純化好的蛋白各20μl，加入4μl6xloadingbuffer，同時制備規(guī)格濃度梯度的bsa樣品作為銀染定量對照，煮樣5min。

2)、跑膠

依次每孔加入12μl上述制備好的樣品，bsa梯度樣品，2.5μmarker(takara)記錄次序。80v30min，140v1h。

3)銀染操作步驟：

固定：30min或者更長時間40％乙醇10％冰醋酸加水到250ml

致敏：30min75ml乙醇30％乙醇17g乙酸鈉28.2g三水乙酸鈉0.5g硫代硫酸鈉(大蘇打)加水到終體積250ml

水洗：3x10min

銀染：20min0.625gagno3100μl37％甲醛(在使用前加入)加水到終體積250ml

水洗：2x1min

顯色：時間視情況而定6.25gna2co350μl37％甲醛(在使用前加入)加水到終體積250ml

終止：10min1g甘氨酸加水到終體積250ml

保存：1％冰醋酸，4℃

4)western-blotting步驟：

轉(zhuǎn)膜：15v40min(半干轉(zhuǎn)，bio-rad)。轉(zhuǎn)膜緩沖液：甘氨酸2.9g；tris5.8g；sds0.37g；甲醇200ml；加ddh2o定容至1000ml

封閉：5％脫脂牛奶(bio-rad)1h。

第一抗體孵育：anti-gst鼠抗(novagen)終濃度1μg/ml1h

第二抗體孵育：羊鼠抗熒光800通道(odyssey)終濃度1μg/ml1h

odyssey掃描儀掃描，保存圖片。

進行銀染定量和western-blotting鑒定的結(jié)果分別如圖1和圖2所示。圖1結(jié)果表明所制備的rv1078蛋白的量均為50μg/ml；圖2結(jié)果證明，所制備的rv1078蛋白正確。

經(jīng)測序，所制備的rv1078蛋白組分具有序列表seqidno.1所示的氨基酸序列。

(二)預(yù)點抗原的蛋白質(zhì)芯片的制備

在含上述制備的50μg/ml的rv1078抗原蛋白的洗脫液溶液中，加入終濃度為25％(體積百分比)的甘油、0.02％(體積百分比)的tween20、0.05mg/ml的bsa和0.1g/l的nan3。采用生物芯片點樣儀將上述混合液點于載體玻片(載體玻片為商品化的三維h載體玻片，購自北京博奧生物芯片有限責任公司)上，每點點樣約1nl、2個平行點。采用生物芯片點樣儀(購自北京博奧生物芯片有限責任公司)點制。

作為陽性對照的igg(1mg/ml)標準品或cy3標記抗人抗體二抗(20μg/ml)，混合液中其它組分和終濃度不變，制備出igg標準品或cy3標記抗人抗體二抗的混合液。以上述相同的點樣方法，將分別含igg標準品或cy3標記抗人抗體二抗的混合液點于上述同一載體玻片上，形成微陣列，每玻片可點12個重復(fù)平行封閉區(qū)間。點樣結(jié)束后貼上12個孔的塑料圍欄，并保持在35％rh濕度4℃環(huán)境中16h后，將玻片放置于塑料盒中封口-80℃低溫保存。

在此需要說明的是，本實施例僅記載一個具體的rv1078蛋白的克隆表達方法，該方法中的相關(guān)宿主和載體并不影響本申請需要保護的技術(shù)方案的實現(xiàn)，僅用作幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員理解該蛋白的克隆表達過程。本領(lǐng)域技術(shù)人員完全可以明晰的是，使用常規(guī)的分子生物學實驗方法，通過其他常見的載體、宿主，也能夠完成目標蛋白的克隆表達。

實施例2、應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片輔助診斷潛伏性/活動性肺結(jié)核

(一)待測血清樣品的準備

全血標本于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘左右，取上清即可立即檢測；或進行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。4℃解凍后的樣品應(yīng)再次離心，然后檢測。

(二)診斷過程中所涉及的各種緩沖液及試劑的配制

(1)樣品稀釋液(見表6)：ph7.4pbs溶液

表6

(2)洗滌液(見表7)：ph7.4的pbst溶液

表7

(3)芯片封閉液(見表8)：含bsa的ph7.4pbs溶液

表8

(4)cy3標記抗人第二抗體的濃縮液：使用市售的抗人igg-cy3熒光標記二抗，稀釋至濃度為1mg/ml，分裝于避光小管。

(三)應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片輔助診斷潛伏性肺結(jié)核的方法

使用實施例1制備的蛋白質(zhì)芯片可以檢測被檢人血液樣品中抗原rv1078相應(yīng)的igg抗體的水平，分析這個蛋白質(zhì)的相應(yīng)抗體的檢測結(jié)果，可以判斷被檢人是否為潛伏性肺結(jié)核。

1、具體操作步驟

1)將實施例1點制好密封的芯片從-80℃取出，室溫復(fù)溫10分鐘。

2)封閉：將芯片放入洗滌盒，加入約50ml芯片封閉液(表8)，搖床50rpm，室溫1h。

3)快速甩掉芯片上多余的液體，置于濕盒內(nèi)。

4)待測樣品的稀釋與加樣：將待測血清樣品按體積比1:100用上述配制的樣品稀釋液(表6)稀釋，取30μl稀釋后的含待測血清的溶液加入到封閉的圍欄封閉空間中。反應(yīng)1h，室溫。待檢測樣品臨用前15分鐘內(nèi)配制。

5)將芯片從濕盒中取出，置于洗滌盒，加入約50ml上述配制的洗滌液，搖床50rpm，室溫5min，重復(fù)3次。

6)快速甩掉芯片上多余的液體，置于濕盒內(nèi)。

7)每個封閉空間加入30μl已經(jīng)稀釋至終濃度1μg/ml的cy3熒光抗人二抗于芯片上，避光反應(yīng)1h。

8)將芯片從濕盒中取出，置于洗滌盒，加入約50ml上述配制的洗滌液，搖床50rpm，室溫5min，重復(fù)3次。再用約50ml超純水洗一次，5min。

9)離心干燥，用genepix掃描儀在532nm通道下讀取數(shù)據(jù)。

2、待測樣品分別對3種抗原蛋白抗性的判定

用genepix掃描儀在532nm通道掃描得到的結(jié)果是通過點樣點的信噪比(snr)來進行衡量,點樣點的信噪比(snr)計算公式為：

式中，s和b分別代表芯片中原始的信號值(是掃描儀直接顯示的數(shù)值)和背景值(非樣品點制區(qū)域的信號值)，而σ則是代表該點原始信號的標準差(σ對應(yīng)的實驗次數(shù)為3次)。

將蛋白質(zhì)芯片上點樣點的信噪比值與下述表9的信噪比區(qū)間(所述信噪比區(qū)間包括所給出的信噪比區(qū)間的兩端值)進行對比，以進行待測樣品對相應(yīng)抗原抗性的陽性、陰性結(jié)果的判定：

抗rv1078(見表9)：

表9

3、待測樣品檢驗結(jié)果的判定

判定標準：

與正常未患有任何疾病的人相比，潛伏性肺結(jié)核感染人中，抗rv1078抗體水平顯著升高，具體表現(xiàn)為：

如果待測樣品的檢測結(jié)果中，抗rv1078抗體呈陽性(判斷抗體是否為陽性的標準：實施例1制備的蛋白質(zhì)芯片上同一抗原的2個平行點樣點都判定為陽性時，該抗體為陽性)，則判定該待測樣品是活動性/潛伏性肺結(jié)核陽性，否則為活動性/潛伏性肺結(jié)核陰性。

(四)、應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片輔助診斷活動性/潛伏性肺結(jié)核的方法的特異性和敏感性

采用200份活動性/潛伏性肺結(jié)核相關(guān)患者的血清(臨床診斷為活動性肺結(jié)核的患者100份，潛伏性肺結(jié)核患者100份；血清樣本由廣東省結(jié)核病控制中心提供，血清樣本的取得均經(jīng)過患者及體檢者的知情同意。)對實施例1的蛋白質(zhì)芯片進行了特異性和敏感性檢測，以上述判定標準判定待測者是否為活動性/潛伏性肺結(jié)核陽性。

檢測結(jié)果顯示，根據(jù)陽性似然比即敏感性/(1-特異性)計算得出實施例1的蛋白質(zhì)芯片輔助診斷活動性/潛伏性肺結(jié)核的最佳工作點的特異性為72％，敏感性為74％，均大大高于現(xiàn)有技術(shù)中活動性/潛伏性肺結(jié)核診斷的指標。

100份活動性肺結(jié)核患者中，有74份被檢測出陽性；100份潛伏性肺結(jié)核患者中，有28份被檢測出陽性。

(五)、應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片輔助診斷活動性肺結(jié)核的方法的特異性和敏感性

采用200份活動性肺結(jié)核相關(guān)患者的血清(臨床診斷為活動性肺結(jié)核的患者100份，健康人100份；血清樣本由廣東省結(jié)核病控制中心提供，血清樣本的取得均經(jīng)過患者及體檢者的知情同意。)對實施例1的蛋白質(zhì)芯片進行了特異性和敏感性檢測，以上述判定標準判定待測者是否為活動性肺結(jié)核陽性。。

檢測結(jié)果顯示，根據(jù)陽性似然比即敏感性/(1-特異性)計算得出實施例1的蛋白質(zhì)芯片輔助診斷活動性肺結(jié)核的最佳工作點的特異性為94％，敏感性為80％，均大大高于現(xiàn)有技術(shù)中活動性肺結(jié)核診斷的指標。

100份活動性肺結(jié)核患者中，有80份被檢測出陽性；100份健康人中，有6被檢測出陽性。

最后需要說明的是，以上實施例僅用作幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員理解本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)，而非對本發(fā)明保護范圍的限定。