本發(fā)明提供了檢測目標(biāo)分析物的測定裝置和方法，該方法包括諸如使用化學(xué)發(fā)光、熒光、比色法等的定量測試結(jié)果。

背景技術(shù)：

側(cè)流免疫測定法廣泛用于食品和醫(yī)療診斷工業(yè)，以及簡單的護(hù)理點測試，諸如快速鏈球菌測試和妊娠測試。側(cè)流條自身通常為注入表面活性劑的硝化纖維隔膜，這是裝置結(jié)果的波動的原因。用于免疫測定法的當(dāng)前技術(shù)通常為非定量的，并且缺乏敏感性。

從而，仍需要提供快速測試結(jié)果同時也提供定量結(jié)果的測定裝置。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了檢測目標(biāo)分析物的測定裝置和方法。在第一方面，提供了一種測定裝置。更具體地講，提供包括接收器的測定裝置，該接收器包括樣品入口；設(shè)置在接收器內(nèi)并具有第一表面的柱塞；至少一種試劑；附接到柱塞的第一表面的隔膜；提供毛細(xì)力的吸芯；以及檢測區(qū)。隔膜包括其中設(shè)置多種親和性組分的目標(biāo)共軛區(qū)。將多種捕獲化合物固定在位于目標(biāo)共軛區(qū)和吸芯之間的檢測區(qū)中。

在第二方面，提供了另一種測定裝置。該測定裝置包括接收器，該接收器包括表面和樣品入口；附接到接收器的表面的隔膜；設(shè)置在接收器中的至少一種試劑；設(shè)置在接收器內(nèi)并具有表面的柱塞；以及其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)。隔膜具有提供毛細(xì)力的吸芯。檢測區(qū)附接到柱塞的表面，并且位于樣品入口和吸芯之間。

在第三方面，提供了檢測目標(biāo)分析物的方法。該方法包括(a)提供包括接收器的測定裝置，該接收器包括表面和樣品入口；至少一種試劑；設(shè)置在接收器內(nèi)并具有表面的柱塞；附接到柱塞的表面、接收器的表面、或柱塞的表面和接收器的表面兩者的隔膜；以及其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)。隔膜包括提供毛細(xì)力的吸芯，并且檢測區(qū)位于樣品入口和吸芯之間。該方法還包括(b)提供疑似含有目標(biāo)分析物的樣品；(c)通過樣品入口將樣品添加到隔膜上；(d)允許樣品沿隔膜行進(jìn)直到樣品到達(dá)檢測區(qū)；(e)通過目標(biāo)分析物與捕獲化合物的反應(yīng)固定目標(biāo)分析物；(f)使固定的目標(biāo)分析物與至少一種試劑反應(yīng)以產(chǎn)生可檢測的信號；以及(g)檢測產(chǎn)生的信號。

使用測定裝置和方法允許目標(biāo)分析物的簡單、快速、定量的測定測試。

附圖說明

圖1A為測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖1B為在壓下柱塞后圖1A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖2A為測定裝置的另一個示例性局部剖視示意圖。

圖2B為在旋轉(zhuǎn)柱塞后圖2A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖2C為在壓下柱塞后圖2B的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖3A為測定裝置的另外的示例性局部剖視示意圖。

圖3B為在旋轉(zhuǎn)柱塞后圖3A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖3C為在壓下柱塞后圖3B的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖4A為測定裝置的又一示例性局部剖視示意圖。

圖4B為在旋轉(zhuǎn)柱塞后圖4A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖4C為在壓下柱塞后圖4B的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖5A為測定裝置的再一示例性局部剖視示意圖。

圖5B為在壓下柱塞后圖5A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖6A為測定裝置的另一個示例性局部剖視示意圖。

圖6B為在壓下柱塞后圖6A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖7A為測定裝置的又一示例性局部剖視示意圖。

圖7B為在初始壓下柱塞后圖7A的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

圖7C為在另外壓下柱塞后圖7B的測定裝置的示例性局部剖視示意圖。

雖然可不按比例繪制的上述附圖示出了本公開的各種實施方案，但還可以想到其它實施方案，如在具體實施方式中所指出。

具體實施方式

提供了檢測目標(biāo)分析物的測定裝置和方法。

通過端點表述的任何數(shù)值范圍旨在包括范圍的端點、范圍內(nèi)的所有數(shù)以及所述范圍內(nèi)的任何較窄的范圍(例如1至5包括1、1.5、2、2.75、3、3.8、4和5)。除非另外指明，否則在說明書和實施方案中所使用的所有表達(dá)數(shù)量或成分、特性測量等的數(shù)值在一切情況下均應(yīng)理解成由術(shù)語“約”修飾。因此，除非有相反的說明，否則前述說明書和所附實施方案列表中示出的數(shù)值參數(shù)可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員使用本公開的教導(dǎo)內(nèi)容尋求獲得的期望特性而變化。在最低程度上并且在不試圖將等同原則的應(yīng)用限制到受權(quán)利要求書保護(hù)的實施方案的范圍內(nèi)的條件下，至少應(yīng)該根據(jù)所記錄的有效數(shù)位的數(shù)量和通過慣常的四舍五入法來解釋每個數(shù)值參數(shù)。

對于以下給出定義的術(shù)語的術(shù)語表，除非在權(quán)利要求書或說明書中的其他地方另外給出了不同的定義，否則整個申請應(yīng)都將應(yīng)用這些定義。

術(shù)語表

在整個說明書和權(quán)利要求書中所使用的某些術(shù)語雖然大部分為人們所熟知，但可能仍然需要作出一些解釋。應(yīng)當(dāng)理解，如本文所用：

術(shù)語“一個(種)”和“該”與“至少一個(種)”可互換使用，意指一個(種)或多個(種)所描述的要素。

術(shù)語“和/或”意指兩者之一或兩者。例如，表達(dá)“A和/或B”意指A、B，或A和B的組合。

術(shù)語“抗體”是指與特定抗體，諸如目標(biāo)分析物反應(yīng)的免疫球蛋白分子，并且另外是指抗體片段(例如，ScFv或Fab)。

術(shù)語“抗原”是指能夠誘導(dǎo)特定免疫響應(yīng)并且能夠與該響應(yīng)的產(chǎn)物反應(yīng)的任何物質(zhì)。

術(shù)語“適體”是指DNA或RNA分子或結(jié)合到特定目標(biāo)分析物分子或原子的肽。

術(shù)語“配體”是指結(jié)合到目標(biāo)分析物分子或原子從而形成絡(luò)合物的原子、分子、官能團(tuán)或離子。

術(shù)語“親和性組分”是指結(jié)合到目標(biāo)分析物例如對于目標(biāo)分析物的抗體、適體或配體的材料。親和性組分由結(jié)合部分和檢測部分組成。結(jié)合部分包括抗體、核苷酸適體、肽適體或配體。檢測部分包括酶、催化劑和/或提供光學(xué)信號(例如，比色信號、熒光信號或發(fā)光信號)的分子。

術(shù)語“捕獲化合物”是指這樣的材料，該材料結(jié)合到目標(biāo)分析物例如對于目標(biāo)分析物的抗體、適體或配體，并且被固定以在適當(dāng)?shù)奈恢媒Y(jié)合目標(biāo)分析物。

所關(guān)注的分析物例如細(xì)菌、蛋白質(zhì)和其它原子或分子常常不固有地化學(xué)發(fā)光、熒光、有色等，因此為了實現(xiàn)特定檢測，需要將親和性組分摻入測定裝置中，諸如抗體、配體或適體，其將允許隔離分析物以及通過反應(yīng)對其進(jìn)行后續(xù)檢測。

在第一方面，提供了測定裝置，該測定裝置包括：

包括樣品入口的接收器；

設(shè)置在接收器內(nèi)并具有第一表面的柱塞；

至少一種試劑；

附接到柱塞的第一表面的隔膜，該隔膜包括：

其中設(shè)置多種親和性組分的目標(biāo)共軛區(qū)；

提供毛細(xì)力的吸芯；以及

其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)，其中檢測區(qū)位于目標(biāo)共軛區(qū)和吸芯之間。

參考圖1A，在示例性實施方案中，測定裝置100包括接收器12，該接收器12包括樣品入口14；設(shè)置在接收器12內(nèi)并且具有第一表面17的柱塞16；至少一種試劑18；附接到柱塞16的第一表面17的隔膜20，該隔膜包括其中設(shè)置多種親和性組分23的目標(biāo)共軛區(qū)22；提供毛細(xì)力的吸芯24；以及其中固定多種捕獲化合物27的檢測區(qū)26。檢測區(qū)26位于目標(biāo)共軛區(qū)22和吸芯24之間。在某些實施方案中，至少一種試劑18設(shè)置在接收器12中，并且接收器12還包括阻隔件28，以使至少一種試劑18與柱塞16分開。任選地，阻隔件包括金屬箔或袋，例如其內(nèi)部設(shè)置至少一種試劑的袋。在某些實施方案中，使用壓縮接頭、膠水或在接收器壁的內(nèi)部上形成的脊將柱塞固定在接收器中。

參考圖1B，當(dāng)將力F施加到柱塞16時，柱塞16被構(gòu)造成用于斷開檢測區(qū)26與吸芯24的流體連通，并且使檢測區(qū)26與至少一種試劑18流體連通。在某些實施方案中，柱塞16包括被構(gòu)造成用于刺穿阻隔件28的端部30，諸如尖的末端。柱塞的端部的構(gòu)造可根椐阻隔件的材料的厚度和類型變化。在圖1B示出的實施方案中，阻隔件28為箔袋，并且柱塞16的端部30為圓形的。

在第二方面，提供了測定裝置，該測定裝置包括：

包括表面和樣品入口的接收器；

附接到接收器的表面的隔膜，該隔膜包括提供毛細(xì)力的吸芯；

設(shè)置在接收器中的至少一種試劑；

設(shè)置在接收器內(nèi)并具有表面的柱塞；以及

其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)，檢測區(qū)附接到柱塞的表面；

其中檢測區(qū)位于樣品入口和吸芯之間。

參考圖5A和圖5B，示出了測定裝置500。測定裝置500包括接收器12，該接收器12包括表面10和樣品入口14；附接到接收器12的表面10的隔膜20，該隔膜20包括提供毛細(xì)力的吸芯24；設(shè)置在接收器12中的至少一種試劑18；設(shè)置在接收器12內(nèi)并且具有表面17的柱塞16；以及其中固定多種捕獲化合物27的檢測區(qū)26，該檢測區(qū)26附接到柱塞16的表面17；其中檢測區(qū)26位于樣品入口14和吸芯24之間。當(dāng)將力F施加到柱塞16時，檢測區(qū)26從與隔膜20流體連通移動到與至少一種試劑18流體連通。

分別在圖1A至圖1B和圖5A至圖5B中示出的測定裝置100和測定裝置500的優(yōu)點是，單個且簡單的力F(即，柱塞16的壓下)能夠?qū)z測區(qū)26從與隔膜20流體連通移動到與至少一種試劑18流體連通。此外，在圖5A至圖5B的測定裝置500中，不存在用于至少一種試劑18被向上輸送到吸芯24的直接路徑，并且因此將避免來自與過量的親和性化合物反應(yīng)的至少一種試劑18的背景信號。

以下公開涉及以上提供的第一方面和第二方面兩者。

在本文公開的測定裝置中采用的親和性組分不受特別限制，只要它們將結(jié)合到所關(guān)注的(一種或多種)目標(biāo)分析物并且能夠參與檢測反應(yīng)就行。親和性組分包括結(jié)合部分與檢測部分的任何組合。如上所述，結(jié)合部分包括抗體、核苷酸適體、肽適體，或配體，并且檢測部分包括酶、催化劑和/或提供光學(xué)信號(例如，比色信號、熒光信號或發(fā)光信號)的分子。親和性組分的一些合適的檢測部分包括(例如并且非限制地)辣根過氧化物酶、熒光素酶和堿性磷酸酶。類似于親和性組分，捕獲化合物不受限制，只要它們在檢測區(qū)保持固定在適當(dāng)?shù)奈恢貌⒔雍系剿P(guān)注的(一種或多種)目標(biāo)分析物就行。捕獲化合物通常包含適體、肽、抗體、配體或它們的組合。

為了產(chǎn)生可檢測的信號(例如，來自化學(xué)發(fā)光或熒光反應(yīng)的光、來自比色法的光吸收等)，任何捕獲的(一種或多種)分析物及其結(jié)合的親和性組分與至少一種試劑反應(yīng)。在許多實施方案中，至少一種試劑包含過氧化氫和/或蟲熒光素。優(yōu)選地，至少一種試劑包含水性溶液。魯米諾常常用于涉及過氧化氫的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，因此在本公開的某些方面，阻隔件包括袋并且袋含有魯米諾。一種合適的袋包括具有兩個塑料環(huán)的杯結(jié)構(gòu)，其中一層箔附連到并且覆蓋每個環(huán)，以形成封閉的杯。袋防止魯米諾和過氧化氫在添加捕獲的目標(biāo)分析物之前反應(yīng)，但是袋一旦被刺穿，就允許魯米諾接觸過氧化氫。在某些實施方案中，親和性組分包含與適體共軛的酶或與抗體共軛的酶。技術(shù)人員可識別用于所關(guān)注的特定目標(biāo)分析物的適體和抗體。常見的酶包括例如辣根過氧化物酶和熒光素酶。在包括與適體或抗體共軛的辣根過氧化物酶的方面，目標(biāo)分析物的定量確定將由例如與魯米諾和過氧化氫反應(yīng)的共軛的辣根過氧化物酶的量引起。在接收器中使用隔膜的優(yōu)點是，它經(jīng)由催化劑在溶液中通過毛細(xì)管作用朝向芯并遠(yuǎn)離至少一種試劑的繼續(xù)行進(jìn)，通過去除過量反應(yīng)催化劑(例如，辣根過氧化物酶)使背景信號最小化。

隔膜任選地包括通常在流動測定中采用的一種或多種材料，例如并且非限制地，流體控制膜、毛細(xì)管流體導(dǎo)體(例如，流體控制膜的疊堆)、硝化纖維，或其它非織造隔膜，諸如由尼龍、聚砜、聚醚砜，或聚偏二氟乙烯(PVDF)制成的隔膜。例如，合適的硝化纖維和PDVF隔膜對于技術(shù)人員是已知的，并且可從供應(yīng)商諸如伯樂實驗室公司(加利福尼亞，赫爾克里)(Bio-Rad Laboratories,Inc.(Hercules,CA))商購獲得。隔膜的檢測區(qū)任選地包括非織造隔膜或類似的材料，其具有曲折流動路徑，以使在樣品溶液中的目標(biāo)分析物和捕獲化合物之間的接觸最大化。

流體控制膜包括具有至少一種微觀結(jié)構(gòu)承載表面的片材，其中其內(nèi)一個或多個通道允許、促進(jìn)或有利于控制或定向流體的流動。合適的流體控制膜描述于美國專利號5,514,120、5,728,446、6,080,243和6,290,685中。流體控制膜通常是片材或膜的形式，而不是大量纖維的形式。流體控制膜的通道提供的液體流動比通常用由纖維形成的網(wǎng)、泡沫或絲束實現(xiàn)的流體流動更有效。在纖維中形成的通道的壁將表現(xiàn)出妨礙液體流動通過通道的相對隨機(jī)的波動和復(fù)雜的表面。相比之下，通道從預(yù)定的圖案精確復(fù)制，并且形成沿主表面延伸的一系列單獨開口毛細(xì)管通道。在片材、膜或管中形成的這些微復(fù)制型的通道優(yōu)選地沿大致每個通道長度并且更優(yōu)選地從通道到通道是均勻并且規(guī)則。流體通常在大約15秒內(nèi)向上芯吸流體控制膜約2.5英寸(6.35cm)的距離。相比于非織造隔膜，采用流體控制膜的優(yōu)點包括更平的流動路徑，并且因此更可再現(xiàn)的結(jié)果。

流體控制膜可由適于澆注或壓印的任何熱塑性材料形成，熱塑性材料包括例如聚烯烴、聚酯、聚酰胺、聚(氯乙烯)、聚醚酯、聚酰亞胺、聚酯酰胺、聚丙烯酸酯、聚乙酸乙烯酯、聚乙酸乙烯酯的水解衍生物等，或它們的組合。常常采用聚烯烴，具體地講聚乙烯或聚丙烯、其共混物和/或共聚物，以及聚乙烯和/或乙烯與較小比例的其它單體(諸如乙酸乙烯酯或丙烯酸酯，諸如丙烯酸甲酯和丙烯酸丁酯)的共聚物。聚烯烴表現(xiàn)出優(yōu)異的物理特性、便于加工，并且通常比其它具有類似特征的熱塑性材料更低的成本。聚烯烴易于復(fù)制澆注或壓花輥的表面。它們是粗糙的、耐用的，并且很好地保持其形狀，因此使此類膜易于在澆注或壓花工藝后處理。親水性聚氨酯也具有有利的物理特性和固有的高表面能。另選地，流體控制膜能夠由熱固性材料(可固化樹脂材料)諸如聚氨酯、丙烯酸酯、環(huán)氧樹脂和硅氧烷澆注，并通過暴露于熱或UV或電子束輻射或水分固化。這些材料可含有各種添加劑，包括表面能改性劑(諸如表面活性劑和親水性聚合物)、增塑劑、抗氧化劑、顏料、剝離劑、抗靜電劑等等。合適的流體控制膜也可使用壓敏粘合劑材料制造。在一些情況下，通道可使用無機(jī)材料(例如，玻璃、陶瓷或金屬)形成。優(yōu)選地，流體控制膜在暴露于液體時大致保持其幾何形狀和表面特征。

在許多實施方案中，測定裝置的柱塞還包括與第一表面相對的第二表面以及與第一表面和第二表面連通的端部，其中隔膜與端部接觸并且與第二表面接觸。例如，圖1A示出與柱塞16的第一表面17相對的柱塞16的第二表面29以及與第一表面17和第二表面29連通的端部30，其中隔膜20與端部30接觸并且與第二表面29接觸。在圖1A所示的實施方案中，隔膜20包括圍繞柱塞16的U形形狀。還可以想到隔膜的其它形狀，諸如V形形狀、方形U形狀等等。常常，隔膜的檢測區(qū)位于柱塞的端部處。參考圖1A、圖2A、圖3A、圖5A和圖6A中的每個，具有位于柱塞16的端部30處的檢測區(qū)26使檢測區(qū)相對靠近至少一種試劑。在某些方面，接收器12包括試管或類似于試管的形狀。當(dāng)測定裝置放入測量儀諸如3M CLEAN-TRACE NG光度計(購自明尼蘇達(dá)州圣保羅的3M公司(3M Company,St.Paul,MN))中時，柱塞16的端部30將接近光度計的檢測區(qū)。

在某些實施方案中，測定裝置還包括用于有助于刺穿阻隔件，例如，如在公布的國際專利申請WO 97/23596中描述的梭子(未示出)。部件包括以下各項中的一項或多項：尖的末端、在端部上的至少一個突起部，和在部件的表面中的至少一個孔。通常，當(dāng)柱塞的端部為圓形或方形、或檢測區(qū)位于柱塞的端部處時，可有利地采用此類部件。具有此類部件的測定裝置的示例性構(gòu)造包括設(shè)置在柱塞的底部和在試劑溶液上方的阻隔件之間的部件。部件可以是可單獨移動的以破壞阻隔件，或可附接到柱塞，使得當(dāng)調(diào)控柱塞時，在柱塞到達(dá)阻隔件之前，部件刺穿阻隔件。在某些實施方案中，當(dāng)部件破壞阻隔件并且與試劑溶液接觸時，部件涂覆有、或以其他方式含有待添加到反應(yīng)混合物中的固體試劑。

任選地，隔膜還包括設(shè)置在吸芯和檢測區(qū)之間的控制線，該控制線包含一般捕獲化合物。參考圖3A，測定裝置300被示出包括在吸芯24和檢測區(qū)26之間的隔膜20上的控制線32。當(dāng)過量的親和性化合物與一般捕獲化合物反應(yīng)時，一般捕獲化合物通常提供顏色改變?？刂凭€可容易地通過窗口34觀察，該窗口34允許用戶視覺上確定樣品是否已行進(jìn)經(jīng)過檢測區(qū)，以及任何捕獲的目標(biāo)分析物是否就緒有待檢測。另選地，吸芯24(全部或部分)可用pH指示劑的弱緩沖溶液處理。例如，在pH從3增加到5時，溴酚藍(lán)發(fā)生黃色到藍(lán)色的轉(zhuǎn)變。對于一旦緩沖就將具有5或高于5的pH的任何樣品，藍(lán)色顏色的出現(xiàn)將用作樣品準(zhǔn)備檢測任何捕獲的目標(biāo)分析物的標(biāo)志。

圖3A至圖3C和圖2A至圖2C還分別示出測定裝置300和測定裝置200，其包括含有螺紋下部36的柱塞16。將螺紋下部36安裝到連接到接收器12的壁13的對準(zhǔn)器38，使得當(dāng)柱塞16繞其豎直軸線旋轉(zhuǎn)時，隔膜20的下部40不旋轉(zhuǎn)，并且所得的撕力破壞遠(yuǎn)離隔膜20的剩余部分的下部40。對準(zhǔn)器38以它可豎直移動的此類方式連接到壁13，例如，用在壁(未示出)中的狹槽中的突出部，使得下部40能夠隨著柱塞16的螺紋下部36的旋轉(zhuǎn)而向下移動，從而在隔膜20中產(chǎn)生物理縫隙。當(dāng)柱塞16隨后壓下時，下部40能夠破壞阻隔件28，并且與至少一種試劑18相互作用；然而，隔膜20的破壞阻止任何反應(yīng)流體向上行進(jìn)到吸芯24，其中已經(jīng)保留任何過量的親和性組分23。

參考圖4A至圖4C，示出了測定裝置400。在該方面，測定裝置400包括包含柱塞16的接收器12和設(shè)置在接收器12內(nèi)的柱塞套管19。該裝置包括附接到柱塞套管19的外表面15的隔膜20。柱塞套管19被構(gòu)造成用于限定在相鄰于隔膜20的檢測區(qū)26的柱塞套管19的一部分中的開口42。在該實施方案中，柱塞套管19通過被安裝到連接到接收器12的壁13的對準(zhǔn)器38被固定在接收器12中。對準(zhǔn)器38以它可豎直移動的此類方式連接到壁13，諸如與在壁(未示出)中的豎直狹槽連通。檢測區(qū)26附接到柱塞26的表面。多種捕獲化合物27被固定在檢測區(qū)26上。如圖4B所示，當(dāng)柱塞16旋轉(zhuǎn)時，僅隔膜20的檢測區(qū)26旋轉(zhuǎn)，并且所得的撕力破壞遠(yuǎn)離隔膜20的其余部分的檢測區(qū)26，并且將檢測區(qū)26移動進(jìn)入柱塞套管19的內(nèi)部中。如圖4C所示，當(dāng)柱塞16隨后壓下時，柱塞30的端部刺穿阻隔件28，并且檢測區(qū)26移動通過破壞的阻隔件28，并且與在接收器12內(nèi)包含的至少一種試劑18流體連通。

另外，柱塞16另外可用于刺穿阻隔件，其中阻隔件包括袋，并且因此使得額外組分能夠同時添加到至少一種試劑18。隔膜20被示出布置有在隔膜20的底部處的吸芯24和在頂部處的樣品入口(未示出)。在該布置中，樣品流體向下流動。在該方面的變型中，測定裝置400能夠簡單地修改，使得樣品入口被放置在圖4A至圖4B中示出的吸芯24的位置，其中吸芯24有待重新安置到檢測區(qū)26上方的位置。此類裝置用作量油計隔膜，其中常見的方法是將隔膜的下端浸入測試溶液中。防止?jié)撛跇悠窛M溢，因為添加的任何過量的樣品應(yīng)當(dāng)從端口回流出來。

參考圖2B、圖3B和圖4B中的每個，在測定裝置的某些實施方案中，當(dāng)柱塞26在接收器12內(nèi)旋轉(zhuǎn)時，柱塞16被構(gòu)造成用于斷開檢測區(qū)26與吸芯24的流體連通。

參考圖6A和圖6B，提供了測定裝置600。柱塞16包括彈簧44，其中當(dāng)柱塞16被壓下時，彈簧44在檢測區(qū)26處與隔膜20接合，并且彈簧44伸展以斷開檢測區(qū)26(在其上固定多種捕獲化合物27)與吸芯24的流體連通，并且使檢測區(qū)26與至少一種試劑18流體連通。

參考圖7A和圖7B，提供了測定裝置700。柱塞16包括彈簧44，其中當(dāng)柱塞16被壓下時，彈簧44與隔膜20接合，并且彈簧44伸展以在部分21處隔膜20中形成破壞，以防止檢測區(qū)26與吸芯24繼續(xù)流體連通。參考圖7C，當(dāng)進(jìn)一步壓下柱塞16時，使檢測區(qū)26(在其上固定多種捕獲化合物27)與至少一種試劑18流體連通。在部分21處隔膜20中的破壞使朝吸芯24的至少一種試劑的流體流動最小化，以從而在檢測期間使背景信號最小化。

在測定裝置(未示出)的另一個實施方案中，至少一種試劑設(shè)置在柱塞的內(nèi)部，并且柱塞被構(gòu)造成用于釋放至少一種試劑的一部分，以使至少一種試劑的該部分與檢測區(qū)流體連通。此類構(gòu)造避免使用將至少一種試劑與隔膜隔離的單獨的阻隔件。

在測定裝置(未示出)的另外的實施方案中，接收器的一部分為不透明的，并且接收器的一部分對光透明。具有接收器的一部分為不透明的優(yōu)點是，使超過對光透明的接收器的一部分的背景信號的檢測最小化。

在第三方面，提供了用于檢測目標(biāo)分析物的方法，該方法包括：

(a)提供測定裝置，該測定裝置包括：

包括表面和樣品入口的接收器；

至少一種試劑；

設(shè)置在接收器內(nèi)并具有表面的柱塞；

附接到柱塞的表面、接收器的表面、或柱塞的表面和接收器的表面兩者的隔膜，隔膜包括提供毛細(xì)力的吸芯；以及

其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)，其中檢測區(qū)位于樣品入口和吸芯之間；

(b)提供疑似含有目標(biāo)分析物的樣品；

(c)通過樣品入口將樣品添加到隔膜上；

(d)允許樣品沿隔膜行進(jìn)直到樣品到達(dá)檢測區(qū)；

(e)通過目標(biāo)分析物與捕獲化合物的反應(yīng)固定目標(biāo)分析物；

(f)使固定的目標(biāo)分析物與至少一種試劑反應(yīng)以產(chǎn)生可檢測的信號；

以及

(g)檢測產(chǎn)生的信號。

以上相對于第一方面和第二方面詳細(xì)描述的測定裝置中的任一個適用于第三方面的方法。

在某些實施方案中，提供樣品還包括將多種親和性組分添加到樣品以與任何目標(biāo)分析物共軛，而在其它實施方案中，隔膜還包括其中設(shè)置多種親和性組分的目標(biāo)共軛區(qū)，其中目標(biāo)共軛區(qū)位于樣品入口和檢測區(qū)之間。

在大多數(shù)實施方案中，檢測區(qū)附接到柱塞的表面和/或附接到接收器的表面。為了使固定的目標(biāo)分析物與至少一種試劑反應(yīng)以產(chǎn)生可檢測的信號，反應(yīng)還包括將力施加到柱塞，以斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。例如，將力施加到柱塞通常包括旋轉(zhuǎn)柱塞、壓下柱塞，或在壓下柱塞后旋轉(zhuǎn)柱塞。

該方法的優(yōu)點是，它與多種定量的檢測方法兼容。例如，在一個實施方案中，產(chǎn)生的信號包括發(fā)光，并且檢測包括使用光度計以測量該發(fā)光。在另一個實施方案中，產(chǎn)生的信號包括熒光，并且檢測包括使用熒光光度計，并且在另外的實施方案中，產(chǎn)生的信號包括顏色變化，并且檢測包括使用色度計。優(yōu)選地，檢測還包括對發(fā)光、熒光或顏色改變進(jìn)行定量。

以下描述測定裝置或使用測定裝置檢測目標(biāo)分析物的方法的各種項目。

實施方案1為包括接收器的測定裝置，接收器包括樣品入口；設(shè)置在接收器內(nèi)并具有第一表面的柱塞；至少一種試劑；附接到柱塞的第一表面的隔膜，隔膜包括其中設(shè)置多種親和性組分的目標(biāo)共軛區(qū)；提供毛細(xì)力的吸芯；以及其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)。檢測區(qū)位于目標(biāo)共軛區(qū)和吸芯之間。

實施方案2為根據(jù)實施方案1所述的測定裝置，其中當(dāng)將力施加到柱塞時，柱塞被構(gòu)造成用于斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。

實施方案3為根據(jù)實施方案1或?qū)嵤┓桨?所述的測定裝置，其中至少一種試劑設(shè)置在接收器中。

實施方案4為根據(jù)實施方案1至實施方案3中任一項所述的測定裝置，其中接收器還包括阻隔件，以將至少一種試劑與柱塞分開。

實施方案5為根據(jù)實施方案4所述的測定裝置，其中阻隔件包括金屬箔或袋。

實施方案6為根據(jù)實施方案4所述的測定裝置，其中柱塞還包括被構(gòu)造成用于刺穿阻隔件的端部。

實施方案7為根據(jù)實施方案4或?qū)嵤┓桨?所述的測定裝置，其中柱塞包括尖的末端。

實施方案8為根據(jù)實施方案1所述的測定裝置，其中至少一種試劑設(shè)置在柱塞的內(nèi)部。

實施方案9為根據(jù)實施方案8所述的測定裝置，其中柱塞被構(gòu)造成用于釋放至少一種試劑的一部分，以使至少一種試劑的該部分與檢測區(qū)流體連通。

實施方案10為根據(jù)實施方案1至實施方案9中任一項所述的測定裝置，其中接收器的一部分為不透明的，并且接收器的一部分對光透明。

實施方案11為根據(jù)實施方案1至實施方案10中任一項所述的測定裝置，其中親和性組分各自包含結(jié)合部分，結(jié)合部分包含抗體、配體、肽適體、核苷酸適體或它們的組合。

實施方案12為根據(jù)實施方案1至實施方案11中任一項所述的測定裝置，其中親和性組分各自包含檢測部分，檢測部分包含辣根過氧化物酶、熒光素酶、堿性磷酸酶或它們的組合。

實施方案13為根據(jù)實施方案1至實施方案12中任一項所述的測定裝置，其中捕獲化合物包含適體、肽、抗體、配體或它們的組合。

實施方案14為根據(jù)實施方案1至實施方案13中任一項所述的測定裝置，其中至少一種試劑包含過氧化氫。

實施方案15為根據(jù)實施方案1至實施方案14中任一項所述的測定裝置，其中至少一種試劑包含蟲熒光素。

實施方案16為根據(jù)實施方案15所述的測定裝置，其中阻隔件包括袋并且袋含有魯米諾。

實施方案17為根據(jù)實施方案1至實施方案16中任一項所述的測定裝置，其中親和性化合物包含與肽適體或核苷酸適體共軛的酶。

實施方案18為根據(jù)實施方案1至實施方案16中任一項所述的測定裝置，其中親和性化合物包含與抗體共軛的酶。

實施方案19為根據(jù)實施方案1至實施方案18中任一項所述的測定裝置，其中至少一種試劑包含水性溶液。

實施方案20為根據(jù)實施方案1至實施方案19中任一項所述的測定裝置，其中隔膜為流體控制膜。

實施方案21為根據(jù)實施方案1至實施方案20中任一項所述的測定裝置，其中隔膜包含硝化纖維。

實施方案22為根據(jù)實施方案1至實施方案21中任一項所述的測定裝置，其中檢測區(qū)包括非織造隔膜。

實施方案23為根據(jù)實施方案1至權(quán)實施方案7中或?qū)嵤┓桨?0至實施方案22中任一項所述的測定裝置，其中當(dāng)柱塞在接收器內(nèi)旋轉(zhuǎn)時，柱塞被構(gòu)造成用于斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通。

實施方案24為根據(jù)實施方案1至實施方案18中任一項所述的測定裝置，其中柱塞還包括與第一表面相對的第二表面以及與第一表面和第二表面連通的端部，其中隔膜與端部接觸并且與第二表面接觸。

實施方案25為根據(jù)實施方案24所述的測定裝置，其中檢測區(qū)位于柱塞的端部處。

實施方案26為根據(jù)實施方案1至實施方案25中任一項所述的測定裝置，其中隔膜還包括設(shè)置在吸芯和檢測區(qū)之間的控制線，控制線包含一般捕獲化合物。

實施方案27為根據(jù)實施方案1至實施方案26中任一項所述的測定裝置，其中接收器包括試管。

實施方案28為根據(jù)實施方案1至實施方案27中任一項所述的測定裝置，其中柱塞包括彈簧，其中當(dāng)柱塞被壓下時，彈簧在檢測區(qū)處與隔膜接合，并且彈簧伸展以斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。

實施方案29為根據(jù)實施方案1至實施方案27中任一項所述的測定裝置，其中隔膜包毛細(xì)管流體導(dǎo)體。

實施方案30為根據(jù)實施方案29所述的測定裝置，其中毛細(xì)管流體導(dǎo)體包括疊堆的流體輸送膜。

實施方案31為包括接收器的測定裝置，接收器包括表面和樣品入口；附接到接收器的表面的隔膜，隔膜包括提供毛細(xì)力的吸芯；設(shè)置在接收器中的至少一種試劑；設(shè)置在接收器內(nèi)并具有表面的柱塞；以及其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)，檢測區(qū)附接到柱塞的表面；其中檢測區(qū)位于樣品入口和吸芯之間。

實施方案32為根據(jù)實施方案31所述的測定裝置，其中當(dāng)將力施加到柱塞時，檢測區(qū)從與隔膜流體連通移動到與試劑流體連通。

實施方案33為根據(jù)實施方案31或?qū)嵤┓桨?2所述的測定裝置，其中接收器的一部分為不透明的，并且接收器的一部分對光透明。

實施方案34為根據(jù)實施方案31至實施方案33中任一項所述的測定裝置，其中親和性組分各自包含結(jié)合部分，結(jié)合部分包含抗體、配體、肽適體、核苷酸適體或它們的組合。

實施方案35為根據(jù)實施方案31至實施方案34中任一項所述的測定裝置，其中親和性組分各自包含檢測部分，檢測部分包含辣根過氧化物酶、熒光素酶、堿性磷酸酶或它們的組合。

實施方案36為根據(jù)實施方案31至實施方案35中任一項所述的測定裝置，其中捕獲化合物包含適體、肽、抗體、配體或它們的組合。

實施方案37為根據(jù)實施方案31至實施方案36中任一項所述的測定裝置，其中至少一種試劑包含過氧化氫。

實施方案38為根據(jù)實施方案31至實施方案37中任一項所述的測定裝置，其中至少一種試劑包含蟲熒光素。

實施方案39為根據(jù)實施方案31至實施方案38中任一項所述的測定裝置，其中親和性化合物包含與肽適體或核苷酸適體共軛的酶。

實施方案40為根據(jù)實施方案31至實施方案38中任一項所述的測定裝置，其中親和性化合物包含與抗體共軛的酶。

實施方案41為根據(jù)實施方案31至實施方案40中任一項所述的測定裝置，其中至少一種試劑包含水性溶液。

實施方案42為根據(jù)實施方案31至實施方案41中任一項所述的測定裝置，其中隔膜為流體控制膜。

實施方案43為根據(jù)實施方案31至實施方案42中任一項所述的測定裝置，其中隔膜包含硝化纖維。

實施方案44為根據(jù)實施方案31至實施方案43中任一項所述的測定裝置，其中檢測區(qū)包括非織造隔膜。

實施方案45為根據(jù)實施方案31至實施方案44中任一項所述的測定裝置，其中當(dāng)柱塞在接收器內(nèi)旋轉(zhuǎn)時，柱塞被構(gòu)造成用于斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。

實施方案46為根據(jù)實施方案31至實施方案45中任一項所述的測定裝置，其中所述接收器還包括阻隔件，以將至少一種試劑與柱塞分開。

實施方案47為根據(jù)實施方案46所述的測定裝置，其中阻隔件包括金屬箔或袋。

實施方案48為根據(jù)實施方案47所述的測定裝置，其中柱塞還包括被構(gòu)造成用于刺穿阻隔件的端部。

實施方案49為根據(jù)實施方案47或?qū)嵤┓桨?8所述的測定裝置，其中柱塞包括尖的末端。

實施方案50為根據(jù)實施方案38所述的測定裝置，其中阻隔件包括袋并且袋含有魯米諾。

實施方案51為根據(jù)實施方案31至實施方案50中任一項所述的測定裝置，其中隔膜還包括設(shè)置在吸芯和檢測區(qū)之間的控制線，控制線包含一般捕獲化合物。

實施方案52為根據(jù)實施方案31至實施方案51中任一項所述的測定裝置，其中接收器包括試管。

實施方案53為用于檢測目標(biāo)分析物的方法，該方法包括(a)提供包括接收器的測定裝置，接收器包括表面和樣品入口；至少一種試劑；設(shè)置在接收器內(nèi)并具有表面的柱塞；附接到柱塞的表面、接收器的表面、或柱塞的表面和接收器的表面兩者的隔膜，隔膜包括提供毛細(xì)力的吸芯；以及其中固定多種捕獲化合物的檢測區(qū)，其中檢測區(qū)位于樣品入口和吸芯之間；(b)提供疑似含有目標(biāo)分析物的樣品；(c)通過樣品入口將樣品添加到隔膜上；(d)允許樣品沿隔膜行進(jìn)直到樣品到達(dá)檢測區(qū)；(e)通過目標(biāo)分析物與捕獲化合物的反應(yīng)固定目標(biāo)分析物；(f)使固定的目標(biāo)分析物與至少一種試劑反應(yīng)以產(chǎn)生可檢測的信號；以及(g)檢測產(chǎn)生的信號。

實施方案54為根據(jù)實施方案53所述的方法，其中提供樣品還包括將多種親和性組分添加到樣品以與任何目標(biāo)分析物共軛。

實施方案55為根據(jù)實施方案53所述的方法，其中隔膜還包括其中設(shè)置多種親和性組分的目標(biāo)共軛區(qū)，該目標(biāo)共軛區(qū)位于樣品入口和檢測區(qū)之間。

實施方案56為根據(jù)實施方案53至實施方案55中任一項所述的測定裝置，其中反應(yīng)還包括將力施加到柱塞，以斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。

實施方案57為根據(jù)實施方案56所述的方法，其中將力施加到柱塞包括旋轉(zhuǎn)柱塞。

實施方案58為根據(jù)實施方案56所述的方法，其中將力施加到柱塞包括壓下柱塞。

實施方案59為根據(jù)實施方案53至實施方案58中任一項所述的方法，其中檢測區(qū)附接到柱塞的表面。

實施方案60為根據(jù)實施方案53至實施方案58中任一項所述的方法，其中檢測區(qū)附接到接收器的表面。

實施方案61為根據(jù)實施方案53至實施方案60中任一項所述的方法，其中產(chǎn)生的信號包括發(fā)光，并且其中檢測包括使用光度計以測量發(fā)光。

實施方案62為根據(jù)實施方案61所述的方法，其中檢測還包括對發(fā)光進(jìn)行定量。

實施方案63為根據(jù)實施方案53至實施方案60中任一項所述的方法，其中所述產(chǎn)生的信號包括熒光。

實施方案64為根據(jù)實施方案63所述的方法，其中檢測還包括對熒光進(jìn)行定量。

實施方案65為根據(jù)實施方案53至實施方案60中任一項所述的方法，其中產(chǎn)生的信號包括顏色改變。

實施方案66為根據(jù)實施方案65所述的方法，其中檢測還包括對顏色改變進(jìn)行定量。

實施方案67為根據(jù)實施方案53至實施方案66中任一項所述的方法，其中接收器的一部分為不透明的，并且接收器的一部分對光透明。

實施方案68為根據(jù)實施方案53至實施方案67中任一項所述的方法，其中親和性組分各自包含結(jié)合部分，結(jié)合部分包含抗體、配體、肽適體、核苷酸適體或它們的組合。

實施方案69為根據(jù)實施方案53至實施方案68中任一項所述的方法，其中親和性組分各自包含檢測部分，檢測部分包含辣根過氧化物酶、熒光素酶、堿性磷酸酶或它們的組合。

實施方案70為根據(jù)實施方案53至實施方案69中任一項所述的方法，其中捕獲化合物包含適體、肽、抗體、配體或它們的組合。

實施方案71為根據(jù)實施方案53至實施方案70中任一項所述的方法，其中至少一種試劑包含過氧化氫。

實施方案72為根據(jù)實施方案53至實施方案71中任一項所述的方法，其中至少一種試劑包含蟲熒光素。

實施方案73為根據(jù)實施方案53至實施方案71中任一項所述的方法，其中親和性化合物包含與肽適體或核苷酸適體共軛的酶。

實施方案74為根據(jù)實施方案53至實施方案71中任一項所述的方法，其中親和性化合物包含與抗體共軛的酶。

實施方案75為根據(jù)實施方案53至實施方案74中任一項所述的方法，其中至少一種試劑包含水性溶液。

實施方案76為根據(jù)實施方案53至實施方案75中任一項所述的方法，其中隔膜為流體控制膜。

實施方案77為根據(jù)實施方案53至實施方案76中任一項所述的方法，其中隔膜包含硝化纖維。

實施方案78為根據(jù)實施方案53至實施方案77中任一項所述的方法，其中檢測區(qū)包括非織造隔膜。

實施方案79為根據(jù)實施方案53至實施方案78中任一項所述的方法，其中當(dāng)柱塞在接收器內(nèi)旋轉(zhuǎn)時，柱塞被構(gòu)造成用于斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。

實施方案80為根據(jù)實施方案53所述的方法，其中至少一種試劑設(shè)置在接收器中。

實施方案81為根據(jù)實施方案53至實施方案80中任一項所述的方法，其中接收器還包括阻隔件，以將至少一種試劑與柱塞分開。

實施方案82為根據(jù)實施方案81所述的方法，其中阻隔件包括金屬箔或袋。

實施方案83為根據(jù)實施方案82所述的方法，其中阻隔件包括袋并且袋含有魯米諾。

實施方案84為根據(jù)實施方案82所述的方法，其中柱塞還包括被構(gòu)造成用于刺穿阻隔件的端部。

實施方案85為根據(jù)實施方案82或?qū)嵤┓桨?3所述的方法，其中柱塞包括尖的末端。

實施方案86為根據(jù)實施方案53所述的方法，其中至少一種試劑設(shè)置在柱塞的內(nèi)部。

實施方案87為根據(jù)實施方案86所述的方法，其中柱塞被構(gòu)造成用于釋放至少一種試劑的一部分，以使至少一種試劑的該部分與檢測區(qū)流體連通。

實施方案88為根據(jù)實施方案53至實施方案87中任一項所述的方法，其中柱塞還包括與第一表面相對的第二表面以及與第一表面和第二表面連通的端部，其中隔膜與端部接觸并且與第二表面接觸。

實施方案89為根據(jù)實施方案88所述的方法，其中檢測區(qū)位于柱塞的端部處。

實施方案90為根據(jù)實施方案53至實施方案89中任一項所述的方法，其中隔膜還包括設(shè)置在吸芯和檢測區(qū)之間的控制線，控制線包含一般捕獲化合物。

實施方案91為根據(jù)實施方案53至實施方案90中任一項所述的方法，其中接收器包括試管。

實施方案92為根據(jù)實施方案53至實施方案91中任一項所述的方法，其中柱塞包括彈簧，其中當(dāng)柱塞被壓下時，彈簧在檢測區(qū)處與隔膜接合，并且彈簧伸展以斷開檢測區(qū)與吸芯的流體連通，并且使檢測區(qū)與至少一種試劑流體連通。

實施方案93為根據(jù)實施方案53至實施方案92中任一項所述的方法，其中隔膜包括毛細(xì)管流體導(dǎo)體。

實施方案94為根據(jù)實施方案93所述的方法，其中毛細(xì)管流體導(dǎo)體包括疊堆的流體輸送膜。

實施例

通過下面的實施例進(jìn)一步說明了本發(fā)明的目的和優(yōu)點，但這些實施例中列舉的具體材料及其量以及其它條件和細(xì)節(jié)不應(yīng)被理解為是對本發(fā)明的不當(dāng)限制。這些實施例僅為了進(jìn)行示意性的說明，并非旨在限制所附權(quán)利要求的范圍。

材料

除非另有說明，否則實施例以及本說明書其余部分中的所有份數(shù)、百分比、比率等均按重量計。除非另外說明，否則所有化學(xué)品均購自諸如密蘇里州圣路易斯的西格瑪奧德里奇化學(xué)公司(Sigma-Aldrich Chemical Company,St.Louis,MO)的化學(xué)品供應(yīng)商。

實施例1-1：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到柱塞的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計(明尼蘇達(dá)州圣保羅的3M公司(3M Company,St.Paul,MN))測量光。

實施例1-2：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到柱塞的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ABTS(2,2'-連氮基雙[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]二銨鹽)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的200μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ABTS包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將無色ABTS氧化成其藍(lán)色自由基陽離子。通過與比色圖表比較、或與色度計諸如3M CLEAN-TRACE色度計(明尼蘇達(dá)州圣保羅的3M公司(3M Company,St.Paul,MN))進(jìn)行比較，可在視覺上估計藍(lán)色顏色的強(qiáng)度。

實施例1-3：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到柱塞的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ADHP(10-乙?；?3,7-二羥基吩嗪)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的250μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ADHP包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將非熒光ADHP氧化成高度熒光的試鹵靈。使用～570nm的激發(fā)波長和～585nm的發(fā)射波長，通過采用標(biāo)準(zhǔn)UV燈或優(yōu)選地采用熒光計照射，可在視覺上估計熒光強(qiáng)度。

實施例1-4：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到柱塞的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。然后將pH為7的緩沖液的1mL等分試樣通過樣品入口添加，以便沖洗流體輸送膜和過量的HRP共軛抗體的檢測區(qū)。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計(明尼蘇達(dá)州圣保羅的3M公司(3M Company,St.Paul,MN))測量光。

實施例1-5：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到柱塞的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ABTS(2,2'-連氮基雙[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]二銨鹽)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的200μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。然后將pH為7的緩沖液的1mL等分試樣通過樣品入口添加，以便沖洗流體輸送膜和過量的HRP共軛抗體的檢測區(qū)。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ABTS包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將無色ABTS氧化成其藍(lán)色自由基陽離子。通過與比色圖表比較、或與色度計諸如3M CLEAN-TRACE色度計(明尼蘇達(dá)州圣保羅的3M公司(3M Company,St.Paul,MN))進(jìn)行比較，可在視覺上估計藍(lán)色顏色的強(qiáng)度。

實施例1-6：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到柱塞的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ADHP(10-乙?；?3,7-二羥基吩嗪)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的250μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。然后將pH為7的緩沖液的1mL等分試樣通過樣品入口添加，以便沖洗流體輸送膜和過量的HRP共軛抗體的檢測區(qū)。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ADHP包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將非熒光ADHP氧化成高度熒光的試鹵靈。使用～570nm的激發(fā)波長和～585nm的發(fā)射波長，通過采用標(biāo)準(zhǔn)UV燈或優(yōu)選地采用熒光計照射，可在視覺上估計熒光強(qiáng)度。

實施例2-1：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例2-2：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。然后將pH為7的緩沖液的1mL等分試樣通過樣品入口添加，以便沖洗流體輸送膜和過量的HRP共軛抗體的檢測區(qū)。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例2-3：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。然后將pH為5的緩沖液的1mL等分試樣通過樣品入口添加，以便沖洗流體輸送膜和過量的HRP共軛抗體的檢測區(qū)。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例2-4：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。然后將pH為9的緩沖液的1mL等分試樣通過樣品入口添加，以便沖洗流體輸送膜和過量的HRP共軛抗體的檢測區(qū)。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例2-5：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ABTS(2,2'-連氮基雙[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]二銨鹽)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的400μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ABTS包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將無色ABTS氧化成其藍(lán)色自由基陽離子。通過與比色圖表、或與色度計諸如3M CLEAN-TRACE色度計進(jìn)行比較，可在視覺上估計藍(lán)色顏色的強(qiáng)度。

實施例2-6：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ADHP(10-乙?；?3,7-二羥基吩嗪)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的800μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ADHP包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將非熒光ADHP氧化成高度熒光的試鹵靈。使用～570nm的激發(fā)波長和～585nm的發(fā)射波長，通過采用標(biāo)準(zhǔn)UV燈或優(yōu)選地采用熒光計照射，可在視覺上估計熒光強(qiáng)度。

實施例3-1：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的250μL等分試樣與1mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例3-2：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ABTS(2,2'-連氮基雙[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]二銨鹽)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的100μL等分試樣與1mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ABTS包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將無色ABTS氧化成其藍(lán)色自由基陽離子。通過與比色圖表、或與色度計諸如3M CLEAN-TRACE色度計進(jìn)行比較，可在視覺上估計藍(lán)色顏色的強(qiáng)度。

實施例3-3：

如在美國專利號8,697,374中描述的艱難梭狀芽胞桿菌的抗體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。艱難梭狀芽胞桿菌的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ADHP(10-乙?；?3,7-二羥基吩嗪)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的250μL等分試樣與1mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何艱難梭狀芽胞桿菌具有足夠長的時間與HRP共軛抗體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)一整圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ADHP包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將非熒光ADHP氧化成高度熒光的試鹵靈。使用～570nm的激發(fā)波長和～585nm的發(fā)射波長，通過采用標(biāo)準(zhǔn)UV燈或優(yōu)選地采用熒光計照射，可在視覺上估計熒光強(qiáng)度。

實施例4-1：

黃曲霉毒素結(jié)合肽與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。黃曲霉毒素的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。檢測區(qū)通過兩個弱化區(qū)域(例如穿孔)在任一側(cè)上結(jié)合，這不抑制流體輸送，但這當(dāng)物理按壓時將破壞。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的50μL等分試樣與0.5mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜向下芯吸直到它到達(dá)下方的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何黃曲霉毒素具有足夠長的時間與HRP共軛肽反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)四分之一圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件，并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液，并且將隔膜的檢測區(qū)向下移動進(jìn)入試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例4-2：

黃曲霉毒素結(jié)合肽與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。黃曲霉毒素的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。檢測區(qū)通過兩個弱化區(qū)域(例如穿孔)在任一側(cè)上結(jié)合，這不抑制流體輸送，但這當(dāng)物理按壓時將破壞。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的50μL等分試樣與0.5mL的pH為8的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜向下芯吸直到它到達(dá)下方的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何黃曲霉毒素具有足夠長的時間與HRP共軛肽反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)四分之一圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件，并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液，并且將隔膜的檢測區(qū)向下移動進(jìn)入試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例4-3：

黃曲霉毒素結(jié)合肽與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。黃曲霉毒素的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。檢測區(qū)通過兩個弱化區(qū)域(例如穿孔)在任一側(cè)上結(jié)合，這不抑制流體輸送，但這當(dāng)物理按壓時將破壞。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的50μL等分試樣與0.5mL的pH為9的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜向下芯吸直到它到達(dá)下方的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何黃曲霉毒素具有足夠長的時間與HRP共軛肽反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)四分之一圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件，并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液，并且將隔膜的檢測區(qū)向下移動進(jìn)入試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例5-1：

原肌球蛋白結(jié)合肽與堿性磷酸酶(AP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。原肌球蛋白的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。化學(xué)發(fā)光AP底物，諸如CDP Star(賽默飛世爾科技公司的應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(ABI,Thermo))包含在任選地含有表面活性劑和/或化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑諸如Sapphire II或Emerald II的試劑溶液內(nèi)。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的500μL等分試樣與0.5mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜向上行進(jìn)直到它到達(dá)在頂部處的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何原肌球蛋白具有足夠長的時間與AP共軛肽反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)四分之一圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且向下移動隔膜的檢測區(qū)進(jìn)入試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何AP水解具有光發(fā)射的CDP-Star底物。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例5-2：

原肌球蛋白結(jié)合肽與堿性磷酸酶(AP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。原肌球蛋白的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。化學(xué)發(fā)光AP底物，諸如CDP Star(賽默飛世爾科技公司的應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(ABI,Thermo))包含在任選地含有表面活性劑和/或化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑諸如Sapphire II或Emerald II的試劑溶液內(nèi)。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的500μL等分試樣與0.5mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜向上行進(jìn)直到它到達(dá)在頂部處的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何原肌球蛋白具有足夠長的時間與AP共軛肽反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在1分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)四分之一圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且向下移動隔膜的檢測區(qū)進(jìn)入試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何AP水解具有光發(fā)射的CDP-Star底物。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例5-3：

原肌球蛋白結(jié)合肽與堿性磷酸酶(AP)共軛，并且在附連到柱塞的表面的硝化纖維隔膜上沉積。原肌球蛋白的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。化學(xué)發(fā)光AP底物，諸如CDP Star(賽默飛世爾科技公司的應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(ABI,Thermo))包含在任選地含有表面活性劑和/或化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑諸如Sapphire II或Emerald II的試劑溶液內(nèi)。吸芯含有小量的以其黃色、酸形式的溴酚藍(lán)。樣品溶液的500μL等分試樣與0.5mL的pH為7的緩沖液混合，并且經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜向上行進(jìn)直到它到達(dá)在頂部處的吸芯。這通過在吸芯上的藍(lán)色顏色(由于溴酚藍(lán))的出現(xiàn)展示，這可通過窗口可視化。在該時間期間，存在于樣品中的任何原肌球蛋白具有足夠長的時間與AP共軛肽反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在10分鐘之后，柱塞旋轉(zhuǎn)四分之一圈，以引起隔膜的流體路徑的破壞。然后壓下柱塞，穿刺箔密封件并且向下移動隔膜的檢測區(qū)進(jìn)入試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何AP水解具有光發(fā)射的CDP-Star底物。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例6-1：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到接收器的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。魯米諾包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許魯米諾包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的任何HRP有利于通過過氧化氫氧化魯米諾并且產(chǎn)生具有光發(fā)射的3-氨基鄰苯二甲酸酯。通過手持式光度計諸如3M CLEAN-TRACE光度計測量光。

實施例6-2：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到接收器的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ABTS(2,2'-連氮基雙[3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]二銨鹽)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ABTS包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將無色ABTS氧化成其藍(lán)色自由基陽離子。通過與比色圖表、或與色度計諸如3M CLEAN-TRACE色度計進(jìn)行比較，可在視覺上估計藍(lán)色顏色的強(qiáng)度。

實施例6-3：

具體地結(jié)合到青霉素G的適體與辣根過氧化物酶(HRP)共軛，并且沉積在附連到接收器的表面的流體輸送膜上。青霉素G的捕獲抗體沉積在檢測區(qū)上。ADHP(10-乙?；?3,7-二羥基吩嗪)包含在箔袋內(nèi)，該箔袋定位在柱塞下面，并且使柱塞與含過氧化氫試劑溶液和任選地表面活性劑分開。樣品溶液的100μL等分試樣經(jīng)由吸移管通過接收器的樣品入口引入，并且允許沿流體輸送膜芯吸直到它到達(dá)在其它側(cè)上的吸芯，通常為5分鐘。在該時間期間，存在于樣品中的任何青霉素G具有足夠長的時間與HRP共軛適體反應(yīng)，沿該膜行進(jìn)，并且然后結(jié)合到捕獲抗體，其中它將保留在檢測區(qū)中。在5分鐘之后，壓下柱塞，穿刺箔密封件并且允許ADHP包含在袋內(nèi)以接觸試劑溶液。保留在檢測區(qū)中的HRP將非熒光ADHP氧化成高度熒光的試鹵靈。使用～570nm的激發(fā)波長和～585nm的發(fā)射波長，通過采用標(biāo)準(zhǔn)UV燈或優(yōu)選地采用熒光計照射，可在視覺上估計熒光強(qiáng)度。

雖然以某些示例性實施方案詳細(xì)描述了說明書，但應(yīng)當(dāng)理解，本領(lǐng)域的技術(shù)人員在理解上述內(nèi)容后，可容易地想到這些實施方案的改變、變型和等同物。此外，本文引用的所有出版物和專利均以引用的方式全文并入本文中，如同被特別地和單獨地指出的各個單獨的出版物或?qū)＠家砸梅绞讲⑷胍话恪Ｒ衙枋隽烁鞣N示例性實施方案。這些實施方案和其它實施方案在以下權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。