屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒，其特征在于：它包括磁微粒標記的抗人IgE抗體試劑管（1）、生物素標記的屋塵螨過敏原試劑管（2）、辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素試劑管（3）、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管（4）、底物液一魯米諾試劑管（5）、底物液二過氧化物試劑管（6）和6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管（7）。其將極大提高過敏原檢測的靈敏度和準確性。
【專利說明】屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒

【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒。

【背景技術】
[0002]塵螨是誘發(fā)過敏性哮喘、過敏性鼻炎和濕疹過敏性結膜炎等過敏性疾病的重要變應原。近年研究證實塵螨與過敏性疾病關系密切，根據(jù)美國、新西蘭和澳大利亞等許多國家的調查相繼證實了塵螨是許多國家重要的過敏原之一。目前全球已有幾百項研究證實了塵螨與哮喘等過敏性疾病之間的密切關系。
[0003]塵螨過敏的診斷主要依賴免疫學檢測。目前臨床上有許多體內和體外的免疫學檢測方法，包括塵螨變應原皮膚試驗、血清塵螨特異性IgE測定、塵螨支氣管或鼻腔激發(fā)試驗、肥大細胞脫顆粒試驗、嗜酸性粒細胞陽離子蛋白水平測定等。塵螨過敏患者的血清特異性抗體水平增高?？赏ㄟ^ELISA或RAST方法檢測塵螨特異性抗體。有臨床意義的指標包括特異性IgE、IgG和IgA抗體。檢測特異性抗體水平可以幫助確診塵螨過敏及其過敏程度，同時可作為臨床療效評價的指標。
[0004]目前臨床多采用的ELISA方法，由于其局限性，檢測靈敏度和準確性遠不如化學發(fā)光的方法，而且我們克服了 ELISA的非均相反應所帶來的本底高特異性不好的缺點。


【發(fā)明內容】

[0005]本實用新型的目的在于克服上述不足，提供一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒，其將極大提高過敏原檢測的靈敏度和準確性。
[0006]本實用新型的目的是這樣實現(xiàn)的:
[0007]一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒，它包括外包裝盒，所述外包裝盒內設置泡沫墊和說明書，所述泡沫墊上放置有磁微粒標記的抗人IgE抗體試劑管、生物素標記的屋塵螨過敏原試劑管、辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素試劑管、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管、底物液一魯米諾試劑管、底物液二過氧化物試劑管和6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管，所述6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管含量分別為0.35、0.7,3.5,17.5、50、100IU/ml。
[0008]本實用新型所采用的反應容器為常見的化學發(fā)光反應平底試管。
[0009]本實用新型的所設計的檢測方法為磁微?；瘜W發(fā)光檢測方法，采用捕獲法來實現(xiàn)對屋塵螨過敏原特異性IgE抗體的定量測定。
[0010]本實用新型的核心內容如下:
[0011](I)、加50 μ I磁微粒標記的抗人IgE抗體試劑至化學發(fā)光反應管底；
[0012](2)、再加50 μ I標準品、待檢血清分別至化學發(fā)光反應管底；
[0013](3)、用多管均勻混合器輕輕振蕩化學發(fā)光反應管30s后，置37°C恒溫箱反應15分鐘；
[0014](4)、從恒溫箱取出反應管放至磁分離器上，確保每個化學發(fā)光反應管底都與分離器表面接觸，沉淀2-3分鐘；緩慢的倒轉分離器倒出上清液，用力在吸水紙上將化學發(fā)光反應管內的液體拍干，以除去粘在反應管中的液滴；
[0015](5)、清洗濃縮液用純化水稀釋40倍后，加300-500 μ I稀釋后的清洗液至每一化學發(fā)光反應管中，置多管均勻混合器上輕輕振蕩混勻30s ；
[0016](6)、重復步驟(4)、(5)、(4) 一遍；
[0017](7)、加50 μ I生物素標記的屋塵螨過敏原試劑至化學發(fā)光反應管底；
[0018](8)、再加50 μ I辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素至化學發(fā)光反應管底；
[0019](9)、用多管均勻混合器輕輕振蕩化學發(fā)光反應管30s后，置37°C恒溫箱反應15分鐘；
[0020](10)、重復步驟(4)、(5)、(6)—遍；
[0021](11)、加50 μ I底物液I魯米諾試劑至化學發(fā)光反應管底，再加50 μ I底物液II過氧化物試劑至化學發(fā)光反應管底，手動輕輕混勻(或放置在多管均勻混合器上輕輕震蕩5-lOs)，使用準備好的化學發(fā)光檢測儀進行檢測；
[0022](12)、根據(jù)校準品采用四參數(shù)擬合方式擬合一條曲線，通過曲線計算待檢樣本所含的過敏原特異性IgE抗體的濃度。
[0023]與現(xiàn)有技術相比，本實用新型的有益效果是:
[0024]本實用新型用于檢測人體內含有的屋塵螨過敏原特異性IgE抗體的含量，以此來確定個體是否對屋塵螨過敏原產(chǎn)生免疫反應，是診斷引起過敏性哮喘、過敏性鼻炎、濕疹過敏性結膜炎的重要參考指標，對于改善生活環(huán)境、生活質量有很重要的參考價值。所采用的磁微粒化學發(fā)光免疫分析法，具有操作方便、靈敏度高、準確性好、快速和無污染的特點。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1為本實用新型結構示意圖。
[0026]圖2為圖1的內部俯視圖。
[0027]其中:磁微粒標記的抗人IgE抗體試劑管1、生物素標記的屋塵螨過敏原試劑管2、辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素試劑管3、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管4、底物液一魯米諾試劑管5、底物液二過氧化物試劑管6、含人IgE抗體的校準品試劑管7、外包裝盒8、泡沫墊9、說明書10。

【具體實施方式】
[0028]實施例1
[0029]參見圖1和2，本實用新型涉及的一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒，它包括外包裝盒8，所述外包裝盒8內設置泡沫墊9和說明書10，所述泡沫墊9上放置有磁微粒標記的抗人IgE抗體試劑管1、生物素標記的屋塵螨過敏原試劑管2、辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素試劑管3、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管4、底物液一魯米諾試劑管5、底物液二過氧化物試劑管6和6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管7，所述6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管7含量分別為0.35,0.7,3.5、17.5、50、100IU/ml。
【權利要求】
1.一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒，它包括外包裝盒(8)，所述外包裝盒(8)內設置泡沫墊(9)和說明書(10)，其特征在于:所述泡沫墊(9)上放置有磁微粒標記的抗人IgE抗體試劑管(I)、生物素標記的屋塵螨過敏原試劑管(2)、辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素試劑管(3)、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管(4)、底物液一魯米諾試劑管(5)、底物液二過氧化物試劑管(6)和6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管(7)。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種屋塵螨過敏原特異性IgE抗體定量檢測試劑盒，其特征在于:所述6瓶含人IgE抗體的校準品試劑管(7)含量分別為0.35,0.7,3.5、17.5、50、100IU/ml。
【文檔編號】G01N21/76GK204086275SQ201420455788
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年8月13日 優(yōu)先權日:2014年8月13日
【發(fā)明者】葉興旺, 奚偉紅 申請人:江蘇福隆生物技術有限公司