一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒及其測定方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒，包括高氯酸鹽標準溶液、18O標記高氯酸根溶液、乙酸溶液、乙腈、乙酸銨溶液和固相萃取C18柱。本發(fā)明還提供了一種檢測食品中高氯酸根離子的方法：（1）樣品提??；（2）凈化；（3）采用反相高分離能力、高信噪比的分析方法進行準確定性與定量。本試劑盒采用乙酸溶液作為樣品提取溶劑；采用固相萃取柱凈化，具有較好的回收率及凈化效果；采用軟電離技術(shù)進行測定，內(nèi)標法定量，達到高選擇性、高靈敏度、應用范圍廣的效果，具有極強的專屬性，廣泛應用于食品中高氯酸根離子的測定。
【專利說明】一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒及其測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化學物質(zhì)的理化分析領(lǐng)域，具體涉及一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒及其測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]高氯酸鹽是指含有高氯酸根([ClO4D的鹽類，既有天然存在，也有人工合成。高氯酸根離子具有與碘離子相似的電荷和離子半徑，對碘離子的轉(zhuǎn)運蛋白具有比碘更高的親和力，因而能夠抑制碘的吸收，削弱甲狀腺功能，導致人類新陳代謝功能絮亂、影響胎兒和嬰兒神經(jīng)中樞的正常生長和發(fā)育，孕婦嚴重的甲狀腺功能不足會導致胎兒的呆小癥。由于高氯酸鹽的高溶解低吸附性，容易通過水源灌溉，植物吸收、累積，最終傳遞給人類。其污染問題已引起了環(huán)境學家和衛(wèi)生學家的極大重視。國外已有研究人員對飲用水、水源、奶類、蔬菜以及營養(yǎng)補充劑等中的高氯酸鹽含量進行了調(diào)查，我國也有研究人員對北京市飲用水及水源高氯酸鹽污染情況進行了檢測。2009年4月，美國疾病控制與預防中心研究人員報道嬰兒奶粉受到高氯酸鹽污染的問題，引起了人們極大的關(guān)注。因此，建立快速準確測定食品中高氯酸鹽含量的方法已迫在眉睫。
[0003]目前對高氯酸鹽的的測定方法可以概括地劃分為離子色譜法、表面增強拉曼散射法、離子色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)和高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法等。雖然離子色譜-電導檢測法可以用來測定水中痕量的高氯酸根離子，但是色譜的保留時間并不是唯一離子的特征，還需要進一步的實驗才能夠完全確定。而且電導檢測器缺乏選擇性，當樣品中含有其他離子時，此方法容易出現(xiàn)假陽性。表面增強拉曼散射法是以一種可實現(xiàn)水環(huán)境中高氯酸根的原位、實時及高靈敏度的檢測而發(fā)展起來的分析方法。但該技術(shù)的重現(xiàn)性較差導致定量分析困難。國內(nèi)外有關(guān)食品中高氯酸根離子的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜檢測方法文獻報道極少，檢測對象主要為單一的瓶裝水、牛奶或奶粉基質(zhì)，尚未見到可以檢測包括瓶裝水、牛奶、奶粉、谷物、水產(chǎn)品、動物組織等食品中高氯酸根離子的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜檢測方法和系統(tǒng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒及其測定方法，該方法適用于瓶裝水、水果、牛奶、奶粉、谷物、水產(chǎn)品、動物組織等食品，且方法科學合理，靈敏度高、選擇性高、應用范圍廣和具有極強的專屬性，完全滿足國內(nèi)外檢測限量的需要。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006]本發(fā)明的一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒，包括高氯酸鹽標準溶液、18O標記高氯酸根溶液、乙酸溶液、乙腈、乙酸銨溶液和固相萃取C18柱。
[0007]優(yōu)選的，所述高氯酸鹽標準溶液的CAS No為7601-89-0，純度為100%，濃度為1000mg/L。[0008]優(yōu)選的，所述18O標記高氯酸根溶液為含Cl18CV的溶液，所述18O標記高氯酸根溶液的純度為90%、濃度為100 μ g/L。
[0009]優(yōu)選的，所述乙酸溶液由乙酸和水組成，所述乙酸與所述水的體積比為1:100。
[0010]優(yōu)選的，所述乙酸銨溶液包含乙酸銨和水，所述乙酸銨溶液的摩爾濃度為0.1mol/L。稱取7.708g乙酸銨，用水定容至IOOOmL即可或相同配比配制的溶液。
[0011]優(yōu)選的,所述固相萃取C18柱的型號為waters,填料量為200mg, 3mL或相當者。
[0012]本發(fā)明還提供了一種高分離能力、高靈敏度、高選擇性，采用質(zhì)量數(shù)進行定性與定量的分析方法測定食品中的高氯酸根離子，按如下步驟進行:
[0013](I)樣品制備與保存；
[0014](2)將步驟(I)中所制備得到的樣品加入所述18O標記高氯酸根溶液，
[0015]若所述食品為瓶裝水，則直接進行液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定；
[0016]若所述食品為非瓶裝水，則再加入所述乙酸溶液進行提??；
[0017](3)凈化:吸取1.0mL步驟(2)中得到的提取上清液過固相萃取C18柱，棄去流出液，吸取1.5mL上清液過固相萃取C18柱，收集流出液，渦旋振蕩30s，供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定；
[0018](4)檢測:
[0019]液相色譜條件:
[0020]a)色譜柱:IC_Pak? Anion HR 柱,6 μ m, 4.6mmX 75mm(內(nèi)徑)或相當者；
[0021]b)流動相:乙腈 +0.lmol/L 乙酸銨溶液=(60+40，V1A2)；
[0022]c)流速:700 μ L/min ；
[0023]d)柱溫:40°C ;
[0024]e)進樣量:IOyL ;
[0025]質(zhì)譜條件:
[0026]a)離子源:電噴霧離子源(ESI);
[0027]b)掃描方式:負離子掃描；
[0028]c)監(jiān)測模式:多反應監(jiān)測(MRM);
[0029]d)氣簾氣(CUR):209kPa ；
[0030]e)霧化氣(GSl):414kPa ；
[0031]f)輔助加熱氣(GS2):483kPa ；
[0032]g)碰撞氣(CAD):高；
[0033]h)電噴霧電壓(IS):-1000V ;
[0034]i)離子源溫度(TEM):5500C ；
[0035]j)監(jiān)測離子對、碰撞能量、去簇電壓、采集時間和保留時間見下表:
[0036]
【權(quán)利要求】
1.一種檢測食品中高氯酸根離子的試劑盒，其特征在于，包括高氯酸鹽標準溶液、18O標記高氯酸根溶液、乙酸溶液、乙腈、乙酸銨溶液和固相萃取C18柱。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述高氯酸鹽標準溶液的CASNo為7601-89-0，純度為 100%，濃度為 1000mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述18O標記高氯酸根溶液為含Cl18O4-的溶液，所述18O標記高氯酸根溶液的純度為90%、濃度為100 μ g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述乙酸溶液由乙酸和水組成，所述乙酸與所述水的體積比為1:100。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述乙酸銨溶液包含乙酸銨和水，所述乙酸銨溶液的摩爾濃度為0.lmol/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述固相萃取C18柱的型號為waters，填料量為200mg，3mL。
7.權(quán)利要求1-6之一所述試劑盒用于檢測食品中高氯酸根離子的測定方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)樣品制備與保 存； (2)將步驟(1)中所制備得到的樣品加入所述18O標記高氯酸根溶液， 若所述食品為瓶裝水，則直接進行液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定； 若所述食品為非瓶裝水，則再加入所述乙酸溶液進行提?。? (3)凈化:吸取1.0mL步驟(2)中得到的提取上清液過所述固相萃取C18柱，棄去流出液，吸取1.5mL上清液過所述固相萃取C18柱，收集流出液，渦旋振蕩30s ； (4)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定: 液相色譜條件: a)色譜柱:IC_Pak?Anion HR 柱，6 μ m, 4.6mmX 75mm(內(nèi)徑)； b)流動相:乙腈+0.lmol/L乙酸銨溶液=(60+40，V1A2)；
c)流速:700μ L/min ； d)柱溫:40°C； e)進樣量:10yL; 質(zhì)譜條件: a)離子源:電噴霧離子源(ESI)； b)掃描方式:負離子掃描； c)監(jiān)測模式:多反應監(jiān)測(MRM); d)氣簾氣(CUR):209kPa ； e)霧化氣(GSl):414kPa ； f)輔助加熱氣(GS2):483kPa ； g)碰撞氣(CAD):高； h)電噴霧電壓(IS):-1000V ； i)離子源溫度(TEM):5500C ； j)監(jiān)測離子對、碰撞能量、去簇電壓、采集時間和保留時間見下表:
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的測定方法，其特征在于，步驟(5)所述的定性判斷按如下方法進行:相對離子豐度的最大允許偏差不超過以下規(guī)定范圍，則可判斷樣品中存在對應的待測物: 若相對離子豐度為> 50%，則允許的相對偏差為±20% ; 若相對離子豐度為> 20%~50%，則允許的相對偏差為±25% ； 若相對離子豐度為> 10%~20%，則允許的相對偏差為±30% ； 若相對離子豐度為≥10%，則允許的相對偏差為±50%。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的測定方法，其特征在于，步驟(5)所述的定量結(jié)果按如下方法計算: 用質(zhì)譜數(shù)據(jù)處理機或按式(I)計算試樣中藥物的含量，計算結(jié)果需扣除空白值:
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的測定方法，其特征在于，所述食品包括瓶裝水、水果、牛奶、奶粉、谷物、水產(chǎn)品和動物組織中的一種或多種。
【文檔編號】G01N30/02GK104007189SQ201410040386
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年1月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月27日
【發(fā)明者】吳映璇, 林峰, 邵琳智, 歐陽少倫, 姚仰勛, 謝敏玲 申請人:廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心