專利名稱：單硝酸異山梨酯注射液中1,2-丙二醇的鑒別和含量測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物分析領(lǐng)域，具體涉及單硝酸異山梨酯注射液中1，2-丙二醇的鑒別和含量測定方法。
背景技術(shù)：
單硝酸異山梨酯適應(yīng)于冠心病的長期治療；心絞痛的預(yù)防；心肌梗死后持續(xù)心絞痛的治療；與洋地黃和/或利尿劑聯(lián)合應(yīng)用，治療慢性充血性心力衰竭；冠心病的長期治療和預(yù)防心絞痛發(fā)作，也適用于心肌梗死后的治療。靜脈注射后約9分鐘內(nèi)分布到總體液中，分布容積為0.6 0.7L/kg。單硝酸異山梨酯的蛋白結(jié)合率〈5%，平均清除半衰期為4 5小時。單硝酸異山梨酯注射液中主要輔料有丙二醇(約20%)，丙二醇是一種廣泛應(yīng)用于注射用藥物制劑中的藥用輔料，丙二醇能夠在胃腸道迅速吸收，也能在受損皮膚處局部吸收，其在肝中代謝成乳酸和丙酮酸，也可在尿中以原型排除。丙二醇大量攝取會引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的不良反應(yīng)。尤其是對新生兒和兒童，其興奮效應(yīng)約為乙醇的三分之一，含35 %丙二醇的處方能致溶血。另外，2006年我國曾發(fā)生使用二甘醇代替丙二醇用于藥品生產(chǎn)而導(dǎo)致嚴(yán)重醫(yī)療事故的“齊二藥事件”。為杜絕此類事件的再次發(fā)生，對于注射液中添加丙二醇作助溶劑的，為了安全起見，增加了對丙二醇的含量控制，本發(fā)明的發(fā)明人欲提供一種采用氣相色譜法對注射液中丙二醇進(jìn)行鑒別以及進(jìn)行含量測定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種單硝酸異山梨酯注射液中1，2-丙二醇的鑒別方法及含量測定方法，本發(fā)明鑒別方法及含量測定方法具有方法靈敏，可靠，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明方法是為了檢測單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇，具體為1，2_丙二醇，其分子式為C3H8O2。本發(fā)明鑒別方法采用氣相色譜法進(jìn)行檢測，檢測條件如下:①實(shí)驗(yàn)材料的處理:(I)供試品溶液的制備:精密量取待測單硝酸異山梨酯注射液1ml，加無水乙醇定容至單硝酸異山梨酯注射液的10-50倍體積量(優(yōu)選50倍體積量)，搖勻，作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備:精密稱取丙二醇對照品約lOOmg，加無水乙醇溶解并稀釋制成l-4mg/ml (優(yōu)選4mg/ml)的溶液,搖勻，作為對照品溶液。②將處理好的實(shí)驗(yàn)材料用GC-FID進(jìn)行分析: GC的色譜柱采用PEG-20M ；進(jìn)樣口溫度為200°C 250°C，優(yōu)選為220°C ；載氣:N2,載氣流速25cm/s 35cm/s,優(yōu)選為30cm/s ；
進(jìn)樣方式采用不分流進(jìn)樣。程序升溫，柱溫初始為110°C 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升溫至200 220°C，保持I 5min。作為優(yōu)選，柱溫初始為120°C，保持lmin，以10°C /min升溫至 200°C，保持 lmin。FID檢測器溫度為200°C 300°C，優(yōu)選為250°C，氫氣流量:30-50ml/min，優(yōu)選為40ml/min ;空氣流量:300-500ml/min,優(yōu)選為 400ml/min ;尾吹流量為 20ml/min 40ml/min,優(yōu)選為 25ml/min。作為優(yōu)選，所述PEG-20M色譜柱的規(guī)格為30mX0.53mmX I μ m ;作為優(yōu)選，所述進(jìn)樣方式為直接進(jìn)樣，進(jìn)樣量為Ι.Ομ I。本發(fā)明鑒別方法的優(yōu)點(diǎn)是:操作簡便；測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠；專屬性更強(qiáng)；主峰保留時間約5分鐘，檢測時間較短。在上述鑒別方法的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還可以利用上述檢測條件用于測定單硝酸異山梨酯注射液中丙二醇的含量?？煽焖佟⒑啽?、準(zhǔn)確的確定單硝酸異山梨酯注射液中丙二醇的含量，實(shí)現(xiàn)控制產(chǎn)品質(zhì)量的目的。通過控制關(guān)鍵檢測參數(shù)實(shí)現(xiàn)簡便，迅速、精確檢測的目的，本發(fā)明方法操作簡便；測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠；專屬性更強(qiáng)；丙二醇色譜峰保留時間在5分鐘左右，檢測時間較短；為檢測丙二醇、控制產(chǎn)品質(zhì)量安全提供了一種全新的選擇。


圖1丙二醇對照品溶液氣相圖譜。圖2缺丙二醇的單硝酸異山梨酯注射液的氣相圖譜。圖3單硝酸異山梨酯注射液中丙二醇的氣相圖譜。圖4丙二醇線性圖。
具體實(shí)施例方式以下通過對本發(fā)明具體實(shí)施方式
的描述說明，進(jìn)一步說明本方面的特征和優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明提供的單硝酸異山梨酯注射液中丙二醇的的鑒別和含量測定方法，即用氣相色譜法-氫離子火焰檢測器對單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇進(jìn)行分析。氣相色譜儀的原理是以氣體作為流動相，當(dāng)樣品進(jìn)入氣化室后，被流動相帶入色譜柱內(nèi)，樣品中各組分在流動相和固定相之間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，由于樣品中各組分的性質(zhì)不同，在色譜柱中兩相間的分配系數(shù)和吸附系數(shù)不同，在流動相帶動下各組分在柱子中的運(yùn)行速度也不同，經(jīng)過一定的柱長后，各組分在柱子末端分離開，然后接在柱子后的檢測器將組分按順序檢測出來。FID的工作原理是以氫氣在空氣中燃燒為能源，載氣攜帶被分析組分和可燃?xì)鈿錃鈴膰娮爝M(jìn)入檢測器，助燃?xì)饪諝鈴乃闹軐?dǎo)入。被分析組分在氫氣-空氣火焰中被解離成正負(fù)離子，在極化電壓形成的電場中，正負(fù)離子向各自相反的電極移動，形成的離子流被收集極吸收，微弱的離子流經(jīng)過高阻放大可以獲得可測量的電信號，產(chǎn)生的電流與燃燒的樣品量成正比，因此可以根據(jù)信號的大型對有機(jī)化合物進(jìn)行定量分析。其主要特點(diǎn)是對幾乎所有揮發(fā)性的有機(jī)化合物均有響應(yīng)，而且靈敏度高、積留小、線性范圍寬、死體積小、響應(yīng)快，可以和毛細(xì)管柱直接聯(lián)用。
經(jīng)試驗(yàn)考察確定本發(fā)明鑒別方法和含量測定方法的色譜條件如下:①實(shí)驗(yàn)材料的處理:(I)供試品溶液的制備:精密量取待測單硝酸異山梨酯注射液1ml，加無水乙醇定容至單硝酸異山梨酯注射液的10-50倍體積量(優(yōu)選50倍體積量)，搖勻，作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備:精密稱取丙二醇對照品約lOOmg，加無水乙醇溶解并稀釋制成l-4mg/ml (優(yōu)選4mg/ml)的溶液,搖勻，作為對照品溶液。②將處理好的實(shí)驗(yàn)材料用GC-FID進(jìn)行分析:GC的色譜柱采用PEG-20M ；進(jìn)樣口溫度為200°C 250°C，優(yōu)選為220°C ；載氣:N2,載氣流速25cm/s 35cm/s,優(yōu)選為30cm/s ；進(jìn)樣方式采用不分流進(jìn)樣。程序升溫，柱溫初始為110°C 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升溫至200 220°C，保持I 5min。作為優(yōu)選，柱溫初始為120°C，保持lmin，以10°C /min升溫至 200°C，保持 lmin。FID檢測器溫度為200°C 300°C，優(yōu)選為250°C ;氫氣流量:30-50ml/min，優(yōu)選為40ml/min ;空氣流量:300-500ml/min,優(yōu)選為 400ml/min ;尾吹流量為 20ml/min 40ml/min,優(yōu)選為 25ml/min。作為優(yōu)選，所述PEG-20M色譜柱的規(guī)格為30mX0.53mmX I μ m ;作為優(yōu)選，所述進(jìn)樣方式為直接進(jìn)樣，進(jìn)樣量為Ι.Ομ I。丙二醇對照品:批號:0001450481，規(guī)格:250ml/ 瓶，ACS reagent,來源:Sigma-Aldricho以下為驗(yàn)證本發(fā)明鑒別方法和含量測定方法的測定效果的實(shí)驗(yàn)以證明其有益效果。以下驗(yàn)證試驗(yàn)中均采用優(yōu)選的測定條件進(jìn)行檢測。1、系統(tǒng)適用性對照溶液的制備:精密稱取丙二醇56.71mg,置25ml量瓶中，以無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置IOml量瓶中，以無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。丙二醇空白溶液的制備:精密量取自制的缺丙二醇的單硝酸異山梨酯注射液樣液lml，置50ml量瓶中，以無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。取對照溶液和丙二醇空白溶液各I μ I注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。對照溶液的圖譜1，丙二醇的保留時間為5.041min，理論塔板數(shù)為6773。丙二醇空白溶液的圖譜見圖2，在丙二醇保留時間處沒有峰干擾。發(fā)明人還對添加了丙二醇的單硝酸異山梨酯注射液進(jìn)行檢測，結(jié)果見圖3，保留時間5.071min時出現(xiàn)了丙二醇特征峰?？梢姳緱l件檢測單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇含量專屬性較好。2、線性試驗(yàn)對照貯備液的制備:精密稱取丙二醇對照品500.09mg,置25ml量瓶中，以無水乙
醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。分別精密量取對照貯備液lml、2ml、3ml、4ml，置IOml量瓶中，以無水乙醇稀釋至刻度，搖勻；另精密量取對照貯備液4ml，置25ml量瓶中，以無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。作為線性試驗(yàn)供試品溶液。取I μ I注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果見表I。
表I丙二醇線性試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的鑒別方法，其特征在于:采用氣相色譜法進(jìn)行檢測，檢測條件如下: ①實(shí)驗(yàn)材料的處理: (1)供試品溶液的制備:精密量取待測單硝酸異山梨酯注射液1ml，加無水乙醇定容至單硝酸異山梨酯注射液的10-50倍體積量，搖勻，作為供試品溶液； (2)對照品溶液的制備:精密稱取丙二醇對照品約lOOmg，加無水乙醇溶解并稀釋制成l-4mg/ml的溶液，搖勻，作為對照品溶液； ②將處理好的實(shí)驗(yàn)材料采用GC-FID進(jìn)行分析: GC的色譜柱采用PEG-20M ； 進(jìn)樣口溫度為200°C 250°C ； 載氣:N2,載氣流速25cm/s 35cm/s ； 進(jìn)樣方式采用不分流進(jìn)樣； 程序升溫，柱溫初始為110°C 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升溫至200 220°C，保持 I 5min ； FID檢測器溫度為200°C 300°C，氫氣流量:30-50ml/min，空氣流量:300-500ml/min，尾吹流量為20ml/min 40ml/min ； 進(jìn)樣方式為直接進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1.0 μ I。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的鑒別方法，其特征在于:所述②采用GC-FID進(jìn)行分析時:所述進(jìn)樣口溫度為220°C ;載氣=N2，載氣流速30cm/s ；程序升溫，柱溫初始為120°C，保持lmin，以10°C /min升溫至200°C，保持lmin。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的鑒別方法，其特征在于:FID檢測器溫度為250°C;氫氣流量:40ml/min，空氣流量:400ml/min，尾吹流量為25ml/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的鑒別方法，其特征在于:所述(I)供試品溶液的制備中:加無水乙醇定容至單硝酸異山梨酯注射液的50倍體積量。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的鑒別方法，其特征在于:所述(2)對照品溶液的制備中:加無水乙醇溶解并稀釋制成4mg/ml的溶液。
6.單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的含量測定方法，其特征在于:采用氣相色譜法進(jìn)行檢測，檢測條件如下: ①實(shí)驗(yàn)材料的處理: (1)供試品溶液的制備:精密量取待測單硝酸異山梨酯注射液1ml，加無水乙醇定容至單硝酸異山梨酯注射液的10-50倍體積量，搖勻，作為供試品溶液； (2)對照品溶液的制備:精密稱取丙二醇對照品約lOOmg，加無水乙醇溶解并稀釋制成l-4mg/ml的溶液，搖勻，作為對照品溶液； ②將處理好的實(shí)驗(yàn)材料采用GC-FID進(jìn)行分析: GC的色譜柱采用PEG-20M ； 進(jìn)樣口溫度為200°C 250°C ； 載氣:N2,載氣流速25cm/s 35cm/s ；進(jìn)樣方式采用不分流進(jìn)樣； 程序升溫，柱溫初始為110°c 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升溫至200 220°C，保持 I 5min ； FID檢測器溫度為200°C 300°C，氫氣流量:30-50ml/min，空氣流量:300-500ml/min，尾吹流量為20ml/min 40ml/min ； 進(jìn)樣方式為直接進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1.0 μ I。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的含量測定方法，其特征在于:所述②采用GC-FID進(jìn)行分析時:所述進(jìn)樣口溫度為220°C ;載氣=N2，載氣流速30cm/s ;程序升溫，柱溫初始為 120°C，保持lmin，以10°C /min升溫至200°C，保持lmin。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的含量測定方法，其特征在于:FID檢測器溫度為250°C ;氫氣流量:40ml/min，空氣流量:400ml/min，尾吹流量為25ml/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的含量測定方法，其特征在于:所述(I)供試品溶液的制備中:加無水乙醇定容至單硝酸異山梨酯注射液的50倍體積量。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的單硝酸異山梨酯注射液中的丙二醇的含量測定方法，其特征在于:所述(2)對照品溶液的制備中:加無水乙醇溶解并稀釋制成4mg/ml的溶液。
全文摘要
本發(fā)明屬于藥物分析領(lǐng)域，具體涉及單硝酸異山梨酯注射液中1,2-丙二醇的鑒別和含量測定方法。本發(fā)明的目的為提供一種操作簡便、迅速、專屬性強(qiáng)的鑒別方法和精確的含量測定方法，采用氣相色譜檢測采用下述檢測條件測定以鍵合交聯(lián)聚乙二醇為固定液的毛細(xì)管色譜柱；載氣為N2，控制流速、柱溫；采用氫火焰離子化檢測器，控制溫度、氫氣流量、空氣流量、尾吹流量，即通過控制關(guān)鍵檢測參數(shù)實(shí)現(xiàn)簡便，迅速、精確檢測的目的，本發(fā)明方法操作簡便；測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠；專屬性更強(qiáng)；丙二醇色譜峰保留時間在5分鐘左右，檢測時間較短；為檢測丙二醇、控制產(chǎn)品質(zhì)量安全提供了一種全新的選擇。
文檔編號G01N30/88GK103149314SQ201310048109
公開日2013年6月12日 申請日期2013年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月6日
發(fā)明者孫毅, 田阿娟, 夏玉立 申請人:成都百?？萍贾扑幱邢薰?br>