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一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條及試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):5984324閱讀:750來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條及試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
,本實(shí)用新型屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域,涉及一種檢測(cè)耗材,具體涉及一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條及試劑盒。
背景技術(shù)
卵清蛋白,英文名ovalbumin,蛋清中的主要糖蛋白(45kDa)。其一級(jí)結(jié)構(gòu)和立體結(jié)構(gòu)均與血清中的絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員同源。雞卵清蛋白由385個(gè)氨基酸殘基 組成,僅有一條雜合型糖鏈。雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白第最常見的八大食品過(guò)敏原之一。過(guò)敏疾病嚴(yán)重危害人們的身體健康,微量的過(guò)敏原就可以使絕大部分過(guò)敏患者產(chǎn)生過(guò)敏癥狀。為了避免接觸微量的過(guò)敏原,過(guò)敏原的檢測(cè)成為當(dāng)務(wù)之急。對(duì)過(guò)敏原的檢測(cè),體內(nèi)試驗(yàn)方法可提供直接的證據(jù),但由于安全因素等方面考慮,只有在不得已情況下在醫(yī)院進(jìn)行,而且費(fèi)用昂貴,風(fēng)險(xiǎn)大;與此相比體外實(shí)驗(yàn)方法具有方便、安全的優(yōu)點(diǎn),但卻存在著準(zhǔn)確性差的缺點(diǎn)。目前體外檢測(cè)方法有免疫法、PCR法、組胺釋放試驗(yàn)法、過(guò)敏原指紋快速檢測(cè)法等。雖然目前有關(guān)過(guò)敏原檢測(cè)的剛發(fā)很多,但都存在各自不同的問(wèn)題,如檢測(cè)速度慢、成本高、需特定的分析儀器等,這些制約了食品中過(guò)敏原檢測(cè)方法的發(fā)展。而酶聯(lián)免疫吸附分析法雖然快速準(zhǔn)確,但使用復(fù)雜、成本高、靈敏度不高,并且要求專業(yè)技術(shù)人員來(lái)操作,這些缺陷使其推廣使用受到限制。申請(qǐng)?zhí)枮?01010209055. 5的發(fā)明專利,公開了一種食品中雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法,該方法檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白前、后都需要做必要的儀器清洗及保養(yǎng)工作,并且要求專業(yè)技術(shù)人員來(lái)操作。免疫膠體金技術(shù)(Immunogold labelling techique)是上世紀(jì)80年代繼突光素、放射性同位素和酶三大標(biāo)記技術(shù)后發(fā)展起來(lái)的固相標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。該技術(shù)主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),形成肉眼可見的紅色或粉紅色斑點(diǎn),因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)方法中??焖僭\斷試紙條是20世紀(jì)90年代以來(lái)在單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)和新型層析材料基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新型體外診斷技術(shù),近年來(lái)發(fā)展迅速,在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域特別是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中得到了廣泛應(yīng)用。該技術(shù)主要是將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在硝酸纖維膜上,膠體金標(biāo)記試劑吸附在結(jié)合墊上,當(dāng)待測(cè)樣品加到試紙條一端的樣品墊上后,通過(guò)毛細(xì)作用向前移動(dòng),溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng),再移動(dòng)至固定的抗原或抗體區(qū)域時(shí),待測(cè)物金標(biāo)試劑復(fù)合物與之發(fā)生特異性結(jié)合而被截留,膠體金標(biāo)記聚集在檢測(cè)帶上,可通過(guò)目測(cè)得到直觀的顯色結(jié)果。而游離的標(biāo)記物則越過(guò)檢測(cè)帶,從而達(dá)到與檢測(cè)物自動(dòng)分離的目的。競(jìng)爭(zhēng)抑制法可用于測(cè)定抗原或抗體,以測(cè)定抗原為例,其原理為標(biāo)本中的受檢抗原和固相的包被抗原競(jìng)爭(zhēng)與標(biāo)記抗體結(jié)合,當(dāng)標(biāo)本中的受檢抗原的量大于等于試劑的閾值,標(biāo)記抗體則不會(huì)與固相的包被抗原結(jié)合;若標(biāo)本中無(wú)受檢抗原,則標(biāo)記抗體直接與固相的包被抗原結(jié)合。[0008]目前,將免疫競(jìng)爭(zhēng)抑制法與膠體金檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合來(lái)對(duì)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白進(jìn)行快速檢測(cè),且具有高效、靈敏、特異、便捷,經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)的膠體金試紙條鮮有報(bào)道。
實(shí)用新型內(nèi)容為解決上述領(lǐng)域的需求和空白,本實(shí)用新型旨在提供一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條及試劑盒,本實(shí)用新型試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法和免疫膠體金技術(shù)相結(jié)合快速檢測(cè)食品中的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白;本實(shí)用新型試紙條操作簡(jiǎn)單,拿來(lái)即用,不需要本領(lǐng)域的專業(yè)人員,能夠滿足不同層次人員的需要,容易普及到食品企業(yè)及家庭,以符號(hào)顯示結(jié)果,擺脫了對(duì)設(shè)備、儀器、人員及貯存和運(yùn)輸環(huán)境的特殊要求,并且具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、特異、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)。一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,在高度方向上包括基板支撐層、反應(yīng)試劑載體吸附層,所述反應(yīng)試劑載體吸附層固定在所述基板支撐層上;所述反應(yīng)試劑載體吸附層從沾液端到手持端依次設(shè)有樣品纖維墊,金標(biāo)纖維墊,纖維素藥膜,手持端吸水材料墊;在所述樣品纖維墊、金標(biāo)纖維墊和手持端吸水材料墊上覆蓋有保護(hù)膜層,所述纖維素藥膜墊上從手持端到沾液端依次設(shè)有對(duì)照線C線、檢測(cè)線T線,所述對(duì)照線C線和檢測(cè)線T線相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直,其特征在于,所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體;所述對(duì)照線C線包被有兔抗小鼠IgG多抗,所述檢測(cè)線T線包被有雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗原。所述雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體為雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗。所述膠體金試紙條,其特征在于,在樣品纖維墊上對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜層上表面標(biāo)有與所述檢測(cè)線T線平行的可視的MAX標(biāo)志線。所述手持端吸水材料墊的材料是粗纖維吸水紙,所述金標(biāo)纖維墊的材料是吸附金標(biāo)蛋白的玻璃纖維棉。所述保護(hù)膜層為膠帶。所述基板支撐層為不吸水的塑料基板。還包括外殼,所述外殼具有中空位,所述中空位與所述反應(yīng)試劑載體吸附層及所述基板支撐層形成的簡(jiǎn)易膠體金試紙條的形狀大小相匹配,用于裝載所述反應(yīng)試劑載體吸附層,所述外殼上表面對(duì)應(yīng)于樣品纖維墊及纖維素藥膜的位置分別設(shè)有加樣窗和視窗。一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的試劑盒,其特征在于包括上述任一膠體金試紙條和樣品稀釋用具。技術(shù)效果根據(jù)膠體金檢測(cè)的原理,將本實(shí)用新型的膠體金試紙條的粘液端浸入待測(cè)液中,或者在粘液端的樣品纖維層滴加待測(cè)液,待測(cè)液通過(guò)虹吸帶動(dòng)待檢雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白及金標(biāo)纖維墊中的膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體一起向硝酸纖維素膜方向擴(kuò)散,并最終滲入手柄端吸水紙中,擴(kuò)散過(guò)程中待檢雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白可與膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體相結(jié)合,進(jìn)而封閉膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體上雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白結(jié)合點(diǎn),阻止膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體與纖維素藥膜上偶聯(lián)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的載體蛋白的檢測(cè)線T線相結(jié)合,檢測(cè)線不能顯色,而兔抗小鼠IgG多抗則可與膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體相結(jié)合,對(duì)照線C線顯紅色,則為陽(yáng)性,反之,待測(cè)液中無(wú)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白則不能阻止膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體與纖維素藥膜上偶聯(lián)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的載體蛋白的檢測(cè)線T線相結(jié)合,檢測(cè)線T線顯紅色,同樣,兔抗小鼠IgG多抗也與膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體相結(jié)合,對(duì)照線C線顯紅色,形成兩條紅色印記為陰性,如果纖維素藥膜上沒(méi)有顯示紅色標(biāo)記,則表明試紙條生效。本實(shí)用新型的膠體金試紙條不同于現(xiàn)有的試紙條之處在于所述纖維素藥膜墊上從手持端到沾液端依次設(shè)有對(duì)照線C線、檢測(cè)線T線,所述對(duì)照線C線和檢測(cè)線T線相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直,其特征在于,所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體;所述對(duì)照線C線包被有兔抗小鼠IgG多抗,所述檢測(cè)線T線包被有雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗原。本實(shí)用新型試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)水產(chǎn)品中雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白。本實(shí)用新型試紙條通過(guò)選定金標(biāo)纖維墊、T線、C線和樣品纖維墊上的相應(yīng)的生物包被試劑來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的快速檢測(cè),同時(shí)本實(shí)用新型試紙條兼顧檢測(cè)的靈敏度和特異性。本實(shí)用新型,優(yōu)選地,所述雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體為雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗,與待測(cè)雞蛋過(guò)敏源卵清蛋白或檢測(cè)線上的雞蛋過(guò)敏源卵清蛋白抗原進(jìn)行特異性反應(yīng)。·本實(shí)用新型,優(yōu)選在樣品纖維墊上對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜層上表面標(biāo)有與所述檢測(cè)線T線平行的可視的MAX標(biāo)志線。用于提醒操作人員,操作時(shí)待測(cè)液不要超過(guò)標(biāo)志線,以免引起假陽(yáng)性。本實(shí)用新型,優(yōu)選所述樣品纖維墊的材料是玻璃纖維棉,所述手持端吸水材料墊的材料是粗纖維吸水紙,所述纖維素藥膜的材料是硝酸纖維素膜,所述金標(biāo)纖維墊的材料是吸附金標(biāo)蛋白的玻璃纖維棉。這些材料配合使用,其吸水性及毛吸作用配合良好,保證本實(shí)用新型檢測(cè)試紙條的檢測(cè)速度和準(zhǔn)確性。本實(shí)用新型,優(yōu)選保護(hù)膜層為膠帶,使試紙條免受污染,成本低且效果好。本實(shí)用新型,優(yōu)選基板支撐層為不吸水的塑料基板,不吸水的材料,避免支撐材料吸收待測(cè)液從而影響水平方向的遷移。本實(shí)用新型,優(yōu)選還包括外殼,所述外殼具有中空位,所述中空位與所述反應(yīng)試劑載體吸附層及所述基板支撐層形成的簡(jiǎn)易膠體金試紙條的形狀大小相匹配,用于裝載所述反應(yīng)試劑載體吸附層,所述外殼上表面對(duì)應(yīng)于樣品纖維墊及纖維素藥膜的位置分別設(shè)有加樣窗和視窗。便于攜帶和保存。本實(shí)用新型試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白,用于食品中的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的快速檢測(cè);本實(shí)用新型試紙條操作簡(jiǎn)單,拿來(lái)即用,方便快捷,不需要本領(lǐng)域的專業(yè)人員,能夠滿足不同層次人員的需要,并且保證檢測(cè)的靈敏性、準(zhǔn)確性和高效率。

圖I本實(shí)用新型試紙條的俯視圖其中1-手持端,2-對(duì)照線C線,3-檢測(cè)線T線,4MAX標(biāo)志線,5_沾液端,6_纖維素藥膜,7-樣品纖維墊,8-手持端吸水材料墊,9-金標(biāo)纖維墊,13-膠帶邊緣線。圖2本實(shí)用新型試紙條的縱向剖面圖其中6_纖維素藥膜,7_樣品纖維墊,8_手持端吸水材料墊,9_金標(biāo)纖維墊,10-手持端膠帶,11-箭頭膠帶,12-基板支撐層。
具體實(shí)施方式
提供下述實(shí)施例是為了更好地進(jìn)一步理解本實(shí)用新型,并不局限于所述最佳實(shí)施方式,不對(duì)本實(shí)用新型的內(nèi)容和保護(hù)范圍構(gòu)成限制,任何人在本實(shí)用新型的啟示下或是將本實(shí)用新型與其他現(xiàn)有技術(shù)的特征進(jìn)行組合而得出的任何與本實(shí)用新型相同或相近似的產(chǎn)品,均落在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。本實(shí)用新型旨在提供一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,本實(shí)用新型試紙條采用雙競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白,用于食品中的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的快速檢測(cè);本實(shí)用新型試紙條操作簡(jiǎn)單,使用方便,拿來(lái)即用,不需要本領(lǐng)域的專業(yè)人員,能夠滿足不同層次人員的需要,容易普及到食品企業(yè)及單個(gè)家庭,以符號(hào)顯示結(jié)果,擺脫了對(duì)設(shè)備、儀器、人員及貯存和運(yùn)輸環(huán)境的特殊要求,并且具 有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、特異的特點(diǎn)。根據(jù)膠體金檢測(cè)的原理,將本實(shí)用新型的膠體金試紙條的粘液端浸入待測(cè)液中,或者在粘液端的樣品纖維層滴加待測(cè)液,待測(cè)液通過(guò)虹吸帶動(dòng)待檢雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白及金標(biāo)纖維墊中的膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體一起向硝酸纖維素膜方向擴(kuò)散,并最終滲入手柄端吸水紙中,擴(kuò)散過(guò)程中待檢雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白可與膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體相結(jié)合,進(jìn)而封閉膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體上雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白結(jié)合點(diǎn),阻止膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體與纖維素藥膜上偶聯(lián)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的載體蛋白的檢測(cè)線T線相結(jié)合,檢測(cè)線不能顯色,而兔抗小鼠IgG多抗則可與膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體相結(jié)合,對(duì)照線C線顯紅色,則為陽(yáng)性,反之,待測(cè)液中無(wú)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白則不能阻止膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體與纖維素藥膜上偶聯(lián)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的載體蛋白的檢測(cè)線T線相結(jié)合,檢測(cè)線T線顯紅色,同樣,兔抗小鼠IgG多抗也與膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體相結(jié)合,對(duì)照線C線顯紅色,形成兩條紅色印記為陰性,如果纖維素藥膜上沒(méi)有顯示紅色標(biāo)記,則表明試紙條生效。本實(shí)用新型,優(yōu)選地,所述雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體為雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗,與待測(cè)雞蛋過(guò)敏源卵清蛋白或檢測(cè)線上的雞蛋過(guò)敏源卵清蛋白抗原進(jìn)行特異性反應(yīng)。本實(shí)用新型試紙條,在高度方向上包括基板支撐層12、反應(yīng)試劑載體吸附層,所述反應(yīng)試劑載體吸附層固定在所述基板支撐層12上;所述反應(yīng)試劑載體吸附層從沾液端5到手持端I依次設(shè)有樣品纖維墊7,金標(biāo)纖維墊9,纖維素藥膜6,手持端吸水材料墊8 ;在所述樣品纖維墊7、金標(biāo)纖維墊9和手持端吸水材料墊8上覆蓋有保護(hù)膜層。本實(shí)用新型的膠體金試紙條不同于現(xiàn)有的試紙條之處在于所述纖維素藥膜6上從手持端I到沾液端5依次設(shè)有對(duì)照線C線2、檢測(cè)線T線3,所述對(duì)照線C線2和檢測(cè)線T線3相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直,其特征在于,所述金標(biāo)纖維墊9上包被有膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體;所述對(duì)照線C線2包被有兔抗小鼠IgG多抗,所述檢測(cè)線T線3包被有雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白半抗原。本實(shí)用新型,優(yōu)選在樣品纖維墊7上對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜層上表面標(biāo)有與所述檢測(cè)線T線3平行的可視的MAX標(biāo)志線4。用于提醒操作人員,操作時(shí)待測(cè)液不要超過(guò)標(biāo)志線4,以免引起假陽(yáng)性。[0042]本實(shí)用新型,優(yōu)選所述樣品纖維墊7的材料是玻璃纖維棉,所述手持端吸水材料墊8的材料是粗纖維吸水紙,所述纖維素藥膜6的材料是硝酸纖維素膜,所述金標(biāo)纖維墊9的材料是吸附金標(biāo)蛋白的玻璃纖維棉。這些材料配合使用,其吸水性及毛吸作用配合良好,保證本實(shí)用新型檢測(cè)試紙條在檢測(cè)速度和準(zhǔn)確性。本實(shí)用新型,優(yōu)選保護(hù)膜層為膠帶,使試紙條免受污染,成本低且效果好。本實(shí)用新型,優(yōu)選基板支撐層12為不吸水的塑料基板,不吸水的材料,避免支撐材料吸收待測(cè)液從而影響水平方向的遷移。本實(shí)用新型,優(yōu)選還包括外殼,所述外殼具有中空位,所述中空位與所述反應(yīng)試劑載體吸附層及所述基板支撐層形成的簡(jiǎn)易膠體金試紙條的形狀大小相匹配,用于裝載所述反應(yīng)試劑載體吸附層,所述外殼上表面對(duì)應(yīng)于樣品纖維墊及纖維素藥膜的位置分別設(shè)有加樣窗和視窗。便于攜帶和保存。實(shí)驗(yàn)例I.本實(shí)用新型試紙條的制備方法 試紙條的制備程序如下步驟I.纖維素藥膜的包被I、將兔抗小鼠IgG多抗作為對(duì)照線C線,雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗原作為檢測(cè)線T線,兩個(gè)試劑分別按照所需的濃度(范圍1.5-2mg/ml),用20mM的PBS進(jìn)行稀釋。2、將配制好的上述試劑,按照C、T線位置分別包被到硝酸纖維素膜上,然后干燥6小時(shí),溫度為30°C,濕度< 35%,從而制得纖維素藥膜。步驟2.金標(biāo)纖維層的標(biāo)記I、取40nm的膠體金溶液,按終濃度8-12 μ I/ml加入O. 2M K2CO3,加入一定濃度的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗,放置室溫反應(yīng)15-30分鐘,然后按照濃度20 μ Ι/ml加入20%BSA的溶液,用于飽和游離的膠體金。最后lOOOOrpm,離心30分鐘,去除上清液中未結(jié)合的蛋白質(zhì)。用等體積的O. 5m硼酸溶液(含l%Tween、5%蔗糖、1%水解BSA、1%水解酪蛋白、O. 1%PVA)復(fù)溶沉淀的膠體金標(biāo)記原液。2、將上述膠體金標(biāo)記原液按照10-20%濃度,用O. 5m硼酸溶液進(jìn)行稀釋,從而配制成標(biāo)記后的膠體金工作液。然后再將該工作液鋪于30*30cm玻璃纖維墊上,干燥6小時(shí),溫度為30°C,濕度彡35%,從而制得金標(biāo)墊。步驟3.試紙條的組裝I、將塑料板平放在操作臺(tái)上,貼上雙面膠帶。2、撕掉雙面膠帶襯紙,在距塑料板上端30mm處貼上已包被有雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗原和兔抗小鼠IgG多克隆抗體的硝酸纖維素膜。3、將粗纖維吸水紙壓硝酸纖維素膜上端2mm貼上,上端與塑料板上端取齊。4、將小無(wú)紡布?jí)合跛崂w維素膜下端O. 5mm處貼上。5、將金標(biāo)墊取齊壓于小無(wú)紡布上面。6、將玻璃纖維墊壓于金標(biāo)墊上約一半,下端距塑料板下端2mm處貼上。7、將大無(wú)紡布與金標(biāo)墊上端取齊,下端與塑料板下端取齊貼上。8、將箭頭膠帶壓硝酸纖維素膜I. 5-2mm貼上。9、將手持端膠帶壓粗纖維吸水紙貼上。檢測(cè)陽(yáng)性樣本時(shí)候,本實(shí)用新型產(chǎn)品則是樣本中的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白先與膠體金標(biāo)記雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗進(jìn)行特異性結(jié)合,進(jìn)而阻止膠體金標(biāo)記雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗與藥膜包被的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗原進(jìn)行特異性結(jié)合反應(yīng)。而對(duì)照試劑則是膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗在藥膜處與兔抗小鼠IgG多抗進(jìn)行特異性結(jié)合反應(yīng)。本實(shí)用新型一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理和免疫膠體金技術(shù)相結(jié)合快速檢測(cè)食品中的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白。本實(shí)用 新型試紙條操作簡(jiǎn)單,使用方便,拿來(lái)即用,不需要本領(lǐng)域的專業(yè)人員,能夠滿足不同層次人員的需要,容易普及到食品企業(yè)及單個(gè)家庭,本實(shí)用新型以符號(hào)顯示結(jié)果,擺脫了對(duì)設(shè)備、儀器、人員及貯存和運(yùn)輸環(huán)境的特殊要求,并且具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、特異的特點(diǎn)。
權(quán)利要求1.一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,在高度方向上包括基板支撐層、反應(yīng)試劑載體吸附層,所述反應(yīng)試劑載體吸附層固定在所述基板支撐層上; 所述反應(yīng)試劑載體吸附層從沾液端到手持端依次設(shè)有樣品纖維墊,金標(biāo)纖維墊,纖維素藥膜,手持端吸水材料墊; 在所述樣品纖維墊、金標(biāo)纖維墊和手持端吸水材料墊上覆蓋有保護(hù)膜層,所述纖維素藥膜墊上從手持端到沾液端依次設(shè)有對(duì)照線C線、檢測(cè)線T線,所述對(duì)照線C線和檢測(cè)線T線相互平行且與所述膠體金試紙條長(zhǎng)度方向相垂直,所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體;所述對(duì)照線C線包被有兔抗小鼠IgG多抗,所述檢測(cè)線T線包被有雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗原。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,所述雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體為雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白單抗。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,在樣品纖維墊上對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜層上表面標(biāo)有與所述檢測(cè)線T線平行的可視的MAX標(biāo)志線。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,所述樣品纖維墊的材料是玻璃纖維棉,所述手持端吸水材料墊的材料是粗纖維吸水紙,所述金標(biāo)纖維墊的材料是吸附金標(biāo)蛋白的玻璃纖維棉。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,所述保護(hù)膜層為膠帶。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,所述基板支撐層為不吸水的塑料基板。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條,其特征在于,還包括外殼,所述外殼具有中空位,所述中空位與所述反應(yīng)試劑載體吸附層及所述基板支撐層形成的簡(jiǎn)易膠體金試紙條的形狀大小相匹配,用于裝載所述反應(yīng)試劑載體吸附層,所述外殼上表面對(duì)應(yīng)于樣品纖維墊及纖維素藥膜的位置分別設(shè)有加樣窗和視窗。
8.一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的試劑盒,其特征在于包括權(quán)利要求1-6任一所述膠體金試紙條和樣品稀釋用具。
9.一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的試劑盒,其特征在于包括權(quán)利要求7所述膠體金試紙條和樣品稀釋用具。
專利摘要本實(shí)用新型一種快速檢測(cè)雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白的膠體金試紙條及試劑盒,屬檢測(cè)耗材,其特征在于,所述金標(biāo)纖維墊上包被有膠體金標(biāo)記的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白抗體;所述對(duì)照線C線包被有兔抗鼠IgG多抗,所述檢測(cè)線T線包被有雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白半抗原,本實(shí)用新型試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法原理以及膠體金技術(shù)快速檢測(cè)食品中的雞蛋過(guò)敏原卵清蛋白,本實(shí)用新型試紙條簡(jiǎn)捷、靈敏、特異、準(zhǔn)確。
文檔編號(hào)G01N33/558GK202710568SQ20122029091
公開日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月15日
發(fā)明者張春山, 張永勝 申請(qǐng)人:北京中檢葆泰生物技術(shù)有限公司
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