專利名稱：一種治療病毒性肝炎藥物組合物的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法，特別涉及一種治療病毒性肝炎的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
病毒性肝炎是由多種肝炎病毒引起的常見傳染病，具有傳染性強(qiáng)、傳播途徑復(fù)雜、流行面廣泛，發(fā)病率較高等特點(diǎn)。臨床上主要表現(xiàn)為乏力、食欲減退、惡心、嘔吐、肝腫大及肝功能損害，部分病人可有黃疸和發(fā)熱。有些患者出現(xiàn)蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛或上呼吸道癥狀，嚴(yán)重者甚至?xí)l(fā)展為肝硬化甚至肝癌，嚴(yán)重危害人類健康。目前臨床上所用治療病毒性肝炎的藥物雖然具有一定的療效，但不同程度地存在易使機(jī)體產(chǎn)生抗藥性及成癮性、副作用明顯等缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物；本發(fā)明另一目的在于提供一種治療病毒性肝炎的藥物組合物；本發(fā)明的第三個目的在于提供該藥物組合物的制備方法；本發(fā)明的第四個目的在于提供該藥物組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案1、2實現(xiàn)技術(shù)方案I :本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為茯苓500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、白術(shù)500-1500重量份、郁金150-450重量份、當(dāng)歸250-750重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝蓮500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、澤蘭250-750重量份、柴胡150-450重量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、紅花150-450重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茯苓960重量份、茵陳960重量份、白術(shù)960重量份、郁金320重量份、當(dāng)歸480重量份、琥珀96重量份、白芍(炒)960重量份、半枝蓮960重量份、砂仁192重量份、虎杖480重量份、丹參960重量份、澤蘭480重量份、柴胡320重量份、廣藿香320重量份、佩蘭480重量份、紅花320重量份。技術(shù)方案2:本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為茯苓500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、郁金150-450重量份、當(dāng)歸250-750重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝蓮500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、澤蘭250-750重量份、柴胡150-450重量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、紅花150-450重量份、板藍(lán)根500-1500重量份、綿馬貫眾250-750重量份、白花蛇舌草500-1500重量份、重樓250-750
重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茯苓960重量份、茵陳960重量份、郁金320重量份、當(dāng)歸480重量份、琥珀96重量份、白芍(炒)960重量份、半枝蓮960重量份、砂仁192重量份、虎杖480重量份、丹參960重量份、澤蘭480重量份、柴胡320重量份、廣藿香320重量份、佩蘭480重量份、紅花320重量份、板藍(lán)根960重量份、綿馬貫眾480重量份、白花蛇舌草960重量份、重樓480重量份。
取本發(fā)明技術(shù)方案1、2的藥物組合物原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于合劑、濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑。本發(fā)明藥物組合物技術(shù)方案I制備合劑方法為當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油6-10小時，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用3-5倍重量份的P -環(huán)糊精飽和水溶液法包結(jié)，干燥，得揮發(fā)油3 _環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用4-8倍重量份的85%乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余藥味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小時，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為I. 02 I. 04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)60-80%，靜置12-36小時，濾過，濾液回收乙醇至適量，與上述丹參提取液合并，并濃縮至60 65°C相對密度為I. 10-1. 15的稠膏II，加入80%的單糖漿900-1200體積份，揮發(fā)油￠-環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入浸膏內(nèi)；再加入苯甲酸鈉9-10g，攪勻，加水至3000-4500體積份，濾過，灌裝，滅菌，即得。本發(fā)明藥物組合物技術(shù)方案2制備方法為以上十九味，當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油6-10小時，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用3-5倍重量份的
環(huán)糊精飽和水溶液法包結(jié)，干燥，得揮發(fā)油3 _環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用4-8倍重量份的85%乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余茵陳等十二味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小時，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為I. 02 I. 04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)60-80%，靜置12-36小時，濾過，濾液回收乙醇至適量，與上述丹參提取液合并，濃縮至相對密度為I. 10-1. 15的稠膏II，加入揮發(fā)油￠-環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于合劑、濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。本發(fā)明藥物組合物技術(shù)方案2制備合劑方法優(yōu)選為以上十九味，當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油8小時，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用4倍重量份的環(huán)糊精飽和水溶液法40°C包結(jié)，40°C干燥，得揮發(fā)油￠-環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用6倍重量份的85%乙醇回流提取2次，每次I小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余茵陳等十二味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮I.5小時，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為
I.02 I. 04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇至適量，與上述丹參提取液合并，并濃縮至60 65°C相對密度為I. 10-1. 15的稠膏II，加入80%的單糖漿960體積份，揮發(fā)油3 -環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入浸膏內(nèi)；再加入苯甲酸鈉9. 6g,加水至3200體積份，濾過，灌裝，滅菌，即得。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種鑒別A、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，加水10_30ml使溶解，用乙酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳蒿對照藥材0. 5-1. 5g，加水40-60ml，煎煮0. 5-1. 5小時，取上清液，濃縮至10-30ml，用乙酸乙酯萃取1_3次，第一次20_40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯0. 5-1. 5ml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取供試品溶液0. 5-1. 5M1,對照藥材溶液4-6M1,分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上， 以0. 5-2 :0. 5-2比例的60-90°C石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；B、取本藥物組合物制劑4/1000-8/1000日用劑量研細(xì)，加40-60%乙醇5_25ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-15 yl，分別點(diǎn)于同一娃月父G薄層板上，以30-50 1-10 5~15 0. 1-0. 3比例的二氣甲燒一乙酸乙酷一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-10%香草醛硫酸溶液，100-110°c加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取本藥物組合物制劑1/100-5/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚20_40ml，回流提取20-40分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯0. 4-0. 6ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對照藥材lg，加乙醚5-15ml,超聲處理5-15分鐘,濾過,濾液揮干,殘洛加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4-6 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以5-15 :0. 1-1.0比例的60-90°C石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；D、取丹參酮II A對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含l_3mg的溶液，作為對照品溶液；取本藥物組合物制劑1/100-5/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚20-40ml，回流提取20-40分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯0. 4-0. 6ml使溶解，作為供試品溶液，吸取供試品溶液5-15 V- I,對照品溶液4-6 y I,分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以4-8:1比例的環(huán)已燒-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；E、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，研細(xì)，加甲醇10_30ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加I. 5-3. 5mol/L硫酸溶液5_15ml使溶解，置水浴中加熱20-40分鐘，立即冷卻，用三氯甲烷振搖提取兩次，每次5-15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4-8 yl，分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以5-25 :4-6 :0. 5-1. 5比例的30 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨氣中熏后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；含量測定照高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；5-25:70-95比例的乙腈-水為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于2600 ；對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品4_6mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每Iml中含芍藥苷40-60 u g的對照品溶液；
供試品溶液制備取裝量差異項下的本藥物組合物制劑，研細(xì)，取6/10000-1/1000日用劑量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50-70%甲醇15-35ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ超聲處理20-40分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用50-70%甲醇補(bǔ)足減少重量，搖勻，取上清液，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-15iU，注入液相色譜儀，測定，即得；本藥物組合物制劑每日用劑量含白芍以芍藥苷C23H28O1Jf，應(yīng)不得少于50_70mg。本發(fā)明所述重量份與體積份的關(guān)系為克/暈升。本發(fā)明藥物組合物不同制劑的日用劑量(每日服用劑量或每日使用劑量)因制劑不同而不同，但不同制劑的日用劑量中含相當(dāng)生藥量相同。本發(fā)明質(zhì)量檢測方法以日用劑量為計量單位。按照原藥材的量換算，成人每日用劑量相當(dāng)原藥材的量為280-360g。本發(fā)明藥物組合物經(jīng)實驗研究證實有顯著恢復(fù)ALT、AST、GGT、BiL等肝功能主要指標(biāo)的作用具備見效快，無毒副作用，使用安全，獲效后不易復(fù)發(fā)等優(yōu)勢。本發(fā)明組合物相比現(xiàn)有制劑具備很好的藥效，本發(fā)明藥物組合物的輔料工藝經(jīng)過篩選，發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油與3 —環(huán)糊精在一定的條件及配比下包合，可以達(dá)到較好的療效；本發(fā)明所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，是通過大量具體創(chuàng)造性試驗篩選后得到，鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法測定的產(chǎn)品相比其他方法測定的產(chǎn)品在藥效上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。


說明書附圖是揮發(fā)油P -環(huán)糊精包結(jié)實驗流程圖。
具體實施例方式下述實驗例和實施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實驗例I :藥物組對保肝降酶、利膽、退黃、吞噬廓清能力的藥效學(xué)試驗藥物組I :取本發(fā)明實施例2制備的藥物組合物合劑藥物組II :取本發(fā)明實施例13制備的藥物組合物合劑對照組市售清熱疏肝合劑。一.保肝降酶作用
I.對急性肝損傷的保護(hù)作用取昆明小鼠84只，體重18_20g，雌雄各半，隨機(jī)分為7組。第一組正常對照組，每日灌服等量飲用水；第二組模型組，每日灌服等量飲用水；第三組藥物組I，灌服藥物組I藥液30ml (相當(dāng)于生藥9.32g)/kg體重 日；第四組藥物組II，灌服藥物組II藥液30ml (相當(dāng)于生藥9. 32g) /kg體重 日；第五組對照組，灌服0. 4g/ml清熱疏肝合劑0. 3ml/10g(相當(dāng)于含生藥134g/kg)體重 日。第二 五組，在連續(xù)給藥14天后，用D-半乳糖胺0.8g/kg體重小鼠腹腔注射進(jìn)行造模。在造模24小時末次給藥半小時后，從小鼠眼眶取血，測SGPT、SGOT含量，結(jié)果見表I。表I本發(fā)明藥物組對D-半乳糖胺所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用(X土SD)
權(quán)利要求
1.一種治療病毒性肝炎藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法中的含量測定方法為 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；5-25:70-95比例的乙腈-水為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于2600 ； 對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品4-6mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每Iml中含芍藥苷40-60 μ g的對照品溶液； 供試品溶液制備取裝量差異項下的該藥物組合物制劑，研細(xì)，取6/10000-1/1000日用劑量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50-70%甲醇15-35ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ超聲處理20-40分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用50-70%甲醇補(bǔ)足減少重量，搖勻，取上清液，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-15 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本藥物組合物制劑每日用劑量含白芍以芍藥苷 C23H28O11計，應(yīng)不得少于50-70mg; 所述藥物組合物的原料藥組成為 茯苓500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、白術(shù)500-1500重量份、郁金150-450重量份、當(dāng)歸250-750重量份、琥珀50-150重量份、炒白芍500-1500重量份、半枝蓮500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、澤蘭250-750重量份、柴胡150-450重量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、紅花150-450重量份； 所述日用計量按照原藥材的量換算，相當(dāng)原藥材的量為280-360g。
2.如權(quán)利要求I所述的藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法中的含量測定為 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；15:85比例的乙腈-水為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于2600 ； 對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每Iml中含芍藥苷50 μ g的對照品溶液； 供試品溶液制備取裝量差異項下的本藥物組合物制劑，研細(xì)，取7/10000日用劑量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加60 %甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ超聲處理30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減少重量，搖勻，取上清液，濾過，即得； 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本藥物組合物制劑每日用劑量含白芍以芍藥苷C23H28O1Jf，應(yīng)不得少于60mg。
3.如權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法還包括如下鑒別方法的一種或幾種 鑒別A、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，加水10-30ml使溶解，用乙酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯O. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳蒿對照藥材O. 5-1. 5g，加水40_60ml，煎煮O. 5-1. 5小時，取上清液，濃縮至10-30ml，用乙酸乙酯萃取1_3次，第一次20_40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯O. 5-1. 5ml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取供試品溶液O. 5-1. 5μ1，對照藥材溶液4_6μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以O(shè). 5-2 :0. 5-2比例的60-90°C石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； B、取本藥物組合物制劑4/1000-8/1000日用劑量研細(xì)，加40-60%乙醇5_25ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每Iml含O. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-15 μ 1，分別點(diǎn)于同一娃月父G薄層板上，以30-50 1-10 5~15 0. 1-0. 3比例的二氣甲燒一乙酸乙酷一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-10%香草醛硫酸溶液，100-110°c加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； C、取本藥物組合物制劑1/100-5/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚20-40ml，回流提取20-40分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯O. 4-0. 6ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對照藥材lg，加乙醚5-15ml,超聲處理5-15分鐘,濾過,濾液揮干,殘洛加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以5-15 :0. 1-1.0比例的60-90°C石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干， 置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； D、取丹參酮IIA對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含l-3mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取鑒別C項下的供試品溶液5-15 μ 1，對照品溶液4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4-8:1比例的環(huán)已烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)； Ε、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，研細(xì)，加甲醇10-30ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加I. 5-3. 5mol/L硫酸溶液5_15ml使溶解，置水浴中加熱20-40分鐘，立即冷卻，用三氯甲烷振搖提取兩次，每次5-15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇O. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每Iml含O. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各4-8 μ 1，分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以5-25 :4-6 :0. 5-1. 5比例的30 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨氣中熏后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物的檢測，其特征在于該方法包括如下鑒別方法的一種或幾種 A、取本藥物組合物制劑14/1000日用劑量，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳蒿對照藥材lg，加水50ml，煎煮I小時，取上清液，濃縮至20ml，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取供試品溶液 μ ，對照藥材溶液5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以I :1比例的60-90°C石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； B、取本藥物組合物制劑6/1000日用劑量研細(xì)，加50%乙醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以40:5:10:0. 2比例的三氯甲烷一乙酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑,展開,取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； C、取本藥物組合物制劑3/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚30ml，回流提取30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯O. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對照藥材lg，加乙醚10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9. 5:0. 5比例的60-90°C石油醚一乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； D、取丹參酮IIA對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取鑒別C項下的供試品溶液10 μ 1，對照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6:1比例的環(huán)已烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；Ε、取本藥物組合物制劑14/1000日用劑量，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加2. 5mol/L硫酸溶液IOml使溶解，置水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用三氯甲烷振搖提取兩次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各6μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以15:5:1比例的30 60°C石油醚一甲酸乙酯一甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨氣中熏后，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5.如權(quán)利要求I所述的藥物組合物的檢測方法，其特征在于所述藥物組合物的制備方法為當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油6-10小時，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用3-5倍重量份的β-環(huán)糊精飽和水溶液法包結(jié)，干燥，得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用4-8倍重量份的85%乙醇回流提取1-3次，每次O. 5-1. 5小時，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余藥味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小時，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為I. 02 I. 04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)60_80%，靜置12-36小時，濾過，濾液回收乙醇至適量，與上述丹參提取液合并，并濃縮至60 65°C相對密度為I. 10-1. 15的稠膏II，加入80%的單糖漿900-1200體積份，揮發(fā)油β-環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入浸膏內(nèi)；再加入苯甲酸鈉9-10g，攪勻，加水至3000-4500體積份，濾過，灌裝，滅菌，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療病毒性肝炎的藥物組合物檢測方法，該藥物組合物的原料藥組成為茵陳、茯苓、郁金、半枝蓮、廣藿香、白術(shù)、虎杖等。本發(fā)明所提供的中藥組合物的檢測方法，是通過大量具體創(chuàng)造性試驗篩選后得到，鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法測定的產(chǎn)品相比其他方法測定的產(chǎn)品在藥效上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。
文檔編號G01N30/36GK102967662SQ20121042445
公開日2013年3月13日 申請日期2007年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月3日
發(fā)明者付立家, 付建家 申請人:北京亞東生物制藥有限公司