專利名稱：生物傳感器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物傳感器，特別是中性脂肪濃度測(cè)定用生物傳感器。特別是，本發(fā)明涉及能夠利用酶反應(yīng)迅速定量生物試樣等特定材料中特定成分的濃度的生物傳感器，特別涉及中性脂肪濃度測(cè)定用生物傳感器。
背景技術(shù)：
近年，生物傳感器被用于醫(yī)療等領(lǐng)域。生物傳感器的測(cè)定對(duì)象為從低分子到高分子的各種各樣的化學(xué)物質(zhì)，為了應(yīng)對(duì)各種測(cè)定對(duì)象，正在進(jìn)行具備各種機(jī)能的生物傳感器的開發(fā)。目前，不必對(duì)生物試樣以及食品中所含的特定成分(底物)進(jìn)行稀釋、攪拌等操作就能簡(jiǎn)單定量的生物傳感器已廣為人知。例如，已經(jīng)提出如下生物傳感器在絕緣性基板上 形成至少具有工作電極和對(duì)電極的電極系統(tǒng)，在該電極系統(tǒng)上設(shè)有用親水性聚合物等固定劑固定氧化還原酶以及電子受體而成的酶反應(yīng)層，接著在該酶反應(yīng)層上設(shè)置過濾層(血球去除層)，進(jìn)一步，在該過濾層上包被殼體而一體化。這個(gè)生物傳感器按照以下的方法定量試樣中的底物濃度。首先，將血液等試樣溶液滴加到過濾層，其過濾液滲透到酶反應(yīng)層。從而氧化還原酶以及電子受體溶解至試樣溶液中，底物和酶之間發(fā)生酶反應(yīng)。通過該酶反應(yīng)底物被氧化，同時(shí)電子受體被還原。酶反應(yīng)終止后，將已被還原的電子受體電化學(xué)氧化，通過此時(shí)得到的氧化電流值求出試樣溶液中的底物濃度。例如，作為用生物傳感器測(cè)定中性脂肪的方法，如下定量試樣中的中性脂肪的方法已廣為人知。首先，試樣溶液中包含的中性脂肪被例如脂蛋白脂肪酶(LPL)分解為游離脂肪酸和甘油。此處生成的甘油，可以如下式(I)和下式(2)所示的那樣通過使用甘油激酶(GK)和甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)或者甘油-3-磷酸脫氫酶(GPDH)來定量。S卩，可以通過測(cè)定如下式所示的、氧化型電子受體的減少、還原型電子受體的增加或者磷酸二羥丙酮的量來定量甘油。特別是，可以通過電化學(xué)地測(cè)定還原型電子受體的增加量來定量甘油。[化I]
權(quán)利要求
1.一種生物傳感器，所述生物傳感器具有絕緣性基板、形成在上述絕緣性基板上的至少包含工作電極和對(duì)電極的電極系統(tǒng)、以及形成在上述電極系統(tǒng)上的試樣供給部， 所述試樣供給部具備包含第一反應(yīng)層和第二反應(yīng)層的反應(yīng)層， 第一反應(yīng)層形成在上述電極系統(tǒng)上，至少包含含有作為輔基的吡咯喹啉醌(PQQ)、黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、 或黃素單核苷酸(FMN)的氧化還原酶； 第二反應(yīng)層是通過在上述第一反應(yīng)層上涂布包含脂質(zhì)分解酶的溶液形成的。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的生物傳感器，上述試樣供給部進(jìn)一步包含電子傳遞體。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物傳感器，上述電子傳遞體配置在第二反應(yīng)層，或者 按照與上述第一反應(yīng)層和第二反應(yīng)層分離的方式，在上述試樣供給部進(jìn)一步設(shè)置具有電子傳遞體的第三反應(yīng)層。
4.根據(jù)權(quán)利要求I 3中任一項(xiàng)所述的生物傳感器，上述氧化還原酶為包含作為輔基的吡咯喹啉醌(PQQ)的多元醇脫氫酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4中任一項(xiàng)所述的生物傳感器，上述第一反應(yīng)層、第二反應(yīng)層或第三反應(yīng)層進(jìn)一步包含表面活性劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求3 5中任一項(xiàng)所述的生物傳感器，上述第一反應(yīng)層、第二反應(yīng)層或第三反應(yīng)層進(jìn)一步包含親水性高分子。
7.根據(jù)權(quán)利要求3 6中任一項(xiàng)所述的生物傳感器，上述第一反應(yīng)層、第二反應(yīng)層或第三反應(yīng)層進(jìn)一步包含糖和蛋白質(zhì)中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明提供一種能在短時(shí)間內(nèi)測(cè)定試樣中的葡萄糖、中性脂肪等特定成分的濃度的生物傳感器。所述生物傳感器具有絕緣性基板、形成在上述絕緣性基板上的至少包含工作電極和對(duì)電極的電極系統(tǒng)、以及形成在上述電極系統(tǒng)上的試樣供給部，所述試樣供給部具備包含第一反應(yīng)層和第二反應(yīng)層的反應(yīng)層，第一反應(yīng)層形成在上述電極系統(tǒng)上，包含含有作為輔基的吡咯喹啉醌(PQQ)、黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、或黃素單核苷酸(FMN)的氧化還原酶；第二反應(yīng)層是通過在上述第一反應(yīng)層上涂布包含脂質(zhì)分解酶的溶液形成的。
文檔編號(hào)G01N27/327GK102959392SQ20118001794
公開日2013年3月6日 申請(qǐng)日期2011年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月31日
發(fā)明者西脅直秀, 宮本翔一, 稻川顯嗣, 村瀨博宣 申請(qǐng)人:Cci株式會(huì)社, 究極酵素國(guó)際股份有限公司