專利名稱：一種調(diào)經(jīng)丸的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中成藥的質(zhì)量控制方法，更具體地說，是一種通過改進(jìn)的方法來控制調(diào)經(jīng)丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
本發(fā)明的調(diào)經(jīng)丸收載于《部頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》第九冊(cè)165頁，標(biāo)準(zhǔn)號(hào) WS3-B-1820-94。由當(dāng)歸、白芍(酒炒)、川芎、熟地黃、艾葉(炭)、香附(醋制)、陳皮、半夏(制)、茯苓、甘草、白術(shù)(炒)、吳茱萸(制)、小茴香(鹽炒)、延胡索(醋制)、沒藥(制)、益母草、牡丹皮、續(xù)斷、黃芩(酒炒)、麥冬、阿膠二十一味中藥組成。調(diào)經(jīng)丸是全國知名企業(yè)天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠生產(chǎn)的百姓放心藥品牌。已應(yīng)用臨床多年，具有理氣和血，調(diào)經(jīng)止痛的功效。用于氣郁血滯，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)來腹痛，崩漏白帶。盡管調(diào)經(jīng)丸具有見效快，療效顯著等特點(diǎn)，但由于中藥具有成分復(fù)雜多變、活性成分多、藥效成分和毒性成分不甚明確等特點(diǎn)，再加上缺乏更加科學(xué)全面的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，嚴(yán)重地制約其在國際市場(chǎng)的競(jìng)爭力。中國藥典2010年版增補(bǔ)“調(diào)經(jīng)丸”中的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)步驟是1、顯微鑒別；2、薄層色譜法鑒別當(dāng)歸、川芎；3、薄層色譜法鑒別酒白芍、牡丹皮；4、薄層色譜法鑒別制吳茱萸；5、薄層色譜法鑒別醋延胡索；6、薄層色譜法鑒別酒黃芩；7、薄層色譜法鑒別益母草；8、高效液相法測(cè)定芍藥苷。但對(duì)于調(diào)經(jīng)丸這樣一個(gè)由21味動(dòng)植物藥組成的復(fù)方，其質(zhì)量控制的鑒定方法過于簡單，相對(duì)于目前中藥產(chǎn)品質(zhì)量控制的要求有較大的差距。目前，中國藥典規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，不能準(zhǔn)確全面反映產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，也無法用于生產(chǎn)過程中、以及產(chǎn)品質(zhì)量的有效控制。因而必須重視質(zhì)量控制與療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的研究相結(jié)合，這樣才能使我國的中藥走出國門，邁向世界。相對(duì)于調(diào)經(jīng)丸盡管中國藥典2010年版增補(bǔ)“調(diào)經(jīng)丸”中的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，但對(duì)于薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮，沒見相關(guān)的描述。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明建立了一種調(diào)經(jīng)丸的質(zhì)量檢測(cè)方法，其目的在于提高產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可控性，進(jìn)一步確保產(chǎn)品內(nèi)在含量和療效，保證患者用藥安全，增加了薄層色譜法鑒別醋香附； 薄層色譜法鑒別陳皮；高效液相法測(cè)定芍藥苷三部分內(nèi)容。本發(fā)明的檢測(cè)方法能夠定性定量檢測(cè)且檢測(cè)手段簡單、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案
一種調(diào)經(jīng)丸的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮；高效液相法測(cè)定芍藥苷三部分內(nèi)容，其步驟如下 一.薄層色譜法鑒別醋香附
(1)供試品溶液的制備取本品15g，研細(xì)，加乙醚50ml，時(shí)時(shí)振搖1小時(shí)，濾過，濾液揮干，殘?jiān)宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；
(2)對(duì)照品溶液的制備取α-香附酮對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液， 作為對(duì)照品溶液；
(3)陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；
照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2ul， 分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以體積比80 1 :1 二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干；
(4)置254nm紫外光燈下檢視供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同的深藍(lán)色斑點(diǎn)；噴以二硝基苯胼，放置片刻，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾。二.薄層色譜法鑒別陳皮
(1)供試品溶液的制備取本品10g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30min，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)覫ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；
(2)對(duì)照品溶液的制備另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液；
(3)陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含陳皮的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；
照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 3、ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水，體積比100 17 :13為展開劑 ，展開，取出，晾干；
(4)置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且陰性顯示無干擾；
三.高效液相法測(cè)定芍藥苷
(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-乙腈-水-磷酸，體積比13:10: 77:0. 1為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為232nm;理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算為8352，與相鄰峰的分離度為1. 80 ；
(2)對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每Iml中含 50ug的溶液，即得；
(3)供試品溶液的制備取本品適量，研細(xì)，混勻，取約lg，精密稱定，加稀乙醇50ml， 超聲處理30分鐘，放冷，取續(xù)濾液即得；
(4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，本品含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28011)計(jì)，每Ig不得少于0. 60mg。本發(fā)明增加了薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮，這兩個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，主要是因?yàn)榇紫愀綖樵撎幏骄?，且處方量最大；陳皮的功效和該處方相符。因此，增加醋香附和陳皮的檢測(cè)更能反映產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量的可控性；而薄層色譜法具有簡單、迅速、靈敏高度、分離效能好等優(yōu)點(diǎn)，在藥品檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。因而本發(fā)明增加了薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮。本發(fā)明參考中國藥典2010版一部增補(bǔ)版中“調(diào)經(jīng)丸”含量測(cè)定項(xiàng)下所用的流動(dòng)相為依據(jù)，將原標(biāo)準(zhǔn)乙腈-水(12. 587. 5)，調(diào)整為甲醇-乙腈-水-磷酸(13 10 77:0. 1) 為流動(dòng)相。在此流動(dòng)相條件下，分離效果好，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算為8352，與相鄰峰的分離度為1.80。最終確定的流動(dòng)為甲醇-乙腈-水-磷酸(13:10: 77:0.1)為流動(dòng)相
ο本發(fā)明建立的調(diào)經(jīng)丸質(zhì)量檢測(cè)方法與現(xiàn)有技術(shù)相比所具有的積極效果在于
(1)調(diào)經(jīng)丸處方由21味藥組成。主證為肝氣不疏，氣郁血滯之婦科諸癥。方以香附為君藥，疏肝解郁，氣行則血行，疏泄條達(dá)，則月經(jīng)自調(diào)，疼痛自止，為婦科調(diào)經(jīng)止痛的要藥。通過調(diào)經(jīng)丸中醋香附的薄層色譜法鑒別，更加準(zhǔn)確地把握有關(guān)藥品的質(zhì)量。采用本發(fā)明的質(zhì)量控制方法，提高了調(diào)經(jīng)丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，從而有效確保了調(diào)經(jīng)丸的安全、有效、質(zhì)量可控，保證了工藝的規(guī)范化和質(zhì)量的穩(wěn)定一致。(2)本發(fā)明根據(jù)處方中陳皮具有理氣健脾的功效，與調(diào)經(jīng)丸理氣和血，調(diào)經(jīng)止痛的功效相符。通過增加調(diào)經(jīng)丸中陳皮的薄層鑒別，提高產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可控性，進(jìn)一步確保產(chǎn)品內(nèi)在含量和療效，保證患者用藥安全，且檢測(cè)手段簡單、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。(3)本發(fā)明參考中國藥典2010版一部增補(bǔ)版中“調(diào)經(jīng)丸”含量測(cè)定項(xiàng)下所用的流動(dòng)相為依據(jù)，進(jìn)行試驗(yàn)，但分離度低，雜質(zhì)峰與芍藥苷峰無法達(dá)到基線分離，故通過反復(fù)試驗(yàn)摸索，將流動(dòng)相調(diào)整為甲醇-乙腈-水-磷酸(13:10: 77:0.1)。在此流動(dòng)相條件下，分離效果好。(4)本發(fā)明在中國藥典2010年版增補(bǔ)“調(diào)經(jīng)丸”標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，增加了薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮；改進(jìn)了高效液相法測(cè)定芍藥苷。修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)， 提高了藥品標(biāo)準(zhǔn)的可控性，確保了產(chǎn)品的內(nèi)在含量，對(duì)促進(jìn)產(chǎn)品銷售、增加產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭力、保證患者用藥安全意義重大。


圖1從左至右分別為α-香附酮對(duì)照品、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930001)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930002)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930003)、醋香附陰性樣品；
圖2從左至右分別為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930001)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930002)、調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930003)、橙皮苷對(duì)照品、陳皮陰性樣品； 圖3為芍藥苷對(duì)照品色譜圖； 圖4為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930000)色譜圖； 圖5為調(diào)經(jīng)丸(缺白芍、牡丹皮)陰性樣品色譜圖； 圖6為芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)曲線；
圖7為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930000)色譜圖(aglient eclipse-cl8)； 圖8為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930000)色譜圖(aglient extend-cl8)； 圖9為調(diào)經(jīng)丸樣品(批號(hào)7930000)色譜圖(aglient zorbax sb_aq)。
具體實(shí)施例方式為了更充分的解釋本發(fā)明的實(shí)施，提供下述測(cè)定方法的實(shí)施實(shí)例。這些實(shí)施實(shí)例僅僅是解釋、而不是限制本發(fā)明的范圍。下面通過典型的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1 調(diào)經(jīng)丸(水蜜丸)處方
當(dāng)歸75g白芍(酒炒)75g 川芎50g熟地黃IOOg艾葉(炭)50g 香附(醋制)200g 陳皮50g半夏(制)50g
茯苓59g甘草15g白術(shù)(炒)75g 吳茱萸(制)25g
小茴香(鹽炒)25g延胡索(醋制)25g 沒藥(制)25g益母草IOOg
牡丹皮50g續(xù)斷50g黃芩(酒炒)50g 麥冬50g
阿膠IOOg ；
制法以上二十一味，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻。每IOOg粉末加煉蜜30-50g及適量的水，制丸，干燥，制成水蜜丸。性狀本品為深褐色至黑色水蜜丸，氣微，味苦、微甘辛。實(shí)施例2
薄層色譜法鑒別醋香附
硅膠G板，青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)，105°C活化1小時(shí)，備用；聚酰胺薄膜，上海東聯(lián)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。(1)供試品溶液的制備取本品15g，研細(xì)，加乙醚50ml，時(shí)時(shí)振搖1小時(shí)，濾過，濾液揮干，殘?jiān)宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液。(2)對(duì)照品溶液的制備取α -香附酮對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。(3)陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(80:1 :1)為展開劑，展開，取出，晾干。三批供試品(批號(hào)為7930001、7930002、7930003)按上述方法鑒別。置紫外光燈 (2Mnm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同的深藍(lán)色斑點(diǎn)；噴以二硝基苯胼，放置片刻，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾。結(jié)果見圖1。實(shí)施例3
薄層色譜法鑒別陳皮
硅膠G板，青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)，105°C活化1小時(shí)，備用；聚酰胺薄膜，上海東聯(lián)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。(1)供試品溶液的制備取本品10g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30min，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)覫ml甲醇使溶解，作為供試品溶液。(2)對(duì)照品溶液的制備另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液。(3)陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含陳皮的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 3、ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100 17 13)為展開劑，展開，取出，晾干。三批供試品(批號(hào)為7930001、7930002、7930003)按上述方法鑒別。噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且陰性顯示無干擾。結(jié)果見圖2。
實(shí)施例4
高效液相法測(cè)定芍藥苷 1.儀器和試藥 1.1儀器
Agilent Technologies 1200 Series高效液相色譜儀，美國Agilent公司生產(chǎn) Agilent Technologies 1200 Series G1314B 紫外檢測(cè)器，美國 Agilent 公司生產(chǎn) Agilent Technologies 1200 Series G1329A 自動(dòng)進(jìn)樣器，美國 Agilent 公司生產(chǎn) SART0RIUS BP211D電子天平，瑞士 SART0RIUS公司生產(chǎn) ZB-IB型智能崩解儀，天津大學(xué)精密儀器廠生產(chǎn) WFH-201型三用紫外儀，上海精科實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)
1.2試劑及藥品
芍藥苷對(duì)照品(批號(hào)110736-200933)購自中國藥品生物制品檢定所、樣品為中試樣品， 批號(hào)為:7930001,7930002,7930003
藥材為天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠提供乙腈、甲醇為色譜純，水為純水，其它試劑均為分析純
2.性狀
本品為水蜜丸，除去包裝后觀察，結(jié)果見表1 表1 調(diào)經(jīng)丸(水蜜丸)性狀觀察結(jié)果
權(quán)利要求
1. 一種調(diào)經(jīng)丸的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括薄層色譜法鑒別醋香附；薄層色譜法鑒別陳皮；高效液相法測(cè)定芍藥苷三部分內(nèi)容，其步驟如下一.薄層色譜法鑒別醋香附(1)供試品溶液的制備取本品15g，研細(xì)，加乙醚50ml，時(shí)時(shí)振搖1小時(shí)，濾過，濾液揮干，殘?jiān)宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；(2)對(duì)照品溶液的制備取α-香附酮對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液， 作為對(duì)照品溶液；(3)陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以體積比80 :1:1 二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干；(4)置254nm紫外光燈下檢視供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同的深藍(lán)色斑點(diǎn)；噴以二硝基苯胼，放置片刻，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾；二.薄層色譜法鑒別陳皮(1)供試品溶液的制備取本品10g，研細(xì)，加甲醇30ml，超聲處理30min，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)覫ml甲醇使溶解，作為供試品溶液；(2)對(duì)照品溶液的制備另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液；(3)陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含陳皮的樣品，取該樣品按照供試品溶液制備方法制備；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3、ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水，體積比100 17 13為展開劑，展開，取出，晾干；(4)置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且陰性顯示無干擾；三.高效液相法測(cè)定芍藥苷(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-乙腈-水-磷酸，體積比13:10: 77:0.1為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為232nm ；理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算為8352，與相鄰峰的分離度為1. 80 ；(2)對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每Iml中含 50ug的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取本品適量，研細(xì)，混勻，取約lg，精密稱定，加稀乙醇50ml，超聲處理30分鐘，放冷，取續(xù)濾液即得；(4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定， 本品含白芍、牡丹皮以芍藥苷(C23H28011)計(jì)，每Ig不得少于0. 60mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種調(diào)經(jīng)丸的檢測(cè)方法，包括薄層色譜法鑒別醋香附、陳皮；高效液相法測(cè)定芍藥苷三部分內(nèi)容。其中取醋香附15g，研細(xì)，加乙醚50ml，經(jīng)處理，殘?jiān)宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液;對(duì)照品溶液取α-香附酮對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液；陰性對(duì)照液制備按照工藝和處方制備不含醋香附的樣品。照薄層色譜法，以8011二氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸展開，置254nm紫外光燈下檢視:供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同的深藍(lán)色斑點(diǎn)；噴以二硝基苯肼，放置片刻，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色，且陰性顯示無干擾。采用本發(fā)明的測(cè)定方法，能有效的控制調(diào)經(jīng)丸的內(nèi)在質(zhì)量，該方法具有精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性高的特點(diǎn)，確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定一致，從而保證產(chǎn)品的安全有效。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102507836SQ20111033129
公開日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月27日
發(fā)明者張紅茹, 閆曉楠, 陳偉 申請(qǐng)人:天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠