專利名稱：心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)腦中風(fēng)等心腦血管疾病的器具，特別是涉及一種 心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡。屬于腦中風(fēng)等心腦血管疾病檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腦中風(fēng)等心腦血管疾病是目前全世界范圍內(nèi)危害人類生命健康的第一殺 手。臨床醫(yī)學(xué)上大多依靠腦電圖、影像學(xué)檢查診斷此類疾病，但其使用受到多 種條件的限制，很大程度上耽誤了治療時(shí)間。研究表明，已知多種腦中風(fēng)的生 化標(biāo)志物及其分析鑒定方法有助于判斷、預(yù)測(cè)心腦血管疾病病情，大大提高了 疾病診斷率，可明顯降低患者死亡率。這些生化標(biāo)志物是大腦缺血或出血性中 風(fēng)發(fā)生時(shí)從大腦釋放出的蛋白質(zhì)或其它分子，包括僅存于大腦中的一些蛋白的
異構(gòu)體，如神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和s—ioop蛋白等，使用多種
生化標(biāo)志物的試劑檢測(cè)將大大提高腦中風(fēng)的有效診斷率。
通過(guò)檢測(cè)分析人腦脊液或血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和s
一ioop蛋白的水平，可提供一種快速診斷和區(qū)分腦中風(fēng)的方法，有助于鑒別栓
塞性和出血性中風(fēng)。現(xiàn)有技術(shù)對(duì)于神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和s 一ioop蛋白的檢測(cè)主要依賴化學(xué)儀器分析、酶免疫檢測(cè)試劑盒，也有單獨(dú)檢測(cè)
神經(jīng)元特異性烯醇化酶的檢測(cè)試紙條。但到目前為止，還沒(méi)有同時(shí)檢測(cè)這三種
物質(zhì)的檢測(cè)器具。
發(fā)明內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的在于提供一種能同時(shí)檢測(cè)神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘
堿性蛋白和s—ioop蛋白的檢測(cè)器具，大大提高腦中風(fēng)的有效診斷率。
本實(shí)用新型的技術(shù)方案是一種心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡，它在長(zhǎng)條扁平薄殼狀的檢測(cè)卡外殼中設(shè)置測(cè)試條，檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔和加樣孔，測(cè)
試條2是由支承背板5上粘貼樣品墊8、膠體金膜7、硝酸纖維素膜6、和吸水 膜9組成。支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端疊置粘貼吸 水膜9，另一端疊置粘貼樣品墊8，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖 維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼數(shù)段膠體 金膜7。膠體金膜是含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗
s—ioop蛋白抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有三條檢測(cè)帶和
一條質(zhì)控帶，依次是含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體檢測(cè)帶10，含抗髓鞘堿 性蛋白抗體檢測(cè)帶ll，含抗S—100p蛋白檢測(cè)帶12,質(zhì)控帶13,質(zhì)控帶含抗兔 抗體或抗鼠抗體，測(cè)試條置入檢測(cè)卡外殼l內(nèi)，樣品墊正對(duì)加樣孔4，硝酸纖維 素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔3。
本實(shí)用新型的有益效果本發(fā)明的三通道檢測(cè)卡能同時(shí)檢測(cè)出血液和腦脊 液樣品中含有的神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和S—100p蛋白，本實(shí)用 新型三通道檢測(cè)卡易于制備且節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用，使用方便快速，結(jié)果準(zhǔn)確。

圖1心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡的外殼及測(cè)試條在外殼內(nèi)的安置圖。 圖2心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡的測(cè)試條結(jié)構(gòu)示意圖。 圖3心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡的硝酸玻璃纖維膜上顯示印跡示意圖。
具體實(shí)施方式
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本實(shí)用新型結(jié)合具體實(shí)施例參見(jiàn)附圖進(jìn)一步說(shuō)明如下
一種心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡，它是在檢測(cè)卡外殼1中設(shè)置測(cè)試條2，檢
測(cè)卡外殼1的結(jié)構(gòu)及測(cè)試條2的設(shè)置參見(jiàn)附圖1，檢測(cè)卡外殼1為長(zhǎng)條扁平薄殼 狀外殼，長(zhǎng)7cm,寬2cm，厚0. 5cm，薄殼壁厚0. lcm，由工程塑料制成。檢測(cè)卡外殼1由殼蓋與殼座兩半聯(lián)接構(gòu)成，在檢測(cè)卡外殼1殼蓋上有檢測(cè)窗孔3和 加樣孔4。測(cè)試條2放置在檢測(cè)卡外殼1的殼座內(nèi)。
測(cè)試條2是多層結(jié)構(gòu)的窄條薄片，片長(zhǎng)約6.0cm，片寬約0.4cm,厚度小于 2.5mm。測(cè)試條2是多層結(jié)構(gòu)底層是支承背板5，為聚氯乙烯塑料薄片，厚約 0.5mm,長(zhǎng)6.0cm,寬0. 4cm;在支承背板5上通過(guò)不干膠在其上粘貼樣品墊8, 膠體金膜7，硝酸纖維素膜6和吸水膜9。支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素 膜6，硝酸纖維素膜厚0.5咖，長(zhǎng)2-2.5cm,寬0. 4cm。硝酸纖維素膜6上有四 條間隔開(kāi)的橫向顯示印跡帶，參見(jiàn)附圖3，四條顯示印跡帶中，第一條是檢測(cè)帶 10，含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體，第二條檢測(cè)帶11,含抗髓鞘堿性蛋白抗 體，第三條是檢測(cè)帶12,含抗S—IOOP蛋白抗體，第四條是質(zhì)控帶13,含抗兔 抗體或抗鼠抗體。調(diào)節(jié)待檢物的抗體濃度大約為lmg/ml，抗兔抗體或抗鼠抗體 濃度大約為lmg/ml時(shí)噴膜。支承背板5 —端上疊置粘貼吸水膜9，支承背板5 另一端上疊置粘貼樣品墊8，吸水膜9內(nèi)端與樣品墊8內(nèi)端各自分別與硝酸纖維 素膜6 —端搭接，在樣品墊8與硝酸纖維素膜6的搭接部，兩者之間夾置粘貼 數(shù)段膠體金膜7,膠體金膜7是含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋 白抗體和抗S — 100P蛋白抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜。膠體金膜7厚 0. 5-0. 8咖，長(zhǎng)0. 5~0. 6cm,寬0. 4cm。樣品墊8厚0. 5-0. 8咖，長(zhǎng)2cm,寬0. 4c邁。 吸水膜9厚0. 5-0. 8mm,長(zhǎng)1.6-2cm，寬0. 4cm。膠體金膜是將抗體與膠體金顆 粒標(biāo)記后，調(diào)節(jié)濃度大約為1D涂布膠體玻璃纖維膜，烘干后備用。膠體金膜7、 樣品墊8及吸水膜9與硝酸纖維素膜6搭接長(zhǎng)度為0. 1-0. 2cm。吸水膜9材料是 吸水紙，樣品墊8材料是吸水玻璃纖維膜。
使用心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，先將待檢測(cè) 樣品液從加樣 孔中4滴注入神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和S—100P蛋白三通道檢測(cè)卡的樣品墊8，由于虹吸作用原理，帶動(dòng)待檢測(cè)的樣品液及膠體金膜7所含的抗
神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗s—ioop蛋白抗體膠體金
標(biāo)記物一起向硝酸纖維素膜6擴(kuò)散，5-IO分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。
檢測(cè)卡的主要反應(yīng)是免疫學(xué)的抗原和抗體反應(yīng)，當(dāng)樣品中有相應(yīng)的待檢神
經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和s—ioop蛋白存在，則樣品加入后即與相
應(yīng)的膠體金結(jié)合的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗S 一100p蛋白抗體反應(yīng)，在硝酸纖維素膜上遷移的膠體金標(biāo)記的抗體，在測(cè)試帶 上分別與含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗s—ioop 蛋白抗體，以及質(zhì)控帶抗兔抗體或抗鼠抗體反應(yīng)，形成棕紅色條帶。主要反應(yīng) 的結(jié)果有以下9種情況，分別顯示不同的檢測(cè)結(jié)果
1、 如果顯示檢測(cè)帶IO、 11、 12和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡帶，表示 檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明被檢測(cè)樣品中神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和S
—ioop蛋白含量增高。
2、 如果檢測(cè)帶IO、 11、 12不顯示顏色，只有質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡， 檢測(cè)結(jié)果為陰性，表明被檢測(cè)樣品中神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和S
一ioop蛋白含量正常。
3、 如果檢測(cè)帶IO、 11、質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)帶12不顯色，表 明被檢測(cè)樣品中神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白含量增高，而S—100j3 蛋白含量正常。
4、 如果檢測(cè)帶10、 12、質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)帶11不顯色，表
明被檢測(cè)樣品中神經(jīng)元特異性烯醇化酶、s—ioop蛋白含量增高，而髓鞘堿性蛋
白含量正常。
5、 如果檢測(cè)帶ll、 12、質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)帶10不顯色，表明被檢測(cè)樣品中髓鞘堿性蛋白、s—ioop蛋白含量增高，而神經(jīng)元特異性烯醇化
酶含量正常。
6、 如果檢測(cè)帶10顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)帶ll、 12和質(zhì)控帶13不顯現(xiàn)棕 紅色印跡，表明被檢測(cè)樣品中神經(jīng)元特異性烯醇化酶含量增高，而髓鞘堿性蛋 白和S—100(3蛋白含量正常。
7、 如果檢測(cè)帶11顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)帶10、 12和質(zhì)控帶13不顯現(xiàn)棕 紅色印跡，表明被檢測(cè)樣品中髓鞘堿性蛋白含量增高，而神經(jīng)元特異性烯醇化 酶和S—100p蛋白含量正常。
8、 如果檢測(cè)帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)帶10、 11和質(zhì)控帶13不顯現(xiàn)棕 紅色印跡，表明被檢測(cè)樣品中S—100J3蛋白含量增高,而神經(jīng)元特異性烯醇化酶、 髓鞘堿性蛋白含量正常。
9、 如果檢測(cè)帶IO、 11、 12和質(zhì)控帶13均不顯色，則表明測(cè)試條失效。
權(quán)利要求1、一種心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡，它在長(zhǎng)條扁平薄殼狀的檢測(cè)卡外殼中設(shè)置測(cè)試條，檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔和加樣孔，其特征在于測(cè)試條(2)是由支承背板(5)上粘貼樣品墊(8)、膠體金膜(7)、硝酸纖維素膜(6)、和吸水膜(9)組成支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜(6)，支承背板一端疊置粘貼吸水膜(9)，另一端疊置粘貼樣品墊(8)，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼數(shù)段膠體金膜(7)；膠體金膜是含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗S-100β蛋白抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有三條檢測(cè)帶和一條質(zhì)控帶，依次是含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體檢測(cè)帶(10)，含抗髓鞘堿性蛋白抗體檢測(cè)帶(11)，含抗S-100β蛋白檢測(cè)帶(12)，質(zhì)控帶(13)，質(zhì)控帶含抗兔抗體或抗鼠抗體，測(cè)試條置入檢測(cè)卡外殼(1)內(nèi)，樣品墊正對(duì)加樣孔(4)，硝酸纖維素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔(3)。
專利摘要心腦血管疾病三通道檢測(cè)卡。本實(shí)用新型三通道檢測(cè)卡外殼內(nèi)有測(cè)試條，由支承背板上粘貼樣品墊、膠體金膜、硝酸纖維素膜和吸水膜組成。膠體金膜為含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗S-100β蛋白抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有3條檢測(cè)帶，分別含抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體、抗髓鞘堿性蛋白抗體和抗S-100β蛋白抗體，另有1條含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶。本實(shí)用新型優(yōu)點(diǎn)是能同時(shí)檢測(cè)出血液和腦脊液樣品中含有的神經(jīng)元特異性烯醇化酶、髓鞘堿性蛋白和S-100β蛋白。檢測(cè)卡易于制備且節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用，使用方便快速，結(jié)果準(zhǔn)確。
文檔編號(hào)G01N33/558GK201429597SQ200920065048
公開(kāi)日2010年3月24日 申請(qǐng)日期2009年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月6日
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