專利名稱：一種毛細(xì)管電泳拆分2,4-滴丙酸對映體的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種手性除草劑2，4-滴丙酸的對映體拆分方法，屬于環(huán)境污染物分 析技術(shù)領(lǐng)域。
(二)
背景技術(shù)：
除草劑又稱殺草劑，是一類用來殺死植物的藥劑。這些藥劑能夠選擇性地作用于 特定目標(biāo)，使其他對于人類有用的農(nóng)作物不受傷害，或受的傷害較小。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國目前除 草劑每年使用面積以200萬hm2遞增，如此大量化學(xué)除草劑的使用， 一方面，它對我們農(nóng)業(yè) 發(fā)展作出了非常重要的貢獻(xiàn)，但同時也造成了一系列的環(huán)境問題，如抗藥雜草種群的增加、 土壤板結(jié)、水體污染等，嚴(yán)重地影響了農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和人類的健康安全。
2，4-滴丙酸，中文別名為2-(2，4-二氯苯氧基)丙酸，英文名稱為2_ (2， 4-Dichlorophenoxy) -propionic acid，分子式C9H8C1203，分子量235. 07，純品為無色無味 結(jié)晶，熔點(diǎn)117. 5-118. rc (純品)，微溶于水，溶于多數(shù)有機(jī)溶劑，結(jié)構(gòu)如式l所示。大鼠 經(jīng)口急性毒性LD5。 > 800mg/kg ;大鼠經(jīng)皮急性毒性大于1400mg/kg。遇明火、高熱可燃，遇 潮時對大多數(shù)金屬有腐蝕性，受高熱分解，放出有毒的煙氣，且對眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸 道有剌激作用。它屬于苯氧類除草劑，主要用于防治谷類作物中寥屬和其他雜草。
式1 已有研究表明，同一手性除草劑的各對映體之間雖然有著相同的理化性質(zhì)，但是 它們在生理和毒理方面存在著巨大的差異，因此，從對映體層面考慮這些手性除草劑的藥 效和環(huán)境安全性就顯得尤為重要，而手性除草劑2，4-滴丙酸的拆分則是研究其對映體環(huán) 境行為差異和環(huán)境安全的必要前提，它將對于準(zhǔn)確評價2，4-滴丙酸在環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品的殘 留有著十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種毛細(xì)管電泳結(jié)合紫外檢測技術(shù)拆分2， 4_滴丙酸的方法，為評價其各對映體其殘留特征和環(huán)境健康風(fēng)險(xiǎn)提供技術(shù)支持。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下
—種拆分2， 4-滴丙酸的方法，包括以下步驟 (1)將外消旋的2， 4-滴丙酸、有機(jī)改性劑與水溶劑混合制成樣品溶液，所述的有 機(jī)改性劑為甲醇或乙腈，所述的樣品溶液中2，4-滴丙酸的濃度為10—2mg/ml 10—^g/ml， 所述有機(jī)改性劑的體積濃度不大于1% ; (2)配制十二烷基硫酸鈉_磷酸緩沖溶液，調(diào)節(jié)pH至2 3范圍內(nèi)，然后加入手性
3選擇劑Y _環(huán)糊精(Y -CD)，并控制Y _環(huán)糊精的質(zhì)量終濃度為2 4% ;以含有Y _環(huán)糊 精的十二烷基硫酸鈉_磷酸緩沖溶液作為運(yùn)行用的緩沖溶液； (3)將步驟(1)制得的樣品溶液和步驟(2)制得的含有Y-環(huán)糊精的十二烷基硫 酸鈉-磷酸緩沖溶液放入毛細(xì)管電泳儀中，加上反向電壓，進(jìn)行拆分。 本發(fā)明步驟(1)中，在配制樣品溶液時加入了有機(jī)改性劑，以增加樣品的溶解性。 優(yōu)選有機(jī)改性劑為甲醇；優(yōu)選樣品溶液中有機(jī)改性劑的體積濃度為0. 5 1%。
本發(fā)明步驟(2)中，配置H3P04濃度和十二烷基硫酸鈉(SDS)濃度分別為30 50mmol/L的緩沖溶液，優(yōu)選其中H3P04和SDS的摩爾比為1 : 1 ;優(yōu)選調(diào)節(jié)ffl至2左右。本 發(fā)明中運(yùn)行用的緩沖溶液在配制好后使用一次性注射器經(jīng)過0. 45 m的濾膜過濾。
本發(fā)明步驟(3)中，在用毛細(xì)管進(jìn)行拆分之前，通常先后用NaOH溶液、水、十二 烷基硫酸鈉_磷酸緩沖溶液沖洗毛細(xì)管，具體推薦按照如下方法進(jìn)行沖洗用0. lmol/L NaOH溶液和水分別沖洗2min，然后運(yùn)行緩沖溶液沖洗2min，之后進(jìn)行拆分。本發(fā)明可在 常規(guī)拆分條件下進(jìn)行拆分，比如反向電壓控制在15 25kV，優(yōu)選20kV ;進(jìn)樣采用壓力進(jìn)樣 0.5psi X 3s。 本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明所述的2，4-滴丙酸拆分方法簡單、準(zhǔn)確，為準(zhǔn)確、真 實(shí)的了解和評價此類物質(zhì)對映體選擇性差異提供技術(shù)支撐。
(四)


圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中的2，4-滴丙酸對映體的拆分效果圖。
(五)
具體實(shí)施例方式
下面以具體實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限 于此 實(shí)施例1 (1)樣品配制稱取5mg的2， 4-滴丙酸溶于lml甲醇中，配置成5mg/ml的母液。 隨后取10 ii 1母液加到990 ii 1蒸餾水中，配置lml成0. 05mg/ml的樣品溶液。
(2)運(yùn)行緩沖溶液配制稱取2. 884g十二烷基硫酸鈉(SDS)溶于50ml水中，配成 濃度為200mmol/L的溶液。取0. 685ml的H3P04加到50ml水中，配成濃度約為200,1/L 的溶液。接著各取上述溶液12. 5ml定容到50ml，配成H3P04濃度和SDS濃度都為50mM的 緩沖溶液，用飽和NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至2左右。最后，取5ml先前所配pH為2的緩沖溶液， 稱取130mg Y-CD溶于其中，配制成最終運(yùn)行用的添加手性選擇劑的緩沖溶液。使用一次性 注射器經(jīng)過0. 45 ii m的濾膜過濾。 (3)儀器使用儀器為Beckman P/ACE MDQ毛細(xì)管電泳儀，PDA檢測器，32Karat 軟件(美國，Beckman公司)；熔融石英毛細(xì)管柱，60cmX50 y m，有效長度為50cm(美國， Beckman公司)。 (4)電泳條件工作電壓，20kV(反向電壓)；檢測波長214nm ;柱溫25t:;壓力進(jìn) 樣0. 5psiX3s ;毛細(xì)管使用前用0. lmol/LNaOH溶液和水分別沖洗2min，運(yùn)行緩沖溶液沖 洗2min。隨后即可拆分。拆分結(jié)果如圖l所示，其中左邊的峰記為峰一，右邊的峰記為峰
在步驟(4)的實(shí)驗(yàn)條件下，將步驟(1)配制得到的樣品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，得到 與圖l相似的結(jié)果，考察對映體分離的出峰時間、峰面積、峰高的重現(xiàn)性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下 1.出峰時間標(biāo)準(zhǔn)偏差峰一 3. 21%，峰二 3. 45% ;2.峰面積的標(biāo)準(zhǔn)偏差峰一 5. 02%，峰二 4. 72% ;3.峰高的標(biāo)準(zhǔn)偏差峰一 6. 17%，峰二 5. 69%。由此可見，本發(fā)明所述拆分方法具 有良好的重現(xiàn)性。
權(quán)利要求
一種拆分2，4-滴丙酸對映體的方法，包括以下步驟(1)將外消旋的2，4-滴丙酸、有機(jī)改性劑與水溶劑混合制成樣品溶液，所述的有機(jī)改性劑為甲醇或乙腈，所述的樣品溶液中2，4-滴丙酸的濃度為10-2mg/ml～10-1mg/ml，所述有機(jī)改性劑的體積濃度不大于1％；(2)配制十二烷基硫酸鈉-磷酸緩沖溶液，調(diào)節(jié)pH至2～3范圍內(nèi)，然后加入手性選擇劑γ-環(huán)糊精，并控制γ-環(huán)糊精的質(zhì)量終濃度為2～4％；(3)將步驟(1)制得的樣品溶液和步驟(2)制得的含有γ-環(huán)糊精的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩沖溶液放入毛細(xì)管電泳儀中，加上反向電壓，進(jìn)行拆分。
2. 如權(quán)利要求1所述的拆分2，4-滴丙酸對映體的方法，其特征在于所述樣品溶液中有 機(jī)改性劑的體積濃度為0. 5 1%。
3. 如權(quán)利要求1所述的拆分2， 4-滴丙酸對映體的方法，其特征在于所述十二烷基硫酸 鈉-磷酸緩沖溶液中，十二烷基硫酸鈉與磷酸的摩爾比為1 : l，所述十二烷基硫酸鈉與磷 酸的濃度分別為30 50mmol/L。
4. 如權(quán)利要求1所述的拆分2， 4-滴丙酸對映體的方法，其特征在于調(diào)節(jié)十二烷基硫酸 鈉-磷酸緩沖溶液的pH為2。
5. 如權(quán)利要求1 4之一所述的拆分2， 4-滴丙酸對映體的方法，其特征在于所述的反 向電壓控制在15 25kV。
6. 如權(quán)利要求5所述的拆分2， 4-滴丙酸對映體的方法，其特征在于所述的反向電壓控 制在20kV。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種毛細(xì)管電泳拆分2，4-滴丙酸對映體的新方法，包括以下步驟(1)將外消旋的2，4-滴丙酸、有機(jī)改性劑與水溶劑混合制成樣品溶液，所述的有機(jī)改性劑為甲醇或乙腈；(2)配制十二烷基硫酸鈉-磷酸緩沖溶液，調(diào)節(jié)pH至2～3范圍內(nèi)，然后加入手性選擇劑γ-環(huán)糊精，并控制γ-環(huán)糊精的質(zhì)量終濃度為2～4％；(3)將樣品溶液和含有γ-環(huán)糊精的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩沖溶液放入毛細(xì)管電泳儀中，加上反向電壓，進(jìn)行拆分。本發(fā)明所述的2，4-滴丙酸對映體拆分方法簡單、準(zhǔn)確，為準(zhǔn)確、真實(shí)的了解和評價此類物質(zhì)對映體選擇性差異提供技術(shù)支撐。
文檔編號G01N27/447GK101782548SQ20091015474
公開日2010年7月21日 申請日期2009年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月3日
發(fā)明者劉維屏, 張全, 王萃, 趙美蓉 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)