專利名稱：：蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
膠囊制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，確切地說(shuō)是一種蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：蒲元和胃膠囊是由延胡索、蒲公英、香附、乳香、甘草、白砜等六味中藥組成，具有行氣和胃止痛的功效。用于胃脘脹痛、噯氣返酸、煩躁易怒、脅脹等胃及十二指腸潰瘍屬氣滯證者。對(duì)幽門螺旋桿菌有明顯的殺菌和抑菌作用，因此具有抑制應(yīng)激型、幽門結(jié)扎型、醋酸型和乙醇型潰瘍發(fā)病和抗炎鎮(zhèn)痛的作用，并可減少導(dǎo)致慢性胃炎、胃潰瘍病和胃萎縮性病變的刺激因素；同時(shí)對(duì)胃粘膜病變的修復(fù)和改善具有促進(jìn)作用。由于組方中各味中藥的質(zhì)量指標(biāo)，直接影響到組方制劑的藥理活性、藥效和其他性質(zhì)，因此完善中藥制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法是具有非常必要的實(shí)際意義的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明就是為了在生產(chǎn)中有效的保證和提高蒲元和胃膠囊產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量和藥品療效，對(duì)蒲元和胃膠囊的性狀指標(biāo)、薄層色譜鑒別指標(biāo)、含量測(cè)定制定的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)方法。方中蒲公英近年臨床研究對(duì)治療胃、十二指腸潰瘍有明顯療效，本應(yīng)涉及含量測(cè)定方法，考慮蒲公英在方中僅作為臣藥，故只做蒲公英的鑒別反應(yīng)。本發(fā)明的目的是由以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，包括延胡索、蒲公英、香附、乳香、甘草、白礬，該膠囊品種的性狀指標(biāo)采用目測(cè)、鼻嗅及口嘗，其特征在于采用薄層色譜鑒別指標(biāo)和/或含量測(cè)定指標(biāo)中的一種或幾種進(jìn)行檢測(cè)；薄層色譜鑒別指標(biāo)采用薄層色譜法，含量測(cè)定指標(biāo)采用高效液相色譜法。性狀指標(biāo)為硬膠囊，內(nèi)容物為棕黃色顆粒；氣微香、味微苦。薄層色譜鑒別指標(biāo)為試品色譜中，具有甘草、蒲公英、乳香藥材的斑點(diǎn)特征和a-香附酮的斑點(diǎn)特征。薄層色譜鑒別檢測(cè)方法為(1)取本品內(nèi)容物19g，力n10%100%甲醇或乙醇1060ml，超聲處理或加熱回流或冷浸提取1060分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖糽6ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲公英對(duì)照藥材l6g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液515tU、對(duì)照藥材溶液36ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(155:124:31)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)取本品內(nèi)容物19g，加甲醇或乙醇1060ml，超聲處理或加熱回流l2小時(shí)，冷卻至室溫，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀⒓状蓟蛞掖?030ml使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取24次，每次1030ml，合并正丁醇液，再以正丁醇飽和的水2060ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟驘o(wú)水乙醇24ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材12g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液515ul、對(duì)照藥材溶液l10ul，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(3015:21:21:42)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以812%硫酸乙醇溶液，在105t:烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)取本品內(nèi)容物l9g，加甲醇或無(wú)水乙醇1060ml，振搖片刻，浸泡過夜，上清液作為供試品溶液；另取乳香對(duì)照藥材12g,同法制成對(duì)照藥材溶液;照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液515Ul、對(duì)照藥材溶液36ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(3060'C)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以812%香草醛硫酸溶液，在105。C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本品內(nèi)容物1030g，加水200400ml，連接揮發(fā)油提取器，自冷凝管頂端加入乙酸乙酯14ml，回流提取13小時(shí)，冷卻至室溫，用吸管吸取乙酸乙酯液作為供試品溶液;另取a-香附酮對(duì)照品加乙酸乙酯制成每lml含l2mg的溶液作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VlB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各515lil，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(459:51)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，放置片刻，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。薄層色譜鑒別檢測(cè)優(yōu)選的方法為蒲公英的鑒別取本品內(nèi)容物26g，加10。/。100。/。甲醇或乙醇2040ml，超聲處理或加熱回流或冷浸提取2040分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖?5ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲公英對(duì)照藥材24g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液510ul、對(duì)照藥材溶液35"1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(105:84:21)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；甘草的鑒別取本品內(nèi)容物26g,加甲醇或乙醇2040ml，超聲處理或加熱回流2小時(shí)，冷卻至室溫，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?、甲醇或乙?020ml使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取34次，每次1020ml，合并正丁醇液，再以正丁醇飽和的水3050ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟驘o(wú)水乙醇23ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對(duì)照藥材lg,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液510ul、對(duì)照藥材溶液36ul，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(3015:21:21:42)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以911%硫酸乙醇溶液，在105°C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；乳香的鑒別取本品內(nèi)容物26g，加甲醇或無(wú)水乙醇2040ml，振搖片刻，浸泡過夜，上清液作為供試品溶液；另取乳香對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液510tU、對(duì)照藥材溶液45nl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(3060°C)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以911%香草醛硫酸溶液，在105'C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；a-香附酮的鑒別取本品內(nèi)容物1020g，加水200300ml，連接揮發(fā)油提取器，自冷凝管頂端加入乙酸乙酯23ml，回流提取12小時(shí)，冷卻至室溫，用吸管吸取乙酸乙酯液作為供試品溶液；另取a-香附酮對(duì)照品加乙酸乙酯制成每lml含l2mg的溶液作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各510tU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(279:31)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，放置片刻，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定指標(biāo)為每粒含延胡索以延胡索乙素(C^H25N04)計(jì)大于或等于30.0lig。含量測(cè)定檢測(cè)方法為參照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠或辛基硅烷鍵合硅膠或氰基或氨基鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(8545:5515)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230330nm,理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)，不得低于20004000;對(duì)照品溶液的制備取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲垸制成每lml含2080Ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物2.510g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水510ml，振搖，放置3060分鐘，精密加入甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲垸50100ml，稱重，加熱回流13小時(shí)或超聲處理3060分鐘或放置冷浸1224小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，放置室溫后再稱重，用甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲垸補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液1050ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?、正丁醇或三氯甲?無(wú)水乙醇(1:1)溶解，定容至525ml容量瓶中，搖勻，過濾，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各515Ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；蒲元和胃膠囊每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25N04)計(jì)大于或等于30.0^g。含量測(cè)定優(yōu)選的方法為參照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠或辛基硅烷鍵合硅膠或氰基或氨基鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(7565:3525)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為260300nm，理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)，不得低于20003000;對(duì)照品溶液的制備取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲垸制成每lml含4060ug的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物2.55g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水58ml，振搖，放置3045分鐘，精密加入甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷5075ml，稱重，加熱回流12小時(shí)或超聲處理3060分鐘或放置冷浸1824小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，放置室溫后再稱重，用甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲垸補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液2550ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?、正丁醇或三氯甲?無(wú)水乙醇(1:1)溶解，定容至510ml容量瓶中，搖勻，過濾，即得供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各510Ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；蒲元和胃膠囊每粒含延胡索以延胡索乙素(C^H25N04)計(jì)，大于或等于30.0Pg。本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn)是由于對(duì)蒲元和胃膠囊釆取了性狀指標(biāo)、各味中藥的薄層色譜鑒別指標(biāo)和含量測(cè)定制定的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)方法，使得各味中藥的質(zhì)量指標(biāo)能夠得到有效的控制，保證了組方制劑的藥理活性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和回收率，達(dá)到了通過控制產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，使藥品療效得到更好保證的目的。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:一種蒲元和胃膠囊的質(zhì)量控制方法，該膠囊品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括(1)蒲公英的薄層鑒別蒲公英含綠原酸、咖啡酸、木犀草素等成分，因此采用溶劑(50%甲醇)提取，經(jīng)試驗(yàn)，能得到清晰的薄層色譜圖。取本品內(nèi)容物3g，加50。/。甲醇20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取蒲公英對(duì)照藥材2g,同法制成對(duì)照藥材溶液。取缺蒲公英的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物3g,同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各5ul、對(duì)照藥材溶液3u1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。(2)甘草的薄層鑒別取本品內(nèi)容物3g，加乙醇30ml，加熱回流2小時(shí)，冷卻至室溫，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀s20ml使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，再以正丁醇飽和的水30ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇約2ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。取缺甘草的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物3g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各10Pl、對(duì)照藥材溶液5nl，分別點(diǎn)于同一用1°/。氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(30:2:2:4)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。(3)乳香的薄層鑒別取本品內(nèi)容物3g，加無(wú)水乙醇20ml，振搖片刻，浸泡過夜，上清液作為供試品溶液。另取乳香對(duì)照藥材lg,同法制成對(duì)照藥材溶液。取缺乳香的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物3g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各10ul、對(duì)照藥材溶液5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚35。C為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，在105"烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。(4)ci-香附酮的薄層鑒別取本品內(nèi)容物20g，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自冷凝管頂端加入乙酸乙酯2ml，回流提取約2小時(shí)，冷卻至室溫，用吸管吸取乙酸乙酯液作為供試品溶液。另取a-香附酮對(duì)照品加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液作為對(duì)照品溶液。取缺香附的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物20g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液和對(duì)照藥材溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己垸-乙酸乙酯(9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，放置片刻，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。本發(fā)明所說(shuō)的含量測(cè)定檢測(cè)方法為照高效液相色譜法測(cè)定(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱溫25°C，以甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(65:35)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)，不低于3000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取延胡索乙素對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含50ug的溶液，作為對(duì)照品溶液，備用。供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物5g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水5ml，振搖，放置30分鐘，精密加入三氯甲烷50ml，稱重，放置冷浸24小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，再稱重，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液25ml，水浴蒸干，殘?jiān)尤燃综?無(wú)水乙醇(l:l)溶解，定容至10ml容量瓶中，搖勻，過濾，即得供試品溶液，備用。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10lU,注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。蒲元和胃膠囊每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25N04)計(jì)，30.0lig。儀器、試劑及試藥(1)儀器高效液相色譜儀、分析天平、移液管、超聲波清洗器、量瓶、具塞錐形瓶等。(2)試劑試藥延胡索乙素中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào)110726-200409，供含量測(cè)定用)；樣品批號(hào):080201，080215，080227;甲醇色譜純；水純化水；其它試劑分析純。實(shí)驗(yàn)條件的選擇(1)提取方法的考察參照相關(guān)文獻(xiàn)中有關(guān)延胡索乙素的含量測(cè)定方法，比較了超聲法、加熱回流法和冷浸提取法，結(jié)果表明，超聲提取法所得延胡索乙素的含量最低，加熱回流法和冷浸法測(cè)得結(jié)果基本一致，但加熱回流法所得譜圖的干擾峰較多，且延胡索乙素峰在其它峰之間，難以達(dá)到基線分離，故選擇冷浸提取法。(2)色譜條件的選擇流動(dòng)相的選擇參考文獻(xiàn)資料中收載的有關(guān)延胡索乙素的含量測(cè)定方法，比較了甲醇-0.1%磷酸溶液(60:40，三乙胺調(diào)PH6.0)、甲醇-0.1%磷酸溶液(60:40，三乙胺調(diào)PH6.8)、甲醇-0.1%磷酸溶液(55:45，三乙胺調(diào)PH6.0)、甲醇-0.1%磷酸溶液(55:45，三乙胺調(diào)PH6.5)、甲醇-磷酸緩沖鹽(65:35，磷酸緩沖鹽磷酸二氫鉀0.1g+磷酸氫二鉀4.8g制成500ml)、甲醇-磷酸緩沖鹽(65:35,磷酸緩沖鹽磷酸二氫鉀0.78g+磷酸氫二鉀7.00g制成2000ml)等流動(dòng)相，結(jié)果表明甲醇-磷酸緩沖鹽(65:35，磷酸緩沖鹽磷酸二氫鉀0.1g+磷酸氫二鉀4.8g制成500ml)為流動(dòng)相，色譜峰峰形較理想，基線平穩(wěn)，分離度較好，故選擇甲醇-磷酸緩沖鹽(65:35，磷酸緩沖鹽磷酸二氫鉀O.lg+磷酸氫二鉀4.8g制成500ml)為流動(dòng)相。檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇據(jù)文獻(xiàn)資料報(bào)道，延胡索乙素的最大吸收波長(zhǎng)為280nm，波長(zhǎng)掃描試驗(yàn)證明亦如此，故檢測(cè)波長(zhǎng)選擇為280nm。方法學(xué)考察(1)線性關(guān)系考察取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含500昭的溶液，作為對(duì)照品溶液。精密吸取上述對(duì)照品溶液0.6ml、0.8ml、l.Oml、1.2ml、1.4ml各置于10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，制成所需的一系列對(duì)照品溶液，分別精密吸取iow，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，以延胡索乙素濃度對(duì)峰面積值進(jìn)行回歸分析，結(jié)果延胡索乙素在30pg/ml7(^g/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?；貧w方程為y=6.1656x—9.36，Y=0.99985。結(jié)果見表1。表l標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>(2)精密度試驗(yàn)取同一批號(hào)供試品，按[含量測(cè)定]項(xiàng)下方法制備供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)定結(jié)果見表2。表2精密度試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>結(jié)果表明本法精密度符合規(guī)定。(3)穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一批號(hào)供試品，按[含量測(cè)定]項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別于O、2、4、6、8小時(shí)進(jìn)樣，記錄延胡索乙素峰面積積分值，其峰面積均未見明顯變化，說(shuō)明供試品溶液較穩(wěn)定，結(jié)果見表3。表3穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>(4)重復(fù)性試驗(yàn)本試驗(yàn)設(shè)計(jì)3個(gè)不同的濃度，每個(gè)濃度分別制備3份供試品溶液。取同一批號(hào)供試品，按[含量測(cè)定]項(xiàng)下方法分別制備供試品溶液，結(jié)果見表4。表4重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>結(jié)果表明本法具有可操作性，重復(fù)性良好。(5)回收率試驗(yàn)取已知含量的同一供試品6份，每份2.0g，精密稱定，分別精密加入延胡索乙素(50ug/ml)8.5ml,按[含量測(cè)定]項(xiàng)下方法操作并測(cè)定其含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表5。表5加樣回收率試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>(6)樣品測(cè)定分別取不同批號(hào)的樣品約5g，精密稱定,按[含量測(cè)定]項(xiàng)下方法操作并測(cè)定，結(jié)果見表6。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>0802155.0016236.8339.30802275細(xì)9235.1839.0(7)陰性樣品測(cè)定取不含延胡索的樣品5g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水5ml，振搖，放置30分鐘，精密加入三氯甲烷50ml，稱重，放置冷浸24小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，再稱重，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液25ml，水浴蒸干，殘?jiān)尤燃综?無(wú)水乙醇(1:1)溶解，定容至10ml容量瓶中，搖勻，過濾，取續(xù)濾液即得。精密吸取10iU，注入液相色譜儀，測(cè)定。結(jié)果表明對(duì)樣品的測(cè)定無(wú)干擾，其具備專屬性。實(shí)施例2:一種蒲元和胃膠囊的質(zhì)量控制方法，該膠囊品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括(1)蒲公英的薄層鑒別蒲公英含綠原酸、咖啡酸、木犀草素等成分，因此采用溶劑(70%乙醇)提取，經(jīng)試驗(yàn)，能得到清晰的薄層色譜圖。取本品內(nèi)容物6g，加70。/。乙醇40ml，加熱回流50分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取蒲公英對(duì)照藥材4g，同法制成對(duì)照藥材溶液。取缺蒲公英的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物5g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各10ixl、對(duì)照藥材溶液5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(10.'8:3)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。(2)甘草的薄層鑒別取本品內(nèi)容物6g,加甲醇20ml，加熱回流1.5小時(shí)，冷卻至室溫，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀s25ml使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次15ml，合并正丁醇液，再以正丁醇飽和的水45ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状技s3ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液。取缺甘草的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物3g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各10ul、對(duì)照藥材溶液4ul，分別點(diǎn)于同一用1°/。氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(20:1.5:1.5:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8%硫酸乙醇溶液，在105。C烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。(3)乳香的薄層鑒別取本品內(nèi)容物6g，加甲醇50ml，振搖片刻，浸泡過夜，上清液作為供試品溶液。另取乳香對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液。取缺乳香的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物3g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各15uk對(duì)照藥材溶液6ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚5(TC為展開劑，展開，取出，晾干，噴以12%香草醛硫酸溶液，在105i:烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。(4)a-香附酮的薄層鑒別取本品內(nèi)容物30g，加水400ml，連接揮發(fā)油提取器，自冷凝管頂端加入乙酸乙酯4ml，回流提取約3小時(shí)，冷卻至室溫，用吸管吸取乙酸乙酯液作為供試品溶液。另取a-香附酮對(duì)照品加乙酸乙酯制成每lml含2mg的溶液作為對(duì)照品溶液。取缺香附的"蒲元和胃膠囊"內(nèi)容物30g，同法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液、陰性樣品溶液和對(duì)照藥材溶液各15Ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(30:3)為展幵劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，放置片刻，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾。實(shí)施例3:一種蒲元和胃膠囊的質(zhì)量控制方法，該膠囊品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括含量測(cè)定檢測(cè)方法為照高效液相色譜法測(cè)定(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱溫30°C，以甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(80:50)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為310nm，理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)，不低于3500。對(duì)照品溶液的制備精密稱取延胡索乙素對(duì)照品適量，加乙醇制成每lml含70lig的溶液，作為對(duì)照品溶液，備用。供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物9g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水9ml，振搖，放置50分鐘，精密加入正丁醇80ml，稱重，放置冷浸15小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，再稱重，用正丁醇補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液40ml，水浴蒸干，殘?jiān)诱〈既芙?，定容?0ml容量瓶中，搖勻，過濾，即得供試品溶液，備用。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各13lU，注入液相色譜儀,測(cè)定，即得。蒲元和胃膠囊每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25N04)計(jì)，30.5ug。權(quán)利要求1、一種蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，包括延胡索、蒲公英、香附、乳香、甘草、白礬，該膠囊品種的性狀指標(biāo)采用目測(cè)、鼻嗅及口嘗，其特征在于采用薄層色譜鑒別指標(biāo)和/或含量測(cè)定指標(biāo)中的一種或幾種進(jìn)行檢測(cè)；薄層色譜鑒別指標(biāo)采用薄層色譜法，含量測(cè)定指標(biāo)采用高效液相色譜法。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于性狀指標(biāo)為硬膠囊，內(nèi)容物為棕黃色顆粒；氣微香、味微苦。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于薄層色譜鑒別指標(biāo)為試品色譜中，具有甘草、蒲公英、乳香藥材的斑點(diǎn)特征和a-香附酮的斑點(diǎn)特征。4、根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于薄層色譜鑒別檢測(cè)方法為(1)取本品內(nèi)容物19g，力n10%100%甲醇或乙醇1060ml，超聲處理或加熱回流或冷浸提取1060分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖糽6ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲公英對(duì)照藥材16g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液515ul、對(duì)照藥材溶液36lU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(155:124:31)為展開齊IJ，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)取本品內(nèi)容物19g，加甲醇或乙醇1060ml，超聲處理或加熱回流l2小時(shí)，冷卻至室溫，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?、甲醇或乙?030ml使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取24次，每次1030ml，合并正丁醇液，再以正丁醇飽和的水2060ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟驘o(wú)水乙醇24ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對(duì)照藥材12g，同法制成對(duì)照藥材溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液515ul、對(duì)照藥材溶液l10ul，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(3015:21:21:42)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以812%硫酸乙醇溶液，在105。C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑占.(3)取本品內(nèi)容物l9g，加甲醇或無(wú)水乙醇1060ml，振搖片刻，浸泡過夜，上清夜作為供試品溶液；另取乳香對(duì)照藥材12g，同法制成對(duì)照藥材溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液515ul、對(duì)照藥材溶液36ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(3060°C)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以812%香草醛硫酸溶液，在105。C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)取本品內(nèi)容物1030g，加水200400ml，連接揮發(fā)油提取器，自冷凝管頂端加入乙酸乙酯14ml，回流提取13小時(shí)，冷卻至室溫，用吸管吸取乙酸乙酯液作為供試品溶液;另取a-香附酮對(duì)照品加乙酸乙酯制成每lml含l2mg的溶液作為對(duì)照品溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各515ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己垸-乙酸乙酯(459:51)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，放置片刻，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于蒲公英的鑒別取本品內(nèi)容物26g，加10%100%甲醇或乙醇20401111，超聲處理或加熱回流或冷浸提取2040分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟蛞掖?5ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲公英對(duì)照藥材24g，同法制成對(duì)照藥材溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液510"1、對(duì)照藥材溶液35u1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸(105:84:21)為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；甘草的鑒別取本品內(nèi)容物26g，加甲醇或乙醇2040ml,超聲處理或加熱回流2小時(shí)，冷卻至室溫，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀⒓状蓟蛞掖?020ml使溶解，以水飽和的正丁醇振搖提取34次，每次1020ml，合并正丁醇液，再以正丁醇飽和的水3050ml洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状蓟驘o(wú)水乙醇23ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液510ul、對(duì)照藥材溶液36lU，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水(3015:21:21:42)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以911%硫酸乙醇溶液，在105°C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；乳香的鑒別取本品內(nèi)容物26g，加甲醇或無(wú)水乙醇2040ml，振搖片刻，浸泡過夜，上清夜作為供試品溶液；另取乳香對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液510ul、對(duì)照藥材溶液45iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚G06(TC)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以911%香草醛硫酸溶液，在105'C烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；a-香附酮的鑒別取本品內(nèi)容物1020g，加水200300ml，連接揮發(fā)油提取器，自冷凝管頂端加入乙酸乙酯23ml，回流提取12小時(shí)，冷卻至室溫，用吸管吸取乙酸乙酯液作為供試品溶液；另取a-香附酮對(duì)照品加乙酸乙酯制成每lml含12mg的溶液作為對(duì)照品溶液；參照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各510ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(279:31)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液，放置片刻，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。6、根據(jù)權(quán)利要求l所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于含量測(cè)定指標(biāo)為每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25N04)計(jì)大于或等于30.0ug。7、根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于含量測(cè)定檢測(cè)方法為-參照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠或辛基硅烷鍵合硅膠或氰基或氨基鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(8545:5515)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230330nm，理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)，不得低于20004000;對(duì)照品溶液的制備取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷制成每lml含2080lig的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物2.510g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水510ml，振搖，放置3060分鐘，精密加入甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷50100ml，稱重，加熱回流13小時(shí)或超聲處理3060分鐘或放置冷浸1224小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，放置室溫后再稱重，用甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液1050ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?、正丁醇或三氯甲?無(wú)水乙醇(l:l)溶解，定容至525ml容量瓶中，搖勻，過濾，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各515"1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；蒲元和胃膠囊每粒含延胡索以延胡索乙素(C21H25N04)計(jì)大于或等于30.0yg。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，其特征在于含量測(cè)定參照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛基硅烷鍵合硅膠或氰基或氨基鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(7565:3525)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為260300nm，理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)，不得低于20003000;對(duì)照品溶液的制備取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷制成每lml含4060ug的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物2.55g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入濃氨水58ml，振搖，放置3045分鐘，精密加入甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷5075ml，稱重，加熱回流12小時(shí)或超聲處理3060分鐘或放置冷浸1824小時(shí)(其間應(yīng)振搖數(shù)次)，放置室溫后再稱重，用甲醇、乙醇、正丁醇或三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液2550ml,水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?、正丁醇或三氯甲?無(wú)水乙醇(1:1)溶解，定容至510ml容量瓶中，搖勻，過濾，即得供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各510Ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；蒲元和胃膠囊每粒含延胡索以延胡索乙素(C2iH25N04)計(jì)，大于或等于30.0Ug。全文摘要一種蒲元和胃膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，包括延胡索、蒲公英、香附、乳香、甘草、白礬，該膠囊品種的性狀指標(biāo)采用目測(cè)、鼻嗅及口嘗，其特征在于采用薄層色譜鑒別指標(biāo)和/或含量測(cè)定指標(biāo)中的一種或幾種進(jìn)行檢測(cè)；薄層色譜鑒別指標(biāo)采用薄層色譜法，含量測(cè)定指標(biāo)采用高效液相色譜法。由于對(duì)蒲元和胃膠囊采取了性狀指標(biāo)、各味中藥的薄層色譜鑒別指標(biāo)和含量測(cè)定制定的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)方法，使得各味中藥的質(zhì)量指標(biāo)能夠得到有效的控制，保證了組方制劑的藥理活性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和回收率，達(dá)到了通過控制產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，使藥品療效得到更好保證的目的。文檔編號(hào)G01N33/15GK101435812SQ20081023837公開日2009年5月20日申請(qǐng)日期2008年12月15日優(yōu)先權(quán)日2008年12月15日發(fā)明者崔科遠(yuǎn),白建宏,石華章,辛建杰,高向榮申請(qǐng)人:青島華仁太醫(yī)藥業(yè)有限公司