專利名稱：一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑及分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)食品中三聚氰胺殘留量的展開(kāi)劑及分析方法。
背景技術(shù)：
三聚氰胺(Melanmine)，簡(jiǎn)稱三胺，學(xué)名三氨三嗪，別名蜜胺、氰尿酰胺、三 聚酰胺，是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料，白色結(jié)晶粉末，無(wú)味。這種化學(xué)試劑 常被用于生產(chǎn)塑料、膠水和阻燃劑，在部分亞洲國(guó)家，它也被用于制造化肥。它是 一種禁止用于食品、飼料的化學(xué)物質(zhì)，人和動(dòng)物食用后會(huì)發(fā)生腎衰竭并導(dǎo)致死亡。
原料乳中三聚氰胺的檢測(cè)采用《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》〔GB/T 22400-2008) 所述的高效液相法，具體方法為稱取混合均勻的15 g原料乳樣品(準(zhǔn)確至0. 01 g)， 置于50 mL具塞刻度試管中，加入30 mL乙腈，劇烈振蕩6 min，加水定容至滿刻 度，充分混勻后靜置3 min，用一次性注射器吸取上清液用針式過(guò)濾器過(guò)濾后，作 為高效液相色譜分析用試樣。試樣進(jìn)行液相分析，依據(jù)保留時(shí)間一致性進(jìn)行定性識(shí) 別的方法。根據(jù)三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時(shí)間，確定樣品中是否含有三聚氰胺。
對(duì)其他奶制品則沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，借鑒美國(guó)FDA的檢測(cè)方法，具體方法為a. 稱取奶粉樣品5g (或牛奶10mL),加入50mL 1%三氯乙酸提取液，充分混勻，加入 2mL 2%乙酸鉛溶液，超聲20min;b.取部分溶液轉(zhuǎn)移至lOmL離心管中，8000rpm/min 離心10min。固相萃取柱PCX小柱活化及平衡3ml甲醇，3ml水；上樣加入提取 液3ml;淋冼3ml水，3ml甲醇，棄去淋冼液并將小拄抽干；洗脫5ml 5%氨化 甲醇(v/v)洗脫。(5%氨化甲醇的配制5ml氨水+95ml甲醇)；濃縮50°C ，氮?dú)?吹干，20。％甲醇/水定容至2ml。試樣進(jìn)行液相分析，依據(jù)保留時(shí)間一致性進(jìn)行定 性識(shí)別的方法。根據(jù)三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時(shí)間，確定樣品中是否含有三聚氰胺。
現(xiàn)有的國(guó)標(biāo)三聚氰胺的檢測(cè)方法為色譜法，但是該方法需要有完善的實(shí)驗(yàn)室， 有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員，復(fù)雜和昂貴的儀器，而且奶制品前處理過(guò)程十分繁瑣，不適合 大量樣品的篩查。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)上述現(xiàn)狀，旨在提供一種操作簡(jiǎn)便、便宜、準(zhǔn)確、快捷的 一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑及分析方法。本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)方式為， 一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑，由 以下重量份數(shù)的成分組成正丁醇4一8份，乙酸乙酯1一4份，水O. 1-l份。 一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜分析方法，具體步驟如下
1) 硅膠板的預(yù)處理用氯仿、甲醇清洗液處理硅膠薄層板
2) 配制展開(kāi)劑取重量份數(shù)為正丁醇4一8份，乙酸乙酯l一4份，水0. 1-1 份或濃度為0. 2-0. 5%的KC1水溶液0. 05-1份配制成展開(kāi)劑，
3) 顯色劑的配制取重量份數(shù)為，l一5份0.01 — 2% HgCl2乙醇溶液和l一5 份的0. 1-2%二苯卡巴腙乙醇溶液混合配制成復(fù)合顯色劑。
4) 被測(cè)試樣品預(yù)處理樣品進(jìn)行透析分離，取透析液蒸干，加其重量50-500 倍量的水溶解，作為待測(cè)試樣。
5) 薄層色譜分析首先將步驟4)的待測(cè)試樣，點(diǎn)樣到經(jīng)過(guò)步驟l)處理的硅膠 板上，再將薄層板放入倒入展開(kāi)劑的展開(kāi)缸中，上行展開(kāi)至上沿，取出薄層板，吹 千溶劑。
6) 顯色將步驟5)中展開(kāi)的薄層板噴上步驟3)配制的顯色劑，在105'C下， 加熱10min，顯色，完成色譜分析。
本發(fā)明作為食品，如奶制品、飼料等中添加和殘留三聚氰胺的定性鑒別方法， 經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、重現(xiàn)性好，斑點(diǎn)清晰、分離效果好，經(jīng) 陰性樣品對(duì)照，陰性樣品無(wú)干擾，證明此方法具有專屬性及可行性。使用本發(fā)明不 需要經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員和價(jià)格高昂的檢測(cè)設(shè)備，即可準(zhǔn)確方便地鑒別被測(cè)樣品中 是否含有三聚氰胺。


圖J為奶粉中三聚氰胺的薄層鑒別圖，
圖2為奶粉中不含三聚氰胺的陰性和陽(yáng)性薄層對(duì)照鑒別圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的展開(kāi)劑，由以下重量份數(shù)的成分組成正丁醇4一8份，乙酸乙酯1 一4份，水O.卜1份。
還可由以下重量份數(shù)的成分組成正丁醇4一8份，乙酸乙酯1一4份、濃度為 0. 2-0. 5%的KC1水溶液0. 05-1份。
下面舉出本發(fā)明的具體實(shí)施例
例1 、取一塊硅膠薄層板，放入已加有l(wèi)ml氯仿和甲醇(1:1體積比)，展開(kāi)至上沿，取出晾干，在ll(TC加熱烘15min，冷卻備用。
把2. 5g奶粉樣品用10ml水溶解，或取10ml液體奶樣，加入透析處理裝置中， 在超聲和加熱條件下進(jìn)行透析10-20 min，取透析液蒸干，加其重量200倍量的水 溶解，作為待測(cè)試樣。
取2mg三聚氰胺樣品溶于1L水中，制成對(duì)照品溶液。
檢驗(yàn)過(guò)程，照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005版一部附錄VIB)試驗(yàn)，取供試品溶 液25ul硅膠板點(diǎn)樣，正丁醇6份，乙酸乙酯2份和水0.5份為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出 晾千，噴以復(fù)合顯色劑顯色，100'C加熱顯色5min，至斑點(diǎn)清晰。復(fù)合顯色劑為2 份0. ]% HgCl2乙醇溶液和4份的0. 5%二苯卡巴腙乙醇溶液的混合液。
結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2:供試品色譜中，與三聚氰胺對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的斑點(diǎn)；陰性奶樣色譜中，在與三聚氰胺色譜相應(yīng)位置上，無(wú)相同顏色斑點(diǎn)。 說(shuō)明奶樣中是否含有三聚氰胺。
圖1中1、 3為奶粉樣品，2為三聚氰胺對(duì)照品。圖2中1、 3為陽(yáng)性樣品，2 為陰性樣品。
例2、同例l，不同的是，加其重量50倍量的水溶解，正丁醇8份，乙酸乙酯 2份和水0. 1份為展開(kāi)劑，復(fù)合顯色劑為1份0. 01% HgCl2乙醇溶液和1份的0. 1% 二苯卡巴腙乙醇溶液的混合液。
例3、同例l，不同的是，加其重量500倍量的水溶解，正丁醇8份，乙酸乙 酯4份和水1份為展開(kāi)劑，復(fù)合顯色劑為5份2% HgCl2乙醇溶液和2份的0. 5%二 苯卡巴腙乙醇溶液的混合液。
例4、同例1，不同的是，加其重量IOO倍量的水溶解，正丁醇4份，乙酸乙 酯1份和0. 5%的KC1水溶液0. 05份為展開(kāi)劑，復(fù)合顯色劑為1份0. 02% HgCl2乙 醇溶液和1份的0. 2%二苯卡巴腙乙醇溶液的混合液。
例5、同例l，不同的是，加其重量200倍量的水溶解，正丁醇6份，乙酸乙 酯2份和0. 2%的KC1水溶液0. 4份為展開(kāi)劑，復(fù)合顯色劑為3份0. 1% HgCl2乙醇 溶液和5份的1%二苯卡巴腙乙醇溶液的混合液。
例6、同例1，不同的是，加其重量300倍量的水溶解，正丁醇6份，乙酸乙 酯3份和0. 2%的KC1水溶液1份為展開(kāi)劑，復(fù)合顯色劑為4份0. 3% HgCl2乙醇溶 液和3份的0. 3%二苯卡巴腙乙醇溶液的混合液。
權(quán)利要求
1、一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑，其特征在于由以下重量份數(shù)的成分組成正丁醇4—8份，乙酸乙酯1—4份。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑，其 特征在于以下重量份數(shù)的成分組成正丁醇4 —8份，乙酸乙酯1—4份、水O. l-l 份或濃度為0. 2-0. 5%的KC1水溶液0. 05-1份。
3、 一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜顯色劑，其特征在于以下重量份數(shù) 的成分組成取重量份數(shù)為，1—5份0.01—2% HgCl2乙醇溶液和l一5份的0.1-2% 二苯卡巴腙乙醇溶液混合配制成復(fù)合顯色劑。
4、 用權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑進(jìn)行薄 層色譜分析的方法，其特征在于具體步驟如下1) 硅膠板的預(yù)處理用氯仿、甲醇清洗液處理硅膠薄層板2) 配制展開(kāi)劑取重量份數(shù)為正丁醇4一8份，乙酸乙酯l一4份，水0. 1-1 份或濃度為0. 2-0. 5%的KC1水溶液0. 05-1份配制成展開(kāi)劑。3) 顯色劑的配制取重量份數(shù)為，1—5份0.01 — 2% HgCl2乙醇溶液和l一5 份的0. 1-2%二苯卡巴腙乙醇溶液混合配制成復(fù)合顯色劑。4) 被測(cè)試樣品預(yù)處理樣品進(jìn)行透析分離，取透析液蒸干，加其重量50-500 倍量的水溶解，作為待測(cè)試樣。5) 薄層色譜分析首先將步驟4)的待測(cè)試樣，點(diǎn)樣到經(jīng)過(guò)步驟l)處理的硅膠 板上，再將薄層板放入倒入展開(kāi)劑的展開(kāi)缸中，上行展開(kāi)至上沿，取出薄層板，吹 干溶劑。6) 顯色將步驟5)中展開(kāi)的薄層板噴上步驟3)配制的顯色劑，在105'C下， 加熱10miri，顯色，完成色譜分析。
全文摘要
一種用于檢測(cè)三聚氰胺殘留的薄層色譜展開(kāi)劑及分析方法，涉及一種檢測(cè)食品中三聚氰胺殘留量的展開(kāi)劑及分析方法。展開(kāi)劑，由正丁醇、乙酸乙酯等組成。分析方法是硅膠板的預(yù)處理、配制展開(kāi)劑、配制顯色劑，被測(cè)試樣品透析分離，作為待測(cè)試樣，薄層色譜分析，噴顯色劑顯色，完成色譜分析。本發(fā)明作為食品，如奶制品、飼料等中添加和殘留三聚氰胺的定性鑒別方法，經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、重現(xiàn)性好，斑點(diǎn)清晰、分離效果好，經(jīng)陰性樣品對(duì)照，陰性樣品無(wú)干擾，證明此方法具有專屬性及可行性。使用本發(fā)明不需要經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員和價(jià)格高昂的檢測(cè)設(shè)備，即可準(zhǔn)確方便地鑒別被測(cè)樣品中是否含有三聚氰胺。
文檔編號(hào)G01N30/94GK101458240SQ200810236780
公開(kāi)日2009年6月17日 申請(qǐng)日期2008年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月11日
發(fā)明者張長(zhǎng)春, 嫻 汪, 肖晏嬰, 胡中澤, 鄭翹楚, 平 陳, 新 陳, 冰 高 申請(qǐng)人:武漢工業(yè)學(xué)院