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鑒定和定位馬潰瘍和其它消化道出血的方法及儀器的制作方法

文檔序號(hào):5820817閱讀:291來源:國知局
專利名稱:鑒定和定位馬潰瘍和其它消化道出血的方法及儀器的制作方法
鑒定和定位馬潰瘍和其它消化道出血的方法及儀器發(fā)明背景發(fā)明領(lǐng)域-本發(fā)明總的涉及診斷和檢測(cè)儀器及方法,更具體涉及馬血紅蛋 白和馬白蛋白的抗體和其在檢測(cè)并定位馬胃和結(jié)腸潰瘍和其它消化道出血的檢測(cè)儀 器、試劑盒方法中的應(yīng)用。在討論檢測(cè)和診斷馬潰瘍之前,先討論促成馬高發(fā)消化道潰瘍的某些馬獨(dú)特的 消化道解剖結(jié)構(gòu)會(huì)有幫助。就人和大多數(shù)其它動(dòng)物而言,胃對(duì)進(jìn)食的反應(yīng)是分泌胃酸。相反,馬在數(shù)千年進(jìn)化鐘成為細(xì)流進(jìn)食動(dòng)物(tricklefeeder)(進(jìn)食慢卻持續(xù)或多或少一天中大部分時(shí)間),它們的消化系統(tǒng)也配合這種進(jìn)食方式,不斷產(chǎn)生胃液并且肝 臟分泌膽汁進(jìn)入前腸。因此,可認(rèn)為馬的胃是一種可在整天中或多或少不斷產(chǎn)生胃 酸的酸泵,而無論馬是否進(jìn)食。由于馬的解剖結(jié)構(gòu)和現(xiàn)代進(jìn)食及護(hù)理規(guī)程,所有的馬,尤其是表演用馬患胃潰 瘍的非常多。例如賽馬,據(jù)報(bào)道多達(dá)97%患有消化道潰瘍,而展覽用馬的消化道潰 瘍發(fā)病率僅稍稍微落后。即使表演馬的幼駒也受此病折磨,大約60%的表演馬幼駒 患消化道潰瘍。而娛樂用馬消化道潰瘍的發(fā)病率低于展覽用馬,近二十年來所有種 類的馬群包括娛樂用馬消化道潰瘍發(fā)病均顯著升高。雖然結(jié)腸潰瘍(馬的盲腸和/或結(jié)腸潰瘍)的發(fā)病率遠(yuǎn)沒有被探究,但它們也可能 代表了不同的同樣嚴(yán)重的馬健康問題。迄今唯一的一項(xiàng)科學(xué)研究專門觀察了結(jié)腸潰 瘍發(fā)病率顯示了令人吃驚的結(jié)果。此項(xiàng)研究對(duì)馬的剖析顯示,胃潰瘍發(fā)病率約55% 結(jié)腸潰瘍發(fā)病率40%。胃和結(jié)腸潰瘍的發(fā)病率不相同,意味著有些馬僅患胃潰瘍而 另一些馬僅患結(jié)腸潰瘍。然而,患結(jié)腸潰瘍的馬大部分也患胃潰瘍,馬群無胃或結(jié) 腸潰瘍的比例低于30%。如上所述,展覽用馬和賽馬的消化道潰瘍發(fā)病率經(jīng)統(tǒng)計(jì)甚 至比普通馬群還要高。本領(lǐng)域已釆用了很多方案來解決馬的消化道潰瘍問題。此類解決方案包括用抗 酸藥暫時(shí)中和胃酸、用藥物抑制胃酸產(chǎn)生、延長休息時(shí)間和進(jìn)餐時(shí)間。近年來,開 發(fā)出一種新的高效食物添加劑,能夠治療和/或預(yù)防胃潰瘍和結(jié)腸潰瘍,參見2003年5月9日提交的名稱為"食物添加劑及其治療并預(yù)防馬和其它動(dòng)物消化道潰瘍的方法"的美國專利申請(qǐng)第10/435,367號(hào)所述,該專利申請(qǐng)已轉(zhuǎn)讓給本發(fā)明受讓人,該專利 申請(qǐng)的內(nèi)容全文納入本文作為參考。雖然已有了此類治療方法,但高度精確地診斷馬胃潰瘍?nèi)匀环浅@щy,并且還 幾乎不能診斷馬的結(jié)腸潰瘍。已發(fā)現(xiàn),最常用的診斷馬潰瘍的方法,即利用癥狀(常 常是模糊的、非特異性的癥狀如體重減輕、食欲不振、嗜睡或間歇性發(fā)熱)與可察覺 的治療結(jié)果相結(jié)合的方法幾乎完全不可靠。這是由于可能有許多潛在原因能引起相 同的癥狀,并非所有馬均表現(xiàn)出相同或甚至明顯的潰瘍癥狀。因此,用該技術(shù)常常 不比猜測(cè)游戲好多少。認(rèn)為唯一可靠的診斷馬胃潰瘍方法是采用3米視頻內(nèi)窺鏡,其顯著缺點(diǎn)是昂貴、 費(fèi)時(shí)和會(huì)產(chǎn)生緊張感(對(duì)馬和對(duì)訓(xùn)練者/馬主人均如此)。購買一臺(tái)3米視頻內(nèi)窺鏡的 費(fèi)用相當(dāng)高,高到讓馬主人和所有除大部分精英外的訓(xùn)馬師無法承擔(dān)。除費(fèi)用之外 內(nèi)窺鏡操作煩瑣且費(fèi)時(shí)。沒有3米視頻內(nèi)窺鏡的馬主人、訓(xùn)馬者和獸醫(yī)必需向診所 或有內(nèi)窺鏡的獸醫(yī)求診。這將花費(fèi)額外的時(shí)間和支出,因?yàn)轳R失去了馬主人、訓(xùn)馬 師或常常是獸醫(yī)經(jīng)手的照料,會(huì)令馬甚至更為緊張而且會(huì)失敗。而且,即使購買和使用了 3米視頻內(nèi)窺鏡,結(jié)果也只限于此設(shè)備的可視范圍即 胃組織。雖然可用此類設(shè)備有效觀測(cè)并診斷胃潰瘍,卻仍然不能用該設(shè)備診斷馬其 余95%消化道潰瘍。因?yàn)閮?nèi)窺鏡不夠長和用內(nèi)窺鏡時(shí)要充分排空后腸(大約為75英 尺小腸、盲腸和結(jié)腸)這就跟殺了馬差不多,因此用內(nèi)窺鏡無法觀察后腸。實(shí)際上, 近年來文獻(xiàn)報(bào)道的馬結(jié)腸潰瘍高發(fā)病率都是通過死后觀察分析才完成的。因此本發(fā)明的主要目的是提供一種馬潰瘍和消化道出血的檢測(cè)試劑盒和運(yùn)用該 檢測(cè)試劑盒的相關(guān)方法,來有效診斷馬胃潰瘍或出血和結(jié)腸潰瘍或出血。本發(fā)明的 相關(guān)目的是提供對(duì)馬胃潰瘍或出血或結(jié)腸潰瘍或出血或兩者的高度特異性指征。本 發(fā)明的另一個(gè)相關(guān)目的是高度可靠地鑒定馬存在的潰瘍或出血和鑒定馬存在的潰瘍 類型,而不會(huì)產(chǎn)生過度假陽性讀數(shù)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是簡(jiǎn)單迅速地進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)行此檢測(cè)的用戶不需要專門技 術(shù)或進(jìn)行培訓(xùn)。本發(fā)明還有一個(gè)目的是它是完全自主進(jìn)行、不需要實(shí)驗(yàn)室分析或額 外的處理設(shè)備因此可在任何地方如現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明還有另一個(gè)目的是在幾分 鐘內(nèi)快速提供檢測(cè)結(jié)果而不需要更長時(shí)間。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)還必須耐用和能夠長期ie存,試劑盒不需要特殊的貯存條件能確保試劑盒有長期使用壽命。為了提高本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的市場(chǎng)吸引力,它還應(yīng)不昂貴從而能夠擁有最廣泛的市場(chǎng)前景。最終, 還有一個(gè)目的是本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒及其方法的所有上述優(yōu)點(diǎn)和目的 實(shí)現(xiàn)不會(huì)帶來任何實(shí)質(zhì)性相關(guān)缺陷。發(fā)明概述本發(fā)明克服了以上背景技術(shù)所述的缺陷和局限性。本發(fā)明提供一種能以高靈敏 度和特異性鑒定馬的胃和/或結(jié)腸潰瘍和其它消化道出血的馬潰瘍和消化道出血檢測(cè) 試劑盒以及使用所述檢測(cè)試劑盒的方法,利用該馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒及方法能 清楚地區(qū)別胃潰瘍或出血與結(jié)腸漬瘍或出血。本發(fā)明的潰瘍或出血檢測(cè)指糞血檢測(cè), 因?yàn)樗设b定所測(cè)試馬的糞便中的血液成分。根據(jù)本發(fā)明所述,鑒定到兩種血液成分可分別高度表示存在胃潰瘍或出血和/或 結(jié)腸潰瘍或出血。本發(fā)明人測(cè)到糞便中含有完整的馬白蛋白極有可能是來源于結(jié)腸。 這是因?yàn)槲笣儠r(shí)馬血液白蛋白(和潰瘍產(chǎn)生的到達(dá)十二指腸的其它脊髓動(dòng)物血液成 分)已受到胃酸和胃肽酶降解,而無法在糞便中檢測(cè)到馬白蛋白。然而,胃潰瘍或出 血的血液中所含的馬血紅蛋白至少一部分可逃避胃酸或胃肽酶的作用而留存下來, 而能在糞便中檢測(cè)到。因此糞便中存在完整的馬白蛋白表示存在結(jié)腸潰瘍或出血,而存在馬血紅蛋白 表示示存在胃潰瘍或出血或結(jié)腸潰瘍或出血。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)明白利用馬白蛋 白和馬血紅蛋白作為指示物的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒及方法,將提供對(duì)一種或多 種馬潰瘍或出血的存在和定位均為良好的指示劑。本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒 和方法的優(yōu)選實(shí)施形式是設(shè)計(jì)用來檢測(cè)馬白蛋白和馬血紅蛋白指示物存在的免疫測(cè) 定,具體地說,本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)的優(yōu)選實(shí)施方式是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)("ELISA"檢測(cè)),它是生物化學(xué)中普遍用于檢測(cè)樣品中是否存在特定物質(zhì)的方法。 ELISA檢測(cè)是快速的免疫化學(xué)檢測(cè),其包含抗體或抗原(免疫分子)和酶(催化生物化學(xué)反應(yīng)的蛋白質(zhì))??捎肊LISA檢測(cè)具有免疫原性的物質(zhì),主要是蛋白質(zhì)(與小分子和離子例如葡萄糖和鉀離子相反),例如抗體、細(xì)菌性抗原和激素。 一種所謂的 "快速"ELISA檢測(cè)是側(cè)流免疫測(cè)定("LFI")檢測(cè),其試驗(yàn)用膜中的液體通道一端連接液體來源另一端連接到液體壑,沿膜有3個(gè)不連續(xù)的分開區(qū)域。第一區(qū)域含有偶聯(lián)顯色劑例如有色乳膠小珠或染料或膠體金的標(biāo)記抗體。所述標(biāo)記抗體可隨液體從第一區(qū)流到第二和第三區(qū),最終到達(dá)液體壑。如果液體中存在感興趣的物質(zhì),它會(huì)結(jié)合此標(biāo)記抗體。第二區(qū),通常為橫跨此膜的伸展直線區(qū),包含結(jié)合于此膜的抗體。第二區(qū)的抗體對(duì)感興趣的物質(zhì)具有親和性(將其吸附和固定到該區(qū)),與標(biāo)記抗體 和結(jié)合于第二區(qū)抗體的感興趣的物質(zhì)可形成"夾心"結(jié)構(gòu),從而形成著色線,表明 存在感興趣物質(zhì)為陽性讀數(shù)。液體中含的感興趣的物質(zhì)越多,與感興趣物質(zhì)一同結(jié) 合于第二區(qū)抗體的標(biāo)記抗體就越多。第三區(qū),通常也是橫跨此膜的伸展直區(qū),只要有足夠的流量和體積利用不同的 抗體/抗原反應(yīng)就能形成著色線,無論是否存在感興趣的物質(zhì)。其作用是作為對(duì)照表 明該檢測(cè)系統(tǒng)運(yùn)行良好。第三區(qū)位于第二區(qū)與第一區(qū)相反的另一側(cè),可顯示受檢液 體已越過第二區(qū),從而表明提供給該檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)液體足夠使此檢測(cè)系統(tǒng)正常工 作。此檢測(cè)系統(tǒng)的大致說明參見May等的美國專利第5,602,040號(hào),該專利基于兩種 抗體。將含吸附于有色乳膠或膠體金顆粒表面的第一抗體的干燥顆粒加到硝酸纖維 素膜第一末端,形成上述第一區(qū)。使第二抗體吸附于硝酸纖維素膜形成一條線,產(chǎn)生上述第二區(qū)。使液體樣品吸附進(jìn)入硝酸纖維素膜第一末端進(jìn)行檢測(cè)。液體流動(dòng)使第一區(qū)中的 顆粒游離此時(shí)待測(cè)分析物可與所述顆粒上的抗體結(jié)合。在第二區(qū),待測(cè)分析物也結(jié) 合位于線中的第二抗體,從而形成可見的顏色線條表明存在所述分析物。這種類型 的免疫色譜檢測(cè)技術(shù)依賴于流體通過膜的流動(dòng),可稱為"側(cè)流技術(shù)"。將美國專利第 5,602,040號(hào)納入本文作為參考,如Kouvonen等的美國專利第5,712,170號(hào)那樣,它 們對(duì)此領(lǐng)域的該技術(shù)進(jìn)行了極佳的概述??刹捎靡延械牡诙N試驗(yàn)形式,利用"競(jìng)爭(zhēng)性排除"技術(shù)來產(chǎn)生陽性或陰性結(jié) 果。與上述夾心試驗(yàn)不同,將純化的抗原(馬白蛋白或馬血紅蛋白)固定于膜條上,而 靶抗體包含在流動(dòng)相內(nèi)。當(dāng)檢測(cè)樣品中不存在靶抗原時(shí),此抗體游離出來與流動(dòng)相 一起移動(dòng)而結(jié)合于膜條上的固定抗原,在膜條上產(chǎn)生一條線。因此,出現(xiàn)著色線表 示陰性結(jié)果。另一方面,如果,檢測(cè)樣品中存在靶抗原,那么此抗原將結(jié)合流動(dòng)相中的抗體, 而不能與試驗(yàn)帶結(jié)合,從而不出現(xiàn)著色線。因此,此檢測(cè)中不出現(xiàn)著色線表示陽性 結(jié)果。已報(bào)道采用Varian,Inc.公司制造的商標(biāo)名為ONTRAK TESTCUP由Roche Diagnostics獨(dú)家銷售的這種類型的競(jìng)爭(zhēng)性排除檢測(cè)技術(shù)作藥物檢測(cè)。Bachand的美國 專利第6,375,897對(duì)其有所描述,該專利納入本文作為參考。LFI檢測(cè)的制造成本相對(duì)便宜、易于操作,可提供快速分析而無需實(shí)驗(yàn)設(shè)備。LFI 檢測(cè)中的抗體通常通過用感興趣的物質(zhì)接種動(dòng)物,然后動(dòng)物產(chǎn)生對(duì)該物質(zhì)的抗體而獲得。利用這種生物化學(xué)關(guān)聯(lián)作為分離和檢測(cè)感興趣物質(zhì)的機(jī)理。LFI檢測(cè)的靈敏度和特異性與放射免疫試驗(yàn)("RIA")檢測(cè)相當(dāng)。LFI檢測(cè)的額外優(yōu)點(diǎn)是不需要放射性 同位素或放射計(jì)數(shù)儀。本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的優(yōu)選實(shí)施方式包括置于一個(gè)或兩個(gè)塑料容器 內(nèi)的兩個(gè)試驗(yàn)帶。待測(cè)馬的糞便液滴放在容器(可以是例如桶、罐、塑料袋或杯)中, 加入溶液(可以是水或含有緩沖劑如鹽的水),攪拌此混合物使之徹底混合。用點(diǎn)樣器 例如滴眼管從此容器中取幾滴液體滴到容器內(nèi)的試驗(yàn)帶上。經(jīng)優(yōu)選的檢測(cè)時(shí)間約5-30分鐘后,這兩個(gè)試驗(yàn)帶將呈現(xiàn)表示對(duì)照指示物的可見 標(biāo)記,如果存在待檢測(cè)指示物,可看見的標(biāo)記意味著檢測(cè)到那些分別表示胃潰瘍或 出血和/或結(jié)腸潰瘍或出血的指示物。本發(fā)明采用兩種指示物, 一種表示存在胃潰瘍 或出血,另一種表示存在結(jié)腸潰瘍或出血。優(yōu)選實(shí)施方式中,檢測(cè)表明存在結(jié)腸潰瘍或出血的指示性感興趣物質(zhì)是馬白蛋 白,而檢測(cè)表明存在胃潰瘍或出血或結(jié)腸潰瘍或出血或兼有胃和結(jié)腸潰瘍或出血的 指示性感興趣物質(zhì)是馬血紅蛋白。因此,本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法可 診斷胃和/或結(jié)腸潰瘍或出血從而為立即治療提供依據(jù)。因此可明白本發(fā)明所述的馬潰瘍和消化道出血檢測(cè)試劑盒和運(yùn)用此試劑盒的相關(guān)方法,能有效地診斷馬胃潰瘍或出血和結(jié)腸潰瘍或出血以及其它消化道出血。本 發(fā)明的所述馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法提供了對(duì)胃漬瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或 出血的高度特異性指征。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法對(duì)鑒定馬是否存 在潰瘍或出血以及鑒定馬存在的潰瘍類型高度可靠,不會(huì)產(chǎn)生過度的假陽性讀數(shù)。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法既簡(jiǎn)單又實(shí)施快速,而且用戶進(jìn)行該 檢測(cè)無須具備特殊技能或培訓(xùn)。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒是完全自主進(jìn)行, 不需要實(shí)驗(yàn)室分析或額外處理設(shè)備,從而能在任何地方如現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的 馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法可在數(shù)分鐘內(nèi)不需要更長時(shí)間快速提供檢測(cè)結(jié)果。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)兼具耐用性和長期貯存,該檢測(cè)試劑 盒無需特殊貯存條件并具有長期使用壽命。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的結(jié) 構(gòu)還便宜使它具有最廣闊的市場(chǎng)前景。最后,實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑 盒和方法的所有上述優(yōu)點(diǎn)和目標(biāo)不會(huì)造成任何實(shí)質(zhì)性相關(guān)缺陷。


通過參見以下附圖可最好地理解本發(fā)明的這些和其它優(yōu)點(diǎn) 圖1是顯示馬消化道解剖構(gòu)造的示意圖;圖2顯示用本發(fā)明技術(shù)構(gòu)造的用于馬潰瘍或出血檢測(cè)的試劑盒的等比例圖,盒 中的第一容器裝有胃潰瘍或出血試驗(yàn)帶,第二容器裝有結(jié)腸潰瘍或出血試驗(yàn)帶;圖3顯示用本發(fā)明技術(shù)構(gòu)造的用于馬潰瘍或出血檢測(cè)的試劑盒的另一實(shí)施方式的等比例圖,盒中只有一個(gè)容器,裝有胃潰瘍或出血試驗(yàn)帶和結(jié)腸潰瘍或出血試驗(yàn)帶;禾口圖4是說明用馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒檢測(cè)表明是否存在馬白蛋白和檢測(cè)是否 存在馬血紅蛋白的結(jié)果圖。優(yōu)選實(shí)施方式的詳述在討論本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法之前,先簡(jiǎn)單討論一下馬消化 系統(tǒng)的解剖構(gòu)造會(huì)有幫助。參見圖l,顯示馬20的側(cè)面,圖解說明了馬的消化道。 馬20的消化道可分成前腸,用參考數(shù)字22表示,和后腸,用參考數(shù)字24表示。馬20的消化道從它的嘴26開始,繼續(xù)延伸通過食道28進(jìn)入胃30,然后進(jìn)入小 腸32,胃和小腸一起構(gòu)成馬20的前腸22。馬20的前腸22構(gòu)成馬20消化道相對(duì)容 量的約35%-40%。從小腸32開始,消化道延伸通過盲腸34、大結(jié)腸36和小結(jié)腸38終止于直腸 40。馬20的消化道的這些組件共同組成馬20的后腸24。后腸24構(gòu)成馬20消化道 相對(duì)容量的約60-65%。本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的優(yōu)選實(shí)施方式見圖2所示。顯示了用于檢測(cè) 胃潰瘍或出血的含有馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的第一容器50。該第一容器50有一加 入待分析液體的孔52。位于此第一容器50上還有一視窗54,通過此視窗可看到其 中的含檢測(cè)標(biāo)記帶58和對(duì)照標(biāo)記帶60的試驗(yàn)帶56,可顯示存在胃潰瘍或出血。圖2還顯示了馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒包括的用以檢測(cè)結(jié)腸潰瘍或出血的第二 容器70。第二容器70上有一加入待分析液體的孔72。第二容器70上也有一視窗74, 通過此視窗可看到其中的含檢測(cè)標(biāo)記帶78和對(duì)照標(biāo)記帶80的試驗(yàn)帶76。當(dāng)檢測(cè)到 感興趣物質(zhì)的存在時(shí),檢測(cè)標(biāo)記帶78變得可見,從而顯示存在結(jié)腸潰瘍或出血。雖 然看起來第一容器50和第二容器70彼此靠近,但在如圖2所示的實(shí)施方式中它們 是分開的?,F(xiàn)參見圖3,顯示裝有一容器90的另一種實(shí)施方式的檢測(cè)試劑盒。所述容器卯 上只有一個(gè)加入待分析液體的(但更寬)孔92。容器90的兩側(cè)還有第一和第二視窗94 和96。通過第一視窗94可看到其中的含檢測(cè)標(biāo)記帶100和對(duì)照標(biāo)記帶102的試驗(yàn)帶 98。當(dāng)檢測(cè)到感興趣物質(zhì)的存在時(shí),檢測(cè)標(biāo)記帶100變得可見,從而顯示存在胃潰瘍或出血。將足夠的液體通過孔92加入容器90時(shí),對(duì)照標(biāo)記帶102變得可見。通過第二視窗96可看到其中的含檢測(cè)標(biāo)記帶106和對(duì)照標(biāo)記帶108的試驗(yàn)帶 104。當(dāng)檢測(cè)到感興趣物質(zhì)的存在時(shí),檢測(cè)標(biāo)記帶106變?yōu)榭梢?,從而顯示存在胃潰 瘍或出血。將足夠的液體通過孔92引入容器90時(shí),對(duì)照標(biāo)記帶108變得可見。圖2中試驗(yàn)帶56和76和圖3中試驗(yàn)帶98和104的構(gòu)建是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知 的。同樣,設(shè)計(jì)具有不同容器的各種其它類型的檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)也是本領(lǐng)域技術(shù) 人員公知的。圖2和3所示檢測(cè)裝置的關(guān)鍵部分是用于檢測(cè)胃和結(jié)腸潰瘍或出血的 抗體的類型及其衍生物,這將在后面討論。在討論之前,先對(duì)圖2和3所示檢測(cè)試劑盒的操作進(jìn)行簡(jiǎn)要描述。獸醫(yī)、訓(xùn)馬 師或馬主人收集待測(cè)馬的代表性糞便樣品(范圍從幾克到一次完整糞便)。然后將糞便 樣品放進(jìn)容器例如桶或罐或塑料袋中,將其與水溶液(可以是水或含有緩沖劑如鹽的 水)通過振蕩、攪拌或揉搓相混合。然后,獸醫(yī)、訓(xùn)馬師或馬主人用滴眼管或其它常 規(guī)裝置將幾滴液體通過容器50和70上的孔52和72(分別見圖1的實(shí)施方式)或通過 容器90上的孔92(圖2的實(shí)施方式)滴入此檢測(cè)裝置。幾分鐘后,圖1實(shí)施方式中的對(duì)照標(biāo)記帶60和80變得可見,圖2實(shí)施方式中 的對(duì)照標(biāo)記帶102和108變得可見,表示檢測(cè)試劑盒的操作正確。如果檢測(cè)到馬白 蛋白,圖1實(shí)施方式的檢測(cè)標(biāo)記帶58將變得可見,圖2實(shí)施方式的檢測(cè)標(biāo)記帶100 變得可見。同樣,如果檢測(cè)到馬血紅蛋白,圖1實(shí)施方式的檢測(cè)標(biāo)記帶78變得可見, 或圖2實(shí)施方式的檢測(cè)標(biāo)記帶106變得可見。憑此檢測(cè)來診斷胃和/或結(jié)腸潰瘍或出 血,如果檢測(cè)到任何一種或檢測(cè)到兩種可為立即治療提供依據(jù)。雖然圖2和3所示實(shí)施方式顯示了圖2所示實(shí)施方式的分開的試驗(yàn)帶56和76 和圖3所示實(shí)施方式的分開的試驗(yàn)帶98和104,但本領(lǐng)域技術(shù)人員立即就能明白可 將這兩種檢測(cè)合并在一個(gè)膜上。此外,除檢測(cè)標(biāo)記帶顯色表示檢測(cè)到馬白蛋白或馬 血紅蛋白的上述檢測(cè)之外,也可采用競(jìng)爭(zhēng)性排除技術(shù),該技術(shù)中檢測(cè)標(biāo)記帶顯色表 示沒有檢測(cè)到馬白蛋白或馬血紅蛋白。在本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒及方法的優(yōu)選實(shí)施方式中,當(dāng)檢測(cè)到的感興 趣物質(zhì)是馬白蛋白時(shí),表示存在結(jié)腸潰瘍或出血,當(dāng)檢測(cè)到的感興趣物質(zhì)是馬血紅 蛋白時(shí),表示存在胃潰瘍或出血。因?yàn)樵隈R糞便中檢測(cè)到馬白蛋白只可能來源于結(jié) 腸,因此選擇馬白蛋白來表明存在結(jié)腸潰瘍或出血具有特異性。這是因?yàn)槲笣兓?出血到達(dá)十二指腸的其它脊椎動(dòng)物的血液會(huì)受到胃酸和胃肽酶的降解,因此在糞便 中檢測(cè)到馬白蛋白根本不可能來源于胃潰瘍或出血。然而,胃酸和胃肽酶的作用不可能完全降解或消化馬血紅蛋白。糞便中檢測(cè)到 的馬血紅蛋白可以來源于胃和/或結(jié)腸,因此表明有胃潰瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或出 血。因而,對(duì)結(jié)腸性和胃漬瘍或出血的區(qū)分依賴于馬白蛋白是否存在。參見圖4,可見如果檢測(cè)到馬白蛋白,則肯定存在結(jié)腸潰瘍或出血。如果未檢測(cè) 到馬白蛋白但檢測(cè)到馬血紅蛋白,則有可能存在胃潰瘍或出血。如果馬白蛋白或馬 血紅蛋白均未被檢測(cè)到,則既不存在胃潰瘍或出血也不存在結(jié)腸潰瘍或出血。最后, 如果同時(shí)檢測(cè)到馬白蛋白和馬血紅蛋白,則可能只存在結(jié)腸潰瘍或出血,或者同時(shí) 存在胃潰瘍或出血或者結(jié)腸潰瘍或出血。因此,本領(lǐng)域技術(shù)人員將明白本發(fā)明的馬 潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒及方法提供了診斷胃和/或結(jié)腸潰瘍或出血、和為這些潰瘍的 治療提供了可靠的機(jī)制和方法。馬白蛋白檢測(cè)馬白蛋白檢測(cè)是一種高靈敏度的單克隆/多克隆免疫測(cè)定法。建立此種免疫測(cè)定 方法需要4個(gè)步驟,分別稱為免疫接種、融合、克隆和制備。第一階段是免疫接種, 用馬類獨(dú)有的馬白蛋白基因序列衍生的馬白蛋白肽序列注射家兔、小鼠、大鼠、豚 鼠或其他合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。這將激發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng),其血液和脾臟產(chǎn)生大量 抗體。約6周時(shí),動(dòng)物抽血用ELISA試驗(yàn)檢驗(yàn)抗體。包括使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血與馬血清體外 反應(yīng)。如果存在抗體,ELISA將發(fā)生顏色變化。如果存在的抗體水平不夠高,需要 對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行一次或多次馬白蛋白加強(qiáng)注射??捎眠@些第一批血液來制備多克隆 抗體。此階段通常需要約3個(gè)月。此階段得到的多克隆抗體可用來構(gòu)建檢測(cè)試劑盒。第二階段是融合,在該階段中,處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取其脾臟分離分泌馬抗體的細(xì)胞。 然后將這些細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞系融合使它們可以無限增殖,如Stanker等人的美國專 利第5,552,295號(hào)所述,該專利納入本文中作為參考。 一旦無限增殖化成功,可無限 次培養(yǎng)這些細(xì)胞以不斷提供抗體。然后將雜交瘤(融合細(xì)胞)接種到多個(gè)96孔微量滴定板內(nèi)。用另一次ELISA試驗(yàn) 檢測(cè)這些細(xì)胞,將那些顯示能分泌相應(yīng)抗體的細(xì)胞移到另一個(gè)微量滴定孔內(nèi)擴(kuò)增。 用ELISA試驗(yàn)進(jìn)一步檢測(cè)這些細(xì)胞得到能產(chǎn)生所需抗體的純細(xì)胞系,此階段通常需 要約5-6周。第三階段是克隆,將第二階段中檢測(cè)陽性的細(xì)胞進(jìn)行克隆并用ELISA試驗(yàn)進(jìn)一 步檢測(cè)。為了得到穩(wěn)定的克隆可能需要多輪克隆。然后將這些克隆注射小鼠腹腔產(chǎn) 生腹水。純化腹水液中的單克隆抗體然后備用。本領(lǐng)域技術(shù)人員不難明白這種技術(shù)將產(chǎn)生特異性針對(duì)馬白蛋白的新單克隆抗體。此第三階段通常需要約3個(gè)月??捎每乖庖唠u,在雞蛋蛋黃中產(chǎn)生抗體。因?yàn)殡u能下足夠多的蛋來提供抗體, 因此這項(xiàng)技術(shù)不需要上述的克隆階段。然而,這些抗體的純化階段與上述類似。第四即最后階段是制備檢測(cè)試劑盒。按本領(lǐng)域常規(guī)將所述抗體涂布在多孔硝酸 纖維素膜或尼龍膜上。當(dāng)將馬白蛋白放到此檢測(cè)裝置上時(shí),它被吸入通過膜尋找結(jié) 合于帶有顯色劑的標(biāo)記抗體,最終被檢測(cè)標(biāo)記帶中的抗體捕獲。標(biāo)記抗體導(dǎo)致顏色 深度變化清楚表明所檢測(cè)的馬糞便中存在馬白蛋白。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)明白這種 新的抗體試驗(yàn)對(duì)馬白蛋白兼具靈敏度(靈敏度高達(dá)約百萬分之一(l微克/毫升))和特異 性。馬血紅蛋白檢測(cè)馬血紅蛋白檢測(cè)是一種高靈敏度的單克隆/多克隆免疫測(cè)定法。建立此種免疫測(cè) 定方法需要4個(gè)步驟,分別為免疫接種、融合、克隆和制備。第一階段是免疫接種, 用馬類獨(dú)有的馬血紅蛋白基因序列衍生的馬血紅蛋白肽序列注射家兔、小鼠、大鼠、 豚鼠或其他合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。這將激發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng),其血液和脾臟產(chǎn)生大 量抗體。約6周時(shí),動(dòng)物抽血用ELISA試驗(yàn)檢驗(yàn)抗體。包括使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血與馬血清體外 反應(yīng)。如果存在抗體,ELISA將發(fā)生顏色變化。如果存在的抗體水平不夠高,需要 對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行一次或多次馬血紅蛋白加強(qiáng)注射??捎眠@些第一批血液來制備多克 隆抗體。此階段通常需要約3個(gè)月。此階段得到的多克隆抗體可用來構(gòu)建檢測(cè)試劑J§L 。第二階段是融合,在該階段中,處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取其脾臟分離分泌馬抗體的細(xì)胞。 然后將這些細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞系融合使它們可以無限增殖,如以上面Stanker等人的 專利中所述。 一旦無限增殖化成功,可無限次培養(yǎng)這些細(xì)胞以不斷提供抗體。然后將雜交瘤(融合細(xì)胞)接種到多個(gè)96孔微量滴定板內(nèi)。用另一次ELISA試驗(yàn) 檢測(cè)這些細(xì)胞,將那些顯示能分泌相應(yīng)抗體的細(xì)胞移到另一個(gè)微量滴定孔內(nèi)擴(kuò)增。 用ELISA試驗(yàn)進(jìn)一步檢測(cè)這些細(xì)胞得到能產(chǎn)生所需抗體的純細(xì)胞系,此階段通常需 要約5-6周。第三階段是克隆,將第二階段中檢測(cè)陽性的細(xì)胞進(jìn)行克隆并用ELISA試驗(yàn)進(jìn)一 步檢測(cè)。為了得到穩(wěn)定的克隆可能需要多輪克隆。然后將這些克隆注射小鼠腹腔產(chǎn) 生腹水。純化腹水液中的單克隆抗體然后備用。本領(lǐng)域技術(shù)人員不難明白這種技術(shù) 將產(chǎn)生特異性針對(duì)馬血紅蛋白的新單克隆抗體。此第三階段通常需要約3個(gè)月??捎每乖庖唠u,在雞蛋蛋黃中產(chǎn)生抗體。因?yàn)殡u能下足夠多的蛋來提供抗體, 因此這項(xiàng)技術(shù)不需要上述的克隆階段。然而,這些抗體的純化階段與上述類似。第四即最后階段是制備檢測(cè)試劑盒。按本領(lǐng)域常規(guī)將所述抗體涂布在多孔硝酸 纖維素膜或尼龍膜上。當(dāng)將馬血紅蛋白放到此檢測(cè)裝置上時(shí),它被吸入膜尋找結(jié)合 于帶有顯色劑的標(biāo)記抗體,最終被檢測(cè)標(biāo)記帶中的抗體捕獲。標(biāo)記抗體導(dǎo)致顏色深 度變化清楚表明所檢測(cè)的馬糞便中存在馬血紅蛋白。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)明白這種 新的抗體試驗(yàn)對(duì)馬兼具靈敏度(靈敏度高達(dá)約百萬分之一(l微克/毫升))和特異性。組合檢測(cè)將馬白蛋白檢測(cè)與馬血紅蛋白檢測(cè)組合到一個(gè)檢測(cè)試劑盒中,創(chuàng)建了一種馬潰 瘍或出血的簡(jiǎn)單的、費(fèi)用低廉、高靈敏度和特異性的診斷檢測(cè)。或者用分開的試劑 盒來提供這兩種檢測(cè)。優(yōu)選的實(shí)施方式中,這兩種試驗(yàn)帶與同一個(gè)單孔相連,從而 應(yīng)用一次糞便液就能滿足兩次檢測(cè)。如果馬白蛋白檢測(cè)結(jié)果陽性,表明有結(jié)腸潰瘍或出血。如果只有馬血紅蛋白檢 測(cè)結(jié)果陽性,表明有胃潰瘍或出血。如果兩種結(jié)果均為陽性,那么表明要么是結(jié)腸 潰瘍或出血,要么兼有胃潰瘍或出血和結(jié)腸潰瘍或出血。本領(lǐng)域技術(shù)人員將明白此 雙重檢測(cè)可提供方便、非侵入性的胃潰瘍或出血(目前診斷困難并且費(fèi)用昂貴)以及結(jié) 腸潰瘍或出血(目前的試驗(yàn)不能精確診斷)的檢測(cè)。雖然本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法是以診斷馬的胃潰瘍或出血和結(jié) 腸潰瘍或出血為目標(biāo)的優(yōu)選實(shí)施方式,但考慮本發(fā)明的范圍還包括可用其診斷其它 動(dòng)物的胃潰瘍或出血和結(jié)腸潰瘍或出血。可專門設(shè)計(jì)具體動(dòng)物的特殊潰瘍或出血檢 測(cè)試劑盒用它來檢測(cè)該具體動(dòng)物的白蛋白和血紅蛋白。或者通過提供能與多種動(dòng)物 的白蛋白特異性結(jié)合的白蛋白抗體以及能與多種動(dòng)物的血紅蛋白特異性結(jié)合的血紅 蛋白抗體來制造一種通用的動(dòng)物胃潰瘍或出血和結(jié)腸潰瘍或出血的檢測(cè)試劑盒。因此,從本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式詳細(xì)描述中可以明白,本發(fā)明所述馬潰瘍和消 化道出血檢測(cè)試劑盒和該試劑盒的使用方法能有效診斷馬胃潰瘍或出血和結(jié)腸潰瘍 或出血。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法提供了存在胃潰瘍或出血和/或結(jié) 腸潰瘍或出血或二者的高特異性指標(biāo)。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法對(duì) 鑒定馬潰瘍或出血的存在以及鑒定馬潰瘍的類型或出血部位相當(dāng)可靠,不會(huì)產(chǎn)生過 度的假陽性讀數(shù)。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法操作簡(jiǎn)單快速,不需要專門技術(shù)或培 訓(xùn),用戶就能進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒完全自主,不需要實(shí)驗(yàn)室分析或其它處理設(shè)備,能在任何地方例如現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的馬潰瘍或出血 檢測(cè)試劑盒和方法能在幾分鐘內(nèi)快速提供檢測(cè)結(jié)果,而不需要更長時(shí)間。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)建兼具耐用性可長期貯存,此試劑盒 不需要特殊貯存條件具有長期使用壽命。本發(fā)明的馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒的構(gòu)建 便宜而提高了它的市場(chǎng)吸引力,因此具有最廣闊的市場(chǎng)前景。最后,本發(fā)明的馬潰 瘍或出血檢測(cè)試劑盒和方法的所有上述優(yōu)點(diǎn)和目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)不會(huì)引起任何實(shí)質(zhì)性相關(guān) 缺陷。雖然上述的本發(fā)明馬潰瘍或出血檢測(cè)試劑盒已得到證明并通過參見本發(fā)明的具 體實(shí)施方式和應(yīng)用對(duì)其進(jìn)行了描述,但說明和描述的目的不意味著窮盡或限制本發(fā) 明于所公開的具體實(shí)施方式
和應(yīng)用。本領(lǐng)域普通技術(shù)的人員將明白到在不背離本發(fā) 明思路和范圍的前提下,可對(duì)本文所述的本發(fā)明進(jìn)行許多改變、修飾、變化或變更。 選擇并描述具體實(shí)施方式
和應(yīng)用來提供對(duì)本發(fā)明原理及其實(shí)際應(yīng)用的最佳說明讓本 領(lǐng)域普通技術(shù)人員將本發(fā)明用于各種實(shí)施方式和作出各種修飾以適合所考慮的特定 用途。因此,當(dāng)按照公平、合法和公正原則進(jìn)行解釋時(shí),所有此類改變、修飾、變 異和變更應(yīng)視為本文附件的權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測(cè)并定位馬潰瘍或消化道出血的快速檢測(cè)試劑盒,其包括第一試驗(yàn)帶,用于快速免疫測(cè)定或過氧化物酶反應(yīng)以檢測(cè)馬胃潰瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或出血;和第二試驗(yàn)帶,用于快速免疫測(cè)定以檢測(cè)馬結(jié)腸潰瘍或出血。
2. 如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第一試驗(yàn)帶檢測(cè)馬血紅蛋白,所述馬血紅蛋白的存在指示存在是馬胃潰瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或出血。
3. 如權(quán)利要求2所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第一試驗(yàn)帶含有抗 馬血紅蛋白抗體,所述抗體能特異性結(jié)合馬血紅蛋白。
4. 如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬血紅蛋白抗體 結(jié)合馬血紅蛋白的靈敏度等于或大于約百萬分之一(l微克/毫升)。
5. 如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬血紅蛋白抗體 是單克隆抗體。
6. 如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬血紅蛋白抗體 是多克隆抗體。
7. 如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬血紅蛋白抗體 分離自接種過的家兔、小鼠、大鼠或豚鼠的血清或浸軟的脾臟。
8. 如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬血紅蛋白抗體 是用能產(chǎn)生和分泌特異性結(jié)合馬血紅蛋白的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞系制備的。
9. 如權(quán)利要求3所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬血紅蛋白抗體 是用免疫細(xì)胞與無限增殖骨髓瘤細(xì)胞系雜交并表達(dá)馬血紅蛋白抗體來制備的。
10. 如權(quán)利要求9所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述免疫細(xì)胞分離自 接種過的家兔、小鼠、大鼠或豚鼠的血清或浸軟的脾臟。
11. 如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第一試驗(yàn)帶還包 含可證明所述檢測(cè)正常進(jìn)行的對(duì)照指示物。
12. 如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第二試驗(yàn)帶檢測(cè) 馬白紅蛋白,所述馬白紅蛋白的存在表明馬存在結(jié)腸潰瘍或出血。
13. 如權(quán)利要求12所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第二試驗(yàn)帶含有 抗馬白蛋白抗體,所述抗體能特異性結(jié)合馬白蛋白。
14. 如權(quán)利要求13所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬白蛋白抗體結(jié)合馬白蛋白的靈敏度等于或大于約百萬分之一(l微克/毫升)。
15. 如權(quán)利要求13所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬白蛋白抗體 是單克隆抗體。
16. 如權(quán)利要求13所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬白蛋白抗體 是多克隆抗體。
17. 如權(quán)利要求13所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬白蛋白抗體 分離自接種過的家兔、小鼠、大鼠或豚鼠的血清或浸軟的脾臟。
18. 如權(quán)利要求13所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬白蛋白抗體 是用能產(chǎn)生和分泌特異性結(jié)合馬白蛋白的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞系制備的。
19. 如權(quán)利要求13所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述抗馬白蛋白抗體 是用免疫細(xì)胞與無限增殖骨髓瘤細(xì)胞系雜交并表達(dá)馬白蛋白抗體來制備的。
20. 如權(quán)利要求19所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述免疫細(xì)胞分離自 接種過的家兔、小鼠、大鼠或豚鼠的血清或浸軟的脾臟。
21. 如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第二試驗(yàn)帶還包 含可顯示所述檢測(cè)正常進(jìn)行的對(duì)照指示物。
22. 如權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述第一和第二試驗(yàn) 帶包含同時(shí)檢測(cè)馬血紅蛋白和馬白蛋白的單條試驗(yàn)帶,所述馬血紅蛋白的存在表明馬 存在胃潰瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或出血,所述馬白蛋白的存在表明馬存在結(jié)腸潰瘍 或出血。
23. —種制備檢測(cè)并定位馬潰瘍或消化道出血的快速檢測(cè)試劑盒的方法,包括 提供第一試驗(yàn)帶,該試驗(yàn)帶通過快速免疫試驗(yàn)或過氧化物酶反應(yīng)檢測(cè)馬胃潰瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或出血;和提供第二試驗(yàn),該試驗(yàn)帶通過快速免疫試驗(yàn)檢測(cè)馬結(jié)腸潰瘍或出血。
24. 如權(quán)利要求23所述的方法,其特征在于,第一試驗(yàn)帶檢測(cè)馬血紅蛋白,馬 血紅蛋白的表明馬存在胃潰瘍或出血和/或結(jié)腸潰瘍或出血。
25. 如權(quán)利要求24所述的方法,其特征在于,所述第一試驗(yàn)帶含有能特異性結(jié) 合馬血紅蛋白的抗馬血紅蛋白抗體。
26. 如權(quán)利要求23所述的方法,其特征在于,第二試驗(yàn)帶檢測(cè)馬白蛋白,馬白 蛋白的存在表明馬存在結(jié)腸潰瘍或出血。
27. 如權(quán)利要求26所述的方法,其特征在于,所述第二試驗(yàn)帶含有特異性結(jié)合馬白蛋白的抗馬白蛋白抗體。
28. 如權(quán)利要求23所述的方法,其特征在于,所述第一試驗(yàn)帶還含有證明所述 檢測(cè)已正常進(jìn)行的對(duì)照指示物,所述第二試驗(yàn)帶也含有證明所述檢測(cè)已正常進(jìn)行的 對(duì)照指示物。
29. 如權(quán)利要求23所述的方法,其特征在于,所述第一和第二試驗(yàn)帶包含 同時(shí)檢測(cè)馬血紅蛋白和馬白蛋白的單條試驗(yàn)帶。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種診斷和檢測(cè)裝置以及使用該裝置的相關(guān)方法,得到馬白蛋白和馬血紅蛋白的抗體用于檢測(cè)裝置、試劑盒,和檢測(cè)及定位馬胃和結(jié)腸潰瘍或出血的方法中。將待檢測(cè)馬的糞便液滴與緩沖液一起放入容器中徹底混合,然后從容器中取幾滴液體放入檢測(cè)試劑盒中。檢測(cè)試劑盒中出現(xiàn)可視標(biāo)記意味著檢測(cè)到馬血紅蛋白和馬白蛋白標(biāo)記物,它們分別表明存在胃和/或結(jié)腸潰瘍或出血。
文檔編號(hào)G01N33/558GK101221174SQ200710186699
公開日2008年7月16日 申請(qǐng)日期2007年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月28日
發(fā)明者F·L·佩里格里尼, S·D·卡特 申請(qǐng)人:自由健康有限公司
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