專利名稱：一種用于診斷高甘油三酯血癥的試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及載脂蛋白A5(ApoA5)作為高甘油三酯血癥(FHTG)診斷的生化指標(biāo)，抗ApoA5抗體對的制備技術(shù)，酶標(biāo)記顯色免疫反應(yīng)技術(shù)和利用ApoA5的抗體來診斷高甘油三酯血癥(FHTG)的技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用于診斷高甘油三酯血癥(FHTG)的試劑盒及生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
載脂蛋白異常與冠心病和中風(fēng)密切相關(guān)。盡早進(jìn)行正確診斷，有利于早期防治這些嚴(yán)重的疾病。載脂蛋白診斷試劑盒的開發(fā)，有助于冠心病和中風(fēng)的有效防治。ApoA5屬于ApoAI/CIII/AIV基因群，在肝臟表達(dá)，與HDL/VLDL有關(guān)。在表達(dá)人類ApoA5轉(zhuǎn)基因的小鼠的血漿中甘油三酯的濃度下降為對照鼠的三分之一，而在缺少該基因的小鼠中卻增加了4倍。ApoA5基因啟動子的單核苷酸變異(SNP)直接影響甘油三酯水平。然而，目前并不清楚ApoA5調(diào)節(jié)甘油三酯的作用機(jī)制。
高甘油三酯可使小密低密度脂蛋白(sLDL)濃度升高，具有較強(qiáng)的致動脈粥樣硬化作用。甘油三酯水平越高，低密度脂蛋白中的膽固醇酯越多。人們已經(jīng)證實，動脈粥樣硬化斑塊中的膽固醇主要來自于低密度脂蛋白，低密度脂蛋白既是血漿中含膽固醇最多的，也是致動脈粥樣硬化性最強(qiáng)的脂蛋白。另外，流行病學(xué)研究表明，高水平甘油三酯使高密度脂蛋白濃度下降，高密度脂蛋白濃度受甘油三酯水平的影響，兩者呈負(fù)相關(guān)。近來研究表明，血甘油三酯水平異常與體內(nèi)凝血因子異常密切相關(guān)，血漿甘油三酯水平升高可以導(dǎo)致體內(nèi)凝血因子水平升高，從而促進(jìn)血凝，并可使組織型纖溶酶原激活物抑制劑(PAI)合成增加，抑制纖維蛋白溶解，形成高凝狀態(tài)，促進(jìn)冠心病的發(fā)生。有實驗結(jié)果表明，甘油三酯濃度上升1mmol/L，心血管意外發(fā)生率男性上升32％，女性為76％。在校正高密度脂蛋白的影響后，危險率男性上升14％，女性為37％。這些結(jié)果表明血清甘油三酯濃度升高是心血管疾病的重要危險因素。
高甘油三酯血癥患者常同時有高血壓和胰島素抵抗。胰島素抵抗通常指患者有傾向于非胰島素依賴糖代謝異常，該類患者常較早地形成冠狀動脈疾病。通常將脂質(zhì)三聯(lián)癥、高凝狀態(tài)、高血壓、胰島素抵抗稱為代謝綜合征。已證實高甘油三酯血癥患者常合并有代謝綜合征中的其它異常。高甘油三酯血癥的臨床意義在于此。而作為直接影響甘油三酯水平的指標(biāo)ApoA5顯得尤為重要，ApoA5的單核苷酸多態(tài)性有望作為風(fēng)險指示標(biāo)和降低血脂濃度的治療靶點。本發(fā)明就是將ApoA5通過ELISA實驗應(yīng)用于臨床實踐以達(dá)到高甘油三酯血癥的病因診斷，以及冠心病和中風(fēng)等心血管疾病的有效防治。
三明治雙抗體技術(shù)是建立在單克隆抗體技術(shù)之上的生物技術(shù)領(lǐng)域較新的后抗體技術(shù)。雙抗體夾心法應(yīng)用抗體對識別抗原的兩個位點來捕捉抗原，避免了抗體與抗原的同一位點的競爭結(jié)合，減少了抗原決定簇的空間位阻現(xiàn)象，所以較一般的抗原捕捉法更敏感，特異性更強(qiáng)，重復(fù)性更好，尤其適用于抗原含量很少的標(biāo)本的檢測。本發(fā)明結(jié)合此技術(shù)開發(fā)的針對載脂蛋白A5(ApoA5)的抗體對，對檢測FHTG病人血液中微量生化指標(biāo)(抗原)更突顯其重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種利用ApoA5作為FHTG診斷的生化指標(biāo)，制備抗ApoA5的單克隆抗體對，并基于酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理而建立的一種簡便易得的試劑盒，用于測定人血清中ApoA5的濃度而對高甘油三酯血癥進(jìn)行病因診斷，從而達(dá)到冠心病和中風(fēng)等心血管疾病的有效防治。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種高甘油三酯血癥(FHTG)診斷試劑盒，包括酶標(biāo)抗ApoA5的單克隆抗體和未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體；封閉液；酶底物溶液；包被緩沖液；終止液；洗滌液；酶標(biāo)板；其中未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體包被于酶標(biāo)板。所述抗ApoA5的抗體為單克隆抗體對。
所述抗ApoA5單抗用純化的ApoA5免疫BALB/c小鼠，得到抗原刺激的脾臟細(xì)胞，融合該脾臟細(xì)胞和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞系SP2/0；利用HAT選擇培養(yǎng)基選擇雜交瘤細(xì)胞，并利用ELISA方法篩選鑒定產(chǎn)生抗ApoA5抗體的細(xì)胞；進(jìn)行三次克隆化后得到分泌高特異性的單克隆抗體的細(xì)胞株，保存所篩選到的產(chǎn)生與ApoA5高特異性結(jié)合的單抗的細(xì)胞株，通過小鼠腹水生產(chǎn)抗ApoA5的單抗。再利用Protein A-SePharose親和層析柱進(jìn)一步純化腹水中抗ApoA5的單抗，ELISA及Western-Blot鑒定分離純化的單抗。
抗ApoA5單抗隆抗體對的篩選，主要采用抑制法篩選高親和力的亞克隆，進(jìn)而在多次克隆化和ELISA相加實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上進(jìn)行競爭抑制表位分析和親和力的測定，得到不同表位的單抗細(xì)胞株，進(jìn)一步生產(chǎn)腹水并純化得到多量抗體，進(jìn)行單株標(biāo)記，采用ELISA直接法進(jìn)行標(biāo)記抗體的工作濃度滴定，然后采用ELISA競爭抑制法進(jìn)行單標(biāo)抗體表位測定，從而篩選出高效親和力的三明治抗體對。
酶標(biāo)抗ApoA5的單克隆抗體采用的是過碘酸鈉法辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體。以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與ApoA5的單克隆抗體即免疫球蛋白上的氨基相結(jié)合，進(jìn)一步用NaBH4還原生成穩(wěn)定的酶標(biāo)記抗體。透析純化后離心去除沉淀，上清即為酶-抗體結(jié)合物。
將抗ApoA5單抗隆抗體均勻包被于單位面積的酶標(biāo)板孔上，包被緩沖液為0.05M pH9.6的碳酸鹽緩沖液，即1升溶液中含1.59g Na2CO3，2.93gNaHCO3。所述封閉液為1％牛血清白蛋白；所述酶底物溶液為TMB應(yīng)用液，即60μg/ml TMB和0.05％H2O2于0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液中；終止液為1mol/LH2SO4溶液。
本發(fā)明所提供的高甘油三酯血癥診斷試劑盒，是以ApoA5為生化指標(biāo)來診斷高甘油三酯血癥病因的。這包括制備上述ApoA5的單克隆抗體對的方法，以及利用ELISA方法測定人血清中ApoA5的濃度，以診斷FHTG的病因，達(dá)到對冠心病和中風(fēng)等心血管疾病的有效防治。
本試劑盒由酶標(biāo)抗ApoA5的單克隆抗體、未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體、酶標(biāo)板、封閉液、酶底物溶液、包被緩沖液、洗滌液和終止液組成。
與現(xiàn)有指標(biāo)和技術(shù)相比，本發(fā)明有突出的優(yōu)點和實用性1、檢測特異性強(qiáng)。臨床上檢測血脂的項目有很多，各醫(yī)院普遍檢查的基本項目有總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、載脂蛋白(Apo)B、ApoAI、脂蛋白(a)[Lp(a)]等。調(diào)查資料研究表明，高甘油三酯、高膽固醇、低HDL-C和高LDL-C共同構(gòu)成了冠心病的危險因素。血清ApoAI可以代表HDL水平，與HDL-C呈正相關(guān)，其臨床意義也大體相似。但是，HDL是一系列顆粒大小與組成不均一的脂蛋白，病理狀態(tài)下HDL亞類與組成往往會發(fā)生變化，故ApoAI的升降不一定與HDL-C變化完全成比例。ApoB100大約有有90％的比例分布在LDL中，所以血清ApoB主要代表LDL水平，它與血清LDL-C水平呈明顯正相關(guān)，ApoB水平高低的臨床意義也與LDL-C相似。但是，在少數(shù)情況下，可出現(xiàn)高ApoB100血癥而LDL-C濃度正常的情況，所以這兩種載脂蛋白可靠性和準(zhǔn)確性都不十分令人滿意。載脂蛋白A5作為高甘油三酯血癥的病因診斷指標(biāo)具有很高的敏感性和特異性。ApoA5基因啟動子的單核苷酸變異(SNP)直接影響甘油三酯水平。實驗研究表明，在表達(dá)人類ApoA5轉(zhuǎn)基因的小鼠的血漿中甘油三酯的濃度下降為對照鼠的三分之一，而在缺少該基因的小鼠中卻增加了4倍。
2、檢測敏感性高。人血液中ApoA5的濃度很低，平均約為215ng/ml。本發(fā)明采用雙抗體夾心法檢測血清中的ApoA5，使檢測的敏感性更高。
3、避免了目前市場上的同類產(chǎn)品只能單純表現(xiàn)結(jié)果，卻不能明確說明病因的缺點。高甘油三酯血癥一經(jīng)查出是ApoA5基因突變原因引起，即可針對病因進(jìn)行相應(yīng)治療，從而從根本上解決高甘油三酯血癥及其引發(fā)的相關(guān)疾病的預(yù)防和治療。
本發(fā)明實驗結(jié)果及分析ELISA檢測不同樣品中ApoA5的濃度，利用所制備的抗ApoA5的單克隆抗體對，采用三明治式ELISA方法，測定不同樣品中ApoA5的濃度。結(jié)果如下表和圖1。
抗體抗ApoA5，0.1μg/ml，100μl/孔；封閉液1％BSA。由測定結(jié)果可見，三明治式ELISA方法對ApoA5的檢測下限即靈敏度為150ng/ml左右，低于人血液中ApoA5的平均濃度(215ng/ml)。


圖1為ApoA5濃度與吸光度的曲線圖。
具體實施例方式
高甘油三酯血癥(FHTG)診斷試劑盒的生產(chǎn)方法1、ApoA5的單克隆抗體對的制備用純化的ApoA5作為抗原分別免疫BALB/c小鼠，間隔21天免疫第二次，以后每間隔10天免疫一次，共免疫3-4次，然后取出免疫小鼠的脾臟細(xì)胞，用PEG將該脾臟細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞系SP2/0進(jìn)行融合，利用HAT選擇性培養(yǎng)基在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上篩選雜交瘤細(xì)胞，用ELISA方法鑒定抗ApoA5的細(xì)胞株，進(jìn)行三次克隆化后得到穩(wěn)定分泌高特異性單克隆抗體的細(xì)胞株，在相同抗原包被板上采用ELISA抑制法，即參照組中加入細(xì)胞培養(yǎng)上清，在抑制組加入細(xì)胞培養(yǎng)上清和抗原混合物，比較兩組OD值差異從而篩選出高親和力的亞克隆。然后在間接ELISA實驗上進(jìn)行相加法表位分析，即參照組中分別加入兩個單株細(xì)胞培養(yǎng)上清，測定組中同時加入兩株細(xì)胞培養(yǎng)上清，比較兩組OD值(A1、A2和A1+2)，通過下面公式計算
AI=[2A1+2A1+A2-1]×100%]]>在比較計算結(jié)果的基礎(chǔ)上進(jìn)行表位分析和親和力的測定，AI值小于50％為相加陰性，即兩細(xì)胞株分泌的抗體識別抗原的表位相同，AI值大于50％為相加陽性，表示兩細(xì)胞株之間無競爭，即兩細(xì)胞株分泌的抗體識別抗原的兩個不同的表位，從而初步得到針對抗原不同表位的單抗細(xì)胞株。進(jìn)一步將得到的單抗細(xì)胞株分別注射入小鼠腹腔進(jìn)行腹水生產(chǎn)，利用ProteinA-Sepharose親和層析柱純化腹水得到多量單克隆抗體，用HRP酶對純化的抗體進(jìn)行單株標(biāo)記，用ELISA直接法進(jìn)行標(biāo)記抗體的工作濃度滴定，然后用ELISA競爭抑制法在參照組中加入酶標(biāo)抗體，在測定組中加入酶標(biāo)抗體和未標(biāo)記待測抗體混合物，比較兩組OD值，參照組OD值大于測定組OD值的表示存在競爭抑制，視為兩抗體識別抗原的表位相同。反之，兩抗體不存在競爭抑制時視為兩抗體識別抗原的表位不同，從而最終篩選得到高效親和力的三明治抗體對。
2、酶標(biāo)記抗ApoA5單克隆抗體的方法酶標(biāo)抗ApoA5的單克隆抗體采用的是過碘酸鈉法辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體。稱取HRP溶解蒸餾水中。加入新配的0.1M NaIO4溶液，室溫下避光攪拌20分鐘。NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基。上述溶液裝入透析袋中，加1mM PH4.4的醋酸鈉緩沖液透析，4℃過夜。加0.2M PH9.5碳酸鹽緩沖液，使以上醛化HRP的pH升高到9.0～9.5，然后立即加入ApoA5的單克隆抗體，在0.01M碳酸鹽緩沖液中，室溫避光輕輕攪拌2小時。待醛化的HRP與ApoA5的單克隆抗體即免疫球蛋白上的氨基相結(jié)合后，再加新配的4mg/ml NaBH4液，置4℃2小時，NaBH4將其還原生成穩(wěn)定的酶標(biāo)記抗體。上述液裝入透析袋中，在0.15M pH7.4 PBS透析，4℃過夜。透析純化后離心去除沉淀，上清即為酶抗體結(jié)合物。
3、各種緩沖液及試劑的配制方法①包被緩沖液0.05M pH9.6的Na2CO3-NaHCO3:Na2CO3(MW 105.99)1.59g和NaHCO3(MW 84.01)2.93g，加蒸餾水至1000ml。
②封閉液1％牛血清白蛋白(BSA)溶液牛血清白蛋白1g；加磷酸鹽緩沖液(PBS)(配制如下)至100ml。
0.01M，pH 7.4的PBS溶液NaCI(MW 58.44)8.0g，KCl(MW 74.55)0.2g，KH2PO4(MW 136.09)0.24g，Na2HPO4·12H2O(MW 358.14)3.6g，加蒸餾水至1000ml。
③洗滌液pH 7.4的PBS一Tween-20，在1000ml 0.01M，pH 7.4的PBS溶液中加0.5ml吐溫-20(Tween-20)即可。
④酶底物3，3’，5，5’四甲替聯(lián)苯胺(TMB)溶液i)四倍的底物緩沖液稱取35.8g Na2HPO4.12H2O；稱取21.1g檸檬酸；各加超純水至500ml即分別獲得A母液B母液，取A液300ml，用B液調(diào)PH值至5.2即得，使用時四倍稀釋。
ii)TMB濃縮液準(zhǔn)確稱量粉劑TMB400mg加入10ml二甲基亞砜(DMSO)中，使之完全溶解后即得四十倍的TMB底物濃縮液。
iii)工作液配制10ml底物緩沖液(1×)中加入0.025ml TMB濃縮液完全混勻后4μl 30％的雙氧水即可，臨用前現(xiàn)配。
⑤終止液1mol/LH2SO4溶液濃硫酸(95-98％)54.3ml，加蒸餾水至1000ml即可，配時將濃硫酸緩慢滴入蒸餾水中，邊加邊混勻。
高甘油三酯血癥(FHTG)診斷試劑盒操作步驟1、制定標(biāo)準(zhǔn)曲線將純化的未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體溶液用包被液稀釋到0.1μg/ml，加入到96孔酶標(biāo)板中，每孔100μl，37℃包被1小時或4℃過夜；洗滌液洗板3次，甩干，加入1％BSA封閉，每孔200μl，37℃封閉1小時；不洗，甩干，加入不同濃度的ApoA5(0-406ng/ml)標(biāo)準(zhǔn)抗原，每孔100μl，37℃孵育1小時；洗滌液洗板3次，甩干，加入酶標(biāo)記的抗ApoA5單抗溶液(用洗滌液稀釋到0.1μg/ml)，每孔100μl，37℃孵育1小時；洗滌液洗板3次，甩干，加入酶底物溶液，每孔100μl，避光顯色5分鐘，加入終止液，每孔50μl。利用酶標(biāo)儀在450nm測定光吸收值(A450nm)，以濃度(ng/ml)為橫坐標(biāo)，A450nm為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2、測定血清中的ApoA5濃度將純化的未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體溶液用包被液稀釋到0.1μg/ml，加入到96孔酶標(biāo)板中，每孔100μl，37℃包被1小時或4℃過夜；洗滌液洗板3次，甩干，加入1％BSA封閉，每孔200μl，37℃封閉1小時；不洗，甩干，加入適當(dāng)倍數(shù)稀釋的待檢測血清，每孔100μl，37℃孵育1小時或4℃過夜；洗滌液洗板3次，甩干，加入酶標(biāo)記的抗ApoA5單抗溶液，用洗滌液稀釋到0.1μg/ml，每孔100μl，37℃孵育1小時；洗滌液洗板3次，甩干，加入酶底物溶液，每孔100μl，避光顯色5分鐘，加入終止液，每孔50μl。從利用酶標(biāo)儀在450nm測定光吸收值A(chǔ)450nm，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，由所測得的A450nm，求得血清中ApoA5的濃度值。
3、結(jié)果判定根據(jù)ApoA5作為高甘油三酯血癥(FHTG)病因診斷指標(biāo)的截斷值(cut off值)215ng/ml，濃度低于該值的可判定為ApoA5缺乏，有高甘油三酯血癥的危險；或可判定ApoA5基因突變?yōu)楦吒视腿パY的主要病因。
權(quán)利要求
1.一種用于診斷高甘油三酯血癥(FHTG)的試劑盒，試劑盒內(nèi)包含有酶標(biāo)抗載脂蛋白A5(ApoA5)的單克隆抗體和未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體、封閉液、酶底物溶液、包被緩沖液、終止液、洗滌液、酶標(biāo)板。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒是基于酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理，其特征在于未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體包被于酶標(biāo)板，并將抗ApoA5單抗隆抗體均勻包被于單位面積的酶標(biāo)板孔上，包被緩沖液為0.05M pH9.6的碳酸鹽緩沖液也就是1升溶液中含1.59g Na2CO3，2.93g NaHCO3，封閉液為1％牛血清白蛋白；酶底物溶液為3，3’，5，5’四甲替聯(lián)苯胺(TMB)應(yīng)用液也就是60μg/mlTMB和0.05％H2O2于0.1M pH6.0磷酸鹽緩沖液中；終止液為1mol/LH2SO4溶液。
3.用于診斷高甘油三酯血癥(FHTG)的試劑盒的生產(chǎn)方法，按以下步驟進(jìn)行1)、抗ApoA5單克隆抗體的制備用純化的ApoA5免疫BALB/c小鼠，得到抗原刺激的脾臟細(xì)胞，融合該脾臟細(xì)胞和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞系SP2/0；利用HAT選擇培養(yǎng)基選擇雜交瘤細(xì)胞，并利用ELISA方法篩選鑒定產(chǎn)生抗ApoA5抗體的細(xì)胞；進(jìn)行三次克隆化后得到分泌高特異性的單克隆抗體的細(xì)胞株，保存所篩選到的產(chǎn)生與ApoA5高特異性結(jié)合的單抗的細(xì)胞株，通過小鼠腹水生產(chǎn)抗ApoA5的單克隆抗體，再利用Protein A-SePharose親和層析柱進(jìn)一步純化腹水中抗ApoA5的單抗，分離純化單抗；2)、酶標(biāo)記抗ApoA5單克隆抗體的制備用NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與ApoA5的單克隆抗體即免疫球蛋白上的氨基相結(jié)合，進(jìn)一步用NaBH4還原生成穩(wěn)定的酶標(biāo)記抗體，透析純化后離心去除沉淀，上清為酶-抗體結(jié)合物；3)、上述各種溶液的配制①包被緩沖液將1.59g的Na2CO3和2.93gNaHCO3溶解于1000ml蒸餾水中；②封閉液將1g牛血清白蛋白加入0.01M的100ml磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液，0.01M的100ml PBS溶液為將8.0g NaCI、0.2g KCl、0.24g KH2PO4和3.6g Na2HPO4·12H2O一起溶解于1000ml蒸餾水中；③洗滌液在1000ml的0.01M PBS溶液中加0.5ml吐溫-20(Tween-20)；④酶底物3，3’，5，5’四甲替聯(lián)苯胺(TMB)溶液i)四倍的底物緩沖液稱取35.8g Na2HPO4.12H2O；稱取21.1g檸檬酸；各加超純水至500ml即分別獲得A母液B母液，取A液300ml，用B液調(diào)PH值至5.2即得，使用時四倍稀釋；ii)TMB濃縮液準(zhǔn)確稱量粉劑TMB400mg加入10ml二甲基亞砜(DMSO)中，使之完全溶解后即得四十倍的TMB底物濃縮液；iii)工作液配制10ml底物緩沖液中加入0.025ml TMB濃縮液完全混勻后加30％的雙氧水4μl即可；⑤終止液取54.3ml濃度為95-98％濃硫酸加蒸餾水至1000ml即可。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述抗ApoA5單抗隆抗體對的篩選，采用抑制法篩選高親和力的亞克隆，進(jìn)而在多次克隆化和ELISA相加實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上進(jìn)行競爭抑制表位分析和親和力的測定，得到不同表位的單抗細(xì)胞株，進(jìn)一步腹水生產(chǎn)并純化得到多量抗體，進(jìn)行單株標(biāo)記，采用ELISA直接法進(jìn)行標(biāo)記抗體的工作濃度滴定，然后采用ELISA競爭抑制法進(jìn)行單標(biāo)抗體表位測定，從而篩選出高效親和力的三明治抗體對。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于診斷高甘油三酯血癥(FHTG)的試劑盒，利用載脂蛋白A5(ApoA5)作為FHTG診斷的生化指標(biāo)，制備抗ApoA5的單克隆抗體對。試劑盒內(nèi)有酶標(biāo)抗ApoA5的單克隆抗體和未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體、封閉液、酶底物溶液、包被緩沖液、終止液、洗滌液和酶標(biāo)板。用未標(biāo)記抗ApoA5的單克隆抗體包被于酶標(biāo)板以捕捉人體血液中的ApoA5，用酶標(biāo)抗ApoA5的單克隆抗體來識別和檢測人體血液中的ApoA5，而應(yīng)用于高甘油三酯血癥的病因診斷，從而達(dá)到冠心病和中風(fēng)等心血管疾病的有效防治。
文檔編號G01N21/78GK1834654SQ20061001874
公開日2006年9月20日 申請日期2006年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月13日
發(fā)明者廖偉 申請人:廖偉