專利名稱：硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于檢測技術(shù)，涉及檢測硝酸鹽、亞硝酸鹽含量的技術(shù)，尤其涉及檢測食品(蔬菜)中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量的快速測定試紙及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著生活水平的提高，人們對蔬菜的需求不再只注重消費(fèi)數(shù)量，而更重視質(zhì)量。目前生產(chǎn)上大量施用氮肥導(dǎo)致土壤硝態(tài)氮含量普遍較高，被作物吸收后極易在其體內(nèi)累積。已有研究表明，蔬菜是一種容易富集硝酸鹽的作物，人體攝入的硝酸鹽大部分(占70％-80％)來自蔬菜，硝酸鹽在人體內(nèi)細(xì)菌的作用下可還原成亞硝酸鹽，亞硝酸鹽可使血液的載氧能力下降，從而導(dǎo)致高鐵血紅蛋白癥。另一方面，亞硝酸鹽還可與人體攝取的其它食品、醫(yī)療品、殘留農(nóng)藥等成分中的次級胺(仲胺、叔胺、酰胺及氨基酸)反應(yīng)，在胃腔中(pH＝3)形成強(qiáng)力致癌物——亞硝胺，從而誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變，這對人類健康構(gòu)成了潛在威脅。因此，如何減少蔬菜中硝酸鹽、亞硝酸鹽積累，如何讓廣大市民早日吃上“放心菜”已成為各級政府部門及農(nóng)業(yè)科技工作者急待解決的重大課題。
當(dāng)前蔬菜生產(chǎn)的主要方向為發(fā)展無公害蔬菜，按照我國最新的蔬菜中硝酸鹽限量(GB 19338-2003)和農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無公害蔬菜安全要求(GB18406.1-2001)要求，我國居民消費(fèi)量較大的幾種主要蔬菜(尤其是葉菜、根菜)硝酸鹽含量已大大超標(biāo)，這一現(xiàn)象迄今尚未引起高度重視，更無蔬菜硝酸鹽快速有效的檢測工具。因此，必須尋找快速、準(zhǔn)確、低成本的檢測儀器和技術(shù)，用來檢測蔬菜中硝酸鹽、亞硝酸鹽的含量。
目前測定蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法有多種，如光譜法、色譜法、電泳法、極譜法等，但大多需專門儀器，且測定過程復(fù)雜，時間長。經(jīng)檢索可知謝增鴻等發(fā)明的“蔬菜中亞硝酸鹽、硝酸鹽的快速檢測試紙及其檢測方法”(申請?zhí)?311666.6，公開號CN 1445531A)雖然也是一種蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽的快速測定方法，但其僅僅是判斷蔬菜中亞硝酸鹽含量是否超過8mg/kg，硝酸鹽含量是否超過10mg/kg，無法據(jù)此判斷蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量是否超過國家規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)。另外，在檢測硝酸鹽時還需反應(yīng)容器并添加還原劑，比較煩瑣，不太適合廣大人群隨時使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供價格低廉、使用方便、不需要任何儀器的快速測定試紙，能夠同時確定蔬菜中硝酸鹽、亞硝酸鹽大致含量，并判斷是否超過國家規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)。
本發(fā)明提供的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙由顯色試紙與反應(yīng)試紙組合，顯色試紙為浸有等體積的重氮化試劑和偶聯(lián)試劑的混合液，反應(yīng)試紙涂有鋅、銅、鎂、鎘等硝酸鹽金屬還原劑。
本發(fā)明提供的測定試紙通過以下方法制備(1)反應(yīng)試紙的制備先將大張濾紙酸化，分正反兩面，然后在濾紙的反面涂上硝酸鹽金屬還原劑，制成的試紙呈白色，避光低溫保存，使用時剪成1×0.8厘米(長×寬)的小塊。
(2)顯色試紙的制備將大張濾紙浸入等體積的重氮化試劑和偶聯(lián)試劑的混合液中。全部濕透3-5分鐘后立即送入60℃-80℃的烘箱內(nèi)將其烘干。制成的試紙呈白色，避光低溫保存，使用時剪成1×0.8厘米(長×寬)的小塊。
(3)硝酸鹽、亞硝酸鹽測定試紙的制備用雙面膠把顯色試紙小塊粘貼在7.5×1.0厘米的白色塑料條的下端，在其上間隔0.5厘米處反面向下粘貼反應(yīng)試紙。將制備好的硝酸鹽、亞硝酸鹽試紙，參見附圖1，放入塑料袋，密封，置棕色瓶，在冰箱中低溫避光保存。
本發(fā)明提供的測定試紙，在快速檢測食品(蔬菜)中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量的場合應(yīng)用。
本發(fā)明提供的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙配有硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階、亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階，其中硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階為6個色塊，分別代表6個硝酸鹽含量等級，即440、750、1200、2000、2500、3000mg kg-1鮮重；亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階為3個色塊，分別代表3個亞硝酸鹽含量等級，即2、4、6、mg kg-1鮮重。
本發(fā)明檢測亞硝酸鹽的原理是在酸性條件下，蔬菜中亞硝酸鹽與磺胺重氮化后，再與二鹽酸-1-萘乙二胺發(fā)生偶合反應(yīng)生成紫紅色化合物。
本發(fā)明檢測硝酸鹽的原理是在酸性條件下，硝酸鹽被還原劑還原成亞硝酸鹽，然后按上述檢測亞硝酸鹽的原理檢測硝酸鹽。


圖1為本發(fā)明試紙示意圖(①代表顯色試紙②代表反應(yīng)試紙)。
圖2為硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階(mg kg-1鮮重)。
圖3為亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階(mg kg-1鮮重)。
具體實施例方式
本發(fā)明結(jié)合實施例作進(jìn)一步說明。
實施例1 本發(fā)明試紙的制備方法反應(yīng)試紙的制備先將大張濾紙酸化，分正反兩面，然后在濾紙的反面涂上鋅、銅、鎂、鎘等硝酸鹽金屬還原劑，制成的試紙正面呈白色，避光低溫保存，使用時剪成1×0.8厘米(長×寬)的小塊。
顯色試紙的制備將大張濾紙浸入等體積的重氮化試劑和偶聯(lián)試劑的混合液中，全部濕透3-5分鐘后立即送入60℃-80℃的烘箱內(nèi)將其烘干。制成的試紙呈白色，避光低溫保存，使用時剪成1×0.8厘米(長×寬)的小塊。
硝酸鹽、亞硝酸鹽測定試紙的制備用雙面膠把顯色試紙小塊粘貼在7.5×0.8厘米的白色塑料條的下端，在其上間隔0.5厘米處反面向下粘貼反應(yīng)試紙。將制備好的硝酸鹽、亞硝酸鹽試紙，參見附圖1，放入塑料袋，密封，置棕色瓶，在冰箱中低溫避光保存。
本發(fā)明的主要試劑配制是重氮化試劑稱取磺胺0.5-1.5g和30-50g酒石酸溶于100mL蒸餾水中，貯于棕色試劑瓶中，放入4℃冰箱保存；偶聯(lián)試劑稱取0.1-0.3g二鹽酸-1-萘乙二胺和10-20g酒石酸溶于100mL蒸餾水中，貯于棕色試劑瓶中，放入4℃冰箱保存。
實施例2 樣品檢測方法(1)亞硝酸鹽含量取蔬菜汁液數(shù)滴(1-2滴為宜)滴在顯色試紙上，1-2分鐘后觀察試紙顏色變化，與標(biāo)準(zhǔn)色階比較，估計出亞硝酸鹽含量，判斷是否超標(biāo)，超標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中國人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢疫總局2001年8月6日發(fā)布、2001年10月1日實施的農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無公害蔬菜安全要求(GB18406.1-2001)蔬菜中亞硝酸鹽限量(以NaNO2計)≤4(2)硝酸鹽含量取汁液數(shù)滴(1-2滴為宜)滴在反應(yīng)試紙上，1-3分鐘后豎立試紙，讓反應(yīng)液順流至下端顯色試紙上進(jìn)行顯色反應(yīng)，觀察其顏色變化，1-2分鐘后與標(biāo)準(zhǔn)色階相比較，估計硝酸鹽含量范圍，判斷是否超標(biāo)，超標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)中國人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢疫總局2003年10月9日發(fā)布，2004年5月1日實施的蔬菜中硝酸鹽限量(GB 19338-2003)，詳見表1。
表1 蔬菜中硝酸鹽限量(GB 19338-2003)蔬菜類別硝酸鹽(以NO3-計)/(mg kg-1鮮重)茄果類、瓜類、豆類≤440莖菜類≤1200根菜類≤2500葉菜類≤3000實施例3 應(yīng)用實例與實驗室常規(guī)分析方法(標(biāo)準(zhǔn)法)進(jìn)行對比，各類蔬菜硝酸鹽含量(以NO3-計)與亞硝酸鹽含量(以NaNO2計)試紙法與標(biāo)準(zhǔn)法測定，測定結(jié)果參見表2。
表2試紙法與標(biāo)準(zhǔn)法比較單位(mg kg-1)蔬菜品種標(biāo)準(zhǔn)法測定值 試紙法測定值標(biāo)準(zhǔn)法測定值 試紙法測定值(NO3-)(NaNO2)小白菜259723001.272小白菜4250＞3000(超標(biāo))4.27＞4(超標(biāo))甘藍(lán) 20352000油菜 854 800菠菜 291430003.353黃瓜 645 500(超標(biāo))萵筍 176916003.073實施例4 硝酸鹽鋅粉還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽鋅粉還原劑，測得小白菜硝酸鹽含量(以NO3-計)如表3。
表3硝酸鹽鋅粉還原試紙測定結(jié)果 單位(mg kg-1)樣品號估計值樣品號估計值1 3000625002 2000727253 ＞3000(超標(biāo))86004 30009＞3000(超標(biāo))5 120010 2225實施例5 硝酸鹽銅粉還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽銅粉還原劑，測得甘藍(lán)硝酸鹽含量(以NO3-計)如表4。
表4硝酸鹽銅粉還原試紙測定結(jié)果單位(mg kg-1)樣品號 估計值樣品號估計值1＞3000(超標(biāo))675023000730003250082725412009＞3000(超標(biāo))5750101600實施例6 硝酸鹽鎂粉還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽鎂粉還原劑，測得小白菜硝酸鹽含量(以NO3-計)如表5。
表5硝酸鹽鎂粉還原試紙測定結(jié)果單位(mg kg-1)樣品號 估計值樣品號 估計值1200062500230007＞3000(超標(biāo))3120082500412009＞3000(超標(biāo))5＞3000(超標(biāo))101200實施例7 硝酸鹽鎘粉還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽鎘粉還原劑，測得小白菜硝酸鹽含量(以NO3-計)如表6。
表6硝酸鹽鎘粉還原試紙測定結(jié)果單位(mg kg-1)樣品號 估計值樣品號 估計值13000612002200072000312008＞3000(超標(biāo))420009＞3000(超標(biāo))5200010 750實施例8 硝酸鹽鋅鎂粉混合還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽鋅鎂粉等量混合還原劑，測得小白菜硝酸鹽含量(以NO3-計)如表7。
表7硝酸鹽鎘粉還原試紙測定結(jié)果單位(mg kg-1)
樣品號 估計值樣品號 估計值1＞3000(超標(biāo))6222521200725003200082000425009＞3000(超標(biāo))52500101200實施例9 硝酸鹽鋅銅粉混合還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽鋅銅粉等量混合還原劑，測得小白菜硝酸鹽含量(以NO3-計)如表8。
表8硝酸鹽鎘粉還原試紙測定結(jié)果單位(mg kg-1)樣品號 估計值樣品號估計值12000620002＞3000(超標(biāo))7300032500875042000920005250010 ＞3000(超標(biāo))實施例10 硝酸鹽鋅、銅、鎂、鎘粉混合還原試驗按實施例1中反應(yīng)試紙制備采用硝酸鹽鋅、銅、鎂、鎘粉等量混合還原劑，測得小白菜硝酸鹽含量(以NO3-計)如表9。
表9硝酸鹽鎘粉還原試紙測定結(jié)果單位(mg kg-1)樣品號 估計值樣品號估計值130006＞3000(超標(biāo))2120072000320008250042500922255＞3000(超標(biāo))10 2500無需進(jìn)一步詳細(xì)闡述，相信采用前面所公開的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員可最大限度地應(yīng)用本發(fā)明。因此，前面的優(yōu)選具體實施方案應(yīng)被理解為僅是舉例說明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
1.硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，其特征是由顯色試紙與反應(yīng)試紙組合，顯色試紙為浸有等體積的重氮化試劑和偶聯(lián)試劑的混合液，反應(yīng)試紙涂有鋅、銅、鎂、鎘等硝酸鹽金屬還原劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，其特征是通過以下方法制備(1)反應(yīng)試紙的制備先將大張濾紙酸化，分正反兩面，然后在濾紙的反面涂上鋅、銅、鎂、鎘等硝酸鹽金屬還原劑，制成的試紙呈白色，使用時剪成長1厘米，寬0.8厘米的小塊；(2)顯色試紙的制備將大張濾紙浸入等體積的重氮化試劑和偶聯(lián)試劑的混合液中，全部濕透3-5分鐘后立即送入60℃-80℃的烘箱內(nèi)將其烘干，制成的試紙呈白色，使用時剪成長1厘米，寬0.8厘米的小塊；(3)測定試紙的制備用膠把顯色試紙小塊粘貼在7.5×1.0厘米的白色塑料條的下端，在間隔0.5厘米處反面向下粘貼反應(yīng)試紙，將制備好的硝酸鹽、亞硝酸鹽試紙，放入塑料袋，密封，置棕色瓶，在冰箱中低溫避光保存。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，其特征是重氮化試劑由0.5-1.5g磺胺和30-50g酒石酸溶于100mL蒸餾水中，貯于棕色試劑瓶中，放入4℃冰箱保存。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，其特征是偶聯(lián)試劑由0.1-0.3g二鹽酸-1-萘乙二胺和10-20g酒石酸溶于100mL蒸餾水中，貯于棕色試劑瓶中，放入4℃冰箱保存。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，在快速檢測食品中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量中應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，在快速檢測蔬菜中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量中應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，其特征是配套硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階為6個色塊，分別代表6個硝酸鹽含量等級，即440、750、1200、2000、2500、3000mg kg-1鮮重。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙，其特征是配套亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色階為3個色塊，分別代表3個亞硝酸鹽含量等級，即2、4、6、mg kg-1鮮重。
全文摘要
本發(fā)明提供的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙由顯色試紙與反應(yīng)試紙組合，顯色試紙為浸有等體積的重氮化試劑和偶聯(lián)試劑的混合液，反應(yīng)試紙涂有硝酸鹽還原劑。本發(fā)明提供的測定試紙，在快速檢測食品(蔬菜)中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量的場合應(yīng)用。本發(fā)明提供的硝酸鹽、亞硝酸鹽快速測定試紙價格低廉、使用方便、不需要任何儀器的快速測定試紙，能夠同時確定蔬菜中硝酸鹽、亞硝酸鹽大致含量，并判斷是否超過國家規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)。適合廣大人群隨時使用。
文檔編號G01N21/77GK1645114SQ200510048918
公開日2005年7月27日 申請日期2005年1月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月17日
發(fā)明者吳良?xì)g, 伍少福, 許超 申請人:浙江大學(xué)