專利名稱：生理活性物質溶液用過濾膜的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種用于從醫(yī)藥品或作為其原料的生理活性物質的溶液中有效地除去病毒等病原體的過濾膜。
背景技術：
近年來，在血漿分級制劑和生物醫(yī)藥品的精制步驟中，正在采用一類在可能會因制劑給藥發(fā)生病毒感染方面增加安全性的技術。作為這類技術，一般采用鈍化或除去病毒的方法。鈍化病毒的方法包括加熱處理法和化學藥品處理法(例如溶劑/洗滌劑(S/D)處理)等，除去病毒的方法包括膜過濾法。由于膜過濾法是利用篩分原理，根據(jù)粒子的大小進行分離操作，因此，對于病毒而言，不論其化學特性或熱性質如何，只根據(jù)其大小就可以除去病毒。因此，近年來，使用病毒除去膜的膜過濾法已在工業(yè)上得到廣泛應用。
特別地，對于耐熱性的人細小病毒B19和A型肝炎病毒等來說，加熱處理法的效果很差。對于沒有脂質膜的人細小病毒B19、脊髓灰質炎病毒、呼吸道與腸道病毒和SV40等來說，從原理上說，溶劑/洗滌劑(S/D)處理法也沒有效果。特別是由于人細小病毒B19是耐熱性病毒，而且還是沒有脂質膜的病毒，因此，作為將其除去和鈍化的手段，病毒除去膜就顯示出有效性。
另一方面，在血漿分級制劑和生物醫(yī)藥品的精制步驟中，在提高病毒除去和鈍化能力的同時，當然還要求生理活性物質高度滲透。
現(xiàn)有的病毒除去膜，要么是人體免疫球蛋白和血液凝固第VIII因子等高分子量的生理活性物質高度滲透但小病毒除去性能差，要么是能夠除去小病毒但人體免疫球蛋白和血液凝固第VIII因子等高分子量的生理活性物質不能以實用的水平高度滲透。
也就是說，以往的過濾膜要么存在著所謂能使人體免疫球蛋白和血液凝固第VIII因子等高分子量的生理活性物質高度滲透但不能除去人細小病毒B19等小病毒的缺點，要么存在著所謂能夠除去人細小病毒B19等小病毒但不能使人體免疫球蛋白和血液凝固第VIII因子等高分子量的生理活性物質以實用的水平高度滲透的缺點。
例如，特開平7-265674號公報中公開了一種聚偏氟乙烯膜，這種膜可以有效地從液體中除去小粒子，顯示出最小的吸附性，而且實際使用前可通過試驗完整性。已有記載稱這種膜對于從溶液中除去病毒是有用的，但是否能夠同時以高透過率滲透高分子量的生理活性物質尚不清楚。
高分子多孔質中空絲膜已在日本專利第1873816號說明書以及美國專利No.4,808,315號說明書中公開。這些中空絲膜具有能夠有效地從生理活性物質溶液中除去病毒的特有的細孔結構。這些中空絲膜的特征是具有一種能夠使病毒的高除去性和生理活性物質的高滲透性二者同時發(fā)揮作用的特有的細孔結構，但對于在將人體免疫球蛋白或血液凝固第VIII因子等高分子量的生理活性物質與人細小病毒B19或脊髓灰質炎病毒等小病毒篩分的場合下是否是有用的既沒有記載也沒有暗示。
特表平4-505579號公報中公開了一種用于從溶液中分離病毒的膜。這種膜是從含有病毒的溶液中選擇性地分離出病毒的復合不對稱膜。這種膜的噬菌體φX174(28nm)的對數(shù)除去率在3以上，人細小病毒B19和脊髓灰質炎病毒等小病毒的對數(shù)除去率在3以上，但人體免疫球蛋白的透過率僅為10～20％，數(shù)值極低，不能用于實際應用。
進一步地，能夠選擇性地將生理活性物質與人細小病毒B19等小病毒分離開的以往的過濾膜存在著這樣一個問題一旦持續(xù)地過濾，過濾量增加，病毒除去能力就會降低。特別地，初期病毒除去能力優(yōu)良的過濾膜存在著病毒除去能力隨著過濾量的增加而急劇降低的傾向，這在實用上有問題。
發(fā)明的公開本發(fā)明是解決上述以往技術中所存在的問題的發(fā)明。即，本發(fā)明的課題是提供這樣一種過濾膜，它可從具有病毒混入危險性的醫(yī)藥品或作為其原料的生理活性物質的溶液中使生理活性物質溶液以實用的水平滲透，并且能夠除去人細小病毒B19和脊髓灰質炎病毒等小病毒，而且可使其特性不會隨著過濾量的增加而發(fā)生實質性的變化地得以持續(xù)。另外，本發(fā)明還提供一種其結果能夠獲得更安全的制劑的技術。
本發(fā)明者們?yōu)榱私鉀Q上述課題進行了深入的研究，最終完成本發(fā)明。
即，本發(fā)明涉及這樣一種生理活性物質溶液用過濾膜，其特征在于，其泡點BP(Bubble point)(MPa)與表面張力γ(N/m)之比(BP/γ)在110以上，且單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率在70％以上。
另外，本發(fā)明還涉及這樣一種生理活性物質溶液用過濾膜，其特征在于，在0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒(porcineparvovirus)的對數(shù)除去率皆在3以上，且單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率在70％以上。
另外，本發(fā)明還涉及這樣一種生理活性物質溶液用過濾膜，其特征在于，其BP/γ在110以上，0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上，且單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率在70％以上。進一步地，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，上述過濾膜的膜內部孔結構中，如果孔徑的對數(shù)標準偏差σg在2.0以下的那部分區(qū)域的厚度為3μm～90μm，或是純水滲透速度為每1m2膜面積70～200升/h/0.1MPa，則是更優(yōu)選的，另外還發(fā)現(xiàn)，膜表面中不具有皮層、厚度為5μm～100μm是優(yōu)選的。
本發(fā)明的膜的孔徑特征可以用BP/γ和/或豬細小病毒的對數(shù)除去率和單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率來表示。
此處，BP/γ和豬細小病毒的對數(shù)除去率都是了解過濾膜孔結構的指標。BP/γ與過濾初期的膜孔結構有關，而豬細小病毒的對數(shù)除去率不僅是與過濾初期的性能有關的指標，而且還是與過濾性能的持續(xù)性有關的指標。
濾液中的病毒濃度往往隨著過濾量的增加而變化。病毒捕捉容量小的膜，隨著過濾量增加，會引起豬細小病毒的對數(shù)除去率降低。而豬細小病毒的對數(shù)除去率不降低或降低少的膜，其病毒捕捉容量大。進一步地，如果膜內部的孔結構中具有一定程度以上均質性的區(qū)域增多，則病毒捕捉容量增大，因此，豬細小病毒的對數(shù)除去率的持續(xù)性優(yōu)良。因此，本發(fā)明中，在0～5升/m2過濾時和在50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上，應該成為表示膜的持續(xù)特性、膜的孔結構特性、病毒捕捉容量以及膜的均質性等的優(yōu)劣程度的指標。作為用于了解過濾膜孔結構的手段之一，可以采用界面破壞現(xiàn)象。泡點試驗法被用作測定膜所具有的最大孔徑的簡便方法。Bechold等人已經采用過該方法(例如H.Bechold等，Kolloid Z.，55，172(1931)，JIS K3832)。
該方法的大概內容是，用表面張力γ(N/m)的液體使膜濕潤后，用氣體向該膜上緩緩施加壓力，在某一壓力下，膜表面上就會連續(xù)地產生氣泡，測定此時的氣體壓力。將此時的氣體壓力稱為泡點BP(MPa)。
公知的測定方法都是將目視確認連續(xù)發(fā)生氣泡時的壓力作為泡點。但是，在膜面積小的場合下，氣泡的發(fā)生量少，有可能會看漏，另外，還有可能將加壓以前附著在膜表面上的氣泡(不是由界面破壞現(xiàn)象所產生的氣泡)從膜表面脫離誤認為由界面破壞現(xiàn)象所產生的氣泡，因此該判定方法容易出現(xiàn)誤差。
本發(fā)明中，為了使測定誤差更小，將每1cm2發(fā)生3.0ml/min的定量的連續(xù)氣泡時的壓力(MPa)定義為泡點BP。
本發(fā)明者們發(fā)現(xiàn)，BP/γ與人體微小DNA病毒B19的除去有關。詳細地說，本發(fā)明者們發(fā)現(xiàn)，具有BP/γ在110以上孔徑特性的膜可以高效率地除去人細小病毒B19。
為了間接地了解過濾膜的孔結構，采用一種分析粒子除去性能的方法。作為具體地表現(xiàn)除去性能的方法，一般采用一種平均粒徑接近膜的平均孔徑、粒徑分布盡可能窄的模型粒子的除去率。
本發(fā)明的技術領域中，作為具有這種特性的粒子，使用特定的病毒或噬菌體。豬細小病毒的平均粒徑為20～25nm，在非聚集的狀態(tài)下，其粒徑分布也極窄，而且不用擔心會使人感染，因此是特別適用本發(fā)明領域的優(yōu)選的模型粒子。
本發(fā)明中，也可以根據(jù)BP/γ來預測人細小病毒B19等的人類感染性小病毒的除去率。另外，本發(fā)明中，也可以從粒徑和其他特性與人細小病毒B19類似的豬細小病毒的除去率來預測人細小病毒B19等的人類感染性小病毒的除去率。
豬細小病毒的除去率以對數(shù)除去率(LRV)表示，采用以下的公式進行計算。
LRV＝log10(No/Nf)No過濾前的過濾原液中的豬細小病毒濃度Nf過濾后的濾液中的豬細小病毒濃度本發(fā)明中，豬細小病毒的對數(shù)除去率在0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時皆必須在3以上。
該病毒過濾是在過濾壓力0.0785MPa、過濾溫度25℃、恒壓死端(dead-end)過濾的條件下進行的。濾液中的病毒濃度隨著過濾量而改變。本發(fā)明中，所謂的豬細小病毒的對數(shù)除去率(LRV)在3以上，是指在上述過濾操作中，與0～5升/m2過濾時的濾液有關的LRV以及與50～55升/m2過濾時的濾液有關的LRV皆在3以上。
隨著過濾量增加而引起LRV降低的膜，其病毒捕捉容量小，而LRV不降低或者降低少的膜，其病毒捕捉容量大。因此，可以考慮用這2點的LRV表征膜的結構特性。
以往技術的膜中，很難制作一種使生理活性物質溶液以實用的水平過濾并且人細小病毒B19或脊髓灰質炎病毒等小病毒除去時的LRV持續(xù)性優(yōu)良的膜。
由于本發(fā)明的膜的內部孔結構中存在許多具有一定程度以上的均質性的區(qū)域，因此在除去小病毒方面也具有LRV持續(xù)性優(yōu)良的特征。上述用來求出豬細小病毒的對數(shù)除去率的過濾原液，使用一種使含有3％牛胎血清的Dulbecco MEM培養(yǎng)基溶液培養(yǎng)的ESK細胞(豬腎臟細胞)感染豬細小病毒時的培養(yǎng)上清液。
過濾原液和濾液中的豬細小病毒的濃度的測定方法是，分別將各溶液加入ESK細胞中，培養(yǎng)10天后，采用利用新鮮的雞紅血球聚集反應的TCID50測定法進行測定。
對于人細小病毒B19的濃度測定(分析)，尚未確立一種通過觀察細胞變性等的一般的方法。有些場合下采用PCR法進行濃度測定(分析)，但由于靈敏度不夠，對于病毒除去率而言，難以獲得精度高的數(shù)據(jù)。因此，作為評價人細小病毒B19的除去乃至鈍化方法的有效性的手段，已確立了通過觀察細胞變性的高靈敏度分析法，使用豬細小病毒或狗細小病毒進行評價。實際上，采用使用豬細小病毒或狗細小病毒的評價方法來判斷人細小病毒B19的鈍化乃至除去的有效性的方法，已被用于制劑制造步驟中，并發(fā)揮出實用的性能。
生理活性物質的膜滲透過程中，所謂的透過率低與生理活性物質劇烈堵塞膜孔結構具有相同的含義。膜孔結構的堵塞會帶來被捕捉到膜中而構成損失的生理活性物質增加、濾液中的生理活性物質的濃度降低、每單位膜面積的可過濾量降低等問題，成為制劑制造步驟中成本增加的主要原因。從這種觀點考慮，在制劑制造步驟的膜過濾過程中，生理活性物質的透過率在70％以上、優(yōu)選在80％以上被認為是工業(yè)化生產的實用水平。
生理活性物質的透過率根據(jù)物質的種類、溶液的性狀而有所不同，人體免疫球蛋白的分子量為160,000～900,000，在醫(yī)藥和醫(yī)療領域已被實用化的生理活性物質中的范圍最大，且聚集性高，因此，一般認為難以提高其滲透性。
但是，在實際的以人體血液作為原料的血漿分級制劑制造步驟中，通常在經過利用與乙醇親和性的差異而將血漿蛋白成分分級的Cohn分級法或是色譜處理等幾種精制處理之后，用過濾膜對獲得的人體免疫球蛋白施行病毒除去。
過濾前，人體免疫球蛋白中的雜質或多聚物的含量少于牛免疫球蛋白。因此，從所謂的牛免疫球蛋白的高透過率可以容易地推測出人體免疫球蛋白的透過率也具有同等以上的水平。本發(fā)明的對單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率達到70％以上的膜，在將醫(yī)藥品或作為其原料的生理活性物質全部過濾的過程中，從上述的制劑制造步驟的成本觀點考慮，具有顯著的效果。
牛免疫球蛋白透過率由下述公式求出。
牛免疫球蛋白透過率＝Cf/Co×100Cf過濾前(原液)的牛免疫球蛋白濃度Co過濾后(濾液)的牛免疫球蛋白濃度用于求出牛免疫球蛋白透過率的過濾，是在過濾壓力0.0785MPa、過濾溫度25℃、恒壓死端過濾的條件下進行。
將Life Technology公司的牛免疫球蛋白溶液用0.15N NaCl稀釋至含量3wt％，用旭化成工業(yè)公司生產的PLANOVA 35N進行預過濾，除去雜質后，將其用作牛免疫球蛋白的過濾原液。此時，使用液相色譜測定過濾原液中的牛免疫球蛋白的分子量分布，單體所占比例為80％以上。
將該過濾原液用分離膜過濾3小時，獲得濾液。
過濾原液和濾液中的牛免疫球蛋白濃度，使用紫外線分光光度計測定280nm的吸光度后計算出來。
使用病毒除去膜按照篩分原理分離生理活性物質等小粒子和病毒等大粒子時，實際上有效的膜孔是其孔徑處于這兩種粒子大小之間的孔。為了使這種一定范圍大小的孔具有足夠的有效性，對于膜內部孔結構而言，存在具有一定程度以上均質性的區(qū)域是不可缺少的。即，本發(fā)明中，膜內部的孔結構中，孔徑的對數(shù)標準偏差σg在2.0以下的那部分區(qū)域的厚度優(yōu)選為3μm～90μm，更優(yōu)選為15μm～50μm。作為直接測定該均質性的手段，有使用電子顯微鏡的孔徑測定法。
具有上述膜內部孔結構的本發(fā)明的膜，由于具有一定程度以上的均質性的區(qū)域多，不僅在過濾初期，而且在過濾持續(xù)一段時間后，豬細小病毒的對數(shù)除去率都很高，同時牛免疫球蛋白的透過率也很高。
孔徑的對數(shù)標準偏差σg在2.0以下的那部分區(qū)域的厚度越大，豬細小病毒的對數(shù)除去率當然就越高。但是，如果過大，則對牛免疫球蛋白的滲透性不利。
孔徑的對數(shù)標準偏差σg用以下公式求出。
lnσg＝(∑Δni(lnDpi-lnDpg)2/N)1/2lnDpg＝∑ΔnilnDpi/NΔni孔徑Dpi的孔數(shù)
Dpi孔徑(nm)Dpg對數(shù)平均孔徑(nm)N總孔數(shù)膜的孔徑用電子顯微鏡進行測定。將膜嵌入丙烯酸樹脂等高分子樹脂中。采用通常的方法將嵌入的膜薄薄地切成片，以便能夠清楚地看見膜的橫截面。用掃描型電子顯微鏡(SEM)拍攝切割后露出的膜的橫截面的照片。對拍攝的照片進行圖象處理分析。此時，將膜的橫截面在厚度方向上分割，求出每個分割區(qū)域中的孔徑(Dpi)和孔數(shù)(Δni)。此處所說的孔徑是將掃描型電子顯微鏡照片中拍攝的孔換算成圓時的直徑。
本發(fā)明中合適的純水滲透速度優(yōu)選為每1m2膜面積70～200升/h/0.1MPa，更優(yōu)選為90～120升/h/0.1MPa。通過使取決于膜中全部大孔的純水滲透速度為每1m2膜面積70升/h/0.1MPa以上，可以使生理活性物質溶液的過濾量和透過率達到實用的高水平。特別地，具有使生理活性物質溶液的過濾量增多的優(yōu)點。另外還可理解，如果取決于膜中全部大孔的純水滲透速度大于每1m2膜面積200升/h/0.1MPa，則難以使0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上。
此處所說的純水滲透速度，是將37℃的純水以0.1MPa的膜間壓差過濾時純水的濾出速度以每1m2膜面積升/h/0.1MPa單位表示的數(shù)值(該場合下，膜面積是指干燥狀態(tài)下的膜面積)。另外，純水是指經過超濾精制的水。
本發(fā)明中所說的皮層是指在膜的一側或兩側表面上存在的、結構比膜的內部致密的極薄的層。一般來說，由表面的皮層擔負著過濾特性的膜也可實現(xiàn)使純水滲透速度達到每1m2膜面積70升/h/0.1MPa以上的膜性能，但難以獲得0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上的膜。其理由是因為，皮層經常有例如針孔、龜裂等缺陷，病毒的除去率得不到可靠性。
本發(fā)明的膜的合適的膜厚為5μm～100μm。優(yōu)選為20μm～100μm。制造本發(fā)明的膜時，由于膜內部區(qū)域的凝固速度根據(jù)與膜表面的距離而有很大的差異，因此，如果膜厚大于100μm，則難以控制膜內部區(qū)域的孔結構。因此，膜厚優(yōu)選在100μm以下。另外，為了使0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上，膜厚必須達到一定程度，優(yōu)選為5μm以上。
本發(fā)明中所說的膜是除去病毒的病毒除去膜、超濾膜、精密過濾膜等，膜的原料可以舉出再生纖維素、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈等，但也可以含有它們以外的原料。另外，膜的形態(tài)可以是中空絲膜、平膜、折疊膜、螺旋膜任一種。另外，也可以是將膜重疊而成的復合膜。
本發(fā)明中所說的生理活性物質是醫(yī)藥、醫(yī)療、診斷用藥領域中使用的生理活性物質，具體地有蛋白質、多肽和多糖類或是它們的組合等。這些生理活性物質來源于人、動物或培養(yǎng)細胞。還包括采用基因重組或細胞融合技術用培養(yǎng)動物細胞產生的生理活性物質、采用轉基因技術用動物分泌組織制備的生理活性物質等。
蛋白質是例如作為血液凝固因子的F-IX、F-XI、F-VIII、F-VII、血纖維蛋白原、凝血酶、抗凝血酶-III或其混合物、作為人體免疫球蛋白的IgG、IgA、IgD、IgE或IgM、清蛋白、α-1蛋白酶抑制劑、胰蛋白酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、鏈激酶、載脂蛋白、以及生長因子等。多肽是例如用哺乳動物細胞制備的基因重組人體生長荷爾蒙、來自牛組織的蛋白酶抑制劑等的生理活性多肽。多糖類是例如作為葡萄糖胺聚糖的肝素、肝素片斷、肝素衍生物、硫酸乙酰肝素和透明質酸。
特別地，由于人體免疫球蛋白制劑在溶液中的濃度高，一般情況下，膜滲透時的滲透性差，很難與人細小病毒B19或脊髓灰質炎病毒等的除去同時實現(xiàn)。但是，如果采用本發(fā)明，則由于滲透性高，人細小病毒B19或脊髓灰質炎病毒等的除去率也高，因此是優(yōu)選的。因此，在本發(fā)明中，效果顯著的優(yōu)選的生理活性物質是人體免疫球蛋白。
應予說明，考慮到滲透性，生理活性物質的溶液應在難以堵塞膜孔的條件下進行過濾，從經濟性的觀點考慮，這在實用上當然也是優(yōu)選的。
特別地，人體免疫球蛋白的蛋白質濃度沒有特別的限定，在實用上優(yōu)選為5wt％以下，更優(yōu)選為3wt％以下。
作為使用各種高分子制造本發(fā)明的膜的方法，通常采用利用非溶劑感應或熱感應的相分離法。它們中的任一個方法中，都可以通過調整制膜原液中的膜原料聚合物的濃度、相分離和凝固階段的化學變化中的平衡因數(shù)和動力學因數(shù)來形成目的膜結構。
以下更具體地進行說明。即，當使用雙重噴絲頭制造中空絲膜時，根據(jù)制膜原液中膜原料聚合物的濃度、內部溶液組成、外部溶液組成、制膜原液的噴出速度、膜的卷繞速度等制膜時的化學平衡因數(shù)和動力學因數(shù)，膜的結構有所不同。如果噴出速度和卷繞速度低，則孔徑分布變窄，具有均質孔徑的膜的有效區(qū)域變厚，但噴出速度和卷繞速度過低會使制造效率變差，不實用。因此，在使噴出速度和卷繞速度為實用水平的一定值時，可以通過調整制膜原液的膜原料聚合物的濃度、內部溶液和外部溶液的組成來改變膜的結構。如果降低內部溶液和外部溶液的非溶劑濃度，可以使實際上有助于分離的膜內部區(qū)域的孔徑分布變窄，并進一步使該區(qū)域的厚度變厚，因此，BP/γ和豬細小病毒的對數(shù)除去率有提高的傾向。
以下用銅氨法再生纖維素的中空絲膜作為例子，詳細地說明本發(fā)明過濾膜的制造方法。采用公知的方法(例如特開昭59-204912號公報、特開昭59-204911號公報)配制纖維素銅氨溶液和含有引起微相分離的非溶劑的水溶液(以下稱為凝固液)。即，作為膜原料使用纖維素，將其溶解于銅氨溶液中，配制纖維素濃度為7.0～8.0wt％左右的纖維素銅氨溶液。凝固液有從中空絲外部作用的外部溶液和導入中空絲內部發(fā)生作用的內部溶液2種，外部溶液的組成優(yōu)選為丙酮濃度20～35wt％左右、氨濃度0～0.1wt％左右，內部溶液的組成優(yōu)選為丙酮濃度30～50wt％左右、氨濃度0～0.5wt％。本例是利用非溶劑感應的制膜法，該場合的非溶劑是丙酮，但優(yōu)選將凝固液組成中引起微相分離的非溶劑的濃度降低。降低非溶劑濃度是因為可使膜內部區(qū)域的孔徑分布窄，進一步使該區(qū)域的厚度變厚。
使用上述那樣配制的纖維素銅氨溶液和凝固液，采用特開平4-371221號公報中所示的方法，經紡絲、凝固、再生、水洗、真空干燥等步驟，獲得中空絲膜。
實施發(fā)明的最佳方案以下示出本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明不受這些實施例的限定。
此處，可通過調整纖維素濃度、外部溶液組成和內部溶液組成來控制膜內部的孔結構，從而可以獲得本發(fā)明的膜。
該凝固步驟的凝固浴使用特開平4-371221號公報中公開的U形細管。進一步地，將卷繞的中空絲膜按照特開平4-371221號公報中公開的方法用硫酸水溶液再生、水洗、最后真空干燥。使用聚氨酯系粘合劑，采用通常的方法，將這樣獲得的中空絲膜組裝成過濾器。
將獲得的中空絲膜的內徑、膜厚、BP/γ、純水滲透速度、豬細小病毒LRV、牛免疫球蛋白透過率示于表1中。此處，泡點、純水滲透速度、豬細小病毒LRV、牛免疫球蛋白透過率采用上述的方法測定。進一步地，本實施例的泡點的測定是將表面張力γ為0.012(N/m)的全氟化碳作為濕潤液體，創(chuàng)造可在膜的耐壓范圍內測定的低壓力試驗條件，氣體使用氮氣。
從電子顯微鏡觀察的結果獲知，實施例1、2、3的膜的任一個膜表面上都沒有皮層。
表1

*1)每1m2膜面積升/h/0.1MPa*2)病毒溶液過濾量0～5(升/m2)*3)病毒溶液過濾量50～55(升/m2)將實施例1的膜在膜厚方向上測定的空孔率和孔徑分布的對數(shù)標準偏差σg示于表2中。實施例1的膜中，對數(shù)標準偏差σg在2.0以下那部分區(qū)域的厚度為20μm(占膜厚的63％)。
表2

從上述的人細小病毒B19與豬細小病毒的關系能夠推斷出，實施例1～3的膜具有在適用于除去人細小病毒B19時的病毒除去性能可確保與豬細小病毒的病毒除去性能相匹敵的性能。另外，同樣地，從上述牛免疫球蛋白與人體免疫球蛋白的關系可以容易地推斷出，在實際的人體免疫球蛋白制劑的制造步驟中，也可以達到與實施例1～3中獲得的牛免疫球蛋白的高透過率同等以上的水平。
即，實施例1～3的膜均能夠使具有混入病毒危險性的醫(yī)藥品或作為其原料的生理活性物質溶液中的人體免疫球蛋白等生理活性物質以實用的水平滲透，以便除去人細小病毒B19或脊髓灰質炎病毒等小病毒，從而獲得更安全的制劑。比較例1～3采用與實施例1～3同樣的方法，制造比較例1～3的中空絲膜。但是，使纖維素銅氨溶液和凝固液(外部溶液、內部溶液)為表3所示的組成。
獲得的中空絲膜的內徑、膜厚、BP/γ、純水滲透速度、豬細小病毒LRV、牛免疫球蛋白透過率示于表3中。
此處，泡點、純水滲透速度、豬細小病毒LRV、牛免疫球蛋白透過率按照上述的方法進行測定。進一步地，本比較例中的泡點的測定也與實施例相同，將表面張力γ為0.012(N/m)的全氟化碳作為濕潤液體，創(chuàng)造可在膜的耐壓范圍內測定的低壓力試驗條件，氣體使用氮氣。
從表3的結果推測出，比較例1和比較例3的膜對人體免疫球蛋白具有高滲透性，但不能除去人細小病毒B19等小病毒。另外，可以推斷出比較例2的膜可以以高的除去率除去人細小病毒B19等小病毒，但不認為其人體免疫球蛋白的滲透性達到實用的水平。
表3

*1)每1m2膜面積升/h/0.1MPa*2)病毒溶液過濾量0～5(升/m2)*3)病毒溶液過濾量50～55(升/m2)產業(yè)上的利用可能性利用本發(fā)明的膜可以提供這樣一種技術，在具有混入病毒危險性的醫(yī)藥品或其原料生理活性物質的溶液的過濾過程中，可以以實用的水平同時并存人細小病毒B19或脊髓灰質炎病毒等小病毒的高除去性能(例如人細小病毒B19的對數(shù)除去率持續(xù)在3以上)和生理活性物質的高滲透性能(例如人體免疫球蛋白的透過率在70％以上)，從而獲得更安全的制劑。
權利要求
1.一種生理活性物質溶液用過濾膜，其特征在于，其泡點BP(MPa)與表面張力γ(N/m)之比(BP/γ)在110以上，且單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率在70％以上。
2.一種生理活性物質溶液用過濾膜，其特征在于，在0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上，且單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率在70％以上。
3.一種生理活性物質溶液用過濾膜，其特征在于，其泡點BP(MPa)與表面張力γ(N/m)之比(BP/γ)在110以上，0～5升/m2過濾時和50～55升/m2過濾時的豬細小病毒的對數(shù)除去率皆在3以上，且單體所占比例在80％以上的牛免疫球蛋白的透過率在70％以上。
4.權利要求1～3任一項中所述的過濾膜，其中，膜內部的孔結構中，孔徑的對數(shù)標準偏差σg在2.0以下的那部分區(qū)域的厚度為3μm～90μm。
5.權利要求1～4任一項中所述的過濾膜，其中，純水滲透速度為每1m2膜面積70～200升/h/0.1MPa。
6.權利要求1～5任一項中所述的過濾膜，其中，膜表面上不具有皮層。
7.權利要求1～6任一項中所述的過濾膜，其中，膜的厚度為5μm～100μm。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于從含有病毒等病原體的醫(yī)藥品或作為其原料的生理活性物質的溶液中有效地除去病毒等病原體的過濾膜。本發(fā)明可以提供這樣一種生理活性物質溶液用過濾膜,通過使過濾膜的特性為泡點BP(MPa)與表面張力γ(N/m)之比(BP/γ)在110以上,和/或0～5升/m
文檔編號B01D69/02GK1370093SQ00811842
公開日2002年9月18日 申請日期2000年8月18日 優(yōu)先權日1999年8月20日
發(fā)明者井出正一, 野田壽昭 申請人:旭化成株式會社