一種用于檢測(cè)2型有蹄類博卡細(xì)小病毒試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及檢測(cè)試劑盒，具體一種用于檢測(cè)2型有蹄類博卡細(xì)小病毒試劑合
ΙΤΓΤ.0
【背景技術(shù)】
[0002]為了節(jié)約時(shí)間、方便使用，越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)步驟與檢測(cè)方法被開發(fā)為試劑盒，但是傳統(tǒng)的試劑盒為簡(jiǎn)單的單層包裝盒，內(nèi)部空間為封閉的單一結(jié)構(gòu)，所有內(nèi)容物被疊放于盒內(nèi)。在使用過(guò)程中，技術(shù)人員很難準(zhǔn)確迅速的獲得所需組分，給實(shí)際操作帶來(lái)不便，而且在產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中，里面各種組分容易出現(xiàn)相互碰撞而造成損壞，對(duì)運(yùn)輸條件要求較高。尤其是用于檢測(cè)2型有蹄類博卡細(xì)小病毒(PBoV2)的探針(序列為CGATCCACCCGCCG)在長(zhǎng)期震動(dòng)的條件下容易失效，使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此亟需提供一種防止震動(dòng)的試劑盒。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0003]有鑒于此，本實(shí)用新型公開一種可提高2型有蹄類博卡細(xì)小病毒檢測(cè)精度的試劑盒。本實(shí)用新型的目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0004]一種用于檢測(cè)2型有蹄類博卡細(xì)小病毒試劑盒，包括頂部敞口的矩形盒體以及覆蓋在盒體頂部的頂蓋，所述盒體中設(shè)有多個(gè)可拆卸的固定帶；所述固定帶平行于所述盒體的底部；所述固定帶上設(shè)有至少一個(gè)用于固定試劑的固定孔；所述固定帶和盒體的底部之間設(shè)有防震組件。
[0005]可拆卸的固定帶可以提高試劑盒的應(yīng)用范圍，并為依照某種順序排列試管提供條件，防止試管混亂以提高檢測(cè)效率。盛放有特異性引物、熒光探針、底物等試劑的試管固定在固定孔中，防止試管位移、碰撞。根據(jù)設(shè)計(jì)人的研宄，試管末端的震動(dòng)對(duì)于探針活性影響更大。因此本實(shí)用新型特別在固定帶和盒體設(shè)置防震組件，用于防止試管，尤其是試管的末端晃動(dòng)。
[0006]進(jìn)一步的，所述防震組件包括柔性墊板、設(shè)置在柔性墊板下方的空腔層以及設(shè)置在空腔層下的緩沖室；所述空腔層包括多個(gè)交錯(cuò)設(shè)置的三棱柱型空腔；所述緩沖室的底部的邊緣設(shè)有多個(gè)可轉(zhuǎn)動(dòng)的連桿，連桿的末端與空腔層的底部鉸接；所述空腔層的底部的中心還設(shè)有多個(gè)緩沖彈簧。
[0007]所述柔性墊板可選用任一種柔性材料制成，如人造海綿、硅膠、橡膠等?？涨粚右环矫婵梢宰韪艉畜w表面?zhèn)鱽?lái)的震動(dòng)，另一方面可支撐所述柔性墊板，以避免柔性墊板過(guò)于柔軟而無(wú)法固定試管末端。連桿的作用是在盒體橫向晃動(dòng)時(shí)以慣性維持試管的靜止。緩沖彈簧的作用是在盒體縱向晃動(dòng)時(shí)以慣性維持試管的靜止。通過(guò)本實(shí)用新型設(shè)計(jì)的防震組件，可以使試劑盒內(nèi)的試管在盒體小幅度晃動(dòng)的情況下保持靜止，從而維持試劑的活性，提高2型有蹄類博卡細(xì)小病毒檢測(cè)精度。
[0008]更進(jìn)一步的，所述頂蓋和盒體通過(guò)密封組件連接；所述密封組件包括環(huán)繞在盒體頂部外側(cè)的環(huán)形突起以及設(shè)置在頂蓋內(nèi)側(cè)、與突臺(tái)配合的凹槽；所述凹槽表面覆蓋有彈性密封層；所述突臺(tái)的截面為半圓形；所述頂蓋的底部設(shè)有突出的壓緊弧面。
[0009]頂蓋封閉時(shí)，突起嵌入所述凹槽中。在突起和凹槽的擠壓下，彈性密封層發(fā)生彈性形變而提高試劑盒的密封性，防止試劑被污染、變質(zhì)。突出的壓緊弧面可以擠壓出盒體中的空氣，從而通過(guò)大氣壓將頂蓋緊壓在盒體上。彈性密封層可選用橡膠制成。
[0010]所述柔性墊板頂部設(shè)有與所述固定孔對(duì)應(yīng)的固定槽；所述固定帶和頂蓋間設(shè)有防震層，所述防震層上設(shè)有與固定孔對(duì)應(yīng)的防震通道。
[0011]所述盒體的內(nèi)側(cè)設(shè)有多個(gè)突臺(tái)，所述固定帶橫架在突臺(tái)上。
[0012]優(yōu)選的，所述固定帶數(shù)量為4個(gè)，依次為底物固定帶、taq酶固定帶、特異性引物固定帶和熒光探針固定帶。
[0013]不同試劑固定在單獨(dú)的固定帶上，可以防止試劑的混合，提高試劑的辨識(shí)度。
[0014]所述固定帶的頂部設(shè)有識(shí)別區(qū)。
[0015]優(yōu)選的，識(shí)別區(qū)為設(shè)置在固定帶表面的矩形凹槽，內(nèi)部可填充不同顏色的涂料。在凹陷的識(shí)別區(qū)中填充涂料，可以避免涂料的磨損而無(wú)法識(shí)別試劑，或防止涂料污染試劑。
[0016]博卡病毒(Bocavirus)隸屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒亞科的博卡病毒屬。細(xì)小病毒包括濃病毒亞科和細(xì)小病毒科亞科，前者主要感染昆蟲，后者則主要感染脊椎動(dòng)物。細(xì)小病毒亞科又分為細(xì)小病毒屬、博卡病毒屬、紅病毒屬、依賴病毒屬、貂阿留申病毒屬等6個(gè)屬。豬博卡病毒(Porcine Bocavirus, PBoV，又稱豬博卡細(xì)小病毒)則是屬于其中的博卡病毒屬，為單股線狀無(wú)囊膜DNA病毒，基因組在5.2kb左右，包括3個(gè)開放閱讀框(ORFs)，分別為NS1，NP1和V P1/VP2。2013年國(guó)際病毒分類委員會(huì)(http: / /www.1ctvdh.0rg)對(duì)豬博卡病毒的分型提出了新的建議，提出以NSl基因編碼氨基酸同源性，將豬博卡病毒分為4個(gè)種群:Ungulate bocaparvovirus 2型(2型有蹄類博卡細(xì)小病毒，UBoV2包括 PBoVl、PBoV2、PBoV — A6)、Ungulate bocaparvovirus 3 型包括 PBoV_SX、Ungulatebocaparvovirus 4型、Ungulate bocaparvovirus 5型。其中的2型有蹄類動(dòng)物博卡細(xì)小病毒包括有PBoVl，PBoV2，PB0V-A6三種基因型，這三種基因型具有傳染效率強(qiáng)、流行廣泛等特點(diǎn)，早期的診斷有利于對(duì)豬群進(jìn)行及時(shí)防止，避免大規(guī)模感染導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。設(shè)計(jì)人設(shè)計(jì)出特異性擴(kuò)增和檢測(cè)UBoV2的引物(上游:GCCGATTCTG ATTTTCTCGAA ;下游:TGAGTCCAAA CACGCCCTTT)和熒光探針(CGATCCACCC GCCG)。該引物和探針具有良好的敏感性和特異性，但對(duì)反應(yīng)體系較為敏感，且其探針、引物和模板的性質(zhì)不穩(wěn)定，劇烈的震動(dòng)將導(dǎo)致模板無(wú)法被引物擴(kuò)增或擴(kuò)增產(chǎn)物的序列具有多樣性，使診斷結(jié)果出現(xiàn)偏差。本實(shí)用新型的試劑盒專門針對(duì)該反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)，防止試劑在運(yùn)輸過(guò)程中因震動(dòng)而變性，有利于各試劑長(zhǎng)時(shí)間保持反應(yīng)活性。
[0017]本實(shí)用新型相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的有益效果:
[0018]1.本實(shí)用新型設(shè)置的防震組件，通過(guò)柔性墊板、空腔層、緩沖室的配合，可以使試劑盒內(nèi)的試管在盒體小幅度晃動(dòng)的情況下保持靜止，從而維持試劑的活性，提高2型有蹄類博卡細(xì)小病毒檢測(cè)精度；
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