一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，包括步驟(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水浴溫度為80℃，由于這兩種物質(zhì)較難溶解，因此采取加熱震蕩的方式能夠加快培養(yǎng)液的配置；步驟(1)中對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為5.6，該pH為炭疽菌種最適生長的pH環(huán)境，使得菌種順利生長，步驟(2)中菌種的接種方式為平板劃線法，接種方法分為平板劃線法和倒平板法，由于倒平板法容易出現(xiàn)菌種堆疊，影響實驗結果，因此在本發(fā)明中采用平板劃線法作為菌種接種的首選方法，步驟(3)中菌種的培養(yǎng)溫度為25℃，該溫度適宜炭疽菌種的生長，步驟(4)中每次倒入的藥劑量為5ml，為了防止過多一次致死菌種，過少效果不明顯的問題，本發(fā)明采用該劑量對菌種入藥。
【專利說明】
一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及病菌防治技術領域，特別是涉及一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方 法。
【背景技術】
[0002] 油茶是一種木本油料樹種，而食用油安全是繼全球石油安全、糧食安全之后，成為 事關國家戰(zhàn)略的又一個新課題。我國目前60%左右的植物食用油依賴進口或由外資企業(yè)控 制，很不安全。近年來，國家開始對食用油安全十分關注，國務院于2008年在湖南專門召開 油茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)場會;2009-2010年，中央1號文件2次提到要大力發(fā)展油茶等木本油料樹 種，可見發(fā)展植物食用油的重要性和迫切性。
[0003] 油茶炭疽病是油茶生產(chǎn)中最主要的病害，嚴重影響油茶的生長、油茶的產(chǎn)量和品 質(zhì)。油茶感染該病后，可引起落果、落蕾、落葉、枝梢枯死、甚至整株衰亡。各油茶產(chǎn)區(qū)常年因 該病減產(chǎn)10 % -30 %，重病區(qū)減產(chǎn)可達50 %以上甚至絕收，每年造成的直接經(jīng)濟損失不可估 量，是當前油茶生產(chǎn)中亟待解決的問題之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] -種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，其特征在于，其步驟包括：
[0005] (1)稱取20-30g牛肉膏和10-15g蛋白胨溶解于1L水中，在溫度為300-500°C下高溫 滅菌，滅菌后取出培養(yǎng)液轉移至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)液的體積應占培養(yǎng)皿體積的0.3-0.5;
[0006] (2)將上述培養(yǎng)液冷卻至20_30°C，然后無菌條件下接種炭疽菌母種；
[0007] (3)將接種有炭疽菌母種的培養(yǎng)皿放入設定溫度為20-28°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； [0008] (4)配置12種不同濃度的藥劑每隔12h倒入3-7ml于培養(yǎng)基中，進行培養(yǎng)；
[0009] (5)培養(yǎng)3-5天后觀察菌絲生長狀況，記錄加入藥劑菌絲的菌落直徑和空白對照的 菌絲直徑；
[0010] (6)計算各種藥劑在不同濃度下對炭疽病的抑制率，計算公式為：
[0011] 抑制率（％ )=(對照菌絲直徑-加入藥劑菌絲直徑)/對照菌絲直徑X 100
[0012] (7)比較12種藥劑不同濃度下的抑制率，得出最為適合的藥劑種類和該種藥劑的 最適噴灑濃度；
[0013] (8)選取有效成分含量100%波爾多液、500%硫磺.錳鋅、700%炭疽病分和500% 代森錳鋅的四種藥劑對實驗果林進行噴灑，噴灑份兩次，第一次在4月上旬，第二次在5月上 旬，噴灑后8-15天觀察油茶的發(fā)病率；
[0014] (9)通過上述的化學藥劑防治實驗結果，結合物理防治，對油茶進行綜合防治，并 且跟蹤記錄果實的發(fā)病率，計算油茶的產(chǎn)量。
[0015] 優(yōu)選的，步驟（1)中牛肉膏蛋白胨采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水浴溫度為80 Γ。
[0016] 優(yōu)選的，步驟(1)中對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為5.6。
[0017]優(yōu)選的，步驟(2)中菌種的接種方式為平板劃線法。
[0018]優(yōu)選的，步驟(3)中菌種的培養(yǎng)溫度為25°C。
[0019]優(yōu)選的，步驟(4)中每次倒入的藥劑量為5ml。
[0020] 有益效果:本發(fā)明提供了一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，步驟（1)中牛肉 膏蛋白胨采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水浴溫度為80°C，由于這兩種物質(zhì)較難溶解，因此 采取加熱震蕩的方式能夠加快培養(yǎng)液的配置;步驟(1)中對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng) 液的pH為5.6,該pH為炭疽菌種最適生長的pH環(huán)境，使得菌種順利生長，步驟(2)中菌種的接 種方式為平板劃線法，接種方法分為平板劃線法和倒平板法，由于倒平板法容易出現(xiàn)菌種 堆疊，影響實驗結果，因此在本發(fā)明中采用平板劃線法作為菌種接種的首選方法，步驟(3) 中菌種的培養(yǎng)溫度為25°C，該溫度適宜炭疽菌種的生長，步驟(4)中每次倒入的藥劑量為 5ml，為了防止過多一次致死菌種，過少效果不明顯的問題，本發(fā)明采用該劑量對菌種入藥。
【具體實施方式】
[0021] 為使本發(fā)明實現(xiàn)的技術手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結合
【具體實施方式】，進一步闡述本發(fā)明。
[0022] 實施例1:
[0023] -種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，其特征在于，其步驟包括：
[0024] (1)稱取20g牛肉膏和10g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水 浴溫度為80 °C，對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為5.6，在溫度為300 °C下高溫滅 菌，滅菌后取出培養(yǎng)液轉移至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)液的體積應占培養(yǎng)皿體積的0.3;
[0025] (2)將上述培養(yǎng)液冷卻至20°C，然后無菌條件下接種炭疽菌母種，接種方式為平板 劃線法；
[0026] (3)將接種有炭疽菌母種的培養(yǎng)皿放入設定溫度為25°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
[0027] (4)配置12種不同濃度的藥劑每隔12h倒入5ml于培養(yǎng)基中，進行培養(yǎng)，12種藥劑不 同濃度配置如下：
[0030] (5)培養(yǎng)3天后觀察菌絲生長狀況，記錄加入藥劑菌絲的菌落直徑和空白對照的菌 絲直徑；
[0031] (6)計算各種藥劑在不同濃度下對炭疽病的抑制率，計算公式為：
[0032] 抑制率（％ )=(對照菌絲直徑-加入藥劑菌絲直徑)/對照菌絲直徑X 100
[0033] (7)比較12種藥劑不同濃度下的抑制率，得出最為適合的藥劑種類和該種藥劑的 最適噴灑濃度；
[0034] (8)選取有效成分含量100%波爾多液、500%硫磺·錳鋅、700%炭疽病分和500% 代森錳鋅的四種藥劑對實驗果林進行噴灑，噴灑份兩次，第一次在4月8號，第二次在5月8 號，噴灑后8天觀察油茶的發(fā)病率；
[0035] (9)通過上述的化學藥劑防治實驗結果，結合物理防治，對油茶進行綜合防治，并 且跟蹤記錄果實的發(fā)病率，計算油茶的產(chǎn)量，防治處理如下：
[0038] 實施例2:
[0039] -種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，其特征在于，其步驟包括：
[0040] (1)稱取25g牛肉膏和12g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水 浴溫度為80 °C，對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為5.6，在溫度為450 °C下高溫滅 菌，滅菌后取出培養(yǎng)液轉移至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)液的體積應占培養(yǎng)皿體積的0.4;
[0041] (2)將上述培養(yǎng)液冷卻至25°C，然后無菌條件下接種炭疽菌母種，接種方式為平板 劃線法；
[0042 ] (3)將接種有炭疽菌母種的培養(yǎng)皿放入設定溫度為25 °C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
[0043] (4)配置12種不同濃度的藥劑每隔12h倒入5ml于培養(yǎng)基中，進行培養(yǎng)，12種藥劑不 同濃度配置如下：
[0046] (5)培養(yǎng)4天后觀察菌絲生長狀況，記錄加入藥劑菌絲的菌落直徑和空白對照的菌 絲直徑；
[0047] (6)計算各種藥劑在不同濃度下對炭疽病的抑制率，計算公式為：
[0048] 抑制率（％ )=(對照菌絲直徑-加入藥劑菌絲直徑)/對照菌絲直徑X 100
[0049] (7)比較12種藥劑不同濃度下的抑制率，得出最為適合的藥劑種類和該種藥劑的 最適噴灑濃度；
[0050] (8)選取有效成分含量100%波爾多液、500%硫磺.錳鋅、700%炭疽病分和500% 代森錳鋅的四種藥劑對實驗果林進行噴灑，噴灑份兩次，第一次在4月6旬，第二次在5月10， 噴灑后10天觀察油茶的發(fā)病率；
[0051] (9)通過上述的化學藥劑防治實驗結果，結合物理防治，對油茶進行綜合防治，并 且跟蹤記錄果實的發(fā)病率，計算油茶的產(chǎn)量，防治處理如下：
[0054] 實施例3:
[0055] -種研究炭疽病無公害防治技術的方法，其特征在于，其步驟包括：
[0056] (1)稱取30g牛肉膏和15g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水 浴溫度為80 °C，對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為5.6，在溫度為500 °C下高溫滅 菌，滅菌后取出培養(yǎng)液轉移至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)液的體積應占培養(yǎng)皿體積的0.5;
[0057] (2)將上述培養(yǎng)液冷卻至30°C，然后無菌條件下接種炭疽菌母種，接種方式為平板 劃線法；
[0058] (3)將接種有炭疽菌母種的培養(yǎng)皿放入設定溫度為25°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
[0059] (4)配置12種不同濃度的藥劑每隔12h倒入5ml于培養(yǎng)基中，進行培養(yǎng)，12種藥劑不 同濃度配置如下：
[0061] (5)培養(yǎng)5天后觀察菌絲生長狀況，記錄加入藥劑菌絲的菌落直徑和空白對照的菌 絲直徑；
[0062] (6)計算各種藥劑在不同濃度下對炭疽病的抑制率，計算公式為：
[0063] 抑制率（％ )=(對照菌絲直徑-加入藥劑菌絲直徑)/對照菌絲直徑X 100
[0064] (7)比較12種藥劑不同濃度下的抑制率，得出最為適合的藥劑種類和該種藥劑的 最適噴灑濃度；
[0065] (8)選取有效成分含量100%波爾多液、500%硫磺.錳鋅、700%炭疽病分和500% 代森錳鋅的四種藥劑對實驗果林進行噴灑，噴灑份兩次，第一次在4月12,第二次在5月15， 噴灑后15天觀察油茶的發(fā)病率；
[0066] (9)通過上述的化學藥劑防治實驗結果，結合物理防治，對油茶進行綜合防治，并 且跟蹤記錄果實的發(fā)病率，計算油茶的產(chǎn)量，防治處理如下：
[0068]通過實驗得到的結果比較如下表：
[0071] 根據(jù)上述表格數(shù)據(jù)可以得出，當實施實施例2參數(shù)時，得到的該防治炭疽病技術， 對炭疽病的抑制率為98.7 %，用藥量為0.12Kg/m2，果實發(fā)病率為8.2 %，畝產(chǎn)量為1195kg， 而現(xiàn)有技術標準對炭疽病的抑制率為90%，用藥量為0.21Kg/m2,果實發(fā)病率為15.8%，畝 產(chǎn)量為973kg，因此本發(fā)明具有顯著的優(yōu)越性。
[0072] 本發(fā)明提供了一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，步驟（1)中牛肉膏蛋白胨 采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水浴溫度為80°C，由于這兩種物質(zhì)較難溶解，因此采取加熱 震蕩的方式能夠加快培養(yǎng)液的配置;步驟(1)中對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為 5.6,該pH為炭疽菌種最適生長的pH環(huán)境，使得菌種順利生長，步驟(2)中菌種的接種方式為 平板劃線法，接種方法分為平板劃線法和倒平板法，由于倒平板法容易出現(xiàn)菌種堆疊，影響 實驗結果，因此在本發(fā)明中采用平板劃線法作為菌種接種的首選方法，步驟(3)中菌種的培 養(yǎng)溫度為25°C，該溫度適宜炭疽菌種的生長，步驟(4)中每次倒入的藥劑量為5ml，為了防止 過多一次致死菌種，過少效果不明顯的問題，本發(fā)明采用該劑量對菌種入藥。
[0073] 以上所述僅為本發(fā)明的實施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā) 明說明書內(nèi)容所作的等效結構或等效流程變換，或直接或間接運用在其他相關的技術領 域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內(nèi)。
【主權項】
1. 一種油茶炭疽病無公害綜合式防治方法，其特征在于，其步驟包括： (1) 稱取20-30g牛肉膏和10-15g蛋白胨溶解于IL水中，在溫度為300-500°C下高溫滅 菌，滅菌后取出培養(yǎng)液轉移至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)液的體積應占培養(yǎng)皿體積的0.3-0.5; (2) 將上述培養(yǎng)液冷卻至20-30°C，然后無菌條件下接種炭疽菌母種； (3) 將接種有炭疽菌母種的培養(yǎng)皿放入設定溫度為20-28°C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； (4) 配置12種不同濃度的藥劑每隔12h倒入3-7ml于培養(yǎng)基中，進行培養(yǎng)；（5)培養(yǎng)3-5天 后觀察菌絲生長狀況，記錄加入藥劑菌絲的菌落直徑和空白對照的菌絲直徑； (6) 計算各種藥劑在不同濃度下對炭疽病的抑制率，計算公式為： 抑制率（％ )=(對照菌絲直徑-加入藥劑菌絲直徑)/對照菌絲直徑X 100 (7) 比較12種藥劑不同濃度下的抑制率，得出最為適合的藥劑種類和該種藥劑的最適 噴灑濃度； (8) 選取有效成分含量100 %波爾多液、500 %硫磺.錳鋅、700 %炭疽病分和500 %代森 錳鋅的四種藥劑對實驗果林進行噴灑，噴灑份兩次，第一次在4月上旬，第二次在5月上旬， 噴灑后8-15天觀察油茶的發(fā)病率； (9) 通過上述的化學藥劑防治實驗結果，結合物理防治，對油茶進行綜合防治，并且跟 蹤記錄果實的發(fā)病率，計算油茶的產(chǎn)量。2. -種權利要求1所述的研究炭疽油茶病無公害防治技術的方法，其特征在于，步驟 (1)中牛肉膏蛋白胨采用恒溫震蕩的方式進行溶解，水浴溫度為80°C。3. -種權利要求1所述的研究炭疽油茶病無公害防治技術的方法，其特征在于，步驟 (1) 中對培養(yǎng)液進行調(diào)pH處理，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH為5.6。4. 一種權利要求1所述的研究炭疽油茶病無公害防治技術的方法，其特征在于，步驟 (2) 中菌種的接種方式為平板劃線法。5. -種權利要求1所述的油茶炭疽病無公害防治方法，其特征在于，步驟(3)中菌種的 培養(yǎng)溫度為25 °C。6. -種權利要求1所述的油茶炭疽病無公害防治方法，其特征在于，步驟(4)中每次倒 入的藥劑量為5ml。
【文檔編號】A01G13/00GK105950702SQ201610390093
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】方先紅, 詹文勇, 詹秀芝, 周玉環(huán), 朱小妹, 詹志彬, 夏挺, 王永友, 楊雪梅, 方華橋
【申請人】安徽德昌苗木有限公司