一種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基按照以下方法獲得：一、將大豆成株風(fēng)干葉片40～60g粉碎后加蒸餾水100～200mL浸泡6～10h，過濾備用；二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊150～250g，加蒸餾水500～600mL，加熱煮沸20～40min，雙層紗布過濾；三、將步驟一中的大豆成株浸泡液加入到步驟二的濾汁中，然后加入葡萄糖15～25g，瓊脂15～20g，蒸餾水補(bǔ)充至1000mL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中滅菌，取出制成斜面，備用。本發(fā)明的培養(yǎng)基原料易得，配制方法簡便，保藏時(shí)間長，穩(wěn)定性好，保藏前后無明顯差異，具有方法簡單、生長速度快、存活率高、活性恢復(fù)快速、安全可靠等優(yōu)點(diǎn)；而且采用本發(fā)明培養(yǎng)基保藏的大豆疫霉菌，大大降低了保藏成本，無需購買專用設(shè)備。
【專利說明】
一種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明是對大豆疫霉菌保藏方法的改良，涉及一種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉菌侵染引起的，是危害極其嚴(yán)重的、最具毀滅性的大豆病害之一，在大豆整個(gè)生育期均可造成危害，而且發(fā)生面積逐年增加，危害程度逐年加重，并造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前比較有效的防治大豆疫霉根腐病的方法就是培育抗大豆疫霉根腐病品種，掌握大豆疫霉菌的毒力類型和大豆疫霉菌保藏方法是進(jìn)行抗病育種的基礎(chǔ)和前提。目前大豆疫霉菌保藏的培養(yǎng)基存在保藏時(shí)間短、存活率低、保存條件復(fù)雜的缺點(diǎn)，因此急需對保藏的培養(yǎng)基進(jìn)行改良。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決現(xiàn)有大豆疫霉菌保藏的培養(yǎng)基存在保藏時(shí)間短、存活率低、保存條件復(fù)雜的缺點(diǎn)，本發(fā)明提供了一種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基。
[0004]本發(fā)明所述目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0005]—種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，按照以下方法獲得:
[0006]一、將大豆成株風(fēng)干葉片40?60g粉碎后加蒸餾水100?200mL浸泡6?1h，過濾備用；
[0007]二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊150?250g，加蒸餾水500?600mL，加熱煮沸20?40min，雙層紗布過濾；
[0008]三、將步驟一中的大豆成株浸泡液加入到步驟二的濾汁中，然后加入葡萄糖15?25g，瓊脂15?20g，蒸餾水補(bǔ)充至lOOOmL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中滅菌，取出制成斜面，備用。
[0009]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0010]1、本發(fā)明在培養(yǎng)基中加入了大豆成株風(fēng)干葉粉浸提液，由于在新鮮的葉片上適宜大豆疫霉菌的發(fā)生和生長，因此該混合物是一種更有利于大豆疫霉菌生長的混合物；
[0011 ] 2、培養(yǎng)基的原料易得，配制方法簡便；
[0012]3、本培養(yǎng)基中各組分具有協(xié)同作用，有效地延長了大豆疫霉菌在4°C條件下的保藏時(shí)間，一年內(nèi)無退化或變異，達(dá)到了長期保藏的目的，具有保藏時(shí)間長、穩(wěn)定性好、保藏前后無明顯差異的優(yōu)點(diǎn)，具有良好的應(yīng)用前景；
[0013]4、具有方法簡單、生長速度快、存活率高、活性恢復(fù)快速、安全可靠等優(yōu)點(diǎn)；
[0014]5、采用本發(fā)明培養(yǎng)基保藏的大豆疫霉菌，大大降低了保藏成本，無需購買專用設(shè)備。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例1:
[0016]本實(shí)施例提供的用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基按照以下方法獲得:
[0017]一、將大豆成株風(fēng)干葉片40g粉碎后加蒸餾水10mL浸泡6h，過濾備用；
[0018]二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊150g，加蒸餾水500mL，放置在電磁爐中加熱煮沸30min(注意火力的控制，可適當(dāng)補(bǔ)水)，雙層紗布過濾；
[0019]三、濾汁加大豆成株浸泡液，然后加入葡萄糖15g，瓊脂15g，蒸餾水補(bǔ)充至lOOOmL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中121°C下滅菌30min，取出制成斜面，備用。
[0020]將大豆疫霉菌菌種接種在本實(shí)施例的斜面培養(yǎng)基上，待菌充分生長后，棉塞部分用牛皮紙包扎好，把試管放置在滅菌的塑料瓶中，并用真空栗把塑料瓶中的空氣抽出達(dá)半真空狀態(tài)，置于4 V冰箱中能保存一年。
[0021]實(shí)施例2:
[0022]本實(shí)施例與實(shí)施例1不同的是，用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基按照以下方法獲得:
[0023]一、將大豆成株風(fēng)干葉片50g粉碎后加蒸餾水150mL浸泡8h，過濾備用；
[0024]二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊200g，加蒸餾水550mL，放置在電磁爐中加熱煮沸30min(注意火力的控制，可適當(dāng)補(bǔ)水)，雙層紗布過濾；
[0025]三、濾汁加大豆成株浸泡液，然后加入葡萄糖20g，瓊脂18g，蒸餾水補(bǔ)充至lOOOmL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中121°C下滅菌30min，取出制成斜面，備用。
[0026]實(shí)施例3:
[0027]本實(shí)施例與實(shí)施例1不同的是，用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基按照以下方法獲得:
[0028]一、將大豆成株風(fēng)干葉片60g粉碎后加蒸餾水200mL浸泡10h，過濾備用；
[0029]二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊250g，加蒸餾水600mL，放置在電磁爐中加熱煮沸30min(注意火力的控制，可適當(dāng)補(bǔ)水)，雙層紗布過濾；
[0030]三、濾汁加大豆成株浸泡液，然后加入葡萄糖25g，瓊脂20g，蒸餾水補(bǔ)充至lOOOmL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中121°C下滅菌30min，取出制成斜面，備用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基按照以下方法獲得: 一、將大豆成株風(fēng)干葉片40?60g粉碎后加蒸饋水100?200mL浸泡6?1h，過濾備用； 二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊150?250g，加蒸餾水500?600mL，加熱煮沸20?40min，雙層紗布過濾；三、將步驟一中的大豆成株浸泡液加入到步驟二的濾汁中，然后加入葡萄糖15?25g，瓊脂15?20g，蒸餾水補(bǔ)充至lOOOmL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中滅菌，取出制成斜面，備用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，其特征在于所述滅菌溫度為121°C，時(shí)間為30min。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基按照以下方法獲得: 一、將大豆成株風(fēng)干葉片40g粉碎后加蒸餾水10mL浸泡6h，過濾備用； 二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊150g，加蒸餾水500mL，放置在電磁爐中加熱煮沸30min，雙層紗布過濾； 三、濾汁加大豆成株浸泡液，然后加入葡萄糖15g，瓊脂15g，蒸餾水補(bǔ)充至1000mL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中121°C下滅菌30min，取出制成斜面，備用。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基按照以下方法獲得: 一、將大豆成株風(fēng)干葉片50g粉碎后加蒸餾水150mL浸泡Sh，過濾備用； 二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊200g，加蒸餾水550mL，放置在電磁爐中加熱煮沸30min，雙層紗布過濾； 三、濾汁加大豆成株浸泡液，然后加入葡萄糖20g，瓊脂18g，蒸餾水補(bǔ)充至100mL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中121°C下滅菌30min，取出制成斜面，備用。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于大豆疫霉菌保藏的改良培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基按照以下方法獲得: 一、將大豆成株風(fēng)干葉片60g粉碎后加蒸餾水200mL浸泡1h，過濾備用； 二、將新鮮馬鈴薯去皮，切塊250g，加蒸餾水600mL，放置在電磁爐中加熱煮沸30min，雙層紗布過濾； 三、濾汁加大豆成株浸泡液，然后加入葡萄糖25g，瓊脂20g，蒸餾水補(bǔ)充至100mL，分裝入試管中，高壓滅菌鍋中121°C下滅菌30min，取出制成斜面，備用。
【文檔編號】C12R1/645GK105925485SQ201610537372
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年7月8日
【發(fā)明人】劉淑霞, 魏國江, 潘冬梅, 關(guān)向軍, 郭永霞, 徐海軍, 郭夢橋, 王曉飛, 肖宇, 杜春玉
【申請人】黑龍江省科學(xué)院大慶分院