阿哌沙班合成中的關鍵中間體和雜質：阿哌沙班二醇酯的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的涉及一種改進的用于通過新的中間體制備阿哌沙班的方法，所述中間體經歷更快的酰胺化反應。本發(fā)明還鑒定和定量阿哌沙班的雜質。
【專利說明】
阿哌沙班合成中的關鍵中間體和雜質:阿哌沙班二醇酯
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種通過新的關鍵中間體制備名為阿哌沙班的活性藥物成分的方法。
【背景技術】
[0002] 阿哌沙班是一種活性藥物成分，作為抗凝劑用于靜脈血栓栓塞事件的治療。
[0003] 阿哌沙班具有化學名稱卜^-甲氧基苯基)-7_氧代-6-[4-(2_氧代哌啶-1-基)苯 基]_4,5_二氫吡唑并[5,4_c]吡啶-3-甲酰胺，并具有以下化學式(I):
[0005] 阿哌沙班的某些溶劑合物是已知的，例如，已知阿哌沙班和甲酰胺或者和二甲基 甲酰胺的溶劑合物，兩者都具有化學計量比1:1。
[0006] 阿哌沙班二水合物，即每一個阿哌沙班具有兩個水分子的阿哌沙班水合物形式， 也是已知的。
[0007] 文獻中公開了阿哌沙班的一些合成途徑，特別地，在W02007/0001385中詳細說明 了在數千克規(guī)模上的阿哌沙班的首次工業(yè)合成。
[0008] PCT申請W02007/0001385在實施例6中公開了一種通過阿哌沙班乙酯在10千克規(guī) 模上的酰胺化反應根據以下反應方案制備阿哌沙班的方法：
[0010] 根據上述程序，使用在丙二醇中的無水氨，并在90°C下進行反應至少12小時，以 94.6 %的分離摩爾收率獲得阿哌沙班。
[0011] 在W02007/0001385的實施例6中公開的方法的最大優(yōu)點（也與實施例7和9比較)是 這種方法提供了具有名為N-1的多晶型的阿哌沙班，這種固體形式在同一申請的實施例9中 被明確表征并且是阿哌沙班的熱力學穩(wěn)定形式。
[0012] 根據由創(chuàng)始人提供的監(jiān)管信息，阿哌沙班形式N-1是目前市場上出售的形式，因 此，對于提供一種與創(chuàng)始人用于一般市場的形式具有完全相同的物理化學和治療特性的活 性藥物成分這樣一種目的來說，重要的是找到一種提供多晶型N-1的阿哌沙班的制備方法。
[0013] 在出版物J.Med.Chem.，2007，vol.50,22,第5339-5356頁中，根據以下反應方案， 從阿哌沙班乙酯和5%氨水在乙二醇中加熱到120°C4小時，以76%的摩爾收率制備阿哌沙 班：
[0015] 令人遺憾的是，上述出版物沒有涉及由此方法制備阿哌沙班的固體形式。
[0016] 出版物Synthetic Communication，43，第72-79頁，（2013)公開了一種利用25%氨 水在甲醇中在65°C下5小時以91 %摩爾收率從中間體阿哌沙班乙酯制備阿哌沙班的方法。
[0017] 然而，可能是因為在甲醇中而不是在二醇溶劑中進行，這種方法不提供阿哌沙班 形式N-1，實際上產物的熔點是171-173°C，這與形式N-1的熔點235-237°C不同。此外，沒有 提供關于所述產物的純度的數據。
[0018] 在專利公布W02013/119328的實施例2中，使用5%氨水在丙二醇中在100°C下過夜 從阿哌沙班乙酯進行阿哌沙班的合成。不用形式N-1對該反應混合物進行接種，以致在加工 結束時，分離出一種不同的固體形式，稱為形式I。由此制備的阿哌沙班形式I是阿哌沙班1， 2_丙二醇半溶劑合物。
[0019]考慮到上述現有技術和我們的初步實驗結果，盡管如W02007/0001385的實施例7 和9中，醇溶劑的存在看起來傾向于提供固體形式H2-2，但是，例如在W02007/0001385的實 施例6中，二醇溶劑的存在看起來促進了多晶型N_1的制備。
[0020] 因此，為了制備阿哌沙班形式N-1，從二醇溶劑分離阿哌沙班看起來是方便的。
[0021] 然而，盡管W02007/0001385中公開的用于制備阿哌沙班形式N-1的工業(yè)方法已經 使用了二醇溶劑，但是這種方法具有要求在高溫下長反應時間的缺點，即，在90°C下至少12 小時，或者根據W020 13/1 19328在100 °C下過夜，或者在120 °C下4小時（參見上述 J.Med.Chem.(2007))。
【附圖說明】
[0022] 圖1顯示對比阿哌沙班二醇酯向阿哌沙班的轉化和阿哌沙班乙酯向阿哌沙班的轉 化的動力學研究，兩種轉化在相同的酰胺化條件下進行。

【發(fā)明內容】

[0023]因此，本發(fā)明解決的問題是提供一種改進的用于制備阿哌沙班和其溶劑合物或者 水合物的方法，所述方法避免了長反應時間和/或高溫。
[0024] 這個問題通過如權利要求書中所概述的用于制備阿哌沙班和其鹽的方法來解決， 權利要求書的定義構成本說明書的一部分。
[0025] 本發(fā)明方法的其他特征和優(yōu)點源自于下文報告的對實現本發(fā)明的實施例的描述， 所述實施例被提供作為對本發(fā)明的說明而不是作為對本發(fā)明的限制。
【具體實施方式】
[0026] 本發(fā)明的目的是一種通過式(II)的化合物的酰胺化反應制備式（I)的阿哌沙班和 其溶劑合物或者水合物的方法：
[0029] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基、-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基并且n是1~6的整數。
[0030] 已經確實令人驚訝地發(fā)現，從式（II)的化合物開始，即從阿哌沙班的二醇酯開始， 將其轉化為阿哌沙班的酰胺化反應比使用常規(guī)的阿哌沙班C1-C2烷基酯進行得快得多。
[0031] 由本發(fā)明式（II)的化合物提供的效果可能是由自由氧烷基(oxydryl)引起的，所 述自由氧烷基以任何方式有利于由氨進行的烷氧基取代，可能提供了一種鄰位促進?；蛘?， 這樣的效果可能是由于另一種氧的存在引起的，所述氧的電負性提供了一種容易被氨取代 的酯。
[0032] 換言之，通過酰胺化反應將式（II)的阿哌沙班的二醇酯轉化成阿哌沙班，比常規(guī) 的阿哌沙班酯容易得多或者快得多。
[0033]在比較的表1和圖1中，提供了由本發(fā)明方法提供的效果的明顯證據。
[0034]雖然在下列某些實施例中，酰胺化反應進行6小時（僅僅是為了完成實驗標準方 案），但是它們遠在此時間之前就已完成。
[0035]實際上，提供阿哌沙班的式（II)的化合物的酰胺化反應通常在80 °C和90 °C之間的 溫度下只持續(xù)3小時，達到99.0 %的轉化。
[0036]如表1所示，在完全相同的條件下，阿哌沙班乙酯轉化為阿哌沙班至少耗費6小時。 [0037] 根據在W02007/0001385中公開的工業(yè)方法，所述轉化在90°C下持續(xù)至少12小時。
[0038] 因此，與已知的阿哌沙班酯的酰胺化反應相比，本發(fā)明的方法需要更短的反應時 間。
[0039] 本發(fā)明方法的進一步的優(yōu)點是反應的副產物是二醇，二醇可以是所述反應的溶劑 介質，從而避免了其它殘留溶劑的存在，并避免了醇例如乙醇作為副產物的存在，根據 W02007/0001385的實施例7和9,醇例如乙醇看起來促進了固體形式H2-2。
[0040] 所述酰胺化反應可以使用無水氨，氨水，銨鹽例如氫氧化銨、氯化銨、溴化銨、硫酸 銨等進行。
[0041] 本發(fā)明方法的酰胺化反應可以在水性介質和/或在有機溶劑中進行。
[0042] 所述有機溶劑可以是醇、二醇、醚、酯、腈、烴、氯代烴等和其混合物。
[0043]所述有機溶劑可以是醇，例如甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等。
[0044]所述有機溶劑可以是醚例如叔丁基甲醚，酯例如乙酸乙酯或乙酸異丙酯，腈例如 乙腈、烴例如甲苯或二甲苯、氯代烴例如氯仿、二氯甲烷、氯苯等。
[0045] 二醇溶劑是優(yōu)選的，因為它們提供固體形式N-1的阿哌沙班，并且因為使用式H0-R-OH的二醇溶劑，其中R與式（II)的化合物中的R相同，反應的副產物是與所述溶劑相同的 化合物，從而避免監(jiān)測到另外的殘留溶劑。
[0046] 所述有機溶劑可以是選自以下的二醇：乙二醇、1，2_丙二醇、1，3_丙二醇、二甘醇、 PEG200、聚丙二醇、甘油。
[0047]根據本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案，優(yōu)選的溶劑是乙二醇、1，2_丙二醇、1，3_丙二 醇、二甘醇。
[0048]在本發(fā)明方法中使用的式H0-R-OH的二醇溶劑可以具有與式（II)的化合物的R基 團有相同含義的R基團，或者可選地，R可以具有不同的含義。根據所述實施方案，式H0-R-OH 的二醇溶劑具有與式(II)的化合物的R基團有相同含義的R基團。
[0049] 在式（II)的化合物中，所述R基團選自直鏈或支鏈C2_C6烷基、-〇1 2-〇1(01〇-〇12-、- (Ri) nR1-，其中R1是直鏈或支鏈C2-C4烷基，n是1~6的整數。
[0050] 所述直鏈或支鏈c2-c6烷基是選自以下的基團：-01 2012-、-012012012-、-01 2(013)-CH2-、- (CH2) 4-、_CH( CH3) CH2CH2-、-CH2CH (CH3) CH2、-CH2CH2CH (CH3) -、- (CH2) 5-、- (CH2) 6-等。
[0051] 其中n是1~6的整數并且其中R1是直鏈或支鏈C2-C4烷基的基團-(#0)#是選自以 下的基團：_ (CH2CH2O)nCH2CH2-、_(CH2CH2CH2O) nCH2CH2CH2-、_ (CH(CH3) CH20)nCH(CH3) CH2-、_ (CH2CH (CH3) 0) nCH2CH (CH3) _、_ (CH2CH2CH2CH2O) nCH2CH2CH2CH2-等。
[0052] 根據一種優(yōu)選的實施方案，所述基團-(妒0) nR1-是(CH2CH20) nCH2CH2-。
[0053]根據本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方案，式(II)的化合物是一種分離的化合物，即，一 種從用于制備所述化合物的反應混合物中分離出來的化合物。因此，所述式（II)的化合物 通常是固體形式或者分離的油的形式。
[0054]根據本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方案，式（II)的化合物是一種具有高于80%的純度 的化合物，所述純度以HPLC A/A%測量，例如通過使用實施例13的分析方法測量。
[0055] 本發(fā)明的方法是在60 °C和140 °C之間、優(yōu)選在80 °C和120 °C之間、更優(yōu)選在80 °C和 90°C之間的溫度下進行的。
[0056] 當酰胺化反應在80°C和90°C之間進行時，反應在大約3小時內完成（即轉化高于 99%)〇
[0057]根據一種優(yōu)選的實施方案，本發(fā)明的方法進一步包括利用式（III)的化合物的酯 交換反應制備式(II)的化合物的步驟：
[0059] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基、-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數，
[0061 ] 其中，R2是直鏈或支鏈CrC6烷基。
[0062]因此，通過式（III)的化合物與二醇、與聚二醇或與甘油反應來進行所述式（III) 的化合物的酯交換以提供式(II)的化合物。
[0063] 所述酯交換反應通過式0H-R-OH的二醇的反應來進行，其中R選自直鏈或支鏈&-〇5 烷基、-CH2-CH (OH) -CH2-和-(#0) J?1-，其中R1是直鏈或支鏈C2-C4烷基并且n是1~6的整數。 [0064] 優(yōu)選的二醇是乙二醇、1，2-丙二醇，1，3-丙二醇和二甘醇。
[0065] 優(yōu)選的聚二醇是聚乙二醇（200)(簡稱PEG200)和丙二醇SOCKPPGSOOhPEG具有以 下化學結構 H〇-(CH2CH2〇)nCH2CH2-〇H。
[0066] 所述酯交換反應可在7.5~10.0之間的pH下、優(yōu)選在8.0~9.5之間的pH下進行。 [0067]所述酯交換反應可以在堿存在下進行，所述堿優(yōu)選為無機堿，例如優(yōu)選NaHC03或 KH 2P〇4,即磷酸氫二鉀。
[0068]所述酯交換反應優(yōu)選在磷酸氫二鉀存在下進行，因為它提供更高和更快的轉化。 [0069] 所述酯交換反應在60 °C和120 °C之間、優(yōu)選在70 °C和80 °C之間的溫度下、更優(yōu)選在 大約75 °C下進行。
[0070] 所述酯交換反應使用過量的反應物二醇作為反應溶劑來進行。
[0071] 根據一種可選的合成途徑，式(II)的化合物可以通過式(IV)的化合物的內環(huán)合來 制備：
[0073] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基，-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數。
[0074]式(IV)的化合物可以通過修改用于制備相應的酯的已知的現有技術方法來制備， 以制備所述阿哌沙班二醇酯。使用該合成方法，可以制備式（II)的化合物，以避免之前式 (III)的阿哌沙班酯的制備。參見以下的反應方案。
[0076]可以在堿例如t-BuOK存在下進行式（IV)的化合物的環(huán)化，以提供式（II)的化合 物。
[0077] 此外，式（II)的化合物可以根據其他合成方法制備，然而，所述其他合成方法不一 定涉及式(I II)的化合物或者酯中間體的制備。
[0078] 在下面的反應方案中描述了通過腙起始原料的二醇酯的反應直接合成式（II)的 化合物的實施例。
[0080] 其中R選自直鏈或支鏈c2-c6烷基，-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) nR1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數。
[0081]根據優(yōu)選的實施方案，在本發(fā)明的用于制備阿哌沙班的方法中和/或在從式(III) 的化合物開始制備式（II)的化合物的進一步的步驟中，式（II)的化合物中的R基團選自-〇12〇12-、-〇1 2〇1(〇13)-、〇1(〇13)〇12-、-(〇1 2)3-和〇12〇120〇12〇1 2-，或者根據另外的實施方案， 所述R基團選自-CH2CH2-、- (CH2) 3-和 CH2CH2OCH2CH2-。
[0082]所述式（II)的化合物可以方便地通過其中R例如為乙基的式（III)的化合物分別 與乙二醇、1，2_丙二醇、1，3_丙二醇和二甘醇或者根據另外的實施方案，分別與乙二醇、1， 3_丙二醇和二甘醇的酯交換而制備。
[0083]通過與1，2-丙二醇的酯交換從式（III)的化合物制備的式（II)的化合物是具有1: 2比例的兩種同分異構體的混合物，其中R是-CH( CH3) CH2，稱為同分異構體A，或者R是-CH2CH (CH3)-，稱為同分異構體B，即，所述兩種同分異構體分別具有下列結構：
[0085]已經觀察到，根據實施例13中所述的分析方法，同分異構體A( R = _CH( CH3) CH2_的 化合物（II))具有RRT = 1，18，同時根據同樣的分析方法，同分異構體B (R=-CH2CH( CH3)-的 化合物（II))具有RRT = 1，16。
[0086] 優(yōu)選其中R是-CH2CH(CH3)_的式（II)的化合物，即同分異構體B，因為這是通過式 (III)的化合物與1，2-丙二醇的酯交換反應制備的主要的同分異構體化合物。
[0087]相反，通過與乙二醇的酯交換從式（III)的化合物制備的式（II)的化合物只具有 下面的一種結構：
[0089] 根據本發(fā)明方法的一種優(yōu)選的實施方案，所述式（II)的化合物的R取代基選自-CH2CH2- ^ -CH2CH( CH3) - ^ -CH (CH3) CH2- ^ - (CH2) 3-^P-CH2CH2〇CH2CH2- 0
[0090] 根據本發(fā)明方法的另一種優(yōu)選的實施方案，所述式(II)的化合物的R取代基選自- CH2CH2-、- (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2- 〇
[0091 ]因此，本發(fā)明的目的還在于式(II)的化合物：
[0093] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基，其中R1是直鏈或支鏈C 2-C4烷基并且n是1~6的整 數的-(R1。) nR1-，和基團-CH2-CH (OH) -CH2-。
[0094] 根據本發(fā)明式（II)化合物的一種優(yōu)選的實施方案，R選自-CH2CH2-、-CH2CH(CH 3)-、 CH( CH3) CH2-、_ (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2- 〇
[0095]根據本發(fā)明式(II)化合物的另一種優(yōu)選的實施方案，R選自-CH2CH2-、-(CH 2)3-和-CH2CH2OCH2CH2-0
[0096] 因此，本發(fā)明式（II)的化合物可以用于式（I)的阿哌沙班和其溶劑合物或水合物 的制備。
[0097] 根據本發(fā)明的一種實施方案，用于制備式（I)的阿哌沙班和其溶劑合物或水合物 的方法包括以下步驟：
[0099] a)式(III)的化合物的酯交換反應：
[0101] 其中，R2是直鏈或支鏈&-C6烷基，
[0102] 以提供式(II)的化合物：
[0104] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基，-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數，
[0105] b)分離式(II)的化合物，
[0106] c)式(II)的化合物的酰胺化反應：
[0108]以提供式（I)的阿哌沙班。
[0109] 根據本發(fā)明方法的上述實施方案，式（II)的化合物是一種對于阿哌沙班的制備有 用的中間體，其允許在通過阿哌沙班酯的直接酰胺化反應進行的已知的阿哌沙班合成中插 入一個另外的步驟。
[0110] 實際上，從式(III)的阿哌沙班酯開始制備和分離式（II)的化合物，能夠提高所述 式(II)的中間體的純度，由此提高最終阿哌沙班的純度。
[0111] 換句話說，與已知的將式(III)的阿哌沙班酯直接轉化成阿哌沙班的方法相比，根 據所述優(yōu)選的實施方案進行本發(fā)明的方法，其中式（II)的中間體被分離，所述方法允許提 高最終產物阿哌沙班的純度。
[0112] 步驟(b)中式（II)的化合物的分離可以通過已知的有機合成技術(包括沉淀和過 濾或離心)或可選地通過相分離來進行。
[0113] 在步驟(b)結束時，所述式（II)的化合物可以任選地在烘箱內或在干燥過濾器內 進行干燥。
[0114] 此外，分離式（II)的化合物可用于滿足監(jiān)管機構的要求，所述監(jiān)管機構要求所述 方法由至少三個合成步驟組成。
[0115] 根據剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案，一種優(yōu)選的方法是其中式（III)的 化合物中的R2是乙基。
[0116] 根據剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案，一種優(yōu)選的方法是其中式(II)的化 合物中的 R選自-CH2CH2-、_CH2CH( CH3) _、CH (CH3) CH2-、_ (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2-。
[0117]根據剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案，另一種優(yōu)選的方法是其中式(II)的 化合物中的 R選自-CH2CH2-、- (CH2) 3-和-ch2ch2〇ch2ch2-。
[0118] 根據剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案，一種優(yōu)選的方法是其中式（III)的 化合物中的R2是乙基并且其中式（II)的化合物中的R選自-CH 2CH2-、-CH2CH( CH3) -、CH( CH3) CH2-、_ (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2-。
[0119] 根據剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案，另一種優(yōu)選的方法是其中式（III) 的化合物中的R2是乙基并且其中式（II)的化合物中的R選自-CH2CH2-、- (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2-0
[0120] 進行剛才提到的本發(fā)明優(yōu)選實施方案的步驟(a)和(c)的條件與上面已經描述的 用于本發(fā)明方法(包括其優(yōu)選的實施方案)的條件是相同的。
[0121] 正如利用化學合成獲得的任何化合物，阿哌沙班和其溶劑合物或水合物可能包含 少量被稱為雜質的外來化合物。這些雜質可能是原材料、合成中間體、反應副產物和降解產 物等。
[0122] 所述阿哌沙班的雜質正如任何其他的藥物活性成分或者相關藥物的雜質(被稱為 "藥物雜質"）可能影響藥物的效力和安全性兩者，在極端情況下，所述雜質甚至可能對患者 是有害的。通過基于后面的化學反應的生產方法生產的活性成分如阿哌沙班的純度對于商 業(yè)化來說是一種關鍵因素。美國食品藥品監(jiān)督管理局（US Food and Drug Administration) (FDA)和歐洲藥品管理局（European Medicinal Agency) (EMA)以及相關 的藥典要求雜質保持在給定的限值之下。
[0123] 化學反應的產物很少是一種具有足以滿足監(jiān)管標準的純度的單一化合物。由于反 應中使用的試劑的二次反應產生的副產物也可以存在于分離的產物中。在活性成分例如阿 哌沙班的生產方法的某些步驟中，通常利用高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)或者 薄層色譜法(TLC)分析純度，用于明確它是否適合后來的治療并最終在藥物產品中使用。
[0124] 通常，通過光譜學方法鑒定雜質，因此，色譜峰位置例如色譜圖的色譜峰位置或者 TCL板上的點與所述雜質相關。
[0125] -旦將峰位置與特定的雜質相關后，可以針對色譜圖中所述雜質的相對峰位置在 樣品中鑒定所述雜質，其中以在色譜柱中注入樣品與洗脫雜質通過檢測器之間的分鐘數測 量色譜圖中的峰位置。色譜圖中的峰位置被稱為保留時間，保留時間之間的比率被稱為相 對保留時間。
[0126] 制藥領域的技術人員知曉相對純的化合物可以被用作參比標準品。參比標準品和 參比標記物相似，區(qū)別在于后者不僅可以用于檢測雜質，也可以用于定量活性成分樣品中 存在的雜質的量這一事實。
[0127] 本領域技術人員知道，通過了解過程雜質的化學結構、合成方法并例如用D0E確定 影響最終產物中雜質的量的參數，顯著改進了所述過程雜質的管控。阿哌沙班的雜質，包括 沒有完全反應的中間體，原材料的雜質、反應副產物、降解產物以及其他產物，可以影響包 含阿哌沙班的藥物形式的品質和效力。因此，需要一種確定阿哌沙班樣品中雜質水平的方 法和用于移除雜質或者限制其含量或者防止其形成的方法。
[0128] 作為本發(fā)明的另一方面，在開發(fā)用于制備阿哌沙班的方法期間，已經發(fā)現式（II) 的化合物傾向于殘留在產物阿哌沙班中，換句話說，式（II)的化合物既是根據本發(fā)明方法 合成阿哌沙班的起始原料或者中間體，又是阿哌沙班的一種雜質。
[0129] 為了減少活性成分中雜質的量，必須使用適當的分析方法檢測其存在，只有在能 夠方便地鑒定、定量雜質的情況下，才能夠在之后提供一種能夠防止所述雜質形成的合成 方法和/或提供一種用于去除所述雜質的方法。然而，這實質上要求提供這種雜質的參比標 準品或參比標記物。為此目的，可以利用上述方法方便地制備式（II)的化合物。
[0130] 因此，本發(fā)明式（II)的化合物可以用作參比標記物或者參比標準品，用于鑒定和/ 或定量在阿哌沙班和其溶劑合物或水合物中的所述式(II)的化合物。
[0131]式（II)的化合物實際上可以根據下面的分析方法用于鑒定和/或定量在阿哌沙班 和其溶劑合物或水合物中的所述式(II)的化合物。
[0132] -種用于檢測或鑒定在阿哌沙班或其溶劑合物或水合物中的式（II)的化合物的 方法，包括：
[0133] a)向阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物中加入已知量的式(II)的化合物，
[0134] b)進行步驟a)的阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物的HPLC分析，
[0135] c)檢測式（I)的化合物的HPLC峰；
[0136] 或，
[0137] a 1)利用HPLC分析式（II)的化合物，
[0138] bl)利用HPLC分析阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物，
[0139] cl)通過比較保留時間或相對保留時間，檢測式(II)的化合物的HPLC峰。
[0140] 實質上使用以上方法，其允許在阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物的色譜圖中 鑒定關于式(II)的雜質化合物的峰。該分析可能是HPLC類型的。
[0141] 除了鑒定在阿哌沙班或溶劑合物或水合物中的雜質峰，一種用于定量在阿哌沙班 或其溶劑合物或水合物中的式(II)的化合物的方法，包括：
[0142] i)利用HPLC在具有未知量的式（II)的化合物的阿哌沙班或其溶劑合物或水合物 中測量與式(II)的化合物相對應的峰面積；
[0143] ii)利用HPLC測量與含有已知量的式（II)的化合物的參比標準品相對應的峰面 積；
[0144] iii)比較步驟a)中測量的面積與步驟ii)中測量的面積，確定阿哌沙班或其溶劑 合物或水合物中式(II)的化合物的量。
[0145] 由此可見，式（II)的化合物可以用作參比標記物或者參比標準品，分別用于鑒定 和/或定量在阿哌沙班或其溶劑合物或水合物中的式(II)的化合物。
[0146] 特別地，已經發(fā)現，根據本發(fā)明的方法生產并且用實施例13中所述的分析方法測 得具有RRT = 1.16的阿哌沙班的雜質是下列結構的同分異構體B，而具有RRT = 1.18的雜質 是下列結構的同分異構體A:
[0148] 作為與通過本發(fā)明方法生產的阿哌沙班的固體形式有關的一個方面，進行一個研 究，所述研究的目的是制備阿哌沙班固體形式N-1。
[0149] 通過重復W02007/0001385的實施例6的實驗，但不加入形式N-1的晶種，已獲得、制 備和表征了式(V)的阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物：
[0151] 式(V)的具有化學計量比（2:1)的阿哌沙班1，2_丙二醇溶劑合物是白色固體。
[0152] 之后，進行一個研究，所述研究的目的是找到一種從式(V)的阿哌沙班1，2_丙二醇 半溶劑合物獲得N-1形式的方法。
[0153] 使用阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物(縮寫為APX ? PG)作為起始原料的篩選，在 所有情況下都使用形式N-1作為晶種進行。使用ICH指南第3類溶劑(除了甲醇，ICH指南第2 類允許3000ppm的殘留溶劑)進行實驗。APX ? PG在常見工業(yè)溶劑中的低溶解度限制了結晶 的使用。
[0154] 在表1中收集了從APX ? PG提供阿哌沙班形式N-1的成功的實驗。
[0155] 表1:從APX ? PG制備阿哌沙班形式N-1的方法：
[0157] 漿化看來是制備形式N-1的最好程序，因為在結晶中需要大量的溶劑（36-60體 積)。
[0158] 由于其更低的沸點和良好的工業(yè)接受性，選擇乙醇和異丙醇作為溶劑來將漿化實 驗按比例放大到1克。通過XRro監(jiān)測轉化：
[0159] -在室溫下，在乙醇中所述轉化在1小時后完成。
[0160] _在異丙醇中，所述轉化慢得多：在50°C下5小時后，轉化沒有完成，但是在一夜之 后完成。
[0161] 通過1H-NMR在阿哌沙班形式N-1中沒有檢測到丙二醇。遺憾的是，在兩個實驗中通 過 1H-NMR檢測到殘留溶劑(大約0.8重量％的乙醇和0.7重量％的異丙醇）AMR分析表明，當 使用乙酸乙酯時也有0.7重量％的殘留溶劑。
[0162] 通過結晶和漿化在乙醇中獲得的形式N-1的1H-匪R分析表明，在結晶情況下殘留 溶劑的量更低(0.4重量％，而不是0.8重量％ )。制備方法看起來對最終殘留溶劑的量具有 某些影響(或許是由于聚集體的不同粒度或者種類）。
[0163] 通常，根據本發(fā)明方法制備的阿哌沙班形式N-1具有0.05%~0.1 %之間的水含 量。
[0164] 實驗部分
[0165] 起始原料阿哌沙班乙酯可根據W02007/001385的實施例5制備。
[0166] 實施例1:從阿哌沙班乙酯制備式(V)的阿哌沙班1,2-丙二醇半溶劑合物。
[0168] 在通過氮氣惰化的高壓釜中裝載阿哌沙班乙酯（15g，1.0當量)和丙二醇（1，2_丙 二醇，135毫升），并且用氨在p = 4巴和T = 80/85°C下加壓該容器6小時。然后將混合物轉移 到圓底燒瓶中，冷卻到45/50°C并且用水(85毫升)稀釋。在T = 45/50°C下攪拌額外2小時后， 將懸浮液冷卻到20/25 °C持續(xù)10小時并過濾。將濕濾餅用水(2 X 30毫升)洗滌。將固體在T = 75°C下在真空下干燥8小時以提供式(V)的阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物（13.3g，0.86當 量）< 3m.p.l95tC</H-Mffi(400MHz，CDCl3，ppm)，S:7.49(d，J = 9Hz，2H)、7.35(d，J = 8Hz，2H)、 7.28(d，J = 8Hz，2H)、6.95(d，J = 9Hz，2H)、6.91(s，lH)、5.91(s，lH)、4.13(t，J = 8Hz，2H)、 3.84化8,3肝0.51101丙二醇）、3.62(13111，211+0.511011丙二醇）、3.39(13111，了 = 8抱，211+0.511011 丙二醇），2,57化8,2肝111〇12丙二醇）、1.95卬8,410，1.14((1，了 = 6.4抱，1.511〇13丙二醇）。 13C NMR和DEPT 135NMR(100MHz，CDCl3，ppm)，S:170.3(C)、163.8(C)、159.9(C)、157.4(C)、 141?4(C)、140?7(C)、140?0(C)、133?4(C)、132.5(C)、126.8(CH)、126.2(CH)、126.5(CH)、 125.9(CH)、113.8(CH)、68.3(CH)、68.1(CH2)、55.6(CH 3)、51.6(CH2)、51.2(CH2)、32.8(CH2)、 23.5(012)、21.4(012)、21.3(012)、18.8(013)?！?1-]\^ m/z = 460([M+H] + )<JR(ATR，cm-4 : 3447、3145、2940、2860、1687、1631、1543、1512、1465、1441、1401、1380、1350、1326、1297、 1243、1170、1144、1111、1027、1016、982、945、831、812、761、705。父-1^)(29°):6.6°、7.6°、 8.1°、9.9°、11.7°、12.7°、13.7°、14.5°、15.1°、15.6°、16.3°、16.9°、17.2°、17.9°、18.2°、 19.5°、20.0°、20.5°、20.8°、21.4°、22.8°、23.8°、24.8°、25.5°、29.0°、31.2°、33.0°。
[0169] 對W02007/001385的實施例6進行多次修改而不加入阿哌沙班形式N-l的晶種，始 終提供式(V)的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物。
[0170] 這與專利公布W02013/119328的教導一致，在W02013/119328中，在沒有用形式N-1 接種的情況下獲得阿哌沙班形式I，即阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物。
[0171] 實施例2:從阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物制備阿哌沙班形式N-1 -一不用形式 N-1接種。
[0173]在圓底燒瓶中裝載阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物（10克，1.0當量)和乙醇(400 毫升），將該混合物加熱到回流4小時。將懸浮液緩慢冷卻到20/25°C，在此溫度下攪拌8小 時，然后用乙醇（2 X 20毫升)過濾洗滌。將濕固體在75 °C下在真空下干燥8小時，提供8.1克 的阿哌沙班N-1 形式（0.87當量hmp 237°C</H-匪R(400MHz，DMS0-d6，ppm)，S:7.74(s，lH)、 7.53(d，J=12Hz，2H)、7.47(s，lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J=12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)，3.61(t，J = 4Hz，2H)、3.23(t，J = 8Hz，2H)、2.41 (t，J = 4Hz，2H)、1 ? 87(m，4H)。13C-NMR和DEPT 135NMR( 100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S: 169 ? 3(C)、 163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、141.9(C)、140.3(C)、133.5(C)、133.1(C)、127.3 (C)、126.8(CH)、126.5(CH)、125.7(CH)、113.9(CH)、56.0(CH 3)、51.3(CH2)、33.1(CH2)、23.5 (012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]^ m/z = 460([M+H] + )。
[0174] 實施例3:阿哌沙班形式N-l的表征。
[0175] 通過幾種技術表征了通過在乙醇中結晶獲得的阿哌沙班形式N-l。
[0176] FT-IR
[0177] 利用配備有光束分離器KBr系統(tǒng)、35mW He-Ne激光器作為激發(fā)光源和DTGS KBr檢 測器的Thermo Nicolet Nexus 870FT-IR記錄FTIR光譜。所述光譜在4cm-1分辨率下在32次 掃描中獲得。
[0178] IR(KBr):v=3483(m)、3311(m)、2909(m)、2866(W)、1683(s)、1630(s)、1595(s)、 1519(m)、1295(m)、1256(m)、975(m)、848(s)、813(m)、668(m)、467(m)cm-H 參見圖 2)。
[0179] DSC
[0180] 利用Mettler DSC822e記錄DSC分析。將1.6770毫克的樣品稱取到具有針孔蓋的40 yL鋁坩堝中，并在氮氣(50毫升/分鐘）下，以10°C/分鐘從30°C加熱到300°C。
[0181] 形式N-1的特征是通過DSC分析（10 °C/分鐘）測量到的對應于在235.68 °C (熔化焓-106.66J/g)開始的熔點的吸熱尖峰。
[0182] TGA
[0183] 在熱重分析儀MettlerTGA/SDTA85^中記錄熱重分析。將4.2206毫克的樣品稱取 到具有針孔蓋的70此氧化鋁坩堝中，并在氮氣（50毫升/分鐘）下，以10°C/分鐘從30°C加熱 至 |J400°C。
[0184] 形式N1的熱重分析顯示在熔點之前(在130 °C和230 °C之間）0.23 %的重量損失。這 個重量損失可能來自于乙醇痕量的消除。
[0185] X-RPD
[0186] 以布拉格-布倫塔諾（Bragg-Brentano )幾何學，使用具有Cu Ka福射的 PANalytical X'Pert衍射儀進行XRPD分析。該系統(tǒng)配備有單維的實時的多條檢測器。在每 分鐘17.6°的掃描速率下從3°到40° (20)記錄衍射圖（參見圖5)。選擇的峰的列表（只顯示具 有大于或等于1 %的相對強度的峰）： 位置 相則強度 『。2Th，l [%] 8,4 9 10.0 4
[0187] 10.5 5 11.1 5 12.3 ：8 41 13.9 5.8 15.1 2 16.2 14 16.9 100 18.4 30 18.8 14 19.6 8 21,1 11 21.5 12 22,0 16 22.2 29 23.6 2. 24.0 4
[0188] 24.7 8 25.3 4 26,2 1 2M 8 27.7 5. 28.0 3 28.6 4 29,2 6 29.9 5 30.6 3 31，） 1 32.6 5 35.1 .3
[0189] 在專利US7396932B2中，形式N-1通過SCXR和13C SSNMR描述使用SCXR數據（晶胞， 對稱性和原子位置），利用Mercury程序模擬XRPD。將該模擬的XRH)與實施例2中獲得的實驗 性XRH)進行比較，證實了阿哌沙班N-1形式的形成。
[0190] 卡爾費歇爾(Karl Fischer)
[0191] 用Metrohm 787KF Trinito記錄卡爾費歇爾分析。將產品溶解在甲醇中。使用以下 反應物分析兩個樣品：Hydranal_復合物5(Hydranal_Composite 5) (Riedel de.Ha§n. Ref. 34805)，Hydranal 快速甲醇（Hydranal Methanol Rapid) (Riedel deHaSn.Ref. 37817) 和Hydranal水標準 1.0(Hydranal Water Standard 1.0)(Riedel deHa&nRef.34828,用于 計算該因子）。
[0192] 在實施例2中制備的形式N-1的含水量是0.9%。
[0193] 實施例4:從阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物在更大規(guī)模上制備阿哌沙班形式N-1--用形式N-1接種。
[0195] 向配備有溫度計和機械攪拌器的三頸圓底燒瓶中加入如在實施例1中制備的式 (V)的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物（85.1克；171毫摩爾），和乙醇/水（2 :1)的混合物 (850毫升，10體積）。將得到的懸浮液用形式N-1 (如在實施例2中制備的)接種，并將它在50 °C下加熱。將該混合物在50°C下保持2.5小時，然后將它冷卻到室溫。將該漿料在室溫下攪 拌2~3小時。將固體用燒結漏斗(孔隙率2-非常好的過濾)過濾，用乙醇:水(2:1)(170毫升， 2體積）、水（170毫升，2體積)洗滌，并在50°C下在真空下干燥過夜。得到作為灰白色粉末的 阿哌沙班形式N-1 (65.4克，83 %收率）。咕-NMR分析顯示該產品含有0.13 %的殘留乙醇。 K.F. 0.1 %。通過HPLC測定化學純度:99.4%。起始的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物具有 98.3%的純度。
[0196] 重復上述程序，從具有95.2 %純度的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物起始，制備 的阿哌沙班形式N-1具有99.5%的純度。
[0197] 實施例5:合成式(II)的化合物，其中R是-CH2CH2_。
[0199] 將阿哌沙班乙酯（10.0克，1.0當量）、磷酸氫二鉀(K2HP〇4,17.8克，5.0當量)和乙二 醇（1，2 -乙二醇，7 0毫升）的混合物加熱到T = 7 5 °C 10小時，然后冷卻至室溫。裝入水（7 0毫 升)和二氯甲烷(70毫升），將由此產生的兩相溶液在室溫下攪拌10分鐘。一旦將相分開后， 將有機層用分子篩處理以移除殘留的水，然后在減小的壓力下濃縮成殘渣。使用由此產生 的固體而無需進一步純化(9.0克，0.87 當量）</H-NMR(400MHz，DMS0-d6，ppm)，S:7.52(d，J = 12Hz，2H)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 8Hz，2H)、7.03(d，J=12Hz，2H)、4.98(t，J = 4Hz，lH)，4.35(t，J = 4Hz，2H)、4.09(t，J = 4Hz，2H)、3.82(s，3H)，3.74(dd，Ji = 4Hz，J2 = 4Hz，2H)、3.60(t，J = 4Hz，2H)、3.24(t，J = 4Hz，2H)、2.40(t，J = 4Hz，2H)、1.85(m，4H)</3C-NMR和DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S: 169.4(C)、162.0(C)、159.8(C)、156.9(C)、 141?9(C)、140?2(C)、139?0(C)、133?5(C)、132.9(C)、127.4(CH)、127.2(CH)、126.8(CH)、 126.5(CH)、114.0(CH)、66.8(CH2)、59.5(CH2)、56.0(CH 3)、51.3(CH2)、51.2(CH2)、33.1 (012)、23.5(012)、21.6(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/z = 505([M+H] + )。
[0200] 實施例6:合成式（II)的化合物，其中R是-CH( CH3) 2CH2-和-CH2CH (CH3)-。
[0202] 將阿哌沙班乙酯(30.0克，1.0當量）、磷酸氫二鉀(K2HP〇4,53.4克，5.0當量)和丙二 醇（1，2_丙二醇，210毫升）的混合物加熱到T = 75°C10小時，然后冷卻至室溫。裝入水(210毫 升)和二氯甲烷(210毫升），將由此產生的兩相溶液在室溫下攪拌10分鐘。一將相分開后，將 有機層用分子篩處理以移除殘留的水，然后在減小的壓力下濃縮成殘渣。由此產生的固體 是兩種同分異構體(在 1H-NMR表征中分別稱為同分異構體A和同分異構體B)的1:2混合物， 使用該固體而無需進一步純化（25.2g，0.79當量VH-NMRGOOMHzJMSO-dhppm)』：？』〗 (111，311(211同分異構體4和211同分異構體8))、7.37(111，311(211同分異構體4和211同分異構體 8))、7.30(111，311(211同分異構體4和211同分異構體8))、7.03(111，311(211同分異構體4和211同分 異構體幻）、5.12(111，0.511(111同分異構體4)、4.96(111，1.511(111同分異構體4和111同分異構體 B))、4.20(m，2H(2H同分異構體B))、4.11 (m，3H(2H同分異構體A和2H同分異構體B))、3.98 (111，111(111同分異構體8))、3.83(111，4.511(311同分異構體六和311同分異構體8))、3.61(111，311(211 同分異構體A和2H同分異構體B))，3.26(m，3H(2H同分異構體A和2H同分異構體B))，1.88(m， 6H(4H同分異構體A和4H同分異構體B))，1.29(d，J = 4Hz，1.5H(3H同分異構體A))，1.17(d，J =4泡，311(311同分異構體8))。13(：-匪1?(1001泡，0150-(16，口？111)，5 :169.4、161.8、161.6、 159.8、156.9、141.9、140.2、139.3、139.0、133.5、133.0、127.3、127.2、126.8、126.5、 114.0、72.7、69.9、64.5、64.1、56.0、51.3、51.2、33.1、23.5、21.7、21.4、20.5、16.9(觀察到 兩種同分異構體的一些信號重疊）JSI-MS m/z = 519( [M+H] + )。
[0203] IR(ATR, cm-1)：3329^2934^2839^1708^1673^1627^1592^151U1438^1403^1372^ 1325、1301、1252、1172、1144、1054、1021、988、949、832、788、699。父-1^)(29°):6.7°、8.2°、 8.5°、8.9°、10.5°、11.1°、11.6°、12.1°、13.0°、15.3°、15.9°、16.8°、17.2°、17.9°、19.3°、 20.1°、20.4°、21.3°、22.8°、23.2°、23.8°、24.5°、25.4°、27.9°、30.3°。
[0204] 實施例7:合成式（II)的化合物，其中R是-CH2CH2OCH2CH 2-。
[0206] 將阿哌沙班乙酯（10.0克，1.0當量）、磷酸氫二鉀(K2HP〇4,17.8克，5.0當量)和二甘 醇(70毫升）的混合物加熱到T = 75°C10小時，然后冷卻至室溫。裝入水(70毫升)和二氯甲烷 (70毫升），將由此產生的兩相溶液在室溫下攪拌10分鐘。一旦將相分開后，將有機層用分子 篩處理以移除殘留的水，然后在減小的壓力下濃縮成殘渣。使用由此產生的固體而無需進 一步純化（10.5克，0.93當量）。 111-匪1?(4001〇^，0150-(16，口口111)，5:7.53((1，了 = 8抱，21〇、7.37 (d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 8Hz，2H)、7.03(d，J = 8Hz，2H)、4.65(t，J = 4Hz，lH)、4.45(m， 2H)、4.10(d，J = 4Hz，2H)、3.83(s，3H)、3.77(m，2H)、3.53(m，4H)、7.53(d，J = 8Hz，2H)、3.24 (d，J = 8Hz，2H)、2 ? 41 (m，2H)、1 ? 86(m，4H)。13C-NMR和DEPT 135NMR( 100MHz，DMS〇-d6，ppm)， 5:169.4(C)、161.8(C)、159.8(C)、156.9(C)、141.9(C)、140.2(C)、138.8(C)、133.5(C)、 132?9(C)、127?5(C)、127?2(CH)、126.8(CH)、126.5(CH)、114.0(CH)、72.8(CH2)、68.7(CH2)、 64.3(CH2)、60.7(CH2)、56.0(CH 3)、51.3(CH2)、51.2(CH2)、33.1(CH2)、23.5(CH2)、21.6(CH2)、 21.4(CH 2)〇ESI-MS m/z = 549([M+H] + )〇KF = 0.06%〇
[0207] 實施例8:從式(II)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH2CH2_。
[0209]在通過氮氣惰化的高壓釜中裝載實施例5的化合物（式（II)的化合物，其中1?是_ CH2CH2-，8.0克，1.0當量）和丙二醇（1，2-丙二醇，80毫升），將該容器在p = 4巴和T = 80/85°C 下用氨加壓6小時。然后將混合物轉移到圓底燒瓶中，加熱以溶解并且用水（16毫升)稀釋。 在T = 95/100°C下攪拌額外2小時后，加入更多的水(48毫升），并將溶液用阿哌沙班N-1形式 (如實施例2或4中制備的）接種。將懸浮液在T = 95/100 °C下攪拌2小時，冷卻至室溫，并用乙 醇（16毫升)稀釋。在T = 20/25°C下攪拌3小時后，過濾漿料，并用水(2X8毫升)洗滌濕濾餅。 將固體在T = 65°C下在真空下干燥8小時，提供阿哌沙班N-1形式（6.7克，0.92當量）。 lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J=12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、 3.82(s，3H)，3.61(t，J = 4Hz，2H)、3.23(t，J = 8Hz，2H)、2.41(t，J = 4Hz，2H)、1.87(m，4H)。 13C-匪R和DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S : 169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1 (C)、142?0(C)、141?9(C)、140?3(C)、133?5(C)、133?1(C)、127.3(C)、126.8(CH)、126.5 (CH)、125.7(CH)、113.9(CH)、56.0(CH3)、51.3(CH2)、33.1(CH2)、23.5(CH2)、21.5(CH2)、21.4 (OfchESI-MS 111/2 = 460([]\1+11] + )。肝=0.08%。
[0210] 實施例9 :從式（II)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH(CH3)2CH2-和- ch2ch(ch3)-〇
[0212] 在通過氮氣惰化的高壓釜中裝載實施例6的化合物(式(II)的化合物，其中R是-CH (CH3)2CH 2-和-CH2CH(CH3)-，11克，1.0當量)和丙二醇（1，2-丙二醇，100毫升），將該容器在p =4巴和T = 80/85°C下用氨加壓6小時。然后將混合物轉移到圓底燒瓶中，加熱以溶解并用 水(20毫升)稀釋。在T = 95/100°C下攪拌額外2小時后，加入更多的水(60毫升），并將溶液用 阿哌沙班N-1形式接種。將懸浮液在T = 95/100 °C下攪拌2小時，冷卻至室溫，并用乙醇(20毫 升)稀釋。在T = 20/25°C下攪拌3小時后，過濾漿料，并用水(2X10毫升)洗滌濕濾餅。將固體 在T = 65°C下在真空下干燥8小時，提供阿哌沙班N-1形式(8.6克，0.88當量）p.237°C。 1H-NMR(400MHz,DMS0-d6,ppm),8：7.74(saH)^7.53(dJ=12Hz,2H)^7.47(saH)^7.37(dJ = 8Hz，2H)、7.30(d，J=12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)， 3.61(^ = 4抱，21〇、3.23(^ = 8抱，21〇、2.41(^ = 4抱，21〇、1.87(111，41〇。13(：-匪1?和 DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S : 169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、 141?9(C)、140?3(C)、133?5(C)、133?1(C)、127?3(C)、126.8(CH)、126.5(CH)、125.7(CH)、 113.9(0〇、56.0(013)、51.3(012)、33.1(012)、23.5(012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/ 2 = 460([]?+11] + )。肝=0.05%。
[0213] 實施例10:從式(II)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH2CH2OCH 2CH2-〇
[0215] 在通過氮氣惰化的高壓釜中裝載實施例7的化合物（式（II)的化合物，其中1?是_ CH2CH2OCH 2CH2-，9.0克，1.0當量)和丙二醇（1，2-丙二醇，105毫升），將該容器在p = 4巴和T = 80/85°C下用氨加壓6小時。然后將混合物轉移到圓底燒瓶中，加熱以溶解并且用水(20毫 升)稀釋。在T = 95/100°C下攪拌額外2小時后，加入更多的水(60毫升），并將溶液用阿哌沙 班N-1形式接種。將懸浮液在T = 95/100°C下攪拌2小時，冷卻至室溫，并用乙醇（20毫升)稀 釋。在T = 20/25°C下攪拌3小時后，過濾漿料，并用水(2X10毫升)洗滌濕濾餅。將固體在T = 65 °C下在真空下干燥8小時，提供阿哌沙班N-1形式(6.5克，0.86當量）mp 237 °C。匪R (400MHz，DMS0-d6，ppm)，S:7.74(s，lH)、7.53(d，J=12Hz，2H)、7.47(s，lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)， 3.61(^ = 4抱，21〇、3.23(^ = 8抱，21〇、2.41(^ = 4抱，21〇、1.87(111，41〇。13(：-匪1?和 DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S : 169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、 141?9(C)、140?3(C)、133?5(C)、133?1(C)、127?3(C)、126.8(CH)、126.5(CH)、125.7(CH)、 113.9(0〇、56.0(013)、51.3(012)、33.1(012)、23.5(012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/ 2 = 460([]?+11] + )。肝=0.06%。
[0216] 實施例11 :從式（III)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH2CH3(W02007/ 0001385的實施例6)-比較例
[0218]在通過氮氣惰化的高壓釜中裝載阿哌沙班乙酯(65克，1.0當量)和丙二醇（1，2_丙 二醇，455毫升），將該容器在p = 4巴和T = 80/85°C下用氨加壓6小時。然后將混合物轉移到 圓底燒瓶中用丙二醇(65毫升)洗滌高壓釜，加熱以溶解并用水（130毫升)稀釋。在T = 95/ 100°C下攪拌額外2小時后，加入更多的水(390毫升），并將溶液用阿哌沙班N-1形式接種。將 懸浮液在T = 95/100 °C下攪拌2小時，冷卻至室溫，并用乙醇（130毫升)稀釋。在T = 20/25 °C 下攪拌3小時后，過濾漿料，并用水(2X130毫升)洗滌濕濾餅。將固體在T = 65°C下在真空下 干燥 8小時，提供阿哌沙班 N-1 形式(56 ? 0克，0 ? 917 當量）。111.?.237°(：。111-匪1?(4001〇^，0150-d6，ppm)，S:7.74(s，lH)、7.53(d，J=12Hz，2H)、7.47(s，lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)，3.61(t，J = 4Hz，2H)、 3.23(t，J = 8Hz，2H)、2.41(t，J = 4Hz，2H)、1.87(m，4H)<313C-Mfl^PDEPT135Mffi(100MHz， DMS〇-d6，ppm)，S:169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、141.9(C)、140.3 (C)、133?5(C)、133?1(C)、127?3(C)、126?8(CH)、126?5(CH)、125.7(CH)、113.9(CH)、56.0 (01 3)、51.3(012)、33.1(012)、23.5(012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/z = 460([M+H ] + )〇KF = 0.08%〇
[0219]實施例12:與從阿哌沙班乙酯合成阿哌沙班相比，從式（II)的化合物合成阿哌沙 班的反應速率。本發(fā)明的效果。
[0220]阿哌沙班可以從式（II)的化合物獲得（如實施例9、實施例10或者實施例11中所 述），或根據現有技術的方法，從阿哌沙班乙酯獲得（如比較例11中所述）（參見W02007/ 0001385的實施例6)。
[0221] 然而，當從式（II)的化合物例如其中R是-CH2CH(CH3)_和CH(CH 3)2CH2-的化合物 (11)(在圖1和表1中稱為丙二醇酯)開始時反應速率快得多。
[0222] 如圖1所示，采用丙二醇酯作為起始原料，在3小時內達到反應完成(轉化率>99%) (圖1中的三角形），然而在完全相同的反應條件下，至少需要6小時從阿哌沙班乙酯達到相 同的轉化值(圖1中的圓形）。
[0223] 此外，比較6小時后收集的數據，當從丙二醇酯制備阿哌沙班時，阿哌沙班的量更 高（99.25%對98.95%)。
[0224] 表1中收集了關于丙二醇酯轉化成阿哌沙班和阿哌沙班乙酯轉化成阿哌沙班的動 力學研究的詳細數據。
[0225] 表1:比較性動力學研究
[0227] 用HPLC轉化率表示數據。
[0228] 實施例13:用于鑒定和定量式（II)的化合物的HPLC方法，其中R是-CH(CH3)2CH 2-(同分異構體A)和-CH2CH(CH3)-(同分異構體B)，它們是典型的過程中間體和雜質。
[0229] 如實施例10中所提到的，式（II)的化合物，特別是其中R是-CH2CH(CH 3)-和-CH (CH3)2CH2-的式（II)的化合物，也是在通過上述實施例中描述的方法獲得的分離的阿哌沙 班產物中發(fā)現的典型的雜質。
[0230] 可以通過下面的HPLC方法鑒定和監(jiān)測該物質：
[0231] 色譜條件： 色譜柱： XIMdge .C:18_ 15:0x.4J_ 毫米 3_..5 微米 色譜柱溫度： 40V 流動相A:: 水M:miQ/甲醇_/10 流動相B: :乙腈/甲醇_/10 梯度： 時側（分鐘）％A %B Q 83,5 16.5 20 5.5 94.5
[0232] 25. 5.5 94.5 后運行時間: 7分鐘 流速： 1.0毫升/分鐘 檢測器: 紫外252納米 注射體積： 5微升 運行時間： 25:分鐘 樣品稀釋液： 二氯甲烷/乙醇/水1:5:4
[0233] 應用上述的條件，預期的保留時間如下所示：
[0235]式(II)的化合物轉化為阿哌沙班的量以面積百分比來確定。
【主權項】
1. 用于通過式（II)的化合物的酷胺化反應制備式（I)的阿贓沙班和其溶劑合物或者水 合物的方法：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(r1〇 ) nRi-，其中R1是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數。2. 根據權利要求1所述的方法，其中所述酷胺化反應利用無水氨、氨水或者錠鹽進行。3. 根據權利要求1~2任一項所述的方法，其中所述酷胺化反應在二醇溶劑中進行。4. 根據權利要求1~3任一項所述的方法，其中所述酷胺化反應在大約3小時內、在80°C 和90°C之間的溫度下進行。5. 根據權利要求1~4任一項所述的方法，其還包括利用式（III)的化合物的醋交換反 應制備式(II)的化合物的步驟：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(Ri〇) nRi-，其中Ri是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數，其中R2是直鏈或者支鏈Ci-C6烷基。6. 根據權利要求5所述的方法，其中所述醋交換反應在憐酸氨二鐘或化H(X)3存在下進 行。7. 根據權利要求1~6任一項所述的方法，其包括W下步驟： a) 式(III)的化合物的醋交換反應：其中R2是直鏈或者支鏈C1-C6烷基， W提供式(II)的化合物：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(Ri〇) nRi-，其中Ri是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數， b) 分離式(II)的化合物， C)式(II)的化合物的酷胺化反應：W提供式(I)的阿贓沙班。8. 根據權利要求1~7任一項所述的方法，其中式（II)的化合物的R取代基選自- C出C出-、-C出CH畑3) -、-CH畑3) C出-、-畑2)廠和-C出C出0C出C出-。9. 式(II)的化合物：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(r1〇 ) nRi-，其中R1是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數。10. 根據權利要求9所述的式（II)的化合物，其中R選自-CH2C出-、-CH2CH(C出）-、-CH (CH3) CH2-、- (C出）3-和-CH2C出 OC出 CH2-。11. 利用式（III)的化合物的醋交換反應制備根據權利要求9~10任一項所述的式(II) 的化合物的方法：其中R2是直鏈或者支鏈C2-C6烷基。12. 根據權利要求9~10任一項所述的式(II)的化合物在制備式（I)的阿贓沙班和其溶 劑合物或水合物中的應用。13. 根據權利要求9~10任一項所述的式（II)的化合物作為參比標記物或者參比標準 品在鑒定和/或定量阿贓沙班和其溶劑合物或水合物中的所述式(II)的化合物中的應用。14. 一種用于在阿贓沙班或其溶劑合物或水合物中檢測根據權利要求9~10任一項所 述的式(II)的化合物的方法，所述方法包括： a) 向阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物中加入已知量的式(II)的化合物； b) 進行步驟a)的阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物的HPLC分析； C)檢測式(I)的化合物的HPLC峰； 或， a 1)利用HPLC分析式(II)的化合物， bl)利用HPLC分析所述阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物， cl)通過比較保留時間或相對保留時間，檢測式(II)的化合物的HPLC峰。15. 用于在阿贓沙班或其溶劑合物或水合物中定量根據權利要求9~10任一項所述的 式(II)的化合物的方法，所述方法包括： i) 利用HPLC在具有未知量的式（II)的化合物的阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物 中測量與式(II)的化合物相對應的峰面積； ii) 利用HPLC測量與包含已知量的式(II)的化合物的參比標準品相對應的峰面積； iii) 比較在步驟a)中測量的面積與步驟ii)中測量的面積，確定在阿贓沙班或其溶劑 合物或水合物中式(II)的化合物的量。
【文檔編號】C07D471/04GK105849106SQ201580003432
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2015年2月18日
【發(fā)明人】埃萊娜·布拉索拉, 菲利波·托馬西
【申請人】意大利合成制造有限公司