從小薊中提取的苯乙醇苷類化合物及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及從小薊中提取的苯乙醇苷類化合物及其制備 方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 小薊(Cirsium setosum)為菊科薊屬植物，在民間俗稱為刺角芽，又名刺兒菜，富 含多種營養(yǎng)物質(zhì)。長期以來，它作為一種野菜，深受人們的喜愛。作為藥食兩用的野生植物， 小薊廣泛分布于中國大部分地區(qū)，在中歐、東歐、俄羅斯東部、日本、朝鮮等地區(qū)亦有分布。 小薊性涼，味甘、苦，歸心、肝經(jīng)，具有涼血止血，散瘀解毒消癰之功效。研究發(fā)現(xiàn)小薊中含有 黃酮類、生物堿類、三萜類和揮發(fā)油類等化學(xué)成分?，F(xiàn)代藥理研究表明小薊具有涼血止血、 抗菌消炎、利膽、利尿和強心等作用。目前，人們對小薊的化學(xué)成分研究還不夠深入，需要進 一步挖掘其有效成分，明確其藥理活性與有效成分之間的關(guān)系，為人類從天然植物中發(fā)現(xiàn) 新藥奠定理論基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種從小薊中提取的具有很好降脂活性和抗 氧化作用的苯乙醇苷類化合物，本發(fā)明還提供該化合物的制備方法。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：
[0005] 如式（I)所示的苯乙醇苷類化合物，
[0007] 式（I)苯乙醇苷類化合物的化學(xué)名為：l〃-(7S)-7-(3-甲氧基-4-羥基苯基)-7_甲 氧乙基-3〃-a-L-吡喃鼠李糖-4〃-[ (8E)-7-( 3，4，5-三羥基苯基-8-丙烯酸酯）]。
[0008] 式（I)苯乙醇苷類化合物的制備方法，包括：取干燥的小薊全株為原料，用70 % -95%乙醇回流提取2-4次，每次1-3小時，提取液過濾，合并濾液，濃縮得到總稠膏，總稠膏加 水混懸后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取2-4次，分別濃縮得到石油醚部位萃取 物、乙酸乙酯部位萃取物和正丁醇部位萃取物；正丁醇部位萃取物上大孔吸附樹脂，用 10 %-95 %乙醇進行梯度洗脫，收集40-70 %乙醇餾分，反復(fù)運用硅膠柱層析和Sephadex LH-20柱層析進行分離純化，得到（I)苯乙醇苷類化合物。
[0009] 所述的小薊全株和70 % -95 %乙醇的重量體積比為1:1 -2.5kg/L。
[0010]所述的濾液在30-50°C下低溫濃縮至無醇味得到總稠膏。
[0011]所述的總稠膏和水按照體積比1:1進行混懸。
[0012]所述的大孔吸附樹脂的型號為Diaion-IOl。
[0013]所述的40-70%乙醇餾分的分離純化得到（I)苯乙醇苷類化合物的方法為:進行第 一次硅膠柱層析分離，第一次硅膠柱層析的洗脫液為石油醚-丙酮，石油醚-丙酮的體積比 為15:1-1:2;收集石油醚-丙酮3:1餾分，進行第二次硅膠柱層析，第二次硅膠柱層析的洗脫 液為石油醚-丙酮，石油醚-丙酮的體積比為6 : 1 - 2 : 1，收集石油醚-丙酮3 : 1餾分，上 SephadexLH-20柱，用85-95%甲醇洗脫，得到式（I)苯乙醇苷類化合物。
[0014]優(yōu)選的，第一次硅膠柱層析采用100-200目硅膠;第二次硅膠柱層析采用200-300 目硅膠。
[0015] 發(fā)明人根據(jù)活性指導(dǎo)的分離方法，對式(I)化合物進行了多模型的藥理活性篩選， 藥理結(jié)果表明該化合物具有很好的降脂活性和抗氧化作用。故式（I)化合物可以應(yīng)用于制 備降脂藥物方面，尤其是制備減肥藥物方面;也可以應(yīng)用于制備抗氧化藥物，尤其是制備自 由基清除劑藥物方面；
[0016] 本發(fā)明式（I)化合物也可作為食品、藥品或化妝品原料用于生產(chǎn)食品（如保健食 品）、藥品和化妝品。
[0017] 本發(fā)明還包括一種組合物，其以式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽為活性成分 或主要活性成分，輔以輔料制成。具體可輔以食品輔料制成食品（如保健食品等）、輔以藥學(xué) 上可接受的載體制成藥品、輔以化妝品輔料制成化妝品等。
[0018] 本發(fā)明的有益效果：
[0019] 本發(fā)明依據(jù)"藥食同源"的原理，選取小薊作為研究對象，采用現(xiàn)代提取分離技術(shù)， 簡便有效地從小薊中分離純化得到一種新的苯乙醇苷類化合物，該化合物結(jié)構(gòu)新穎，具有 很好的降脂活性和抗氧化作用，這為進一步開發(fā)療效顯著、毒副作用小的新型減肥藥物和 抗氧化作用藥物奠定了重要的理論基礎(chǔ)。該化合物的提取分離工藝簡單，操作方便，節(jié)約了 成本。
【附圖說明】
[0020] 圖1為本發(fā)明化合物的提取分離流程示意圖；
[0021] 圖2為本發(fā)明化合物的偶聯(lián)相關(guān)圖。
【具體實施方式】
[0022] 下面通過【具體實施方式】對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步說明。
[0023] 實施例1
[0024]如圖1所示，取8kg干燥的小薊整株植物為原料，用70 %的乙醇（18L X 2)提取2次， 每次1.5小時，提取液過濾，合并濾液，40°C下減壓濃縮至無醇味得到總稠膏0.9kg。將所得 總稠膏和水按照體積比1:1混懸于適量水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取3次， 分別得到石油醚部分萃取物83.5g，乙酸乙酯部分萃取物185.7g，正丁醇部分萃取物 238. lg。根據(jù)前期萃取物藥理篩選結(jié)果，確定正丁醇部位萃取物為活性部位。將正丁醇部位 萃取物238. Ig上大孔吸附樹脂柱(Diaion-IOl)，依次用10%、25%、45%、95%乙醇進行梯 度洗脫，得到A、B、C、D四種餾份;然后將C餾分拌適量硅膠（100-200目）進行硅膠柱層析分 離，用石油醚-丙酮(9:1、6 :1、3:1、2:1、1:1)進行洗脫，合并石油醚-丙酮(3:1)餾分再次上 200-300目的硅膠柱、用石油醚-丙酮(4:1、3:1、2:1)依次進行洗脫，最后合并石油醚-丙酮 (3:1)餾分上Sephadex LH-20柱，用85%甲醇洗脫，進行分離純化，得到式（I)苯乙醇苷類化 物。
[0025] 實施例2
[0026]取12kg干燥的小薊整株植物為原料，用85 %的乙醇（18L X 3)提取3次，每次2小時， 提取液過濾，合并濾液，45°C下減壓濃縮至無醇味得到總稠膏1.3kg。將所得總稠膏和水按 照體積比1:1混懸于適量水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取4次，分別得到石油 醚部分萃取物110.2g，乙酸乙酯部位萃取物202.5g，正丁醇部分萃取物280.4g。根據(jù)前期萃 取物藥理篩選結(jié)果，確定正丁醇部分萃取物為活性部位。將正丁醇部位萃取物280.4g上大 孔吸附樹脂柱(Diaion-IOl)，依次用15%、30%、60%、95%乙醇進行梯度洗脫，得到A、B、C、 D四種餾份;然后將C餾分拌適量硅膠（100-200目）進行硅膠柱層析分離，用石油醚-丙酮 (12:1、8:1、5 :1、3:1、1:1)依次進行洗脫，合并石油醚-丙酮(3:1)餾分再次上200-300目的 硅膠柱、用石油醚-丙酮(5:1、3:1、2:1)進行洗脫，合并石油醚-丙酮(3:1)餾分上Sephadex LH-20柱，用90%甲醇洗脫，進行分離純化，得到式（I)苯乙醇苷類化物。
[0027] 實施例3
[0028]取15kg干燥的小薊整株植物為原料，用95 %的乙醇(20L X 4)提取4次，每次3小時， 提取液過濾，合并濾液，48°C下減壓濃縮至無醇味得得到總稠膏1.6kg。將所得總稠膏和水 按照體積比1:1混懸于適量水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取4次，分別得到石 油醚部分萃取物156.4g，乙酸乙酯部分萃取物254.2g，正丁醇部分萃取物304.7g。根據(jù)前期 粗提物藥理篩選結(jié)果，確定正丁醇部位萃取物為活性部位。將正丁醇部分萃取物304.7g上 大孔吸附樹脂柱(Diaion-IOl)，依次用20%、40%、70%、95%乙醇進行梯度洗脫，得到A、B、 C、D四種餾份;然后將C餾分拌適量硅膠（100-200目）進行硅膠柱層析分離，用石油醚-丙酮 (15:1、7:1、5:1、3:1、1:1)依次進行洗脫，合并石油醚-丙酮(3:1)餾分再次上200-300目的 硅膠柱、用石油醚-丙酮(6:1、3:1、2:1)進行洗脫，合并石油醚-丙酮(3:1)餾分上Sephadex LH-20柱，用95%甲醇洗脫，進行分離純化，得到式（I)苯乙醇苷類化物。
[0029]根據(jù)TLC、HPLC等檢測手段和化合物的波譜數(shù)據(jù)，鑒定實施例1-3所得單體化合物 (I)為同一單體化合物，其為一個苯乙醇苷類化合物。
[0030] 化合物為黃色固體（甲醇），HR-ESI-MS