從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物有效成分提取方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]靈芝是赤芝和紫芝的總稱，又稱“靈芝草”、“仙草”，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有具滋補(bǔ)強(qiáng)壯、卻病延年之功效。真菌若被直接食用一般達(dá)不到治療的功效，其有效成分通常只有經(jīng)過提取、分離純化，才能提高功效，發(fā)揮一定的藥理作用。在活性物質(zhì)制備過程中，提取是第一步，也是最為關(guān)鍵的一步，如何將有效成分最大程度的釋放出來具有非常重要的意義。熱水浸提法是提取靈芝多糖常用的方法之一。但是，傳統(tǒng)熱水浸提法存在提取時(shí)間長、溫度高、得率低的問題，為克服傳統(tǒng)水提取法的不足，近年來，出現(xiàn)了超聲或微博輔助萃取、超高壓、酶法等新的提取技術(shù)與方法，但是這些方法的提取效果也很不理想。與其它食用菌不同，靈芝子實(shí)體木質(zhì)化程度高，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，多糖一般與纖維素、木質(zhì)素通過物理或化學(xué)鍵結(jié)合在一起，采用一般的方法很難將多糖提取出來。從目前的研究結(jié)果可以看出，單純進(jìn)行水溶性靈芝多糖的提取，其提取率只有3%左右，而其余大部分的多糖都滯留在殘?jiān)?，如果直接丟棄，即造成資源浪費(fèi)，又對環(huán)境造成污染。為克服以上方法的缺陷，本發(fā)明利用亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系來消解靈芝子實(shí)體中的木質(zhì)素和纖維素，使靈芝多糖更多的釋放出來，從而大大提高靈芝多糖的提取效率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，公開了從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法。
[0004]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明通過下述技術(shù)方案得以解決。
[0005]從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法，包括以下步驟，
[0006]A.原材料預(yù)處理:對靈芝子實(shí)體進(jìn)行干燥、粉碎后，將粉碎后的靈芝子實(shí)體與水混合成混合液，靈芝子實(shí)體與水的重量比為1:20?30 ;將靈芝子實(shí)體粉碎，以便于與亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系充分反應(yīng)，更有效的將靈芝子實(shí)體中的纖維素和木質(zhì)素消解或斷裂，使更多的靈芝多糖釋放出來，大大提高多糖的提取效率。本發(fā)明將靈芝子實(shí)體干燥，以便更加準(zhǔn)確的稱取亞氯酸鈉、冰醋酸，更充分的與亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系反應(yīng)，提高多糖的提取效率。
[0007]B.亞氯酸鈉-冰醋酸處理:將混合液置于60?80°C的水浴中，加入占靈芝干重40 %的亞氯酸鈉，攪拌后，每隔1小時(shí)滴入占靈芝干重40?60 %的冰醋酸，滴入冰醋酸后進(jìn)行攪拌，按照以上方法滴入三次冰醋酸，每次滴入冰醋酸后均進(jìn)行攪拌；靈芝子實(shí)體與其它食用菌不同，靈芝子實(shí)體木質(zhì)化程度高，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，多糖一般與纖維素、木質(zhì)素通過物理或化學(xué)鍵結(jié)合在一起，采用一般的方法很難將多糖提取出來。本發(fā)明根據(jù)亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系來處理靈芝子實(shí)體，能夠?qū)⑵渲械睦w維素和木質(zhì)素消解或斷裂，使更多的靈芝多糖釋放出來，大大提高了多糖的提取效率。
[0008]放入搖床中振蕩，振蕩后離心得上清液I和沉淀物I ;
[0009]C.水提取:將步驟B所得沉淀物I與水按重量比1:20?30比例混合，經(jīng)過超聲處理后，離心得上清液II和沉淀物II;超聲處理與亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系有機(jī)結(jié)合也有利于活性多糖的溶出。
[0010]D.醇沉多糖:合并上清液I和上清液II，加入3倍體積的95%的乙醇進(jìn)行醇沉后，離心得上清液和靈芝多糖的沉淀物；靈芝多糖的沉淀物經(jīng)干燥、粉碎后得靈芝粗多糖。
[0011]作為優(yōu)選，步驟A中，對靈芝子實(shí)體進(jìn)行超微粉碎。本發(fā)明對靈芝子實(shí)體進(jìn)行超微粉碎，更有利于與亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系反應(yīng)，進(jìn)而更有效的將靈芝子實(shí)體中的纖維素和木質(zhì)素消解或斷裂，使更多的靈芝多糖釋放出來，最大化提高多糖的提取效率。
[0012]作為優(yōu)選，步驟A中，將粉碎后的靈芝子實(shí)體與蒸餾水混合成混合液。采用蒸餾水，確保提取過程不受其他因素的影響，確保提取出靈芝多糖的純度。
[0013]作為優(yōu)選，步驟B中，放入25°C的搖床中振蕩，振蕩后，在6000轉(zhuǎn)/分下離心15分鐘，得上清液I和沉淀物I。在25°C選用搖床進(jìn)行振蕩，使更多的靈芝多糖釋放出來。
[0014]作為優(yōu)選，步驟B中，放入25°C的搖床中，振蕩2小時(shí)后，離心，得上清液I和沉淀物I。在25°C選用搖床進(jìn)行振蕩2小時(shí)，不但節(jié)約了時(shí)間，減少了靈芝多糖受其他條件影響的可能性，而且使更多的靈芝多糖釋放出來。
[0015]作為優(yōu)選，步驟C中，將步驟B所得沉淀物I與蒸餾水按重量比1:20?30比例混入口 ο
[0016]作為優(yōu)選，步驟C中，將步驟Β所得沉淀物I與水按重量比1:20?30比例混合，超聲條件下處理20?30分鐘，在6000轉(zhuǎn)/分下離心15分鐘，得上清液II和沉淀物II。超聲條件下處理20?30分鐘，更有利于活性多糖的溶出。
[0017]作為優(yōu)選，超聲處理的功率為100?250W。超聲處理的功率為100?250W，更有利于活性多糖的溶出。
[0018]作為優(yōu)選，步驟D中，合并上清液I和上清液II，加入3倍體積的95%的乙醇進(jìn)行醇沉后，在4000轉(zhuǎn)/分下離心10分鐘，得上清液和靈芝多糖的沉淀物。
[0019]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為:
[0020](1)本發(fā)明采用的靈芝子實(shí)體與其它食用菌不同，靈芝子實(shí)體木質(zhì)化程度高，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，多糖一般與纖維素、木質(zhì)素通過物理或化學(xué)鍵結(jié)合在一起，采用一般的方法很難將多糖提取出來。本發(fā)明根據(jù)亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系來處理靈芝子實(shí)體，能夠?qū)⑵渲械睦w維素和木質(zhì)素消解或斷裂，使更多的靈芝多糖釋放出來，大大提高了多糖的提取效率。
[0021](2)本發(fā)明采用超聲處理與亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系有機(jī)結(jié)合也有利于活性多糖的溶出。
[0022](3)本發(fā)明高效，操作簡單，條件溫和。
[0023](4)因此本發(fā)明將氧化預(yù)處理和超聲輔助萃取有機(jī)結(jié)合來提取靈芝多糖，具有產(chǎn)量高，操作簡單等特點(diǎn)，對于挖掘靈芝的潛在價(jià)值有非常重要的意義。
【附圖說明】
[0024]圖1是本發(fā)明的流程圖。
[0025]圖2是未處理靈芝粉末的掃描電鏡圖(2000倍)。
[0026]圖3是氧化處理和超聲提取后沉淀物II的掃描電鏡圖(2000倍)。
【具體實(shí)施方式】
[0027]實(shí)施例1
[0028]從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法，如圖1所示，包括以下步驟，
[0029]A.原材料預(yù)處理:對靈芝子實(shí)體進(jìn)行干燥、粉碎后，將粉碎后的靈芝子實(shí)體與水混合成混合液，靈芝子實(shí)體與水的重量比為1:20 ；
[0030]B.亞氯酸鈉-冰醋酸處理:將混合液置于60°C的水浴中，加入占靈芝干重40 %的亞氯酸鈉，攪拌后，每隔1小時(shí)滴入占靈芝干重40%的冰醋酸，滴入冰醋酸后進(jìn)行攪拌，按照以上方法滴入三次冰醋酸，每次滴入冰醋酸后均進(jìn)行攪拌；
[0031]放入搖床中振蕩，振蕩后離心得上清液I和沉淀物I ;
[0032]C.水提取:將步驟B所得沉淀物I與水按重量比1:20比例混合，經(jīng)過超聲處理后，離心得上清液II和沉淀物II ；
[0033]D.醇沉多糖:合并上清液I和上清液II，加入3倍體積的95%的乙醇進(jìn)行醇沉后，離心得上清液和靈芝多糖的沉淀物；靈芝多糖的沉淀物經(jīng)干燥、粉碎后得靈芝粗多糖。
[0034]步驟A中，對靈芝子實(shí)體進(jìn)行超微粉碎。將粉碎后的靈芝子實(shí)體與蒸餾水混合成混合液。
[0035]步驟B中，放入25°C的搖床中，振蕩2小時(shí)后，在6000轉(zhuǎn)/分下離心15分鐘，得上清液I和沉淀物I ;
[0036]步驟C中，將步驟B所得沉淀物I與蒸餾水按重量比1:20?30比例混合，超聲條件下處理20?30分鐘，在6000轉(zhuǎn)/分下離心15分鐘，得上清液II和沉淀物II。超聲處理的功率為100?250W。
[0037]步驟D中，合并上清液I和上清液II，加入3倍體積的95%的乙醇進(jìn)行醇沉后，在4000轉(zhuǎn)/分下離心10分鐘，得上清液和靈芝多糖的沉淀物。靈芝多糖的收率為10.87%。
[0038]圖3與圖2相比，靈芝子實(shí)體經(jīng)亞氯酸鈉-冰醋酸氧化體系和超聲處理處理后，靈芝子實(shí)體組織表面粗糙凹陷，結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不規(guī)則狀，多空洞，斷層較多；能夠?qū)⑵渲械睦w維素和木質(zhì)素消解或斷裂，能夠使更多的靈芝多糖釋放出來。
[0039]實(shí)施例2
[0040]從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法，如圖1所示，包括以下步驟，
[0041]A.原材料預(yù)處理:對靈芝子實(shí)體進(jìn)行干燥、粉碎后，將粉碎后的靈芝子實(shí)體與水混合成混合液，靈芝子實(shí)體與水的重量比為1:30 ；
[0042]B.亞氯酸鈉-冰醋酸處理:將混合液置于80°C的水浴中，加入占靈芝干重40 %的亞氯酸鈉，攪拌后，每隔1小時(shí)滴入占靈芝干重60%的冰醋酸，滴入冰醋酸后進(jìn)行攪拌，按照以上方法滴入三次冰醋酸，每次滴入冰醋酸后均進(jìn)行攪拌；
[0043]放入搖床中振蕩，振蕩后離心得上清液I和沉淀物I ;
[0044]C.水提取:將步驟B所得沉淀物I與水按重量比1:30比例混合，經(jīng)過超聲處理后，離心得上清液II和沉淀物II ；
[0045]D.醇沉多糖:合并上清液I和上清液II，加入3倍體積的95%的乙醇進(jìn)行醇沉后，離心得上清液和靈芝多糖的沉淀物；靈芝多糖的沉淀物經(jīng)干燥、粉碎后得靈芝粗多糖。靈芝多糖的收率為10.19%。
[0046]步驟A中，對靈芝子實(shí)體進(jìn)行超微粉碎。將粉碎后的靈芝子實(shí)體與蒸餾水混合成混合液。
[0047]步驟B中，放入25°C的搖床中，振蕩2小時(shí)后，在6000轉(zhuǎn)/分下離心15分鐘，得上清液I和沉淀物I ;
[0048]步驟C中，將步驟B所得沉淀物I與蒸餾水按重量比1:20?30比例混合，超聲條件下處理30分鐘，在6000轉(zhuǎn)/分下離心15分鐘，得上清液II和沉淀物II。超聲處理的功率為250W。
[0049]步驟D中，合并上清液I和上清液II，加入3倍體積的95%的乙醇進(jìn)行醇沉后，在4000轉(zhuǎn)/分下離心10分鐘，得上清液和靈芝多糖的沉淀物。
[0050]實(shí)施例3
[0051]從靈芝子實(shí)體中提取靈芝多糖的方法，如圖1所示，包括以下步