一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物加工科學領(lǐng)域，特別是一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]原花青素(Procyanidins，簡稱0PC)又被稱為低聚黃燒酮類，是一種新型高效抗氧化劑，是目前為止所發(fā)現(xiàn)的最強效的自由基清除劑，具有非常強的體內(nèi)活性。實驗證明，OPC的抗自由基氧化能力是維生素E的50倍，維生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分鐘即可達到最高血液濃度，代謝半衰期達7小時之久。
[0003]原花青素是自然界酚類化合物中最豐富的種類，原花青素因在酸介質(zhì)下發(fā)生典型氧化降解反應產(chǎn)生有色的花青素而得名。在各類原花青素中二聚體是分布最廣、研究最多的一類原花青素。國內(nèi)外已經(jīng)報道了很多關(guān)于原花青素的藥理學作用，例如清除自由基、強抗氧化性、抗腫瘤以及抗動脈硬化等功能；原花青素也已經(jīng)用來防止糖尿病患者白內(nèi)障手術(shù)后的并發(fā)癥；此外原花青素在植物防御捕食者和微生物機理方面也起到了重要作用。鑒于原花青素具有如此廣泛的作用，其提取方法也受到了國內(nèi)外研究人員的極大關(guān)注。傳統(tǒng)提取原花青素主要采用有機溶劑浸提、超濾反滲透分離和樹脂吸附等方法。
[0004]在現(xiàn)有技術(shù)中，申請?zhí)枮?00410053240的中國專利申請公開了一種名為“一種高含量原花青素的制備方法”的專利文獻，該方法以葡萄籽為起始原料，經(jīng)溶劑提取、柱層析分離和溶劑沉淀過程得到高含量的原花青素。溶劑粗提物的原花青素含量約為50%，經(jīng)大孔吸附樹脂柱層析精制將原花青素含量提高到80%以上，最后經(jīng)一次溶劑沉淀可以將原花青素含量提高到95%以上。申請?zhí)枮镃N03117429.9的中國專利申請公開了一種名為“一種分離提取松樹皮低聚體原花青素的方法”，該方法的生產(chǎn)工藝流程為:原藥材一前處理一提取一回收溶媒、濃縮一固液分離一濃縮一高效逆流萃取一濃縮一干燥一滅菌、包裝，其中采用水為提取溶媒，乙酸乙酯為萃取溶媒。申請?zhí)枮镃N02144708.X的中國專利公開了一種名為“一種葡萄籽中原花青素低溫提取方法”，該方法以葡萄籽為原料，采用甲醇、正丁醇與鹽酸混合溶液提取，加入濃鹽酸，使提取液中酸重量濃度為0.1?0.8%，過濾，回收溶劑中甲醇、正丁醇，水液用氯仿、正丁醇萃取，回收溶劑氯仿、正丁醇，水液低溫沉降，沉降溫度為O?-20 °C，干燥得成品。
[0005]以上幾種方法存在以下幾點缺陷:(I)大孔樹脂吸附之前，未經(jīng)過除雜，這樣雜質(zhì)容易堵塞樹脂，造成樹脂污染，原花青素吸附量下降；(2)適用濃鹽酸、甲醇等有害物質(zhì)，不利于原花青素在食品、醫(yī)藥、化妝品中的應用；(3)有些條件不容易達到，如低溫；(4)這些方法普遍存在著工藝復雜、使用有機溶劑、分離效率低以及產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等問題；(5)上述原花青素的提取方法均未采用酶制劑，影響原花青素的提取率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有提取方法的不足，提出一種利用酶制劑結(jié)合溶劑從薔薇紅景天中提取原花青素的方法。此方法所得到的原花青素產(chǎn)品可用于醫(yī)藥保健及化妝品等行業(yè)。
[0007]本發(fā)明的一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法，原料為薔薇紅景天，試劑有果膠酶(30000IU)，纖維素酶(15000IU)，95%乙醇(食品級)，檸檬酸(食品級)，磷酸氫二鈉(食品級)。
[0008]本發(fā)明的一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法，由以下步驟組成:
(1)備料:將薔薇紅景天進行恒溫減壓干燥，粉碎稱量后，40目過篩，得到原料干粉備用；
(2)配制緩沖溶液:將0.lmol/L檸檬酸溶液與0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液按1:1.5?2的體積比混合，再加水稀釋2倍，配制成緩沖溶液:
(3)配制酶液:混合緩沖溶液、果膠酶和纖維素酶，并充分攪拌使其完全溶解，從而形成均勻的酶液；緩沖溶液的用量按原料干粉重量(kg):緩沖溶液體積(L)=1: 15?30的比例計算果膠酶和纖維素酶的用量為每L的緩沖溶液加入0.1?O: 3g果膠酶與0.1?0.3g纖維素酶；
(4)投料:按原料干粉重量(kg):緩沖溶液體積(L)=1: 15?30的比例，將原料干粉加入酶液中；
(5)酶解:將原料干粉與酶液攪拌均勻后，在50?55°C的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3-4h，生成酶解液和殘渣的混合物；
(6)提取:按每kg原料干粉加入15?30L的75?95%乙醇的方法，將75?95%乙醇加入上述酶解液和殘渣混合物中，在60?65°C條件下提取2?3h，經(jīng)過濾，得到提取液；
(7)成品:置提取液于60?70°C的烘箱中烘至恒重，得到原花青素。
[0009]本發(fā)明的一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法，以薔薇紅景天為主要原料，采用酶制劑結(jié)合溶劑提取原花青素，其優(yōu)點是原青花素產(chǎn)品安全性好、質(zhì)量佳，原青花素提取率較醇提取法高30?40%，酶制劑的用量少，而且工藝簡單，操作方便，效率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。使用果膠酶和纖維素酶可以破壞植物原料中以纖維素為主的細胞壁結(jié)構(gòu)及其細胞間相連的果膠物質(zhì)，使提取傳質(zhì)阻力減小，使內(nèi)容物原青花素成分易于溶出。乙醇溶液作為醇溶性原青花素的提取溶劑。檸檬酸?磷酸緩沖溶液起到調(diào)節(jié)溶液PH值的作用。按本發(fā)明的方法配制的緩沖溶液，經(jīng)檢測其pH=6，可以保證酶制劑作用的最佳效果。
[0010]具體實施例:為了充分公開本發(fā)明的一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法，下面結(jié)合實施例加以說明。
[0011]實施例:一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法取采收期的薔薇紅景天為原料，提取方法包括以下步驟:
(I)置新鮮的薔薇紅景天于65°c烘箱中烘干，用高速組織搗碎機粉碎，40日過篩，得到原料干粉備用。
[0012](2)取0.lmol/L檸檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液320ml，混合并稀釋定容至1000ml，配制成緩沖溶液。
[0013](3)取250ml的緩沖溶液，加入0.05g果膠酶與0.075g纖維素酶，攪拌使其完全溶解，形成均勻的酶液。
[0014](4)在上述的酶液中加入1g的原料干粉。
[0015](5)攪拌均勻后于50°C的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3h，生成酶解液和殘渣的混合物。
[0016](6)在酶解液和殘渣的混合物中加入250ml95%乙醇，于60°C條件下提取2h，經(jīng)過濾得提取液。
[0017](7)置提取液于65°C的烘箱中烘至恒重，得到原花青素。
【主權(quán)項】
1.一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法，其特征在于由以下步驟組成: (1)備料:將薔薇紅景天進行恒溫減壓干燥，粉碎稱量后，40目過篩，得到原料干粉備用； (2)配制緩沖溶液:將0.lmol/L檸檬酸溶液與0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液按1:1.5?2的體積比混合，再加水稀釋2倍，配制成緩沖溶液； (3)配制酶液:混合緩沖溶液、果膠酶和纖維素酶，并充分攪拌使其完全溶解，從而形成均勻的酶液；緩沖溶液的用量按原料干粉重量(kg):緩沖溶液體積(L)=1: 15?30的比例計算果膠酶和纖維素酶的用量為每L的緩沖溶液加入0.1?O: 3g果膠酶與0.1?0.3g纖維素酶； (4)投料:按原料干粉重量(kg):緩沖溶液體積(L)=1: 15?30的比例，將原料干粉加入酶液中； (5)酶解:將原料干粉與酶液攪拌均勻后，在50?55°C的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3-4h，生成酶解液和殘渣的混合物； (6)提取:按每kg原料干粉加入15?30L的75?95%乙醇的方法，將75?95%乙醇加入上述酶解液和殘渣混合物中，在60?65°C條件下提取2?3h，經(jīng)過濾，得到提取液； (7)成品:置提取液于60?70°C的烘箱中烘至恒重。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從薔薇紅景天提取原花青素的方法，其特征在于由以下步驟組 成: (1)置新鮮的薔薇紅景天于65°C烘箱中烘干，用高速組織搗碎機粉碎，40目過篩，得到原料干粉備用； (2)取0.lmol/L檸檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液320ml，混合并稀釋定容至1000ml，配制成緩沖溶液； (3)取250ml的緩沖溶液，加入0.05g果膠酶與0.075g纖維素酶，攪拌使其完全溶解，形成均勻的酶液； (4)在上述的酶液中加入1g的原料干粉； (5)攪拌均勻后于50°C的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3h，生成酶解液和殘渣的混合物； (6)在酶解液和殘渣的混合物中加入250ml95%乙醇，于60°C條件下提取2h，經(jīng)過濾得提取液； (7)置提取液于65°C的烘箱中烘至恒重。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種薔薇紅景天原花青素的制備方法，該方法以薔薇紅景天根莖為原料，先將其粉碎、過篩、酶解、提取和干燥。利用本發(fā)明的方法制備的原花青素，產(chǎn)品安全性好、質(zhì)量佳，酶制劑的用量少，原花青素提取率較醇提取法高30-40%，而且工藝簡單，操作方便，效率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。得到的原花青素產(chǎn)品，可應用于天然色素食品添加劑及具有抗氧化作用的醫(yī)藥保健品原料。
【IPC分類】C07D311/62
【公開號】CN105153097
【申請?zhí)枴緾N201510667799
【發(fā)明人】閔成軍, 鄧小玲, 寧成勇
【申請人】重慶都好生物科技有限公司
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年10月16日