一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體是指一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]布氏白僵菌又名卵胞白僵菌，是一種重要的昆蟲病原真菌，能夠寄生7目70多種昆蟲。多年來，我國(guó)用布氏白僵菌防治農(nóng)林重要昆蟲如馬尾松松毛蟲、象甲、天牛等，已獲得較好的技術(shù)效果。有研究表明，在田間每平方米土壤以101°孢子處理，能造成次年害蟲流行病，而且真菌在蟲尸和土壤中的宿存保證了對(duì)一代害蟲的侵染，從而維持其在田間的特效性，因而布氏白僵殺蟲劑是目前防治地下害蟲、發(fā)展無公害生產(chǎn)的首選生物藥劑，在防治林業(yè)害蟲方面，布氏白僵菌粉劑，已被大面積推廣使用。真菌的大量培養(yǎng)生產(chǎn)是滿足田間應(yīng)用的前提，但迄今仍無成熟的白僵菌殺蟲劑產(chǎn)品，也缺乏高技術(shù)的工業(yè)化生產(chǎn)。
[0003]基于此，研究并設(shè)計(jì)了一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于:提供一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，該培養(yǎng)基為布氏白僵菌菌株的生長(zhǎng)和分生孢子的生產(chǎn)提供了良好的營(yíng)養(yǎng)和空間環(huán)境。
[0005]本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):提供一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3-5mg/l，蛋白胨l-5mg/l，酵母粉l_5mg/l，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比，黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10。
[0006]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3mg/l，蛋白胨lmg/1，酵母粉lmg/1，溶解溶劑為水。
[0007]本發(fā)明還提供了一種提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)3-10天。
[0008]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，所述不銹鋼托盤為經(jīng)過滅菌處理有網(wǎng)眼結(jié)構(gòu)的不銹鋼托盤。
[0009]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，所述液固接種比為1.5:10。
[0010]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，所述液固接種比為0.5:10。
[0011]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，所述培養(yǎng)時(shí)間為8天。
[0012]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，培養(yǎng)前三天置于黑暗環(huán)境中，培養(yǎng)后五天置于光照條件下。
[0013]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，培養(yǎng)基含水率為60%。
[0014]進(jìn)一步地，為了更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，還包括以下技術(shù)特征，培養(yǎng)基含水率為25%。
[0015]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果:
(I)本發(fā)明通過設(shè)置固體培養(yǎng)基，在大米中加入稻殼作載體，稻殼能增加透氣性，提高大米的營(yíng)養(yǎng)率，通過添加黃粉蟲糞，增加菌物生長(zhǎng)所需的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和微量元素，為菌株的生長(zhǎng)和分孢子的生產(chǎn)提供了良好的營(yíng)養(yǎng)和空間環(huán)境。
[0016](2)本發(fā)明所采用的培養(yǎng)基培養(yǎng)方法，可使稻殼和黃粉蟲糞變廢為寶，降低培養(yǎng)成本，又能增加孢子產(chǎn)量，縮短生產(chǎn)周期，為進(jìn)一步降低真菌殺蟲劑生產(chǎn)總成本提供一種新的途徑。
【具體實(shí)施方式】
[0017]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)說明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0018]實(shí)施例1:
本實(shí)施例中，一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3mg/l，蛋白胨lmg/1，酵母粉lmg/1，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比為:黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10，溶劑為水。將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶中，溫度25°C，180r/min，搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)8天，培養(yǎng)前三天置于黑暗環(huán)境中，培養(yǎng)后五天置于光照條件下。
[0019]實(shí)施例2:
本實(shí)施例中，一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖4mg/l，蛋白胨2mg/l，酵母粉2mg/l，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比，黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10，將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)10天，培養(yǎng)前三天置于黑暗環(huán)境中，培養(yǎng)后7天置于光照條件下。
[0020]實(shí)施例3:
本實(shí)施例中，一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖5mg/l，蛋白胨4mg/l，酵母粉2mg/l，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比為:黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10，將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min，搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，液固接種比為0.5:10，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)3天。
[0021]實(shí)施例4:
本實(shí)施例中，一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖5mg/l，蛋白胨4mg/l，酵母粉2mg/l，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10，將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，液固接種比為1.5:10，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)3天。
[0022]實(shí)施例5:
本實(shí)施例中，一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3mg/l，蛋白胨lmg/1，酵母粉lmg/1，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10，溶劑為水。將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min，搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)基含水率為60%，培養(yǎng)8天，培養(yǎng)前三天置于黑暗環(huán)境中，培養(yǎng)后五天置于光照條件下。
[0023]實(shí)施例6:
本實(shí)施例中，一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3mg/l，蛋白胨lmg/1，酵母粉lmg/1，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10，溶劑為水。將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)基含水率為25%，培養(yǎng)8天，培養(yǎng)前三天置于黑暗環(huán)境中，培養(yǎng)后五天置于光照條件下。
[0024]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非對(duì)本發(fā)明做任何形式上的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，其特征在于，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3-5mg/l，蛋白胨l-5mg/l，酵母粉l-5mg/l，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比，黃粉蟲糞:稻殼:大米為0.5:1:10。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下:葡萄糖3mg/l，蛋白胨lmg/1，酵母粉lmg/1，溶解溶劑為水。3.一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于:將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于100ml三角瓶，溫度25°C，180r/min搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將固體培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)3-10天。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述不銹鋼托盤為經(jīng)過滅菌處理的網(wǎng)眼結(jié)構(gòu)不銹鋼托盤。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述液固接種比為1.5:10o6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述液固接種比為0.5:10ο7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述培養(yǎng)時(shí)間為8天。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，培養(yǎng)前三天置于黑暗環(huán)境中，培養(yǎng)后五天置于光照條件下。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，培養(yǎng)基含水率為60%。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于，培養(yǎng)基含水率為25%。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利于提高布氏白僵菌產(chǎn)孢量的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組分及組分含量如下：葡萄糖3-5mg/l，蛋白胨1-5mg/l，酵母粉1-5mg/l，溶解溶劑為水，所述固體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量比，黃粉蟲糞：稻殼：大米為0.5：1：10，將真菌孢子均勻接種于液體培養(yǎng)基中，置于1000ml三角瓶，溫度25℃，180r/min，搖床培養(yǎng)96h，得到種子培養(yǎng)液，將種子培養(yǎng)液接種于固體培養(yǎng)基中，將培養(yǎng)基置于不銹鋼托盤中，培養(yǎng)3-10天，本發(fā)明所采用的培養(yǎng)基培養(yǎng)方法，可使稻殼和黃粉蟲糞變廢為寶，降低培養(yǎng)成本，又能增加孢子產(chǎn)量，縮短生產(chǎn)周期。
【IPC分類】C12R1/645, C12N3/00
【公開號(hào)】CN105087458
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510486540
【發(fā)明人】周潔
【申請(qǐng)人】成都易創(chuàng)思生物科技有限公司
【公開日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2015年8月11日