tion 1)中完成。操作流程如下：
[0035] SI L按照表2配制好反應(yīng)體系混合液（除了 2 μ L DNA模板），分裝于2ml滅菌離 心管中，每管大于0. 5ml，置于制冷保存的載物架中。
[0036] S12.將原態(tài)微生物油氣與水合物勘探工作站（isMOST Station 2)提取和純化的 帶核酸樣品的深孔板一起置于載物架中，作為DNA模板。
[0037] S13.執(zhí)行原態(tài)微生物油氣與水合物勘探工作站（isMOST Station 1)設(shè)定的程 序，將建立PCR反應(yīng)體系所需的混合試劑和2 μ L DNA模板依次加入對(duì)應(yīng)的、新的深孔板中， 即完成PCR反應(yīng)體系的配置。
[0038] 后續(xù)步驟參照文獻(xiàn)（邵明瑞等，2013,三種油氣指示菌定量PCR方法的建立及其 在油氣田土壤中的初步應(yīng)用，生物技術(shù)通報(bào)，第4期，172-178)進(jìn)行操作；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用 LightCycler 480 Software 1.5. 0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，即可獲得樣品中甲燒氧化菌 的豐度。
[0039] 本發(fā)明的有益效果：
[0040] 基于本發(fā)明，可以獲得以下有益效果：
[0041] (1)使氣態(tài)烴氧化菌及其關(guān)聯(lián)菌類的核酸提取與純化步驟實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；
[0042] 基于科學(xué)分析結(jié)合大量?jī)?yōu)化實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，建立氣態(tài)烴氧化菌及其關(guān)聯(lián)菌類核酸 的最佳提取和純化流程，根據(jù)其最佳核酸提取和純化流程，通過(guò)多通道準(zhǔn)確移液、抗懸滴、 機(jī)械臂和軟件控制等技術(shù)，實(shí)現(xiàn)土壤和/或沉積物中核酸提取和純化步驟的自動(dòng)化。
[0043] (2)使氣態(tài)烴氧化菌及其關(guān)聯(lián)菌類特異基因 PCR體系的配制實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；
[0044] 通過(guò)多通道準(zhǔn)確移液、抗懸滴、機(jī)械臂和軟件控制等技術(shù)，精確控制完成氣態(tài)烴氧 化菌及其關(guān)聯(lián)菌類特異基因的熒光定量PCR體系所需的各試劑的準(zhǔn)確用量，實(shí)現(xiàn)PCR體系 配制的自動(dòng)化，減少手工操作時(shí)的人為因素造成的誤差。
[0045] (3)進(jìn)一步地，層流罩的設(shè)計(jì)保證核酸提取等操作步驟在潔凈環(huán)境中運(yùn)行，一方面 確保無(wú)外界污染的影響和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，另一方面將可揮發(fā)的試劑進(jìn)行回收，保證操 作人員的安全和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔。
[0046] 總結(jié)來(lái)說(shuō)，突出的有益效果在于：（1)解決了豐度很低、對(duì)油氣與水合物具有指示 意義的、專性或兼性微生物復(fù)雜樣品的豐度檢測(cè)，數(shù)據(jù)可靠性高；（2)本發(fā)明基于對(duì)油氣與 水合物具有指示意義的氣態(tài)烴氧化菌的多種指標(biāo)的檢測(cè)，可很好地適用于在復(fù)雜多樣的勘 探區(qū)進(jìn)行油氣與水合物勘探；（3)樣品的處理效率非常高，周期短，成本降；(4)自動(dòng)化處 理，消除了多種影響因素，減少數(shù)據(jù)波動(dòng)，有效避免在分析測(cè)定流程中引入的人為誤差；（5) 整個(gè)檢測(cè)流程通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件控制，檢測(cè)流程可以追溯，可實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)誤差的統(tǒng)一校正。
【附圖說(shuō)明】
[0047] 圖1本發(fā)明機(jī)械臂的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0048] 圖2本發(fā)明的移液原理圖。
[0049] 圖3本發(fā)明所述移液通道上設(shè)置的移液模塊實(shí)物圖。
[0050] 圖4用本發(fā)明分析方法檢測(cè)海洋沉積物平行樣中細(xì)菌的PCR擴(kuò)增電泳圖。
[0051] 圖5手工處理陸地土壤樣品中細(xì)菌的PCR擴(kuò)增的電泳圖，其中a:CTAB_酚氯仿法； b:試劑盒法。
[0052] 1-機(jī)械臂，2-移液通道，3-移板機(jī)械手，4-納升點(diǎn)樣及96或384通道，5-活塞， 6-套筒，7-壓力傳感器，8-空氣柱，9-液體。
【具體實(shí)施方式】
[0053] 下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。本發(fā)明裝置和系統(tǒng)中最大的發(fā)明 點(diǎn)在于優(yōu)化和整合了現(xiàn)有常規(guī)的其他領(lǐng)域的相關(guān)技術(shù)，解決了在進(jìn)行微生物油氣與水合物 勘探的樣品分析檢測(cè)時(shí)手工操作所存在的弊端。一些部件以及部件之間的連接關(guān)系可以參 照相關(guān)領(lǐng)域成熟的技術(shù)予以實(shí)現(xiàn)，因此并不在此一一贅述，或者因此限定本發(fā)明范圍。
[0054] 實(shí)施例1
[0055] 本實(shí)施例提供一種原態(tài)微生物油氣與水合物勘探技術(shù)的自動(dòng)化樣品處理裝置，包 括自動(dòng)液體處理裝置和核酸純化設(shè)備；
[0056] 所述自動(dòng)液體處理裝置對(duì)樣品、反應(yīng)試劑的自動(dòng)化加樣、配制和處理，并通過(guò)整合 各種終端分析檢測(cè)設(shè)備將整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程置于無(wú)人操作的環(huán)境下全自動(dòng)運(yùn)行并給出結(jié)果。優(yōu) 選地，所述自動(dòng)液體處理裝置由四個(gè)部分的結(jié)構(gòu)組成：操作平臺(tái)、機(jī)械臂、移液通道及實(shí)驗(yàn) 用品的載架和輔助設(shè)備；所述操作平臺(tái)上設(shè)置有若干定位軌道（T)，用于固定放置各種實(shí) 驗(yàn)用品的載架。操作平臺(tái)是整個(gè)工作站的框架，為半封閉式結(jié)構(gòu)，平臺(tái)正面有可手工開(kāi)、關(guān) 的氣動(dòng)控制門。平臺(tái)上設(shè)計(jì)有很多定位軌道，不同的實(shí)驗(yàn)用品，不同的排放順序，其所需要 的載架大小也不同，會(huì)占據(jù)不同數(shù)量T的位置。按處理樣品的能力大小可將操作平臺(tái)分為 多種類型。主要類型有三種：緊湊型操作平臺(tái)：30個(gè)T，最多可放置25個(gè)SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)板 (如96孔微孔板）；通用型操作平臺(tái)：54個(gè)T，最多可放置45個(gè)SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)板（如96孔 微孔板）；延展型操作平臺(tái)：71個(gè)T，最多可放置55個(gè)SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)板（如96孔微孔板）。
[0057] 所述機(jī)械臂的結(jié)構(gòu)示意圖見(jiàn)附圖1所示，機(jī)械臂1上裝載移液工具和移板機(jī)械手 3,所述移液工具包括單個(gè)或多個(gè)獨(dú)立控制的移液通道，所述機(jī)械臂1帶動(dòng)移液通道2在X 軸方向精確移動(dòng)；移液通道2上設(shè)置若干移液模塊以及納升級(jí)的微量點(diǎn)樣模塊4。附圖3提 供了一種移液模塊的實(shí)物圖。
[0058] 優(yōu)選地，所述機(jī)械臂1上的每個(gè)移液通道2都具有獨(dú)立的動(dòng)態(tài)定位系統(tǒng)，多通道同 時(shí)操作時(shí)，每個(gè)通道可以同時(shí)在Y、Z軸進(jìn)行非統(tǒng)一、非對(duì)稱的移動(dòng)和移液，通道間距離可以 調(diào)整，滿足各種規(guī)格的樣品管或多孔板的多道同時(shí)操作。通道可直接自動(dòng)裝卸一次性吸頭 或可重復(fù)使用的針式吸頭。
[0059] 可選地，所述機(jī)械臂可以為2~6個(gè)，不同機(jī)械臂同時(shí)執(zhí)行不同的移液任務(wù)。
[0060] 進(jìn)一步地，機(jī)械臂帶動(dòng)移液通道在X軸方向精確移動(dòng)，將吸頭精確定位。機(jī)械臂的 位移精度為±0. 1mm。機(jī)械臂上可裝載各種移液工具，如單個(gè)或多個(gè)獨(dú)立控制的移液通道， 并可提供1、2、4、8、12或16個(gè)移液通道的不同配置；對(duì)于更高通量，還可設(shè)置96通道或384 通道的移液模塊，以及納升級(jí)的微量點(diǎn)樣模塊。在裝載有移液通道的機(jī)械臂上還可同時(shí)安 裝移板機(jī)械手，而不需要額外的機(jī)械臂來(lái)控制。
[0061] 所述液體處理裝置的移液技術(shù)是基于空氣置換原理，類似于通常使用的手動(dòng)移液 器，通過(guò)通道內(nèi)活塞5的移動(dòng)來(lái)推動(dòng)空氣進(jìn)行吸液和放液的。采用這種原理移液不需要步 進(jìn)電機(jī)控制的注射栗、各種導(dǎo)管和系統(tǒng)溶液，不易產(chǎn)生工作站內(nèi)部的系統(tǒng)污染，避免了樣品 間由于系統(tǒng)污染而產(chǎn)生的交叉污染。見(jiàn)附圖2所示，附圖2中，5為活塞，6為套筒，7為壓力 傳感器，8為空氣柱，9為液體。
[0062] 所述輔助設(shè)備包括樣品振蕩裝置、孵育裝置、樣品裝載裝置、樣品編號(hào)掃描和記錄 裝置、實(shí)驗(yàn)耗材的轉(zhuǎn)移裝置、上下游設(shè)備的銜接裝置?；谒鲚o助設(shè)備的除了能夠執(zhí)行移 液操作以外，還能夠執(zhí)行很多其他的實(shí)驗(yàn)任務(wù)，如樣品的振蕩、孵育、自動(dòng)裝載和記錄帶編 號(hào)的樣品、實(shí)驗(yàn)耗材的轉(zhuǎn)移、與上下游實(shí)驗(yàn)設(shè)備的銜接等功能。
[0063] 所述核酸提取與純化設(shè)備為全自動(dòng)核酸磁珠提取與純化系統(tǒng)，工作原理是先通過(guò) 震蕩樣品，使核酸游離出來(lái)，再用大體積提取磁頭將樣品中的核酸吸住，轉(zhuǎn)移至新的離心管 中；這樣重復(fù)操作3次，就可獲得很純的核酸，為后續(xù)開(kāi)展PCR反應(yīng)體系的自動(dòng)化配置和實(shí) 時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)及其他分子生物學(xué)研究提供高純度的核酸樣品。在樣品處理過(guò)程中， 不僅獲得的核酸純度高，而且其提取效率也非常高（對(duì)于微生物豐度很低的海洋沉積物樣 品，仍然可以獲得足量的核酸供后續(xù)工作之用）。采用現(xiàn)有常規(guī)計(jì)算機(jī)技術(shù)，在所述核酸提 取設(shè)備中內(nèi)置多個(gè)核酸純化程序，通過(guò)電腦軟件控制而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作。
[0064] 實(shí)施例2
[0065] 基于本發(fā)明所述原態(tài)微生物油氣與水合物勘探技術(shù)的自動(dòng)化樣品處