一種含咖啡酰基的鞣質(zhì)衍生物及其制備工藝和應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于林業(yè)加工剩余物的次生代謝活性成分及其利用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一 種新的含咖啡酰基的鞣質(zhì)衍生物1，3-二-O-沒食子酰基-6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄 糖（l，3-di-〇-galloyl-6-〇-caffeoyl-0-D-glucoside)及其制備工藝和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 漾擤核桃（Juglans sigillata Doda)為胡桃科（Juglandanceae)胡桃屬 (Juglans)落葉喬木，主要分布在我國西南部的云南、西藏、四川及貴州的山坡和山谷地區(qū) (Wu&Raven，F(xiàn)lora of China，Vol. 4，Science Press，Beijing，1999, 283 ~284)。瀟潯核 桃樹樹高可達30米以上，其果核表面褶皺明顯，極不平滑，內(nèi)褶壁發(fā)達，取仁較難。漾濞核 桃根深，主根發(fā)達。漾濞核桃喜光，耐濕熱，不耐干冷（周成貴，林業(yè)科技開發(fā)，2004,18 (3)， 42~44)。漾濞核桃仁因膳食營養(yǎng)價值極高而一直備受推崇，其種子外殼一直被用作民間 藥物治療食道癌、胃癌、心臟癌和肺癌（Si et al，Chemistry ofNatural Compounds，2011， 47(3)，442~445)。最新研宄表明漾濞核桃種子外殼具有優(yōu)異的酪氨酸酶抑制活性（Si CL，et al，Bioresources，2014,9 (2)，2226~2236)。到目前為止，對漾濞核桃樹化學成分 的研宄主要集中在其核桃仁、核桃仁殼、果實青皮、樹干皮等部位，而且從以上諸部位中提 取分離的化合物主要是水解單寧類、縮合單寧類、α -四氫萘酮類，然而對漾濞核桃樹葉次 生代謝化學成分的研宄卻甚少（Liu et al，Helvetica Chimica Acta，2010,93 (2)，265 ~ 271 ；Si et al, Chemistry ofNatural Compounds，2011，47(3)，442 ~445 ;Si et al， Biochemical Systematics andEcology，2011，39(3)，225 ~227)〇

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種具有抗氧化活性的含咖啡酰基的鞣質(zhì)衍生物1， 3-二-0-沒食子?；?6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖（英文名為1，3-di-0-galloyl-6 -〇-caffeoyl-β -D-glucoside)〇
[0004] 本發(fā)明的另一個目的是提供從胡桃科胡桃屬中的漾濞核桃樹樹葉中制備1， 3-二-0-沒食子?；?6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖的工藝。
[0005] 本發(fā)明的第三個目的是提供1，3-二-0-沒食子?；?6-0-咖啡?；?β -D-吡喃 葡萄糖的抗氧化活性功效用途。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：
[0007] 下述結(jié)構(gòu)式的化合物：
[0008]
[0009] 從漾濞核桃樹中制備I，3-二-O-沒食子?；?6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖 的工藝，包括如下步驟：
[0010] (1)取粉碎的漾濞核桃樹葉，按質(zhì)量比為1 : 3~I : 10加入體積百分濃度為 40 %~95%的丙酮水溶液，常溫提取或加熱提取或微波輔助提取或超聲波輔助提取1~6 次，每次1~96小時，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的1 %~10%，得粗提物；
[0011] ⑵加入粗提物質(zhì)量1~5倍的水，攪拌，加入粗提物質(zhì)量1~5倍的正己烷萃取 1~5次，分離出正己烷層，將正己烷層減壓濃縮得正己烷萃取相；
[0012] (3)正己烷萃取相經(jīng)硅膠柱層析和凝膠柱層析之至少一種制備得到1，3_二-0-沒 食子?；?6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖。
[0013] 在上述1，3-二-0-沒食子?；?6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖的制備工藝步 驟中，所述漾濞核桃樹葉原料包括漾濞核桃樹的新鮮葉、落葉、干葉中的一種或幾種。
[0014] 1，3_二-0-沒食子酰基-6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖在制備抗氧化產(chǎn)品中 的應用。
[0015] 本實驗證明本發(fā)明的化合物分子式為C29H26O 17，化學名為1，3-二-0-沒食子酰 基-6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖，即 l，3-di-〇-galloyl-6-〇-caffeoyl-0 -D-glucos ide。該化合物為淡黃色，其熔點為193~195°C，旋光度為Mgi +l〇.5°(c，0.5, MeOH)。其 淠（人_腦，]^0!1):245、300、332;11?(1?1')￥_￡〇^ 13395、1676、1612;正性卩六8-]^111/2[]\1+!1] +為 647，而 m/z [M+Na] + 為 669。
[0016] 本發(fā)明的制備工藝具有操作方法簡單規(guī)范、得率高、制備成本低等特點。
[0017] 實驗證實1，3-二-0-沒食子?；?6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖對DPPH自 由基有優(yōu)異的清除效果（IC5tl值為6. 28 μ Μ)，其清除能力強于正對比組中的人工合成抗氧 化劑BHT (IC5tl值為6. 86 μ Μ)和天然抗氧化劑a -tocopherol (IC 5。值為6. 70 μ Μ)。這表明 本發(fā)明制備的1，3-二-0-沒食子酰基-6-0-咖啡?；?β -D-吡喃葡萄糖的抗氧化活性顯 著，可作為抗氧化劑應用于保健品、藥品、食品以及化妝品等行業(yè)。
【具體實施方式】
[0018] 參考下列實施例將更全面、更容易地理解本發(fā)明，給出實施例是為了更清楚地闡 明本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明。
[0019] 實施例1 :
[0020] 1，3-二-ο-沒食子?；?6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖的制備
[0021] (1)取粉碎的漾濞核桃樹葉，按質(zhì)量比為1 : 4加入體積百分濃度為60%的丙酮 水溶液，常溫提取3次，每次72小時，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的4%，得粗提物；
[0022] (2)加入粗提物質(zhì)量3倍的水，攪拌，加入粗提物質(zhì)量2倍的正己烷萃取4次，分離 出正己烷層，將正己烷層減壓濃縮得正己烷萃取相；
[0023] (3)正己烷萃取相經(jīng)硅膠柱層析制備得到1，3-二-0-沒食子?；?6-0-咖啡酰 基-β-D-吡喃葡萄糖。
[0024] 該化合物的結(jié)構(gòu)鑒定：
[0025] 由正性快原子轟擊質(zhì)譜圖譜（Positive FAB-MS)可知該化合物的m/z[M+Na]+為 669,而m/z [M+H]+為647,結(jié)合1H和13C NMR圖譜得出其分子式為C29H26O17。以1 %的三氯 化鐵乙醇溶液（質(zhì)量百分比）噴霧顯色反應時呈深綠色，表明該化合物分子中含有酚羥基 團（Imakura et al，Phytochemistry，1985, 24(1)，139 ~146)。1H NMR 譜圖數(shù)據(jù)（表 1) 中，特征質(zhì)子峰[S7.09(2H，s，H-2' &6' )、δ7· 12(2H，s，H-2" &6")]表明該