大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒?br>【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于咖啡酷奎巧酸類化合物提取領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種大孔樹脂純化紫甘馨 莖葉中咖啡酷奎巧酸類化合物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 咖啡酷奎巧酸類化合物是植物在有氧呼吸過程中經(jīng)磯酸戊糖途徑中間體合成的 一類苯丙素類化合物，它們廣泛存在于植物中，具有顯著的抗氧化活性和藥理活性，如抗 炎、抗HIV活性、抑菌、抑制多種酶活性、保肝、抑制血小板凝集等多種作用，是眾多藥材的 有效成分，并成為某些中藥制劑質(zhì)量控制的重要指標。除了藥用外，還可用作抗氧化劑應(yīng)用 于食品工業(yè)，同時還具有增香和護色作用，可用于食品和果品保鮮。
[0003] 甘馨是旋花科甘馨屬一年W生或多年生蔓生草本植物，目前甘馨的栽培已經(jīng)遍及 世界許多國家和地區(qū)，年產(chǎn)量達到1.4X108噸，是重要的糧食、飲料及工業(yè)原料。我國是世 界上甘馨栽培第一大國，占世界總產(chǎn)量的85. 9%，在我國糧食作用生產(chǎn)中總產(chǎn)排列第四位。 目前人們對葉馨葉的開發(fā)利用較少，除少量的作用為蔬菜食用外及加工成飼料外，大部分 在田間被拋棄，造成資源的嚴重浪費。
[0004] 申請人前期研究從甘馨莖葉中分離鑒定了綠原酸、4, 5-雙咖啡酷基奎寧酸、 3, 5-雙咖啡酷基奎寧酸、3, 4-雙咖啡酷基奎寧酸等咖啡酷奎巧酸類化合物及異搬皮巧等 黃酬類化合物，進一步研究表明紫馨莖葉中主要為咖啡酷奎巧酸類化合物，而黃酬類化合 物含量極低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明實施例的目的在于提供一種大孔樹脂純化紫甘馨莖葉中咖啡酷奎巧酸類 化合物的方法，旨在解決目前對葉馨葉的開發(fā)利用較少，造成資源浪費的問題，同時擴大咖 啡酷奎巧酸類化合物的天然來源。
[0006] 本發(fā)明是該樣實現(xiàn)的，一種大孔樹脂純化紫甘馨莖葉中咖啡酷奎巧酸類化合物的 方法包括：
[0007] 步驟一、紫甘馨莖葉在60°C下干燥后粉碎，取該干燥粉碎的紫甘馨莖葉用己醇提 取0. 5-1.化，過濾，所得的原料渣用相同的方法提取一次，合并提取液；
[000引步驟二、55°C真空濃縮回收己醇，得到紫甘馨莖葉提取液，調(diào)整該提取液濃度中咖 啡酷奎巧酸類化合物含量及提取液的pH;
[0009] 步驟=、將步驟二得到的提取液過大孔吸附樹脂，將大孔吸附樹脂中的雜質(zhì)水洗 洗去，再依次用洗脫劑洗脫，將得到的洗脫液分別濃縮、冷凍干燥。
[0010] 進一步，步驟一中用于提取干燥粉碎的紫甘馨莖葉的己醇的質(zhì)量為干燥粉碎的紫 甘馨莖葉質(zhì)量的5-15倍，體積分數(shù)為50-70%。
[0011] 進一步，步驟二中得到的紫甘馨莖葉提取液作為上樣液，調(diào)整該上樣液中咖啡酷 奎巧酸類化合物質(zhì)量濃度為l-3mg/ml，上樣液的抑為2-3,上樣液流速2-3BV/h，上樣體積 小于等于5BV。
[0012] 進一步，選用的樹脂為NKA-2樹脂。
[0013] 進一步，大孔吸附樹脂裝在一根垂直的層析中，步驟二中得到的上樣液流經(jīng)大孔 吸附樹脂，吸附流速為2-3BV/h。
[0014] 進一步，洗脫流速為2-3BV/h。
[0015] 進一步，洗脫劑選用體積分數(shù)為20%和40% -70%的己醇。
[0016] 紫甘馨莖葉在60°C下干燥后粉碎，取一定量的干燥原料用5-15倍質(zhì)量的50-70% 己醇在80-100°C下提取0. 5-1.化，過濾，原料渣再同法提取一次，合并提取液，55°C真空 濃縮回收己醇，得紫甘馨莖葉提取液，調(diào)整該提取液濃度至咖啡酷奎巧酸類化合物含量在 l-3mg/ml及抑2-3,上樣液流速2-3BV/h，樣體積蘭5BV為宜；洗脫條件：用5-6BV水洗至 無色，再依次用她V20%己醇、4-6BV40-70%己醇W2-3BVA流速洗脫，洗脫液分別濃縮、 冷凍干燥，可獲得兩種不同規(guī)格的產(chǎn)品；20%己醇洗脫產(chǎn)品中咖啡酷奎巧酸類化合物含量 大于20 %，40-70 %己醇洗脫產(chǎn)品中咖啡酷奎巧酸類化合物含量大于60 %，擴大了咖啡酷 奎巧酸類化合物的天然來源。
【附圖說明】
[0017] 圖1是本發(fā)明實施例提供的大孔樹脂純化紫甘馨莖葉中咖啡酷奎巧酸類化合物 的方法流程圖。
【具體實施方式】
[0018] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，W下結(jié)合實施例，對本本發(fā) 明進行進一步詳細說明。應(yīng)當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用W解釋本本發(fā)明，并不 用于限定本發(fā)明。
[0019] 下面結(jié)合附圖及具體實施例對本發(fā)明的應(yīng)用原理作進一步描述。
[0020] 如圖1所示，本發(fā)明的實施例是該樣實現(xiàn)的，一種大孔樹脂純化紫甘馨莖葉中咖 啡酷奎巧酸類化合物的方法包括：
[0021]S101、紫甘馨莖葉在60°C下干燥后粉碎，取該干燥粉碎的紫甘馨莖葉用己醇提取 0. 5-1. 5h，過濾，所得的原料渣用相同的方法提取一次，合并提取液；
[0022] S102、55°C真空濃縮回收己醇，得到紫甘馨莖葉提取液，調(diào)整該提取液濃度中咖啡 酷奎巧酸類化合物含量及提取液的pH;
[0023]S103、將步驟S102得到的提取液過大孔吸附樹脂，將大孔吸附樹脂中的雜質(zhì)水洗 洗去，再依次用洗脫劑洗脫，將得到的洗脫液分別濃縮、冷凍干燥。
[0024] 進一步，步驟S101中用于提取干燥粉碎的紫甘馨莖葉的己醇的質(zhì)量為干燥粉碎 的紫甘馨莖葉質(zhì)量的5-15倍，體積分數(shù)為50-70%。
[0025] 進一步，，步驟S102中得到的紫甘馨莖葉提取液作為上樣液，調(diào)整該上樣液中咖 啡酷奎巧酸類化合物質(zhì)量濃度為l-3mg/mU上樣液的pH為2-3,上樣液流速2-3BV/h，上樣 體積小于等于5BV。
[0026] 進一步，選用的樹脂為NKA-2樹脂。
[0027] 進一步，大孔吸附樹脂裝在一根垂直的層析中，步驟S102中得到的上樣液流經(jīng)大 孔吸附樹脂，吸附流速為2-3BV/h。
[002引進一步，洗脫流速為2-3BV/h。
[0029] 進一步，洗脫劑選用體積分數(shù)為20 %和40% -70 %的己醇。
[0030] 實施例一
[0031] 1.紫甘馨莖葉中咖啡酷奎巧酸類化合物含量檢測
[003引精密稱取純度為98%綠原酸標準品6. 17mg于25血容量瓶中，用50%己醇定容。 精密吸取上述對照品溶液0、0. 1、0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、1. 2、1. 4、1. 6mL于lOmL容量瓶中， 加入5ml的蒸饋水，搖勻，加0. 5mol/L的化lin-C溶液，搖勻后加1. 5ml20%的碳酸鋼溶 液，定容，25°C反應(yīng)化，得到不同濃度的標準品溶液，W樣品空白調(diào)零，在760nm波長處測定 吸光度，W標準品質(zhì)量（mg)為橫坐標，吸光度為縱坐標，線性回歸方程y= 4. 0976X+0. 001， R2 = 0. 993 0
[003引分別稱取l.Og不同品種紫甘馨莖、葉原料，加60%己醇溶液100ml，置90°C的水 浴鍋中回流提取比，過濾，定容至100ml，取0. 2ml樣品溶液按標樣方法顯色，在760皿波長 處測定吸光度，根據(jù)標準曲線計算樣品中的咖啡酷奎巧酸類化合物含量，結(jié)果見表1。從表 1可知，不同品種間咖啡酷奎巧酸類化合物含量具有一定的差異，同一品種的不同部位含量 具有顯著差異，葉含量顯著高于莖及葉柄。考慮到實際使用時通常為甘馨葉及其嫩莖及葉 柄，后續(xù)實驗采用4種紫甘馨莖葉混合物作為實驗原料，其中咖啡酷奎巧酸類化合物含量 為 34. 61mg/g。
[0034] 表1不同部位原料綠原酸類化合物含量的比較（n= 2)
[0035]
[0036]
【主權(quán)項】
1. 一種大孔吸附樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒?，其特征在于， 所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒òǎ? 步驟一、紫甘薯莖葉在60°c下干燥后粉碎，取干燥粉碎的紫甘薯莖葉用乙醇提取 0. 5-1. 5h，過濾，所得的原料渣用相同的方法提取一次，合并提取液； 步驟二、55°C真空濃縮回收乙醇，得到紫甘薯莖葉提取液，調(diào)整提取液濃度中咖啡?？?尼酸類化合物含量及提取液的pH ; 步驟三、將步驟二得到的提取液過大孔吸附樹脂，將大孔吸附樹脂中的雜質(zhì)水洗洗去， 再依次用洗脫劑洗脫，將得到的洗脫液分別濃縮、冷凍干燥。
2. 如權(quán)利要求1所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒?，其 特征在于，步驟一中用于提取干燥粉碎的紫甘薯莖葉的乙醇的質(zhì)量為干燥粉碎的紫甘薯莖 葉質(zhì)量的5-15倍，體積分數(shù)為50-70%。
3. 如權(quán)利要求1所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒ǎ?特征在于，步驟二中得到的紫甘薯莖葉提取液作為上樣液，調(diào)整該上樣液中咖啡?？崴?類化合物質(zhì)量濃度為l_3mg/ml，上樣液的pH為2-3,上樣液流速2-3BV/h，上樣體積小于等 于 5BV。
4. 如權(quán)利要求1所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡酰奎尼酸類化合物的方法，其 特征在于，選用的樹脂為NKA-2樹脂。
5. 如權(quán)利要求1所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒?，其 特征在于，大孔吸附樹脂裝在一根垂直的層析柱中，步驟二中得到的上樣液流經(jīng)大孔吸附 樹脂，吸附流速為2-3BV/h。
6. 如權(quán)利要求1所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒?，其 特征在于，洗脫流速為2-3BV/h。
7. 如權(quán)利要求1所述的大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒ǎ?特征在于，洗脫劑選用體積分數(shù)為20 %和40% -70 %的乙醇。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種大孔樹脂純化紫甘薯莖葉中咖啡?？崴犷惢衔锏姆椒?，紫甘薯莖葉在60℃下干燥后粉碎，取干燥原料用乙醇在80-100℃下提取0.5-1.5h，過濾，原料渣再同法提取一次，合并提取液，55℃真空濃縮回收乙醇，得紫甘薯莖葉提取液，調(diào)整該提取液濃度至咖啡?？崴犷惢衔锖吭?-3mg/ml及pH 2-3，上樣液流速2-3BV/h，樣體積≦5BV為宜；洗脫條件：用5-6BV水洗至無色，再依次用乙醇以2-3BV/h流速洗脫，洗脫液分別濃縮、冷凍干燥，可獲得兩種不同規(guī)格的產(chǎn)品：20％乙醇洗脫產(chǎn)品中咖啡酰奎尼酸類化合物含量大于20％，40-70％乙醇洗脫產(chǎn)品中咖啡酰奎尼酸類化合物含量大于60％，擴大了咖啡?？崴犷惢衔锏奶烊粊碓础?br>【IPC分類】C07C69-732, C07C67-48
【公開號】CN104829456
【申請?zhí)枴緾N201510158086
【發(fā)明人】陸英, 李覓路, 陳金華, 秦玉芝, 劉毅
【申請人】湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年4月3日