一種花生根際促生菌hs9及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及微生物，特別是一種花生根際促生菌HS9及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 砂質(zhì)潮土通透性強，通氣良好，好氣性微生物活動占優(yōu)勢，可以促進(jìn)有機(jī)質(zhì)分解， 有機(jī)質(zhì)礦質(zhì)化加快。且土壤疏松，易耕作。土壤毛管作用強，水分運行快，有"夜潮"現(xiàn)象。 適耕期也長，易立苗；但養(yǎng)分含量低，保肥性能差，作物后期易脫肥早衰。目前，該土已大部 分作耕地利用，其利用率達(dá)92. 3%，一年兩熟，一般年畝產(chǎn)糧600kg左右。今后針對性的改良 措施：因土種植，合理施用化肥，實行配方施肥；多途徑增施有機(jī)肥；實行農(nóng)田林網(wǎng)化，在保 證糧食生產(chǎn)穩(wěn)步上升的前提下，發(fā)展山藥、西瓜等經(jīng)濟(jì)作物。
[0003] 根際促生菌（Plant Growth Promoting Bacteria,簡稱PGPB)被界定為在一定條 件下有利于植物生長的自由生活在土壤、根際、根表、葉際的細(xì)菌。這些細(xì)菌能夠固氮、溶 磷、溶鐵，并產(chǎn)生植物激素，如生長素、赤霉素、細(xì)胞分裂素和乙烯。此外，它們還能提高植物 的抗逆性，包括干旱、高鹽、重金屬毒害和農(nóng)藥。因此從潮土中分離得到根際促生菌，和作物 形成共生體系，利用生物修復(fù)改善潮土，成為當(dāng)前研究的熱點，但至今未見有專用于花生的 根際促生菌的公開報導(dǎo)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種花生根際促 生菌HS9及其應(yīng)用，也就是說，本發(fā)明的一個目的是提供一種花生根際促生菌，另一個目的 是提供該根際促生菌的應(yīng)用，可有效解決將難溶性含鉀硅酸鹽轉(zhuǎn)化為可溶性鉀鹽，解有機(jī) 磷，提高肥料的利用率，促進(jìn)花生的生長和提高產(chǎn)量。
[0005] 本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，花生根際促生菌為花生根際促生菌HS9,分類命名為彎 曲芽孢桿菌/7^?s)，2014年10月31日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員 會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No. 9889。
[0006] 花生根際促生菌HS9 (CGMCC No. 9889)菌落同心圓狀，不透明，表面粗糙，不濕潤， 產(chǎn)芽孢。
[0007] 花生根際促生菌HS9的生理生化特性是：革蘭氏陽性，兼性厭氧，化能異養(yǎng)，接觸 酶陽性，M. R試驗陰性，VP試驗陽性，淀粉水解陽性，明膠水解陽性，硝酸鹽還原陽性，檸檬 酸鹽利用陰性。
[0008] 花生根際促生菌HS9培養(yǎng)時使用的主要氮源包括但不限于蛋白胨、酵母粉、丙氨 酸、硝酸鉀、硝酸銨、硫酸銨、尿素；使用的主要碳源包括但不限于葡萄糖、蔗糖、果糖、木糖、 甘露醇、乳糖、麥芽糖；使用的無機(jī)組分包括但不限于氯化鉀、氯化鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫 二鉀、磷酸三鈣、二水氯化鈣、七水合硫酸鎂、七水和硫酸亞鐵。彎曲芽孢桿菌HS9發(fā)酵可在 28~32°C，pH5~9的環(huán)境下進(jìn)行。
[0009] 所述的保藏號為CGMCC No. 9889的花生根際促生菌HS9在促進(jìn)花生生長中的應(yīng) 用； 所述的保藏號為CGMCC No. 9889的花生根際促生菌HS9在花生種植中的應(yīng)用； 所述花生根際促生菌HS9能產(chǎn)吲哚乙酸，解難溶性無機(jī)磷鹽、含磷有機(jī)物并能利用難 溶性含鉀硅酸鹽為鉀源進(jìn)行生長。
[0010] 本發(fā)明所述的花生根際促生菌HS9分泌吲哚乙酸（IAA)的能力強，達(dá)41. 53 μ g 吲哚乙酸是植物激素的一種，能夠促進(jìn)根的發(fā)育。產(chǎn)吲哚乙酸的菌種，往往附著 在植物根系或葉表面，利用植物代謝產(chǎn)生分泌物的同時產(chǎn)生IAA和少量GA3等植物激素來 影響植物的生理過程和形態(tài)變化。表現(xiàn)為直接促進(jìn)根的伸長，從而增大了與土壤中營養(yǎng)物 質(zhì)的接觸的機(jī)會；可提高植物體內(nèi)源IAA的含量；誘導(dǎo)植物防衛(wèi)基因的表達(dá)，提高植物體抗 病，抗旱等抗逆性。作為本發(fā)明的優(yōu)化方案，所述根際促生菌的發(fā)酵在pH5~6下進(jìn)行，該環(huán) 境下產(chǎn)IAA量最高。
[0011] 作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)化，所述花生根際促生菌HS9采用的碳源為葡萄糖，采用 的氮源為尿素或酵母粉或兩者的組合。利用上述碳源和氮源制得的培養(yǎng)基，培育出的根際 促生菌產(chǎn)IAA的量最高。
[0012] 本發(fā)明所述的花生根際促生菌HS9以難溶性含無機(jī)磷鹽為磷源進(jìn)行生長，并將其 轉(zhuǎn)化為可溶性磷鹽。在實驗室搖瓶條件下，所述花生根際促生菌HS9對磷酸三鈣的轉(zhuǎn)化量 達(dá)到279. 23 mg 說明HS9菌對磷酸三鈣具有溶解作用，以難溶性無機(jī)磷鹽為磷源進(jìn) 行生長，并將其轉(zhuǎn)化為可溶性磷鹽。
[0013] 本發(fā)明所述的花生根際促生菌HS9以難利用含磷有機(jī)物為磷源進(jìn)行生長，并將其 轉(zhuǎn)化為可利用磷。在實驗室搖瓶條件下，所述花生根際促生菌HS9對可溶性卵磷脂的轉(zhuǎn)化 量達(dá)到0.48 mg 說明HS9菌對可溶性卵磷脂具有分解作用，以難利用含磷有機(jī)物為 磷源進(jìn)行生長，并將其轉(zhuǎn)化為可利用磷。
[0014] 本發(fā)明所述的花生根際促生菌HS9以難溶性含鉀硅酸鹽為鉀源進(jìn)行生長，并將其 轉(zhuǎn)化為可溶性鉀鹽。在實驗室搖瓶條件下，所述花生根際促生菌HS9對鉀長石粉的轉(zhuǎn)化量 達(dá)到15. 26 mg · L'說明HS9菌對鉀長石粉具有溶解作用，以難溶性含鉀硅酸鹽為鉀源進(jìn) 行生長，并將其轉(zhuǎn)化為可溶性鉀鹽。
[0015] 本發(fā)明提供的花生根際促生菌HS9可有效將難溶性含鉀硅酸鹽轉(zhuǎn)化為可溶性鉀 鹽，提高肥料的利用率，促進(jìn)植物根系發(fā)育和對肥料的吸收，增加土壤有效鉀含量，土壤有 效鉀含量的提高也使得花生對鉀肥的利用率更高?？蓪㈦y溶性無機(jī)磷鹽和難以利用的有機(jī) 磷轉(zhuǎn)化為可利用的磷，增加土壤有效磷的含量，提高肥料的利用率，促進(jìn)植物的生長發(fā)育和 對肥料的吸收；本發(fā)明針對花生具有良好的促生長效果，高產(chǎn)的吲哚乙酸促進(jìn)花生的生長 發(fā)育和提高產(chǎn)量，有效用于花生的種植，促進(jìn)花生的生長和提高產(chǎn)量，是微生物和花生種植 上的一大創(chuàng)新。
【附圖說明】
[0016] 圖1是本發(fā)明菌株HS9的菌落圖； 圖2為不同裝液量對菌株HS9產(chǎn)IAA的影響情況圖； 圖3為不同初始pH對HS9菌株產(chǎn)IAA的影響情況圖； 圖4為不同碳源對菌株HS9產(chǎn)IAA的影響情況圖； 圖5為不同氮源對HS9菌株產(chǎn)IAA的影響情況圖； 圖6為菌株HS9對難溶性含鉀硅酸鹽的利用情況圖； 圖7為菌株HS9對有機(jī)磷的利用情況圖； 圖8為菌株HS9對難溶性無機(jī)磷的利用情況圖； 圖9為種植花生30天后接種HS9菌株對土壤IAA含量的影響情況圖。
【具體實施方式】
[0017] 以下結(jié)合具體情況對本發(fā)明的【具體實施方式】作詳細(xì)說明。
[0018] 生物材料保藏：花生根際促生菌HS9,分類命名為彎曲芽孢桿菌 /7^^5),2014年10月31日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址 為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，保藏號為CGMCC No. 9889。
[0019] 表1供試土壤基本性質(zhì)
【主權(quán)項】
1. 一種花生根際促生菌HS9,分類命名為彎曲芽孢桿菌（/7奴狀)，2014 年10月31日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.9889。
2. 權(quán)利要求1所述的保藏號為CGMCC No. 9889的花生根際促生菌HS9在促進(jìn)花生生長 中的應(yīng)用。
3. 權(quán)利要求1所述的保藏號為CGMCC No. 9889的花生根際促生菌HS9在花生種植中的 應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及花生根際促生菌HS9及其應(yīng)用，花生根際促生菌為花生根際促生菌HS9，分類命名為彎曲芽孢桿菌（Bacillus？flexus），2014年10月31日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC？No.9889，可有效解決將難溶性含鉀硅酸鹽轉(zhuǎn)化為可溶性鉀鹽，解有機(jī)磷，提高肥料的利用率，有效用于花生的種植，促進(jìn)花生的生長和提高產(chǎn)量，是微生物和花生種植上的一大創(chuàng)新。CGMCC No.98892014.10.31
【IPC分類】C09K101-00, C12N1-20, C12R1-07, A01N63-00, A01P21-00, C09K17-00
【公開號】CN104560788
【申請?zhí)枴緾N201410761466
【發(fā)明人】曹軍, 李雪, 譚云飛, 葛慶勝, 巫偉, 王陽, 高愛華, 曹瑞梅, 周鵬, 王小玲, 王宏武, 劉曉丹
【申請人】鄭州市污水凈化有限公司
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年12月13日