專利名稱：用于結(jié)腸癌預(yù)防和治療的果聚糖復(fù)合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以某些菊粉類為優(yōu)先的果聚糖用來制造用于預(yù)防和/或治療非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的復(fù)合物的應(yīng)用。
本發(fā)明也涉及該復(fù)合物在預(yù)防和/或治療非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的應(yīng)用及其方法。發(fā)明背景哺乳動(dòng)物的癌癥是一種自古以來就已經(jīng)知道的疾病。當(dāng)今在工業(yè)化社會(huì)，癌癥特別是肺癌，乳腺癌及結(jié)腸癌已經(jīng)成為非牛哺乳動(dòng)物，特別是人類死亡的主要原因之一。
癌癥的發(fā)展有多個(gè)步驟，其中包括基因組及功能改變的細(xì)胞的發(fā)生，導(dǎo)致惡變細(xì)胞的生成，惡變細(xì)胞失去控制的增生，對(duì)周圍正常組織的侵蝕以及轉(zhuǎn)移。在轉(zhuǎn)移過程中，癌變細(xì)胞在體腔中擴(kuò)散和/或通過血液和/或淋巴擴(kuò)散到全身，侵蝕各正常組織。對(duì)正常組織結(jié)構(gòu)的侵蝕可導(dǎo)致它們功能的失調(diào)和/或破壞，最終導(dǎo)致哺乳動(dòng)物的死亡。
已知有多種因素可促進(jìn)癌癥的生成，其中包括病毒感染，遭受電離輻射，接觸礦物性纖維，接觸化學(xué)致癌物及不恰當(dāng)?shù)娘嬍场?br> 在此基礎(chǔ)上，人們提出了多種預(yù)防措施，并已成功地用于某些癌癥的預(yù)防和減少發(fā)生率。
此外，已經(jīng)發(fā)展了多種手術(shù)治療及化療用于癌癥的治療。根據(jù)癌癥的類型，疾病的階段，以及患病的不同個(gè)體，這些治療方法通常顯示出不同程度的效果。
目前已有多種可靠的動(dòng)物模型可用于研究不同癌癥的生成和發(fā)展，使我們可以用來評(píng)價(jià)各種化學(xué)物質(zhì)和食品的預(yù)防及治療作用。
流行病學(xué)研究結(jié)合動(dòng)物模型上的研究發(fā)現(xiàn)食用纖維是哺乳動(dòng)物預(yù)防某些癌癥的重要因素食用纖維通常定義為植物細(xì)胞中對(duì)人體內(nèi)消化酶水解作用耐受的組分。食用纖維包括纖維素，半纖維素，多糖，果膠，樹膠，蠟以及木質(zhì)素。根據(jù)上述定義，果聚糖類(fructans)這種可溶的，可食用的多糖是食用纖維。果聚糖類是由主要由果糖單位組成的碳水化合物鏈組成，其中果糖—果糖鍵合占鍵合的大多數(shù)。果聚糖類通常作為多分散性碳水化合物存在。它們存在于植物中，但也可來源于細(xì)菌活動(dòng)及在酶的催化下合成。所有這些果聚糖具有典型的食用纖維性質(zhì)，它們均包括在本發(fā)明中，并通稱為果聚糖類。
果聚糖類是一類已知化合物，它包括左聚糖，菊粉等碳水化合物。左聚糖類是一類D-果聚糖，一般由基本上相互通過β(2-6)鍵連接的果糖鏈單位組成。菊粉類也是一類一般含有果糖鏈單位的D-果聚糖，但它是由基本上相互通過β(2-1)鍵連接的果糖鏈單位組成。多數(shù)菊粉類糖鏈的末端是葡萄糖。
左聚糖可以以直鏈碳水化合物存在，但大多數(shù)左聚糖由支鏈果糖組成。而菊粉類一般是由直鏈碳水化合物組成，但也有一些是由多條果糖鏈組成的支鏈碳水化合物。本發(fā)明所指的左聚糖類和菊粉類物質(zhì)包括直鏈碳水化合物和支鏈碳水化合物以及它們的混合物。
菊粉類存在于許多植物和農(nóng)作物中，在菊苣(chicory)，大麗花(dahlia)的塊莖及北美菊芋(jerusalem artichoke)中，菊粉的含量可達(dá)新鮮組織重量的約10％-20％。利用已經(jīng)很成熟的技術(shù)，它們可以工業(yè)規(guī)模從這些植物中分離，通過純化和精制去除雜質(zhì)和不需要的碳水化合物組分。
菊粉類可用GFn和Fm通式表示，其中G表示一個(gè)葡萄糖單位，F(xiàn)表示一個(gè)果糖單位，n表示與末端葡萄糖單位連接的果糖單位數(shù)目，m表示該碳水化合物中相互連接的果糖單位數(shù)。
一個(gè)果聚糖分子中糖單位(果糖和葡萄糖單位)的數(shù)目，即上述公式中n+1值和m通常是指聚合的程度，用(DP)表示。平均聚合度(PD)這個(gè)參數(shù)也常常應(yīng)用，該值相當(dāng)于某一多糖中糖單位數(shù)的總數(shù)除以糖分子的總數(shù)。
植物來源的菊粉是由多分散的果糖鏈組成，其聚合度(PD)為2-100左右，而細(xì)菌來源的菊粉通常有較高的聚合度。
包括通式為GFn和Fm的菊粉的果聚糖類，具有較低聚合度的(通常定義為(DP)＜10)一般稱為寡聚果糖。
菊粉已有商品供應(yīng)。例如，ORAFTI，(Tienen，比利時(shí))可提供不同規(guī)格的名為RAFTILINE的菊粉(從菊苣中得到)。例如，典型的RAFTILINE有ST，ST-Gel，和GR(平均聚合度(DP)為10，按重量計(jì)算含約8％葡萄糖，果糖和蔗糖)，LS(平均聚合度也為10，但按重量計(jì)算含不到1％的葡萄糖，果糖和蔗糖)和HP(高效菊粉)及HP-Gel(平均聚合度≥23，通常約為25，基本上無葡萄糖，果糖和蔗糖)。
寡聚果糖通常通過菊粉部分酸解或酶解，但也可按照已知的技術(shù)利用蔗糖酶法合成。
寡聚果糖有商品供應(yīng)。例如，ORAFTI，(Tienen，比利時(shí))就可提供多種規(guī)格的名為RAFTILOSE的寡聚果糖，例如，RAFTILOSEP95，含約95％重量的寡聚多糖，聚合度為2-7，含大約5％重量的葡萄糖，果糖和蔗糖。研究現(xiàn)狀食用纖維，特別是果聚糖類，已知對(duì)哺乳動(dòng)物的生理功能及機(jī)理有多種作用。
在非牛哺乳動(dòng)物中，這些纖維在嘴，胃及小腸中幾乎不代謝，它們幾乎全部進(jìn)入大腸，并在結(jié)腸菌群作用下發(fā)酵。該現(xiàn)象在非牛哺乳動(dòng)物中導(dǎo)致各種對(duì)健康有益的作用，例如使小腸通過時(shí)間減少，小腸pH下降，結(jié)腸中雙歧菌被激活以及糞便量和排便次數(shù)增加。
果聚糖類，特別是菊粉，也已知對(duì)脂代謝產(chǎn)生有益的作用，包括血膽固醇和甘油三脂下降作用和提高HDL/LDL比例作用。
P.D.Copper等(Molecul.Immunol.，23(8)895，(1986))報(bào)道γ-菊粉(一種大麗花菊粉的特殊多晶型物)可激活補(bǔ)體的備用通路，目前認(rèn)為一個(gè)補(bǔ)體備用通路的激活劑有可能具有潛在的非特異性的抗腫瘤作用。
此外，果聚糖，特別是菊粉，還報(bào)道具有預(yù)防和抑制癌腫的作用。
P.D.Copper等(Molecul.Immunol.，23(8)903，(1986))證明腹腔注射γ-菊粉可延長荷黑素瘤小鼠的存活時(shí)間。
研究表明，雙歧菌培養(yǎng)在大鼠實(shí)驗(yàn)中可抑制2-氨基-3-甲基-咪唑[4，5-f]喹啉對(duì)結(jié)腸，肝，和乳腺的致癌作用(B.S.Reddy et al.，Cancer Res.，53，3914-3918，(1993))，也可抑制氧化偶氮甲烷(azoxymethane)對(duì)結(jié)腸的致癌作用(N.Kulkarni et al.，Proc Soc.Exptl.Biol.Med.207，278-283.(1994))。
歐洲專利申請(qǐng)EP0692252 A1披露寡聚果糖RAFTILOSEP95(ORAFTI，比利時(shí)；由95％寡聚果糖鏈組成，聚合度(DP)為2-7)和菊粉類RAFTILINEST，GR和LS(平均聚合度約為10)對(duì)大鼠注射N-甲基亞硝基尿(N-methylnitrosourea，MNU)引起的乳房致癌作用及小鼠移植Taper肝瘤的生長均有抑制作用。已研究過的寡聚果糖和菊粉顯示具有類似的抗致癌物質(zhì)作用和癌抑制作用。
此外，有許多文章也介紹了服用食用纖維與減少結(jié)腸癌發(fā)生的關(guān)系，例如J.Potter et al.Principles of Chemoprevention.IARCScientific Publication No 139，61-90，(1996)；G.R.Howe et al.，J.Natl.Cancer Inst.84，1887-1896，(1992)及B.S.Reddy et al.，Gastoenterol.，.102，1475-1482，(1992)。
盡管人們已做了巨大努力與癌癥，特別是結(jié)腸癌作斗爭，但要預(yù)防，抑制及治療結(jié)腸癌還不十分有可能。因此，醫(yī)學(xué)正在繼續(xù)尋找可改進(jìn)預(yù)防，抑制和治療結(jié)腸癌的方法?？紤]到多種因素，如病人的舒適程度等，化療是最先被考慮的治療方法。因此，人們正在不斷尋找比現(xiàn)有藥物或治療方法具有更好的，可抑制和/或治療結(jié)腸癌作用和/或較少副作用的新藥物及新方法。發(fā)明描述申請(qǐng)人提出的本發(fā)明將為上述一個(gè)或幾個(gè)問題提供解決辦法，并有可能提供新的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明中所用結(jié)腸癌一詞是指結(jié)腸癌病變過程中的任何一步，包括結(jié)腸癌發(fā)生，結(jié)腸中癌變細(xì)胞的形成，癌變細(xì)胞的增生，結(jié)腸中癌腫的形成和/或所述癌變細(xì)胞對(duì)正常結(jié)腸組織的侵入。
本發(fā)明是建立在發(fā)明人對(duì)果聚糖類大量研究的基礎(chǔ)上，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)對(duì)非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的預(yù)防和抑制作用而言，具有較高聚合度的果聚糖類，特別是平均聚合度為15或更高的果聚糖類比較低聚合度果聚糖類的作用更強(qiáng)。
根據(jù)以往的研究結(jié)果，可以預(yù)測到較高聚合度的果聚糖類及某些較低聚合度果聚糖類均對(duì)結(jié)腸癌有預(yù)防和/或抑制作用。但是，僅根據(jù)這些結(jié)果是不可能預(yù)測到本發(fā)明人的驚人發(fā)現(xiàn)，即果聚糖類特別是具有較高平均聚合度的菊粉對(duì)非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的預(yù)防和抑制作用比具有較低平均聚合度果聚糖類強(qiáng)得多。
因此，從一方面來講，本發(fā)明涉及到具有平均聚合度至少為15的果聚糖的應(yīng)用，用于制造一種復(fù)合物用來預(yù)防和/或治療非牛哺乳動(dòng)物的結(jié)腸癌，特別是人類結(jié)腸癌。
從另一方面來講，本發(fā)明涉及到一種包含具有平均聚合度至少為15的果聚糖的復(fù)合物的應(yīng)用，用于預(yù)防和/或治療非牛哺乳動(dòng)物的結(jié)腸癌，特別是人類結(jié)腸癌。
更進(jìn)一步來講，本發(fā)明涉及到一種預(yù)防和/或治療非牛哺乳動(dòng)物的結(jié)腸癌，特別是人類結(jié)腸癌的方法，通過對(duì)所述結(jié)腸癌易感哺乳動(dòng)物需要這種預(yù)防或治療時(shí)的給予一種含有效劑量的平均聚合度至少為15的果聚糖的復(fù)合物。
在一較佳實(shí)施例中，果聚糖是左聚糖，平均聚合度較佳至少為20，更好是20到50之間。
在另一較佳實(shí)施例中，果聚糖是平均聚合度至少為20，更好是20到70之間的菊粉。在還有一個(gè)較佳實(shí)施例中，菊粉的平均聚合度在20至40之間。典型的較佳菊粉具有平均聚合度25左右。
主要由直鏈多糖組成的菊粉或含有約2％重量的支鏈多糖的菊粉適合本發(fā)明。但是含有高百分比支鏈多糖或主要由支鏈多糖組成的菊粉甚至由上述直鏈和支鏈菊粉組成的混合物仍適合本發(fā)明。適合本發(fā)明的典型菊粉是菊苣菊粉，例如RAFTILINEHP和RAFTILINEHP-Gel(都是高效菊粉(簡稱HP菊粉)ORAFTI，比利時(shí))，平均聚合度約25。
對(duì)于本發(fā)明而言該復(fù)合物在這里是一種藥物(就是說對(duì)于被給藥的哺乳動(dòng)物該復(fù)合物具有預(yù)防和/或治療的效果)，但也可以說該復(fù)合物是一種功能性食物(就是說該食物含有除其天然特性外的額外功效成分，對(duì)于人類或非人類哺乳動(dòng)物能產(chǎn)生有利的生理效應(yīng))。對(duì)于本發(fā)明而言的功能性食物，額外的功效成份是指上述所定義的包含左聚糖和菊粉的果聚糖。舉例而言，典型的有利生理效應(yīng)有對(duì)于消化道的有益作用，對(duì)于脂質(zhì)代謝的效果以及對(duì)癌癥特別是結(jié)腸癌的預(yù)防作用。
與本發(fā)明一致，該復(fù)合物是一種藥物，它可由所述的果聚糖組成，或包含與任何藥學(xué)上可接受的載體相結(jié)合，也可和任選一種或多種具有生理活性的化合物，藥物或藥物前體相結(jié)合的所述果聚糖。所說的藥物可以有多種劑型，也有已知的相應(yīng)給藥方法。藥物最好制成粉劑，片劑，軟膠囊，糖漿，溶液或懸液，通過口服給藥。另外，若將其制成適當(dāng)?shù)纳w侖制劑(galenic form)，也可胃腸外給藥，經(jīng)管道給藥或直腸給藥。
本發(fā)明中的復(fù)合物作為功能性食物時(shí)，?？诜梢匀魏我阎氖澄镄问酱嬖?，舉例而言，可以是涂抹物，乳制品如牛奶，甜點(diǎn)，酸乳酪或干酪，酒精類或非酒精類飲料，面包制品，巧克力，冰淇淋，肉制品，水果制品，糖果制品，谷類食物，沙司，湯，快餐，干混合物，代餐食品，寵物食品以及其他類似物。
根據(jù)應(yīng)用的對(duì)象和果聚糖的種類，預(yù)防結(jié)腸癌的每日有效劑量較好范圍是0.01到2g/kg體重，更好是0.05到0.5g/kg體重。
根據(jù)應(yīng)用的對(duì)象，果聚糖的種類及結(jié)腸癌的進(jìn)程，對(duì)結(jié)腸癌提供抑制和/或治療作用的每日有效劑量較好范圍是0.2到3g/kg體重，更好是0.5到1.5g/kg體重。
在預(yù)防和/或治療，包括抑制和/或治療非牛哺乳動(dòng)物，特別是人結(jié)腸癌的方法中，對(duì)結(jié)腸癌易感病人需要這種治療時(shí)可給予本發(fā)明所講的復(fù)合物的日常劑量，根據(jù)已知的方法，可在一定期間內(nèi)每一天給予一次或幾次隨由復(fù)合物提供的有效濃度而變。當(dāng)該復(fù)合物作為一功能性食物，目的主要是起預(yù)防作用時(shí)，該功能食物最好以一種或幾種形式，并服用較長時(shí)間，最好終生服用。
與聚合度較低的果聚糖類相比，較高聚合度的果聚糖類除了具有更好的生理性，預(yù)防和/或治療作用外，按本發(fā)明的復(fù)合物及其治療方法還有其他許多優(yōu)點(diǎn)。例如，該復(fù)合物服用或給藥方便，治療方法容易，用藥哺乳動(dòng)物沒有不適。此外，復(fù)合物中存在的較高聚合度的果聚糖鏈可減少服用不消化碳水化合物出現(xiàn)的不適如軟便，腹瀉，氣脹，及小腸痙攣。
本發(fā)明果聚糖類又一值得考慮的優(yōu)點(diǎn)是，特別是菊苣菊粉是天然產(chǎn)物，它們可生物降解，無毒性，新生兒和成人包括孕婦和老年人均可服用。與已知的化療藥物相比，用本發(fā)明的復(fù)合物通常很容易受到用藥者的歡迎，不會(huì)引起明顯的不良副作用，不會(huì)有明顯的不適。此外，本發(fā)明所提到的果聚糖類已有大量供應(yīng)，而且價(jià)格也可以接受。實(shí)驗(yàn)部分為了支持本發(fā)明，以下是檢測寡聚果糖和HP菊粉對(duì)致癌劑引起大鼠結(jié)腸內(nèi)異常腸腺灶(aberrant crypt foci，ACF)形成的影響研究結(jié)果。
在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，實(shí)驗(yàn)性引起結(jié)腸發(fā)生癌變過程中，常常觀察到異常腸腺灶。ACF是一種結(jié)腸內(nèi)腫瘤發(fā)生前的損傷(McLellan，E.A.et al.，Cancer Res.，51，5270-5274，(1991)；Wargovich，M.H.，et al.，Cancer Epidemiol Biomarkers & Prev.，5，355-360，(1996))。Pretlow，T.P.et al.，(J.Cell.Biochem.，16G(Suppl.)，55-62，(1992))發(fā)現(xiàn)這些損傷同樣也存在于結(jié)腸癌患者的結(jié)腸粘膜上。他認(rèn)為ACF很可能是早期損傷，該損傷可最終發(fā)展為腺癌和癌。ACF在apc基因和ras癌基因有突變，可能作為結(jié)腸癌發(fā)展的標(biāo)志(Vivona，A.A.，et al.，Carcinogenesis(Lond.)14，1777-1781，(1993))。
有證據(jù)表明，一些ACF形成的抑制劑可減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物結(jié)腸癌的發(fā)生率(Wargovich，M.H.et al.，Cancer Epidemiol Biomarkers & Prev.，5，355-360，(1996))，該結(jié)果提示ACF的生成可用于評(píng)價(jià)具有結(jié)腸癌化學(xué)預(yù)防作用的新化合物。材料與方法動(dòng)物，飼料，致癌劑及化學(xué)預(yù)防劑氧化偶氮甲烷(Azoxymethane AOM)從Ash Stevens(Detroit，MI，美國)獲得。RAFTILOSEP95(干品中含95％寡聚果糖)和RAFTILINEHP(干品中含99.5％菊粉)從ORAFTI(Tienen，比利時(shí))獲得。由菊苣菊粉部分酶解生成的RAFTILOSE是一個(gè)多分散性β[2-1]果聚糖，其DP在2-7之間，DP為4.5。RAFTILINEHP(即高效菊粉，簡寫為HP菊粉)是一種菊苣菊粉，其中較低DP部分已經(jīng)去除。它的DP在10至60，DP為25。選用這些試驗(yàn)品的目的是觀察聚合度對(duì)其作用的影響。
Weanling雄性F344大鼠得自Charles River Breeding實(shí)驗(yàn)室(Kingston，NY，美國)。所有AIN-76A部分純化飼料的配料組成均來自Dyets Inc(Bethlehem PA，美國)，4℃保管直至配制實(shí)驗(yàn)飼料時(shí)。這種部分純化飼料中百分組成的配比為酪蛋白，20；D，L-蛋氨酸，0.3；玉米淀粉，52；葡萄糖，13；玉米油，5；alphacel，5；礦物混合物(AIN-76A)，3.5；維生素復(fù)合物(AIN-76A)，1；及膽堿二酒石酸，0.2(Reddy B.S.etal.，Cancer Res.，48，6642-6647，(1988))。大鼠在隔離室內(nèi)飼養(yǎng)1周，飼料為改進(jìn)的AIN-76A部分純化飼料。動(dòng)物按重量隨機(jī)分為不同的實(shí)驗(yàn)組，將動(dòng)物轉(zhuǎn)移到動(dòng)物室，在12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗循環(huán)運(yùn)轉(zhuǎn)，相對(duì)濕度50％及室溫21℃控制條件下，動(dòng)物飼養(yǎng)在有機(jī)玻璃籠中，每籠三只大鼠。將10％的RAFTILOSE或RAFTILINE分別加到對(duì)照飼料中(淀粉作相應(yīng)減少)。
實(shí)驗(yàn)步驟從5周齡開始，動(dòng)物組給予對(duì)照或試驗(yàn)飼料。除了空白組大鼠外，所有動(dòng)物在7及8周齡時(shí)均皮下給予AOM，每周一次，劑量為15mg/kg體重?？瞻捉M給予同體積生理鹽水。大鼠繼續(xù)給予對(duì)照或試驗(yàn)飼料一直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束，當(dāng)動(dòng)物達(dá)16周齡，所有動(dòng)物用CO2無痛苦處死。取出動(dòng)物的結(jié)腸，用Krebs-Ringer溶液沖洗，從盲腸到肛門打開結(jié)腸，放入10％緩沖福爾馬林液中，在兩張濾紙片之間放平。結(jié)腸至少在緩沖福爾馬林液中放24小時(shí)，然后切割成2cm長片段，放入含有0.2％亞甲基蘭的Krebs-Ringer溶液的皮氏培養(yǎng)皿(Petri dish)中5-10分鐘。然后，將組織粘膜面向上放在顯微鏡載玻片上，在光學(xué)顯微鏡下觀察。按照常規(guī)步驟記錄ACF(McLellan E.A.，etal.，Cancer Res.，51，5270-5274，(1991))。異常腸腺與周圍正常腸腺的差異表現(xiàn)為體積變大，從組織層到細(xì)胞的基底表面的距離明顯增加，并可見明顯的腸腺周圍區(qū)。腸腺多重性(Crypt multiplicity)以每一病灶中腸腺的數(shù)目形式測定，分為每一病灶中有3，4或更多異常腸腺。全部結(jié)腸由一觀察者作記錄他并不知道來自何種處理的動(dòng)物，該記錄再由另一研究人員隨機(jī)核對(duì)。
統(tǒng)計(jì)分析 所有結(jié)果均以平均數(shù)±SD表示，并用student的單側(cè)t-檢驗(yàn)法(one-tailed student’s t-test)分析，P＜0.05時(shí)，為差異顯著。結(jié)果一般觀察 在喂食對(duì)照飼料或?qū)嶒?yàn)飼料(含10％菊粉或寡聚果糖)的AOM組或空白組中，各組動(dòng)物的體重?zé)o明顯差異(表1)。喂食菊粉或寡聚果糖動(dòng)物的肝，腎，胃，小腸及肺等組織無明顯病變可見。
異常腸腺灶 表2是大鼠喂食了對(duì)照飼料或?qū)嶒?yàn)飼料后AOM引起結(jié)腸中異常腸腺灶的結(jié)果。在給予生理鹽水，同時(shí)喂食對(duì)照飼料或含菊粉或寡聚果糖的試驗(yàn)飼料的動(dòng)物中，結(jié)腸中未見異常腸腺生成。在喂食對(duì)照飼料，同時(shí)給予AOM的動(dòng)物中，結(jié)腸中的異常腸腺平均約為120 ACF/結(jié)腸。異常結(jié)腸主要發(fā)生在結(jié)腸遠(yuǎn)端。本研究中療效觀察依據(jù)是對(duì)結(jié)腸中ACF總數(shù)的抑制及每個(gè)病灶中異常腸腺中多腸腺叢(2個(gè)或更多個(gè))數(shù)目的減少。給予含寡聚果糖或HP菊粉的飼料，比給予對(duì)照飼料的明顯抑制結(jié)腸中ACF數(shù)。給予含HP菊粉飼料的動(dòng)物組的ACF抑制(P＜0.006)比給予寡聚果糖組的ACF抑制(P＜0.02)更為明顯。在動(dòng)物給予HP菊粉(P＜0.02-0.0001)或寡聚果糖(P＜0.04-0.01)后，以每個(gè)病灶中有2或3個(gè)異常腸腺為依據(jù)的腸腺多重性也明顯下降。由于異常腸腺的多重性可作為結(jié)腸癌預(yù)測的指標(biāo)(Pretlow，T.P.，etal.，Carcinogenesis(Lond.)，13.1509-1512，(1992))，因此本研究用該指標(biāo)來評(píng)價(jià)寡聚果糖和HP菊粉的抑制作用。
本研究表明大鼠口服寡聚果糖及HP菊粉可抑制AOM引起的結(jié)腸中ACF的形成，提示菊苣果聚糖類對(duì)結(jié)腸癌具抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，較高聚合度果聚糖(即HP菊粉)的預(yù)防作用及對(duì)ACF的抑制作用明顯比較低聚合度果聚糖(即寡聚果糖)強(qiáng)。表1，動(dòng)物給予對(duì)照飼料或含有寡聚果糖或HP菊粉的試驗(yàn)飼料后各周的體重
a平均數(shù)±SD表2.食用寡聚果糖或HP菊粉對(duì)雄性F344大鼠結(jié)腸內(nèi)ACF形成的影響
a平均數(shù)±SDb與對(duì)照組比差異顯著，顯著性水平見括號(hào)內(nèi)所示
權(quán)利要求
1.平均聚合度至少為15的果聚糖用于制造用于預(yù)防和/或治療非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的復(fù)合物的應(yīng)用。
2.按權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于哺乳動(dòng)物選自于由人、狗和貓組成的哺乳動(dòng)物群。
3.按權(quán)利要求1或2的應(yīng)用，其特征在于果聚糖是左聚糖。
4.按權(quán)利要求3的應(yīng)用，其特征在于左聚糖的平均聚合度至少為20。
5.按權(quán)利要求1或2的應(yīng)用，其特征在于果聚糖為菊粉。
6.按權(quán)利要求5的應(yīng)用，其特征在于菊粉的平均聚合度至少為20。
7.按權(quán)利要求6的應(yīng)用，其特征在于菊粉是平均聚合度約為25的菊苣菊粉，基本上無葡萄糖，果糖和蔗糖。
8.按權(quán)利要求1到7中之一的應(yīng)用，其特征在于復(fù)合物是藥物。
9.按權(quán)利要求8的應(yīng)用，其特征在于藥物包括與藥學(xué)上可接受的載體及任選生理活性化合物，藥物或藥物前體結(jié)合的所述果聚糖。
10.按權(quán)利要求1到7中之一的應(yīng)用，其特征在于復(fù)合物為功能性食物。
11.如同在權(quán)利要求1至10中之一定義的復(fù)合物用于非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的預(yù)防和/或治療的應(yīng)用。
12.非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的預(yù)防方法，包括對(duì)所述結(jié)腸癌易感哺乳動(dòng)物需要這種治療時(shí)的給予包含有效劑量的平均聚合度至少為15的果聚糖的復(fù)合物。
13.按權(quán)利要求12的方法，其特征在于果聚糖的每日劑量為0.01到2g/kg體重，一次或分幾次給藥。
14.非牛哺乳動(dòng)物結(jié)腸癌的治療方法，包括對(duì)所述哺乳動(dòng)物需要這種治療時(shí)的給予包含有效劑量的平均聚合度至少為15的果聚糖的復(fù)合物。
15.按權(quán)利要求14的方法，其特征在于果聚糖的每日劑量為0.2到3g/kg體重，一次或分幾次用。
16.按權(quán)利要求12、13、14或15的方法，其特征在于哺乳動(dòng)物選自于由人，狗，和貓組成的哺乳動(dòng)物群。
17.按權(quán)利要求16的方法，其特征在于果聚糖是左聚糖。
18.按權(quán)利要求16的方法，其特征在于果聚糖是菊粉。
19.按權(quán)利要求18的方法，其特征在于菊粉的平均聚合度至少為20。
20.按權(quán)利要求19的方法，其特征在于菊粉是平均聚合度約為25的菊苣菊粉，基本上無葡萄糖，果糖和蔗糖。
21.按權(quán)利要求12到20中之一的方法，其特征在于復(fù)合物是功能性食物。
22.按權(quán)利要求12到20中之一的方法，其特征在于復(fù)合物是藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供平均聚合度至少為15的果聚糖用來制造用于非牛哺乳動(dòng)物,特別是人結(jié)腸癌預(yù)防和/或治療的復(fù)合物的應(yīng)用。本發(fā)明也提供可用于非牛哺乳動(dòng)物,特別是人結(jié)腸癌預(yù)防和治療的方法,該方法包括給予所述哺乳動(dòng)物含有效劑量的平均聚合度至少為15的果聚糖的復(fù)合物。所述復(fù)合物可以是藥物,也可以是功能性食物。在一個(gè)較佳實(shí)施例中該果聚糖是菊粉,更佳是平均聚合度至少為20的菊粉。
文檔編號(hào)C08B37/18GK1255855SQ98805127
公開日2000年6月7日 申請(qǐng)日期1998年5月14日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月20日
發(fā)明者簡·范魯, 安妮·弗里皮亞特 申請(qǐng)人:蒂西蘇克拉菲納德里有限公司