本發(fā)明屬于植物基因工程，更具體地說(shuō)，涉及一類桂花ofprots基因在提高植物抗逆性中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、prots基因是植物中參與脯氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白家族。脯氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)在植物逆境適應(yīng)中起重要作用，prots基因編碼的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白負(fù)責(zé)脯氨酸在各個(gè)器官間的運(yùn)輸，有助于植物在逆境下積累脯氨酸，從而增強(qiáng)抗逆性。以馬鈴薯為例，stprot3基因在馬鈴薯的根、莖、葉、匍匐莖以及塊莖中均有表達(dá)，且受激素、重金屬、鹽、干旱和低溫等多種因素調(diào)控，表明其參與了馬鈴薯的激素信號(hào)傳導(dǎo)及非生物脅迫響應(yīng)。目前在擬南芥中，prots亞家族被發(fā)現(xiàn)有3個(gè)成員基因atprot1、atprot2和atprot3。該亞家族基因主要介導(dǎo)脯氨酸、gaba(γ-氨基丁酸)、甜菜堿等化合物的轉(zhuǎn)運(yùn)。atprot1主要在擬南芥韌皮部或韌皮部的薄壁細(xì)胞中表達(dá)，可能參與氨基酸的長(zhǎng)距離運(yùn)輸。當(dāng)植物遭受脅迫后，atprot2基因表達(dá)升高且主要的表達(dá)部位是在根中。atprot3表達(dá)部位主要在地上部分的葉片的表皮細(xì)胞，可能參與調(diào)控葉片中的脯氨酸的轉(zhuǎn)運(yùn)。

2、桂花(osmanthus?fragrans)常見于亞熱帶地區(qū)，不耐鹽，鹽堿地中難以生長(zhǎng)，這嚴(yán)重制約了其在濱海及高鹽地區(qū)的應(yīng)用。prots基因在植物逆境適應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，通過(guò)調(diào)控脯氨酸的轉(zhuǎn)運(yùn)和積累，幫助植物應(yīng)對(duì)各種逆境條件，但關(guān)于其在桂花中的具體研究尚不明確。對(duì)prots基因的研究有助于深入了解植物逆境適應(yīng)的分子機(jī)制，并為作物抗逆育種提供新的思路和方法脯氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程關(guān)鍵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因prots在植物響應(yīng)鹽脅迫方面具有重要作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一類桂花ofprots基因。本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供桂花ofprots基因的表達(dá)蛋白。本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題在于提供桂花ofprot1基因或/和ofprot2基因在調(diào)控植物抗逆性中的應(yīng)用，用于調(diào)控桂花抗逆性。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

3、一類桂花ofprots基因，包括ofprot1基因、或/和ofprot2基因；

4、所述ofprot1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

5、所述ofprot2基因的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

6、桂花ofprots基因的表達(dá)蛋白，包括ofprot1蛋白、或/和ofprot2蛋白；

7、所述ofprot1蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示；

8、所述ofprot2蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.4所示。

9、含有桂花ofprot1基因或ofprot2基因的載體、重組菌。

10、桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物抗逆性中的應(yīng)用。

11、所述調(diào)控植物抗逆性為提高植物的抗鹽脅迫能力，具體步驟包括：

12、1)構(gòu)建桂花ofprot1或ofprot2基因的過(guò)表達(dá)載體；

13、2)將構(gòu)建的過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到本氏煙草；

14、3)培育篩選并獲得抗鹽脅迫能力提高的轉(zhuǎn)基因本氏煙草植株。

15、所述過(guò)表達(dá)載體為psuper1300-ofprot1、或/和psuper1300-ofprot2植物過(guò)表達(dá)載體。

16、桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物體內(nèi)相對(duì)電導(dǎo)率中的應(yīng)用。

17、桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物體內(nèi)脯氨酸含量中的應(yīng)用。

18、桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物體內(nèi)丙二醛含量中的應(yīng)用。

19、相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：

20、1)本發(fā)明公開的一類桂花ofprots基因，包括ofprot1基因、或/和ofprot2基因；核苷酸序列分別如seq?id?no.1和seq?id?no.3所示。本發(fā)明構(gòu)建桂花ofprot1或ofprot2基因的過(guò)表達(dá)載體；將構(gòu)建的過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到本氏煙草中；培育篩選并獲得抗鹽脅迫能力提高的轉(zhuǎn)基因本氏煙草植株。

21、2)本發(fā)明實(shí)施例結(jié)果表明：在受到高鹽脅迫后，過(guò)表達(dá)ofprot1和ofprot2基因的植株體內(nèi)相對(duì)電導(dǎo)率、脯氨酸含量、丙二醛含量均顯著降低，結(jié)果表明過(guò)表達(dá)ofprot1和ofprot2基因提高了植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的能力。

技術(shù)特征：

1.一類桂花ofprots基因，包括ofprot1基因、或/和ofprot2基因；

2.權(quán)利要求1所述桂花ofprots基因的表達(dá)蛋白，包括ofprot1蛋白、或/和ofprot2蛋白；

3.含有權(quán)利要求1所述桂花ofprot1基因或ofprot2基因的載體、重組菌。

4.權(quán)利要求1所述桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物抗逆性中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述調(diào)控植物抗逆性為提高植物的抗鹽脅迫能力。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，具體步驟包括：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述過(guò)表達(dá)載體為psuper1300-ofprot1、或/和psuper1300-ofprot2植物過(guò)表達(dá)載體。

8.權(quán)利要求1所述桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物體內(nèi)相對(duì)電導(dǎo)率中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求1所述桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物體內(nèi)脯氨酸含量中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1所述桂花ofprot1基因、或/和ofprot2基因在調(diào)控植物體內(nèi)丙二醛含量中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一類桂花OfProTs基因在提高植物抗逆性中的應(yīng)用，涉及植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開的一類桂花OfProTs基因，包括OfProT1基因、或/和OfProT2基因；核苷酸序列分別如SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.3所示。本發(fā)明構(gòu)建桂花OfProT1或OfProT2基因的過(guò)表達(dá)載體；將構(gòu)建的過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到本氏煙草中；培育篩選并獲得抗鹽脅迫能力提高的轉(zhuǎn)基因本氏煙草植株。結(jié)果表明：在受到高鹽脅迫后，過(guò)表達(dá)OfProT1和OfProT2基因的植株體內(nèi)相對(duì)電導(dǎo)率、脯氨酸及丙二醛含量均顯著降低，結(jié)果表明過(guò)表達(dá)OfProT1和OfProT2基因提高了植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的能力。

技術(shù)研發(fā)人員：鄭棟,楊秀蓮,田清尹,顧恒,劉心怡,岳遠(yuǎn)征,王良桂
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南京林業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6