本發(fā)明屬于藥物合成，具體涉及一種比沙可啶基因毒性雜質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、比沙可啶是一種有機(jī)化合物，化學(xué)式為c22h19no4，中文名為4,4'-(2-吡啶亞甲基)二苯酚雙醋酸酯。比沙可啶是一種刺激性緩瀉藥，為勃林格殷格翰公司原研，主要作用于大腸，臨床上用于急、慢性便秘，栓劑直腸用藥可用于腸鏡檢查、腸道x線檢查或腹部手術(shù)前清潔腸道。

2、藥物中含有的某些雜質(zhì)可能具有生物活性，如果含量超過一定標(biāo)準(zhǔn)，可能會(huì)產(chǎn)生副作用，威脅患者的生命，直接關(guān)系到臨床用藥的安全性。雜質(zhì)可以與藥物相互作用并影響藥物的有效性。化學(xué)合成藥物原料藥和制劑中的雜質(zhì)，特別是基因毒性雜質(zhì)，影響藥物的安全性，在藥物劑型的選擇、處方的制定和工藝決策方面，雜質(zhì)對(duì)產(chǎn)品的分析方法和儲(chǔ)存的研究有較大影響，是創(chuàng)新藥物質(zhì)量研究和安全性研究的重點(diǎn)。

3、為保證藥品質(zhì)量，防范用藥安全，需要對(duì)比沙可啶的相關(guān)雜質(zhì)進(jìn)行研究。查閱國外藥典發(fā)現(xiàn)美國藥典、日本藥典、歐洲藥典收載了比沙可啶原料藥有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)。美國藥典中明確了比沙可啶6個(gè)雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)，分別命名為4,4′-(吡啶-2-基亞甲基)二酚（雜質(zhì)a）、2,4′-(吡啶-2-基亞甲基)二酚（雜質(zhì)b）、4-[(4-羥基苯基)(吡啶-2-基)甲基]苯基醋酸鹽（雜質(zhì)c）、雜質(zhì)1（0.85）、2-[(4-乙酰氧基苯基)(吡啶-2-基)甲基]苯乙酸鹽（雜質(zhì)e）、雜質(zhì)2（2.6），并將其作為已知雜質(zhì)進(jìn)行控制。歐洲藥典收載的比沙可啶原料藥有關(guān)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)與美國藥典基本一致，差別僅在于歐洲藥典未規(guī)定已知雜質(zhì)1（0.85），雜質(zhì)編號(hào)不完全一致，單個(gè)雜質(zhì)限度也有所差別。美國藥典中雜質(zhì)a與雜質(zhì)b限度為≤0.15%，歐洲藥典中雜質(zhì)a與雜質(zhì)b限度為≤0.1%。日本藥典有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)為點(diǎn)板，沒有明確雜質(zhì)限度。美國藥典和歐洲藥典對(duì)色譜條件也有設(shè)定。我國比沙可啶栓和腸溶片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)始載于《中國藥典》1990年版二部，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)載于《中國藥典》2020年版二部第84頁與第85頁，但比沙可啶栓和腸溶片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)為薄層色譜法，與日本藥典一樣，使得該產(chǎn)品存在一定的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。而且，對(duì)于美國藥典和歐洲藥典中6個(gè)已知雜質(zhì)，國內(nèi)外文獻(xiàn)目前基本無相關(guān)制備的報(bào)道。

4、然而，根據(jù)比沙可啶的合成路線與反應(yīng)機(jī)理，原料2-吡啶甲醛中可能含有2-吡啶甲醛氮氧化物，其會(huì)與2-吡啶甲醛一起參與后續(xù)步驟的反應(yīng)，從而導(dǎo)致比沙可啶產(chǎn)物中含有結(jié)構(gòu)式如圖1所示的比沙可啶氮氧化物（中文名為2-(雙(4-乙酰氧基苯基)甲基)吡啶1-氧化物）雜質(zhì)。由于該雜質(zhì)含有吡啶氮氧化結(jié)構(gòu)，即含有基因毒性雜質(zhì)警示結(jié)構(gòu)，故確定其為基因毒性雜質(zhì)。可見以該雜質(zhì)為對(duì)照品，對(duì)進(jìn)行比沙可啶原料藥和制劑的質(zhì)量控制研究和檢測(cè)具有重要的意義，但是目前沒有該比沙可啶氮氧化物的相關(guān)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明旨在開發(fā)一種制備上述比沙可啶基因毒性雜質(zhì)的方法，為比沙可啶原料藥及制劑質(zhì)量控制提供對(duì)照品，保證用藥安全。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案具體如下：

3、本發(fā)明第一方面提供了一種比沙可啶基因毒性雜質(zhì)的制備方法，該比沙可啶基因毒性雜質(zhì)具體為結(jié)構(gòu)式如圖1所示的比沙可啶氮氧化物，其制備方法包括以下步驟：

4、s1、將比沙可啶溶解于有機(jī)溶劑，加入氧化劑進(jìn)行反應(yīng)；其中，有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮的一種或多種，氧化劑為雙氧水和/或間氯過氧苯甲酸；

5、s2、待步驟s1反應(yīng)結(jié)束后，加入水和乙酸乙酯進(jìn)行液液萃取，收集乙酸乙酯層，洗滌，減壓濃縮即得。

6、優(yōu)選地，在上述制備方法中，比沙可啶與有機(jī)溶劑的質(zhì)量體積比為1:(2-10)，比沙可啶與氧化劑的摩爾比為1:(1.2-10)；其中，比沙可啶與氧化劑的摩爾比為1:(1.5-5)時(shí)更佳。

7、優(yōu)選地，在上述制備方法中，氧化劑為間氯過氧苯甲酸。

8、優(yōu)選地，在上述制備方法中，步驟s1的反應(yīng)溫度為0-80℃，且反應(yīng)時(shí)間為1-20?h。

9、優(yōu)選地，在上述制備方法中，萃取時(shí)，水的加入量為有機(jī)溶劑體積的5-10倍，乙酸乙酯的加入量為有機(jī)溶劑體積的15-20倍。

10、優(yōu)選地，在上述制備方法中，步驟s2中減壓濃縮的溫度為35-50℃。

11、優(yōu)選地，在上述制備方法中，還包括以下步驟：

12、s3、利用硅膠柱層析分離純化步驟s2所得產(chǎn)物，洗脫液經(jīng)減壓濃縮、干燥后得到高純度的比沙可啶基因毒性雜質(zhì)（白色粉末固體）；更為優(yōu)選地，減壓濃縮的溫度為35-50℃。

13、基于制備的比沙可啶基因毒性雜質(zhì)，本發(fā)明第二方面提供了比沙可啶基因毒性雜質(zhì)在比沙可啶原料藥及制劑質(zhì)量控制中的應(yīng)用。本發(fā)明方法制備的比沙可啶基因毒性純度高，故可作為對(duì)照品用于比沙可啶原料藥及制劑的質(zhì)量控制。

14、優(yōu)選地，在上述應(yīng)用中，基于hplc，并通過以下色譜條件對(duì)比沙可啶原料藥或制劑中的比沙可啶基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行定性或定量檢測(cè)：

15、色譜柱，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（waterssymmetry?c18?(250×4.6?mm,5?μm)或相當(dāng)?shù)纳V柱）；流動(dòng)相，以甲酸銨水溶液（1.58?g/l，甲酸調(diào)ph至5.0）為流動(dòng)相a，乙腈溶液為流動(dòng)相b；運(yùn)行時(shí)間，45?min；流速，1.5?ml/min；柱溫，30℃；進(jìn)樣體積，20?μl；波長，265?nm。

16、更為優(yōu)選地，在hplc中進(jìn)行等度洗脫，且流動(dòng)相a:流動(dòng)相b=55:45(v:v)。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

18、本發(fā)明首次鑒定了一種新的比沙可啶雜質(zhì)即比沙可啶氮氧化物的結(jié)構(gòu)，并開發(fā)了一種簡便、經(jīng)濟(jì)地合成該雜質(zhì)的方法。本發(fā)明方法以比沙可啶為原料，通過加入氧化劑氧化合成，乙酸乙酯萃取和硅膠柱層析純化等操作得到該雜質(zhì)純品，其純度大于98%且產(chǎn)率高達(dá)95％，而且該方法還具有工藝簡便、物料常見易得、對(duì)環(huán)境污染小、安全環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。

19、本發(fā)明制備的比沙可啶氮氧化物具有高純度的特點(diǎn)，滿足了作為比沙可啶制劑定性及定量分析檢測(cè)對(duì)照品的要求，通過該雜質(zhì)的研究和檢測(cè)可以提高比沙可啶制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為比沙可啶的安全用藥提供保證。

技術(shù)特征：

1.一種比沙可啶基因毒性雜質(zhì)的制備方法，其特征在于，所述比沙可啶基因毒性雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下所示：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，還包括：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述比沙可啶與有機(jī)溶劑的質(zhì)量體積比為1:(2-10)，所述比沙可啶與氧化劑的摩爾比為1:(1.2-10)。

4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中所述反應(yīng)的溫度為0-80℃，且反應(yīng)的時(shí)間為1-20?h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟s2中，所述水的加入量為有機(jī)溶劑體積的5-10倍，所述乙酸乙酯的加入量為有機(jī)溶劑體積的15-20倍。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s2所述減壓濃縮的溫度為35-50℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)權(quán)利要求制備的比沙可啶基因毒性雜質(zhì)。

8.如權(quán)利要求7所述的比沙可啶基因毒性雜質(zhì)在比沙可啶原料藥或制劑質(zhì)量控制中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，基于hplc，通過以下色譜條件對(duì)比沙可啶基因毒性雜質(zhì)進(jìn)行定性或定量檢測(cè)：

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，在hplc中進(jìn)行等度洗脫，且流動(dòng)相a:流動(dòng)相b=55:45。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于藥物合成技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種比沙可啶基因毒性雜質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用，該比沙可啶基因毒性雜質(zhì)具體為比沙可啶氮氧化物，其制備方法包括以下步驟：以比沙可啶為原料，采用氧化劑氧化；再通過乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯層后減壓濃縮即得。本發(fā)明成功確證了比沙可啶氮氧化物的結(jié)構(gòu)，提供的制備方法具有操作簡單、原料常見易得、反應(yīng)條件溫和、無高溫高壓步驟、反應(yīng)原料轉(zhuǎn)化徹底、收率高等特點(diǎn)，而且所得產(chǎn)物純度高，可作為對(duì)照品用于比沙可啶原料和制劑的質(zhì)量控制，為比沙可啶的安全用藥提供保證。

技術(shù)研發(fā)人員：葉學(xué)進(jìn),楊明高,羅賢,張志海,徐金喜,陶周,張和,項(xiàng)飛,周凱
受保護(hù)的技術(shù)使用者：湖北省宏源藥業(yè)科技股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9