本發(fā)明涉及中藥材加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種從細(xì)莖石斛中堿提的水溶性多糖及其制備方法。

背景技術(shù)：

石斛為傳統(tǒng)名貴中草藥，其化學(xué)成分和藥理活性引人矚目。目前，石斛屬植物化學(xué)成分的研究主要以低極性的小分子為主，石斛多糖由于組成復(fù)雜、結(jié)構(gòu)相似，其分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定較為困難，研究起步較晚，研究成果也少。近年來(lái)，由于現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展，石斛多糖的研究由于其獨(dú)特的藥理特性，逐漸引起人們的重視。細(xì)莖石斛是傳統(tǒng)藥用石斛的主要來(lái)源植物，具有抗腫瘤、降血脂的功效。多糖在石斛中的含量較高，一般含量為10～20wt％，但是含有的多糖種類非常多，據(jù)報(bào)道，石斛中多糖種類超過(guò)二十種以上，且酸性多糖含量較多。石斛中多糖的抗腫瘤、降血脂功效究竟是由哪一種多糖，還是多種多糖共同作用的結(jié)果，還一直是目前研究的前沿課題。因此，提取純化得到一種多糖，闡述其結(jié)構(gòu)及其功效，對(duì)石斛多糖應(yīng)用于醫(yī)藥保健領(lǐng)域非常重要。

目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中對(duì)細(xì)莖石斛多糖的研究?jī)H限于熱水提取的多糖，對(duì)其他石斛多糖的研究也主要限于石斛多糖混合物的提取及總多糖功效的研究，對(duì)石斛中某一純多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)及其功效的則很少涉及。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種具有高效降血糖作用的高純度細(xì)莖石斛水溶性中性多糖以及該多糖的制備方法。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下方案實(shí)現(xiàn)：

一種從細(xì)莖石斛中堿提的水溶性中性多糖，所述水溶性多糖的重均分子量為0.9～1.2萬(wàn)，由葡萄糖殘基、半乳糖殘基、木糖殘基、甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基鏈接組成；其主鏈由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，高度支化，且含有10～20wt％末端木糖殘基。

所述水溶性中性多糖的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元結(jié)構(gòu)如下：

上述水溶性多糖的制備方法如下：

s1：將干燥的細(xì)莖石斛粉碎并脫脂；

s2：將脫脂后的細(xì)莖石斛粉碎物置于生理鹽水中高溫浸泡，后分離出殘?jiān)?/p>

s3：將步驟s2得到的殘?jiān)糜趬A液中處理，后離心收集上清液；

s4：將上清液中和至中性，并依次經(jīng)過(guò)脫色、脫蛋白、透析和濃縮得粗多糖水溶液；

s5：將粗多糖水溶液進(jìn)行離子交換處理，收集蒸餾水級(jí)份，依次經(jīng)過(guò)濃縮、冷凍干燥得水溶性中性多糖。

步驟s1中，干燥的細(xì)莖石斛粉碎后，采用有機(jī)溶劑通過(guò)索氏提取去除脂肪。優(yōu)選的，所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯和丙酮，干燥的細(xì)莖石斛粉碎后，依次用乙酸乙酯、丙酮通過(guò)索氏提取去除脂肪。

步驟s2中，脫脂后的細(xì)莖石斛粉碎物置于111～131℃的生理鹽水中高溫浸泡15～45min。分離出的殘?jiān)糜谏睇}水中高溫浸泡并分離，重復(fù)操作3～5次。

步驟s3中，所述堿液為1～2m的naoh水溶液，所述naoh水溶液中含有0.4～0.7wt％的nabh4。殘?jiān)糜趬A液中于室溫條件下攪拌2～4h。

步驟s4中，所述上清液用醋酸中和至中性。

步驟s5中，所述的離子交換處理為將粗多糖水溶液過(guò)deae纖維素離子交換柱。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N能制備出高純度的水溶性中性多糖的方法。該多糖的主鏈由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，高度支化，且含有10～20wt％末端木糖殘基，具有顯著的降血糖作用。

附圖說(shuō)明

圖1為實(shí)施例1多糖dmp-1的紅外光譜圖；

圖2為實(shí)施例1多糖dmp-1單糖組分的氣相色譜圖。

具體實(shí)施方式

為了讓本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述。

實(shí)施例1

一種從細(xì)莖石斛中堿提的水溶性中性多糖的制備方法，包括如下步驟：

s1：購(gòu)買(mǎi)滇產(chǎn)細(xì)莖石斛，曬干粉碎后以依次用乙酸乙酯和丙酮通過(guò)索氏提取回流4h脫脂；

s2：將脫脂后的細(xì)莖石斛粉碎物干燥后浸泡在0.9％的nacl水溶液中，在121℃高溫條件下浸泡30min，分離出殘?jiān)?，該殘?jiān)^續(xù)浸泡在0.9％的nacl水溶液中，在121℃高溫條件下浸泡30min，重復(fù)操作三次；

s3：將步驟s2得到的殘?jiān)糜?mnaoh的水溶液(含0.5wt％nabh4)中，室溫?cái)嚢?h，后離心收集上清液；

s4：上清液使用醋酸中和至中性；用30wt％h2o2脫色至淺黃色，離心得到淺黃色澄清溶液；該溶液用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，將氯仿和正丁醇混合液(體積比為5:1)與多糖溶液混合，劇烈攪拌30min，用分液漏斗靜置分層除去變性蛋白質(zhì)，反復(fù)進(jìn)行5次；然后分別用自來(lái)水、蒸餾水經(jīng)再生纖維素膜透析袋(mwcut-off3500,usa)透析4天和3天，然后45℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到粗多糖水溶液；此粗多糖水溶液包含各種酸性多糖和所需的中性多糖；

s5：將粗多糖水溶液離心過(guò)濾得到澄清溶液后，加入deae纖維素離子交換柱中，通過(guò)在deae纖維素陰離子樹(shù)脂上的吸附差別，用蒸餾水作為流動(dòng)相，收集蒸餾水級(jí)份，其中含所需的中性多糖，最后濃縮、冷凍干燥得到水溶性中性多糖純品dmp-1。

通過(guò)尺寸排除色譜(sec)、元素分析、紅外光譜(ir)、單糖組成氣相色譜(gc)、甲基化分析表明，該細(xì)莖石斛多糖dmp-1是一種多糖純品，純度高于96％，具有高度分支結(jié)構(gòu)的雜多糖，由葡萄糖殘基、半乳糖殘基、木糖殘基、甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基鏈接組成，該多糖的主鏈由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，高度支化，且含有12.5wt％末端木糖殘基。該細(xì)莖石斛多糖dmp-1可溶解于水和二甲基亞砜(dmso)，不溶解于甲醇、乙醇和丙酮。

該水溶性中性多糖的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元結(jié)構(gòu)如下：

圖1示出細(xì)莖石斛多糖dmp-1紅外光譜(ir)，在1700cm^-1處無(wú)吸收峰，說(shuō)明dmp-1中不含糖醛酸，為一種中性多糖。該多糖dmp-1的元素分析結(jié)果見(jiàn)附表1，c：h：o約等于1：2：1，未含n元素，表明該多糖dmp-1未含蛋白質(zhì)，其元素含量與多糖結(jié)構(gòu)一致。將dmp-1強(qiáng)酸水解為單糖后，再乙?；?，然后進(jìn)行氣相色譜分析(見(jiàn)圖2)，可得到該多糖的單糖組成，多糖dmp-1由葡萄糖殘基、半乳糖殘基、木糖殘基、甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基鏈接組成，其摩爾比為0.474：0.296：0.146：0.068：0.016。將dmp-1完全甲基化后，再乙?；缓筮M(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gc-ms)分析(見(jiàn)附表2)，可得到dmp-1的單糖鍵接方式。dmp-1的gc-ms結(jié)果表明該多糖dmp-1為一種高度支化的多糖，其主鏈主要由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，含有12.5wt％末端木糖殘基。該多糖dmp-1通過(guò)激光光散射-尺寸排除色譜(lls-sec)測(cè)試結(jié)果表明，其重均分子量為1.01萬(wàn)。

附表1.細(xì)莖石斛多糖dmp-1元素分析結(jié)果

附表2.細(xì)莖石斛多糖dmp-1單糖組成及鍵接方式結(jié)果

細(xì)莖石斛多糖dmp-1的降血糖作用：將caco-2細(xì)胞接種于96孔板，3天后，換成含100μg/ml多糖dmp-1樣品、5mm葡萄糖的pbs溶液，4h后取pbs上清液，測(cè)定pbs中剩余的葡萄糖濃度。結(jié)果顯示：空白對(duì)照組未被吸收的葡萄糖光密度為0.052，多糖dmp-1組未被吸收的葡萄糖光密度為0.060，高于空白對(duì)照組，說(shuō)明多糖dmp-1可以減緩caco-2腸道上皮細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收。

將細(xì)莖石斛多糖dmp-1以50mg/kg劑量口服灌胃給c57bl/6小鼠，1小時(shí)后進(jìn)行口服糖耐量實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示：1小時(shí)后，空白對(duì)照組中小鼠血液中葡萄糖含量為12mmol/l，多糖dmp-1組中小鼠血液中葡萄糖含量?jī)H為8mmol/l，說(shuō)明多糖dmp-1可以降低口服糖耐量實(shí)驗(yàn)中的血糖水平，即可以降低餐后血糖。

實(shí)施例2

一種從細(xì)莖石斛中堿提的水溶性中性多糖的制備方法，包括如下步驟：

s1：購(gòu)買(mǎi)滇產(chǎn)細(xì)莖石斛，曬干粉碎后以依次用乙酸乙酯和丙酮通過(guò)索氏提取回流4h脫脂；

s2：將脫脂后的細(xì)莖石斛粉碎物干燥后浸泡在0.9％的nacl水溶液中，在111℃高溫條件下浸泡45min，分離出殘?jiān)摎堅(jiān)^續(xù)浸泡在0.9wt％的nacl水溶液中，在111℃高溫條件下浸泡45min，重復(fù)操作五次；

s3：將步驟s2得到的殘?jiān)糜?mnaoh的水溶液(含0.4wt％nabh4)中，室溫?cái)嚢?h，后離心收集上清液；

s4：上清液使用醋酸中和至中性；用30wt％h2o2脫色至淺黃色，離心得到淺黃色澄清溶液；該溶液用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，將氯仿和正丁醇混合液(體積比為5:1)與多糖溶液混合，劇烈攪拌60min，用分液漏斗靜置分層除去變性蛋白質(zhì)，反復(fù)進(jìn)行5次；然后分別用自來(lái)水、蒸餾水經(jīng)再生纖維素膜透析袋(mwcut-off3500,usa)透析4天和3天，然后45℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到粗多糖水溶液；此粗多糖水溶液包含各種酸性多糖和所需的中性多糖；

s5：將粗多糖水溶液離心過(guò)濾得到澄清溶液后，加入deae纖維素離子交換柱中，通過(guò)在deae纖維素陰離子樹(shù)脂上的吸附差別，用蒸餾水作為流動(dòng)相，收集蒸餾水級(jí)份，其中含所需的中性多糖，最后濃縮、冷凍干燥得到水溶性中性多糖純品dmp-2。

通過(guò)尺寸排除色譜(sec)、元素分析、紅外光譜(ir)、單糖組成氣相色譜(gc)、甲基化分析表明，該細(xì)莖石斛多糖dmp-2是一種多糖純品，純度高于95％，具有高度分支結(jié)構(gòu)的雜多糖，由葡萄糖殘基、半乳糖殘基、木糖殘基、甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基鏈接組成，該多糖的主鏈由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，高度支化，且含有13.0wt％末端木糖殘基。該細(xì)莖石斛多糖dmp-2可溶解于水和二甲基亞砜(dmso)，不溶解于甲醇、乙醇和丙酮。

該水溶性中性多糖的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元結(jié)構(gòu)如下：

多糖dmp-2的元素分析結(jié)果見(jiàn)附表3，結(jié)果表明c：h：o約等于1：2：1，未含n元素，表明該多糖dmp-2未含蛋白質(zhì)，其元素含量與多糖結(jié)構(gòu)一致。將多糖dmp-2完全甲基化后，再乙酰化，然后進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gc-ms)分析(見(jiàn)附表4)，可得到dmp-2的單糖鍵接方式。dmp-2的gc-ms結(jié)果表明，該多糖dmp-2為一種高度支化的多糖，其主鏈主要由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，含有13.0wt％末端木糖殘基。該多糖dmp-2通過(guò)激光光散射-尺寸排除色譜(lls-sec)測(cè)試結(jié)果表明，其重均分子量為1.12萬(wàn)。

附表3.細(xì)莖石斛多糖dmp-2元素分析結(jié)果

附表4.細(xì)莖石斛多糖dmp-2單糖組成及鍵接方式結(jié)果

細(xì)莖石斛多糖dmp-2的降血糖作用：將caco-2細(xì)胞接種于96孔板，3天后，換成含200μg/ml多糖dmp-2樣品、5mm葡萄糖的pbs溶液，4h后取pbs上清液，測(cè)定pbs中剩余的葡萄糖濃度。結(jié)果顯示：空白對(duì)照組未被吸收的葡萄糖光密度為0.052，多糖dmp-2組未被吸收的葡萄糖光密度為0.065，高于空白對(duì)照組，說(shuō)明多糖dmp-2可以減緩caco-2腸道上皮細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收。

將細(xì)莖石斛多糖dmp-2以100mg/kg劑量口服灌胃給c57bl/6小鼠，1小時(shí)后進(jìn)行口服糖耐量實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示：1小時(shí)后，空白對(duì)照組中小鼠血液中葡萄糖含量為12mmol/l，多糖dmp-2組中小鼠血液中葡萄糖含量?jī)H為6mmol/l，說(shuō)明多糖dmp-2可以降低口服糖耐量實(shí)驗(yàn)中的血糖水平，即可以降低餐后血糖。

實(shí)施例3

一種從細(xì)莖石斛中堿提的水溶性中性多糖的制備方法，包括如下步驟：

s1：購(gòu)買(mǎi)滇產(chǎn)細(xì)莖石斛，曬干粉碎后以依次用乙酸乙酯和丙酮通過(guò)索氏提取回流4h脫脂；

s2：將脫脂后的細(xì)莖石斛粉碎物干燥后浸泡在0.9wt％的nacl水溶液中，在131℃高溫條件下浸泡15min，分離出殘?jiān)摎堅(jiān)^續(xù)浸泡在0.9wt％的nacl水溶液中，在131℃高溫條件下浸泡15min，重復(fù)操作三次；

s3：將步驟s2得到的殘?jiān)糜?mnaoh的水溶液(含0.7wt％nabh4)中，室溫?cái)嚢?h，后離心收集上清液；

s4：上清液使用醋酸中和至中性；用30wt％h2o2脫色至淺黃色，離心得到淺黃色澄清溶液；該溶液用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，將氯仿和正丁醇混合液(體積比為5:1)與多糖溶液混合，劇烈攪拌60min，用分液漏斗靜置分層除去變性蛋白質(zhì)，反復(fù)進(jìn)行5次；然后分別用自來(lái)水、蒸餾水經(jīng)再生纖維素膜透析袋(mwcut-off3500,usa)透析4天和3天，然后45℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到粗多糖水溶液；此粗多糖水溶液包含各種酸性多糖和所需的中性多糖；

s5：將粗多糖水溶液離心過(guò)濾得到澄清溶液后，加入deae纖維素離子交換柱中，通過(guò)在deae纖維素陰離子樹(shù)脂上的吸附差別，用蒸餾水作為流動(dòng)相，收集蒸餾水級(jí)份，其中含所需的中性多糖，最后濃縮、冷凍干燥得到水溶性中性多糖純品dmp-3。

通過(guò)尺寸排除色譜(sec)、元素分析、紅外光譜(ir)、單糖組成氣相色譜(gc)、甲基化分析表明，該細(xì)莖石斛多糖dmp-3是一種多糖純品，純度高于96％，具有高度分支結(jié)構(gòu)的雜多糖，由葡萄糖殘基、半乳糖殘基、木糖殘基、甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基鏈接組成，該多糖的主鏈由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，高度支化，且含有13.8wt％末端木糖殘基。該細(xì)莖石斛多糖dmp-3可溶解于水和二甲基亞砜(dmso)，不溶解于甲醇、乙醇和丙酮。

該水溶性中性多糖的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元結(jié)構(gòu)如下：

多糖dmp-3的元素分析結(jié)果見(jiàn)附表5，結(jié)果表明c：h：o約等于1：2：1，未含n元素，表明該多糖dmp-3未含蛋白質(zhì)，其元素含量與多糖結(jié)構(gòu)一致。將多糖dmp-3完全甲基化后，再乙?；缓筮M(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gc-ms)分析(見(jiàn)附表6)，可得到dmp-3的單糖鍵接方式。dmp-3的gc-ms結(jié)果表明，該多糖dmp-3為一種高度支化的多糖，其主鏈主要由β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-葡萄糖殘基和β-(1→3)-d-、β-(1→4)-d-半乳糖殘基組成，支鏈由甘露糖殘基和阿拉伯糖殘基組成，含有13.8wt％末端木糖殘基。該多糖dmp-3通過(guò)激光光散射-尺寸排除色譜(lls-sec)測(cè)試結(jié)果表明，其重均分子量為0.92萬(wàn)。

附表5.細(xì)莖石斛多糖dmp-3元素分析結(jié)果

附表6.細(xì)莖石斛多糖dmp-3單糖組成及鍵接方式結(jié)果

細(xì)莖石斛多糖dmp-3的降血糖作用：將caco-2細(xì)胞接種于96孔板，3天后，換成含150μg/ml多糖dmp-3樣品、5mm葡萄糖的pbs溶液，4h后取pbs上清液，測(cè)定pbs中剩余的葡萄糖濃度。結(jié)果顯示：空白對(duì)照組未被吸收的葡萄糖光密度為0.052，多糖dmp-3組未被吸收的葡萄糖光密度為0.062，高于空白對(duì)照組，說(shuō)明多糖dmp-3可以減緩caco-2腸道上皮細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收。

將細(xì)莖石斛多糖dmp-3以80mg/kg劑量口服灌胃給c57bl/6小鼠，1小時(shí)后進(jìn)行口服糖耐量實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示：1小時(shí)后，空白對(duì)照組中小鼠血液中葡萄糖含量為12mmol/l，多糖dmp-3組中小鼠血液中葡萄糖含量?jī)H為7mmol/l，說(shuō)明多糖dmp-3可以降低口服糖耐量實(shí)驗(yàn)中的血糖水平，即可以降低餐后血糖。

對(duì)比例1

一種細(xì)莖石斛多糖的制備方法，包括如下步驟：

s1：購(gòu)買(mǎi)滇產(chǎn)細(xì)莖石斛，曬干粉碎后以依次用乙酸乙酯和丙酮通過(guò)索氏提取回流4h脫脂；

s2：將脫脂后的細(xì)莖石斛粉碎物干燥后置于1mnaoh的水溶液(含0.5wt％nabh4)中，室溫?cái)嚢?h，后離心收集上清液；

s3：上清液使用醋酸中和至中性；用30wt％h2o2脫色至淺黃色，離心得到淺黃色澄清溶液；該溶液用sevag法除去游離的蛋白質(zhì)，將氯仿和正丁醇混合液(體積比為氯仿：正丁醇＝5:1)與多糖溶液混合，劇烈攪拌30min，用分液漏斗靜置分層除去變性蛋白質(zhì)，反復(fù)進(jìn)行5次；然后分別用自來(lái)水、蒸餾水經(jīng)再生纖維素膜透析袋(mwcut-off3500,usa)透析4天和3天，然后45℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得到粗多糖水溶液；

s4：將粗多糖水溶液離心過(guò)濾得到澄清溶液后，加入deae纖維素離子交換柱中，通過(guò)在deae纖維素陰離子樹(shù)脂上的吸附差別，用蒸餾水作為流動(dòng)相，收集蒸餾水級(jí)份，最后濃縮、冷凍干燥得到多糖dmp-4。

通過(guò)尺寸排除色譜(sec)對(duì)多糖dmp-4進(jìn)行純度分析，結(jié)果表明多糖dmp-4為一種多糖混合物，由多種多糖組成，其平均分子量為5.2萬(wàn)。由于該多糖dmp-4為多種多糖的混合物，無(wú)法分析其結(jié)構(gòu)，無(wú)法確定哪一種多糖有降血糖作用。

對(duì)比例2

本對(duì)比例與實(shí)施例1類似，區(qū)別在于，堿液中不含nabh4，制備的多糖為dmp-5。

通過(guò)尺寸排除色譜(sec)、元素分析、紅外光譜(ir)、單糖組成氣相色譜(gc)、甲基化分析表明，該多糖dmp-5結(jié)構(gòu)與降血糖作用與多糖dmp-1基本相同，但此法得到的多糖dmp-5產(chǎn)率只有實(shí)施例1中多糖dmp-1產(chǎn)率的60％，表明堿液中不含nabh4會(huì)氧化中性多糖，降低產(chǎn)率。

上述實(shí)施例僅為本發(fā)明的其中具體實(shí)現(xiàn)方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些顯而易見(jiàn)的替換形式均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。