本發(fā)明涉及植物生長調(diào)節(jié)劑領域，具體涉及一種用于生產(chǎn)s-誘抗素的發(fā)酵培養(yǎng)基。
背景技術：
：s-誘抗素原名天然脫落酸，是所有綠色植物均含有的純天然產(chǎn)物，對光敏感，屬強光分解化合物。同時脫落酸也是一種重要的植物激素。它在植物的生長發(fā)育中起多方面的作用，在農(nóng)業(yè)上也有廣闊的應用前景。使用低濃度的脫落酸浸種可以促進種子的發(fā)芽；使用高濃度的脫落酸浸種則可抑制種子發(fā)芽，在種子儲藏等方面有廣泛的應用；同時脫落酸還能增強作物的抗寒性、抗旱性及耐鹽性。因此，脫落酸在植物生長方面起到了至關重要的作用。目前，s-誘抗素的制備方法有三種。一種為從植物體中直接提取，盡管其在植物中廣泛分布，但其含量非常低，據(jù)報道，從200kg棉桃中才提取到9mg的s-誘抗素晶體，因此難以使用直接提取法獲得；一種為使用化學合成法制備s-誘抗素，所合成的外消旋型s-誘抗素是天然型和非天然型誘抗素的混合物，不僅價格昂貴，而且合成的生理活性低；一種為微生物發(fā)酵生產(chǎn)脫落酸，該方法在發(fā)酵過程中流加肌醇解除葡萄糖阻遏的工藝來制備天然脫落酸，從而提高脫落酸的產(chǎn)量，但該方法雖然在一定程度上提高了脫落酸的發(fā)酵產(chǎn)量，但發(fā)酵工藝繁瑣，發(fā)酵產(chǎn)生的副產(chǎn)物較多，對氧的利用不夠成分，增加了成本，不適于大規(guī)模的生產(chǎn)。技術實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明提供一種用于生產(chǎn)s-誘抗素的發(fā)酵培養(yǎng)基，具有工藝流程簡單、降低生產(chǎn)成本、提高s-誘抗素的產(chǎn)量等優(yōu)點。為解決以上技術問題，本申請?zhí)峁┝艘环N用于生產(chǎn)s-誘抗素的發(fā)酵培養(yǎng)基，其有效成分按重量百分比計包括：碳源10％-20％、有機氮源3％-16％、無機磷酸鹽0.5％-4％、多元醇0.1％-2％；所述碳源選自蔗糖、葡萄糖、淀粉、乳酸或甘露醇中的一種或多種；所述有機氮源選自玉米粉、大豆蛋白、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、尿素或甘酪素中的一種或多種；所述多元醇選自二元醇或三元醇中的一種或多種。優(yōu)選的，所述有效成分按重量百分比計包括：碳源15％-20％；有機氮源8％-16％；無機磷酸鹽2％-4％。優(yōu)選的，所述有效成分按重量百分比計包括：碳源15％-18％；有機氮源8％-12％；無機磷酸鹽2％-3％。優(yōu)選的，所述碳源選自蔗糖、淀粉或葡萄糖中的一種或多種；所述有機氮源選自玉米粉、尿素、干酪素、花生餅粉或大豆蛋白中的一種或多種；所述多元醇選自聚丙二醇、聚碳酸酯二元醇、聚醚二元醇、甘油或三羥基甲基丙烷中的一種或多種。優(yōu)選的，所述碳源選自蔗糖或葡萄糖；所述有機氮源選自玉米粉、花生餅粉、尿素或大豆蛋白；所述多元醇選自甘油、聚丙二醇或三羥基甲基丙烷中的一種或多種。優(yōu)選的，所述發(fā)酵培養(yǎng)基有效成分還包括按重量百分比計的天然油脂1％-2％；所述天然油脂選自色拉油、菜籽油、花生油、棉籽油或棕櫚仁油中的一種或多種。優(yōu)選的，所述天然油脂選自色拉油、花生油或菜籽油中的一種或多種。優(yōu)選的，所述發(fā)酵培養(yǎng)基還包括硫元素，所述發(fā)酵培養(yǎng)基有效成分還包括按重量百分比計的硫元素1％-2％。優(yōu)選的，所述發(fā)酵培養(yǎng)基中還包括微量元素。優(yōu)選的，所述微量元素選自鐵元素、鋅元素、錳元素、銅元素、溴元素、碘元素、硅元素、鈷元素、硼元素、砷元素或鉬元素中的一種或多種。優(yōu)選的，所述微量元素為錳元素、鐵元素、鋅元素、鈷元素、鉬元素、砷元素或硼元素中的一種或多種。優(yōu)選的，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的ph值在4.0-7.0范圍內(nèi)。優(yōu)選的，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的ph值在4.0-6.0范圍內(nèi)。首先，發(fā)酵培養(yǎng)基中有機氮源選自玉米粉、大豆蛋白或花生餅粉，是因為，這3種營養(yǎng)物質(zhì)中含有較多的生物素等營養(yǎng)組分，可以有效的提高s-誘抗素的產(chǎn)量。其次，s-誘抗素為真菌的次級代謝產(chǎn)物，向培養(yǎng)基中加入碳源，如淀粉、蔗糖或葡萄糖等，可以促進真菌的代謝，從而可以促進其的生長。最后，在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入天然油脂，如色拉油、菜籽油、花生油、棉籽油或棕櫚仁油等，可以不同程度地促進菌體產(chǎn)油和產(chǎn)酶。本發(fā)明特別優(yōu)選下述方法和條件：將菌種灰葡萄孢霉菌活化后在種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到種子培養(yǎng)液。將種子培養(yǎng)液移入發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其中發(fā)酵培養(yǎng)基的有效成分為：大豆蛋白、蔗糖與葡萄糖以1:1的質(zhì)量混合、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、甘油、丙酸鈣、乙酸鈉以及硫酸錳，上述有效成分的含量比例為3.6：10：0.6：0.6：2：0.5：0.5：0.01。其中種子培養(yǎng)液在發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)的時間為18天，培養(yǎng)溫度為26.5℃。本發(fā)明所用的試劑以及原料均市售所得。本發(fā)明取得的積極成果為：所得的s-誘抗素發(fā)酵周期較短為18天，較現(xiàn)有技術發(fā)酵時間提高了80％；同時s-誘抗素的產(chǎn)量也提高到8000ppm，較現(xiàn)有技術提高了106％。至此，采用該方法制備的發(fā)酵培養(yǎng)基用于生產(chǎn)s-誘抗素可以達到工藝流程簡單、制備成本低廉、制備出的s-誘抗素具有較強生理活性等特點。具體實施方式為了使本領域的技術人員更好地理解本發(fā)明的技術方案，下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明作進一步的詳細說明。脫落酸對植物的抗旱性：水分虧缺時，植物體內(nèi)脫落酸的積累與抗旱能力的增強呈顯著正相關。脫落酸具有促使氣孔關閉與阻止氣孔開放，降低水分蒸騰，提高葉片水勢，減輕水分虧缺程度的生理效應。脫落酸對植物的抗凍性：對幼苗葉面噴施一定濃度的脫落酸，可降低植株體內(nèi)的相對電導率和丙二醛含量，延緩葉綠素的降解，增加脯氨酸的積累，減少葉片萎蔫面積和死亡率，有效降低冷害指數(shù)，提高幼苗的抗冷性。脫落酸對高溫的抵抗能力：高溫脅迫對植物某些生理指標會產(chǎn)生影響，在高溫(43±0.50℃)脅迫下，植物葉片中的超氧化物歧化酶活性明顯降低，丙二醛含量明顯增加，可溶性蛋白質(zhì)、可溶性糖、脯氨酸、抗壞血酸及還原型谷胱甘肽含量都明顯降低。外源脫落酸能有效減緩高溫脅迫對植物葉片中有關生理生化指標的影響，從而有效提高植物抗高溫傷害的能力。然而，常規(guī)方法制備得到的脫落酸具有生理活性低、工藝繁瑣、生產(chǎn)成本較低等缺點。所以需要一種可行的方法用來制備脫落酸。本申請具體實施方式采用制備方法來制備，一種用于生產(chǎn)s-誘抗素的發(fā)酵培養(yǎng)基其有效成分按重量百分比計包括：碳源10％-20％、有機氮源3％-16％、無機磷酸鹽0.5％-4％、多元醇0.1％-2％；所述碳源選自蔗糖、葡萄糖、淀粉、乳酸或甘露醇中的一種或多種；所述有機氮源選自玉米粉、大豆蛋白、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、尿素或甘酪素中的一種或多種；所述多元醇選自二元醇或三元醇中的一種或多種。其中，優(yōu)選的有效成分按重量百分比計包括：碳源15％-20％；有機氮源8％-16％；無機磷酸鹽2％-4％。更優(yōu)選的有效成分按重量百分比計包括：碳源15％-18％，有機氮源8％-12％，無機磷酸鹽2％-3％。其中，所述碳源選自蔗糖、淀粉或葡萄糖中的一種或多種；所述有機氮源選自玉米粉、尿素、干酪素、花生餅粉或大豆蛋白中的一種或多種；所述多元醇選自聚丙二醇、聚碳酸酯二元醇、聚醚二元醇、甘油或三羥基甲基丙烷中的一種或多種，更優(yōu)選的多元醇選自甘油、聚丙二醇或三羥基甲基丙烷中的一種或多種。在培養(yǎng)基中加入碳源有利于菌種積累代謝產(chǎn)物；加入有機氮源可以增加s-誘抗素的產(chǎn)量；加入多元醇具有保濕補水的作用。一種用于生產(chǎn)s-誘抗素的發(fā)酵培養(yǎng)基中還包括微量元素、天然油脂或硫元素中的一種或多種；其按重量百分比計包括：微量元素0.05％-1％，天然油脂1％-2％，硫元素1％-2％，其中，優(yōu)選的所述微量元素選自鐵元素、鋅元素、錳元素、銅元素、溴元素、碘元素、硅元素、鈷元素、硼元素、砷元素或鉬元素中的一種或多種，更優(yōu)選的所述微量元素選自錳元素、鐵元素、鋅元素、鈷元素、鉬元素、砷元素或硼元素中的一種或多種；優(yōu)選的所述天然油脂選自色拉油、菜籽油、花生油、棉籽油或棕櫚仁油中的一種或多種，更優(yōu)選的所述天然油脂選自色拉油、花生油或菜籽油中的一種或多種。在培養(yǎng)基中加入天然油脂的目的是其可以不同程度的促進菌體產(chǎn)酶及產(chǎn)油。一種用于生產(chǎn)s-誘抗素的發(fā)酵培養(yǎng)基，其培養(yǎng)基的ph在4.0-7.0的范圍內(nèi)，其中優(yōu)選的發(fā)酵培養(yǎng)基的ph在4.0-6.0內(nèi)。當發(fā)酵培養(yǎng)基中ph值低于4.0時自動補充堿性調(diào)節(jié)劑；ph值高于7.0時自動補充發(fā)酵培養(yǎng)基。ph在4.0-6.0的范圍內(nèi)發(fā)酵時間最短，所得到的s-誘抗素的活性較高。本發(fā)明還提供了一種生產(chǎn)s-誘抗素的方法，其特征在于，包括：將種子培養(yǎng)液接入到本發(fā)明的發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)即可。以下為本發(fā)明具體實施例，詳細闡述本發(fā)明具體方案。實施例一：表1為實施例1發(fā)酵培養(yǎng)基的配方根據(jù)上述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，發(fā)酵時間18天所得的誘抗素含量5780ppm。實施例二：表2為實施例2發(fā)酵培養(yǎng)基的配方原料名稱比例(重量百分比)蔗糖20玉米粉15磷酸二氫鉀0.6乙酸鈉2七水硫酸鎂0.6一水硫酸錳0.01丙酸鈣0.01根據(jù)上述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，發(fā)酵時間21天所得的誘抗素含量6510ppm。實施例三：培養(yǎng)基中的碳源為葡萄糖與蔗糖的混合物，其質(zhì)量比為1:1。表3為實施例3發(fā)酵培養(yǎng)基的配方原料名稱比例(重量百分比)葡萄糖、蔗糖10:10玉米粉15磷酸二氫鉀0.6丙酸鈣1七水硫酸鎂0.6一水硫酸錳0.01乙酸鈉0.6根據(jù)上述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，發(fā)酵時間19天所得的誘抗素含量7864ppm。實施例四：表4為實施例4發(fā)酵培養(yǎng)基的配方原料名稱比例(重量百分比)葡萄糖10大豆蛋白3.6磷酸二氫鉀0.6丙酸鈣0.01七水硫酸鎂0.6一水硫酸錳0.01乙酸鈉1根據(jù)上述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，發(fā)酵時間18天所得的誘抗素含量6075ppm。實施例五：表5為實施例5發(fā)酵培養(yǎng)基的配方原料名稱比例(重量百分比)蔗糖20大豆蛋白3.6磷酸二氫鉀0.6丙酸鈣0.5七水硫酸鎂0.6一水硫酸錳0.01乙酸鈉0.5根據(jù)上述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，發(fā)酵時間22天所得的誘抗素含量7608ppm。實施例六：表6為實施例6發(fā)酵培養(yǎng)基的配方根據(jù)上述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，發(fā)酵時間18天所得的s-誘抗素含量8264ppm。根據(jù)上述實施例可以得出，采用實施例六中所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方生產(chǎn)s-誘抗素，其發(fā)酵時間最短，且所得到s-誘抗素的產(chǎn)量最高。以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出的是，上述優(yōu)選實施方式不應視為對本發(fā)明的限制，本發(fā)明的保護范圍應當以權利要求所限定的范圍為準。對于本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。當前第1頁12