本發(fā)明涉及一種提取靈芝孢子油的方法，特別是一種超臨界萃取靈芝孢子油的方法。
背景技術(shù)：
靈芝為多孔菌科真菌，素有“仙草”之譽(yù)，在提高人體免疫功能上具有顯著作用。靈芝孢子是靈芝生長(zhǎng)成熟期產(chǎn)生釋放出的種子，為靈芝的生殖細(xì)胞，具有靈芝的全部遺傳活性物質(zhì)，是靈芝的精華，而靈芝孢子油中包含了靈芝孢子中的三萜類、脂肪酸類、甾醇類、多糖類及生物堿類等成分，是靈芝孢子有效成分的集合體，具有多種生理活性。其中靈芝三萜類成分是靈芝的主要有效成分，中國(guó)、法國(guó)、韓國(guó)、日本等世界靈芝研究專家通過(guò)大量的研究，分別提取靈芝子實(shí)體及孢子內(nèi)的靈芝三菇類化合物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。陸續(xù)證明了赤靈芝孢子內(nèi)的靈芝三萜可直接或間接毒殺腫瘤細(xì)胞。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上靈芝藥品、保健品種類繁多，很多靈芝產(chǎn)品以總?cè)谱鳛闃?biāo)志性功效成分。靈芝三萜類化合物不僅是當(dāng)前靈芝化學(xué)及藥理研究的熱點(diǎn)，而且具有較好的工業(yè)應(yīng)用前景。近年來(lái)，靈芝孢子油產(chǎn)品已成為高檔保健品中的珍品，具有十分重要的利用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
傳統(tǒng)提取靈芝孢子油的方法一般是使用甲醇或乙醇等有機(jī)溶劑提取，該提取方法存在操作繁瑣、提取次數(shù)多、提取效率低、耗能大、萃取過(guò)程中其有效成分易酸敗等缺點(diǎn)。因此，需要一種更加理想的提取靈芝孢子油的方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)和不足，提供一種超臨界萃取靈芝孢子油的方法，該方法工藝簡(jiǎn)單、高效、生產(chǎn)時(shí)間短、提取率高、產(chǎn)物活性高。
為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明提供了一種超臨界萃取靈芝孢子油的方法，其包括以下步驟：
1)預(yù)處理，使靈芝孢子粉的純度至少為98％，烘干粉碎制得粗粉；
2)將所述粗粉與雙蒸水按1：5至1：10的重量比混合均勻，進(jìn)行超聲破壁處理，所得混合液進(jìn)行冷凍干燥，得到靈芝孢子粉；
3)將所述靈芝孢子粉與占所述靈芝孢子粉重量比為8％-10％的維生素C混合，制粒，得到靈芝孢子粉顆粒；
4)將所述靈芝孢子粉顆粒進(jìn)行CO2超臨界萃?。?/p>
5)分離得到靈芝孢子油組分。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟1)中，對(duì)靈芝孢子粉進(jìn)行預(yù)處理包括篩選、洗滌、過(guò)濾。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟1)中，烘干的條件為：溫度為50℃，時(shí)間為4小時(shí)。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟2)中，進(jìn)行超聲破壁處理時(shí)，超聲細(xì)胞破碎儀的功率為100-1000W，頻率為20-80KHz。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟3)中，制粒時(shí)，制粒機(jī)的壓力為3-6MPa。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟3)中，制粒所得的顆粒為10～40目。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟4)中，以正己烷作為攜帶劑，每千克所述靈芝孢子粉顆粒物料加入10～200ml正己烷。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟4)中，萃取壓力為23～28MPa，萃取溫度為25～32℃，CO2流量為400L/h，萃取時(shí)間為1.5～2小時(shí)。
作為一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述步驟5)中，分離時(shí)采用二級(jí)分離方式，其中，第一級(jí)分離的條件為：分離壓力8～10MPa，分離溫度35～38℃；第二級(jí)分離的條件為：分離壓力6～8MPa，溫度32～35℃。
本發(fā)明的有益效果是：(1)采用干壓法制粒，避免了采用乙醇溶液制粒時(shí)，由于乙醇易燃，干燥過(guò)程中存在的安全隱患；(2)采用超聲波破碎靈芝孢子粉壁，避免了機(jī)械破壁中產(chǎn)生的局部過(guò)熱現(xiàn)象，最大限度地保存了靈芝孢子油有效成分的活性；(3)制粒過(guò)程中采用維生素C充當(dāng)填料，由于維生素C具有還原性，能有效避免萃取過(guò)程中靈芝孢子粉中有效成分的氧化酸??；(4)采用正己烷作為攜帶劑，拓寬了攜帶劑的萃取范圍，提高了靈芝孢子粉中有效成分在超臨界CO2流體中的溶解度，同時(shí)能有效提高靈芝孢子油的萃取率。本發(fā)明的方法具有工藝簡(jiǎn)單、成本低、靈芝孢子油得率高、產(chǎn)物活性高等優(yōu)點(diǎn)，可廣泛用于靈芝孢子油的萃取技術(shù)領(lǐng)域。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。如未特別指出，本發(fā)明實(shí)施例中所使用的試劑均可通過(guò)商業(yè)渠道獲得。如未特別說(shuō)明，本發(fā)明實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知曉，故不在此一一贅述其細(xì)節(jié)。
實(shí)施例1：
精選靈芝孢子粉8kg，對(duì)其進(jìn)行篩選、洗滌和過(guò)濾等預(yù)處理步驟，使靈芝孢子粉的純度至少為98％，在50℃烘箱中烘干4小時(shí)，粉碎制得粗粉。將所述粗粉與雙蒸水按1：5的重量比混合均勻，通過(guò)超聲細(xì)胞破碎儀進(jìn)行超聲破壁處理(超聲細(xì)胞破碎儀的功率為100-1000W，頻率為20-80KHz)，所得混合液在冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行冷凍干燥，得到靈芝孢子粉。用維生素C充當(dāng)填料，將靈芝孢子粉與占靈芝孢子粉重量比為8％的維生素C混合，通過(guò)制粒機(jī)進(jìn)行制粒(制粒機(jī)的壓力為3-6MPa)，得到10～40目的靈芝孢子粉顆粒。將靈芝孢子粉顆粒置于超臨界萃取釜中，攜帶劑為正己烷(每千克靈芝孢子粉顆粒物料加入10ml正己烷)，萃取壓力為23MPa，萃取溫度為25℃，CO2流量為400L/h，萃取時(shí)間為2小時(shí)。采用二級(jí)分離方式進(jìn)行分離，分離釜的第一級(jí)分離條件為：分離壓力8MPa，分離溫度35℃，分離釜的第二級(jí)分離條件為：分離壓力6MPa，溫度32℃。最后從分離釜中放出靈芝孢子油2.27Kg。經(jīng)檢測(cè)，出油率為28.4％，產(chǎn)物活性高，且無(wú)氧化酸敗情況發(fā)生。
實(shí)施例2：
精選靈芝孢子粉8kg，對(duì)其進(jìn)行篩選、洗滌和過(guò)濾等預(yù)處理步驟，使靈芝孢子粉的純度至少為98％，在50℃烘箱中烘干4小時(shí)，粉碎制得粗粉。將所述粗粉與雙蒸水按1：8的重量比混合均勻，通過(guò)超聲細(xì)胞破碎儀進(jìn)行超聲破壁處理(超聲細(xì)胞破碎儀的功率為100-1000W，頻率為20-80KHz)，所得混合液在冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行冷凍干燥，得到靈芝孢子粉。用維生素C充當(dāng)填料，將靈芝孢子粉與占靈芝孢子粉重量比為9％的維生素C混合，通過(guò)制粒機(jī)進(jìn)行制粒(制粒機(jī)的壓力為3-6MPa)，得到10～40目的靈芝孢子粉顆粒。將靈芝孢子粉顆粒置于超臨界萃取釜中，攜帶劑為正己烷(每千克靈芝孢子粉顆粒物料加入100ml正己烷)，萃取壓力為25MPa，萃取溫度為28℃，CO2流量為400L/h，萃取時(shí)間為1.5小時(shí)。采用二級(jí)分離方式進(jìn)行分離，分離釜的第一級(jí)分離條件為：分離壓力10MPa，分離溫度35℃，分離釜的第二級(jí)分離條件為：分離壓力8MPa，溫度32℃。最后從分離釜中放出靈芝孢子油2.13kg。經(jīng)檢測(cè)，出油率為26.6％，產(chǎn)物活性高，且無(wú)氧化酸敗情況發(fā)生。
實(shí)施例3：
精選靈芝孢子粉8kg，對(duì)其進(jìn)行篩選、洗滌和過(guò)濾等預(yù)處理步驟，使靈芝孢子粉的純度至少為98％，在50℃烘箱中烘干4小時(shí)，粉碎制得粗粉。將所述粗粉與雙蒸水按1：10的重量比混合均勻，通過(guò)超聲細(xì)胞破碎儀進(jìn)行超聲破壁處理(超聲細(xì)胞破碎儀的功率為100-1000W，頻率為20-80KHz)，所得混合液在冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行冷凍干燥，得到靈芝孢子粉。用維生素C充當(dāng)填料，將靈芝孢子粉與占靈芝孢子粉重量比為10％的維生素C混合，通過(guò)制粒機(jī)進(jìn)行制粒(制粒機(jī)的壓力為3-6MPa)，得到10～40目的靈芝孢子粉顆粒。將靈芝孢子粉顆粒置于超臨界萃取釜中，攜帶劑為正己烷(每千克靈芝孢子粉顆粒物料加入200ml正己烷)，萃取壓力為28MPa，萃取溫度為32℃，CO2流量為400L/h，萃取時(shí)間為2小時(shí)。采用二級(jí)分離方式進(jìn)行分離，分離釜的第一級(jí)分離條件為：分離壓力9MPa，分離溫度38℃，分離釜的第二級(jí)分離條件為：分離壓力8MPa，溫度35℃。最后從分離釜中放出靈芝孢子油2.49kg。經(jīng)檢測(cè)，出油率為31.1％，產(chǎn)物活性高，且無(wú)氧化酸敗情況發(fā)生。
上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他任何在未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均因?yàn)榈刃У闹脫Q方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。