本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提取阿維拉霉素的方法。

背景技術(shù)：

阿維拉霉素屬于正糖霉素族的寡聚糖類抗生素。本品對多種革蘭氏陽性菌有抑制作用，包括一些致病菌，如萬古霉素拮抗的腸道球菌，甲氧苯青霉素拮抗的葡萄球菌以及青霉素拮抗的肺炎雙球菌。此外，阿維拉霉素對大腸桿菌有一種間接作用，即它可以影響細(xì)菌鞭毛及細(xì)菌的粘附，并通過抑制細(xì)菌粘附于宿主粘膜細(xì)胞表面而達(dá)到抑制細(xì)菌的感染，從而抑制了疾病的感染。

阿維拉霉素可由發(fā)酵液經(jīng)分離、提取、純化、干燥而得。專利CN201210544526.7涉及通過結(jié)晶、硅膠柱層析、ODS柱洗脫分離、重結(jié)晶，抽濾后結(jié)晶用純水漂洗，該方法使用硅膠柱、ODS柱和重結(jié)晶，具有成本高、生產(chǎn)工時(shí)過長、收率較低等缺點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種低成本、工序短、收率高的提取阿維拉霉素的方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)中阿維拉霉素提取方法成本高、工序長，所得產(chǎn)品收率低的問題。

為解決上述技術(shù)問題，發(fā)明人提供了以下技術(shù)方案。

一種提取阿維拉霉素的方法，包括以下操作步驟：

a.將阿維拉霉素的發(fā)酵液加堿性溶劑調(diào)節(jié)pH值為8.0～9.0，隨后進(jìn)行固液分離；

b.向步驟a得到的固體進(jìn)行干燥得到干粉然后粉碎，向粉碎后的固體中加入有機(jī)溶劑，攪拌1～3小時(shí)，期間控制溫度為40℃～50℃，過濾，所得濾液備用；

c.將步驟b得到的濾液進(jìn)行活性炭脫色，所得溶液轉(zhuǎn)移至非極性大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，后用展開劑對樹脂柱進(jìn)行解析，收集解析液；

d.將步驟c得到的解析液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮干燥，即得到阿維拉霉素。

步驟a所述堿性溶劑為2mol/L氫氧化鈉水溶液。

步驟b中所述干粉粉碎的顆粒度在0.1～0.4mm。

步驟b中有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、氯仿或四氯化碳中的一種或幾種的組合。

步驟b中攪拌速度為50～80rpm。

步驟b中攪拌時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)。

步驟b中攪拌期間控制溫度為40～45℃。

步驟c中活性炭加量為溶劑體積的1％～5％。

步驟c中步驟中展開劑為60％～75％的乙醇對樹脂柱進(jìn)行解析。

本發(fā)明所述提取阿維拉霉素方法，先向阿維拉霉素的發(fā)酵液加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值，目的調(diào)至堿性后能夠?qū)A性蛋白沉淀除去。

本發(fā)明沒有使用氨水調(diào)節(jié)pH，降低了廢水中的氨氮含量，為環(huán)保做出了很大的貢獻(xiàn)，減少企業(yè)處理廢水的費(fèi)用，進(jìn)而降低成本。

本發(fā)明所述提取阿維拉霉素方法，進(jìn)行浸提及過柱得到阿維拉霉素，所需工序少，工時(shí)短，降低了企業(yè)成本。

本發(fā)明產(chǎn)品收率在56.15％以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于目前收率37.50％以上的水平，經(jīng)濟(jì)效益可觀，適于推廣應(yīng)用。

該方法對比傳統(tǒng)方法的優(yōu)勢對比

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明所述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

實(shí)施例1

將阿維拉霉素發(fā)酵液50L,效價(jià)4656U/mL，產(chǎn)品重量233g。用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH到8.2，隨后進(jìn)行固液分離；得到的固體進(jìn)行干燥得到干粉然后粉碎，向粉碎后的固體中加入有機(jī)溶劑，攪拌1.5小時(shí)，期間控制溫度為42℃，過濾，所得濾液備用；濾液用2％活性炭脫色，所得溶液轉(zhuǎn)移至非極性大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，后用60％乙醇對樹脂柱進(jìn)行解析，收集解析液；解析液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮干燥，即得到阿維拉霉素成品128g,含量82.1％，收率54.9％。

實(shí)施例2

將硫酸新霉素發(fā)酵液60L,效價(jià)4832U/ml，產(chǎn)品重量290g。用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH到8.5，隨后進(jìn)行固液分離；得到的固體進(jìn)行干燥得到干粉然后粉碎，向粉碎后的固體中加入有機(jī)溶劑，攪拌2.0小時(shí)，期間控制溫度為45℃，過濾，所得濾液備用；濾液用3％活性炭脫色，所得溶液轉(zhuǎn)移至非極性大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，后用65％乙醇對樹脂柱進(jìn)行解析，收集解析液；解析液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮干燥，即得到阿維拉霉素成品165g,含量81.5％，收率56.9％。

實(shí)施例3

將硫酸新霉素發(fā)酵液70L，效價(jià)4938U/mL，產(chǎn)品重量346g。用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH到8.7，隨后進(jìn)行固液分離；得到的固體進(jìn)行干燥得到干粉然后粉碎，向粉碎后的固體中加入有機(jī)溶劑，攪拌2.5小時(shí)，期間控制溫度為48℃，過濾，所得濾液備用；濾液用5％活性炭脫色，所得溶液轉(zhuǎn)移至非極性大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，后用75％乙醇對樹脂柱進(jìn)行解析，收集解析液；解析液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮干燥，即得到阿維拉霉素成品194g,含量83.6％，收率56.1％。